Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 32 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
32
Dung lượng
2,76 MB
Nội dung
KH O SÁT HO T TÍNHLIGNIN Ả Ạ PEROXIDASE,MANGANESEPEROXIDASE,CELLULASE C A CH NG Ủ Ủ PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUMKHI B X LÝ Ị Ử B NG SHOCK NHI T VÀTIA UVẰ Ệ Nhóm th c hi n: ự ệ GV h ng d nướ ẫ : Th.S H Thiên Hoàngồ 1.NGUY N VĂN HUYỄ 10037011 2. NGÔ TH L HUY NỊ Ệ Ề 10035861 3. NGUY N TH THÙY LINHỄ Ị 10085471 4. H NH T KHÁNHỔ Ậ 10042591 5. LÊ DUY TH NGẮ 10049421 DANH SÁCH NHÓM IV. PH NG PHÁP KH O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀCELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM B NG Ằ TIA UV. II. KH O SÁT HO T TÍNH C A LiP, MnP Ả Ạ Ủ VÀCELLULASE THEO TH I GIAN NUÔI Ờ C Y Ấ PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM I. M Ở Đ UẦ III. PH NG PHÁP KH O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀCELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM B NG Ằ SHOCK NHI T Ệ Lignin là m t polime phong phú trong t ộ ự nhiên đ c th c v t t ng h p, là m t ngu n ượ ự ậ ổ ợ ộ ồ ch t th m l n trên trái đ t. Lignin t o đ ấ ơ ớ ấ ạ ộ c ng cho t bào th c v t, giúp cho t bào ứ ế ự ậ ế đ ng v t trá nh kh i các xâm nhi m c a vi ộ ậ ỏ ễ ủ sinh v t.ậ I. M đ uở ầ Vi khu n và n m có kh năng sinh ra ẩ ấ ả enzyme phân h y lignin, ch y u là ủ ủ ế n m.ấ Các enzyme có kh năng phân h y Ligin ả ủ đ c ng d ng trong th c ph m và th c ượ ứ ụ ự ẩ ứ ăn gia súc. ng d ng vào CN s n xu t gi y, t y Ứ ụ ả ấ ấ ẩ tr ng b t gi y b ng ph ng pháp sinh ắ ộ ấ ằ ươ h c bi n tính x s i.ọ ế ơ ợ ng d ng s lý ch t th i, t y tr ng Ứ ụ ử ấ ả ẩ ắ cellulose và các ch t h u c đ c h i: ấ ữ ơ ộ ạ PAH, PCB, dioxin…. Kh năng chuy n hóa ch t h u c ả ể ấ ữ ơ thành nh ng s n ph m có ích.ữ ả ẩ Nhi u công trình nghiên c u cho th y ề ứ ấ Phanerochaetechrysosporium là lo i vi sinh ạ v t đ c bi t và đ c nghiên c u nhi u do ậ ượ ế ượ ứ ề kh năng phân h y lignin b ng h enzyme ả ủ ằ ệ c a chúng:ủ Lignin Peroxidase (LiP) Manganese Peroxidase (MnP) Cellulase Kh o sát ho t tính h enzyme theo th i ả ạ ệ ờ gian chi u tiaUVvà nhi t đ gây shock ế ệ ộ nhi tệ a)Nguyên li u:ệ Ch ng n m m c tr ng ủ ấ ụ ắ Phanerochaetechrysosporium t ự nhiên đ c phân l p t thân g ượ ậ ừ ỗ m c.ụ II. KH O SÁT HO T TÍ NH C A LiP, MnP VÀ Ả Ạ Ủ CELLULASE THEO TH I GIAN NUÔI C Y Ờ Ấ PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM Loài n m m c tr ng là nhóm n m d t n ấ ụ ắ ấ ị ả thu c nhóm ộ Basidiomycetes, l p ớ Hymenomycetes, b ộ Aphyllomycetes, chi Phanerochaete… Phanerochaetechrysosporium là lo i n m ạ ấ gây th i tr ng g .ố ắ ở ỗ Có kh năng phân gi i hoàn toàn Lignin ả ả thành carboxyl và H2O nh vào m t h ờ ộ ệ enzyme ngo i bàoạ Đ c tính c a ặ ủ Phanerochaetechrysosporium là m t lo i vi sinh v t ộ ạ ậ hi u khí nên chúng ta nuôi c y l c trong ế ấ ắ môi tr ng PGB (l ng). ườ ỏ Môi tr ng PGB ( Potatos Glucose ườ Bloth): Thành ph n môi tr ng (g/l):ầ ườ Khoai tây: 200g Glucose: 20g N c c t đ y đ :ướ ấ ầ ủ 1000ml [...]... PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUMBẰNGSHOCKNHIỆTvà CHIẾU UV I. PHƯƠNG PHÁP SHOCKNHIỆT 1. Nguyên liệu Chủng nấm mục trắng Phanerochaetechrysosporium 2. Phương pháp PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA LIP, MNP VÀ XENLULASSE CỦA PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUMBẰNGSHOCKNHIỆTShocknhiệt là sự thay đổi nhiệt độ đột ngột tăng cao hoặc hạ thấp so với nhiệt độ phát triển tối ưu của sinh vật Phương pháp Shocknhiệt đối với ... Khảosáthoạttìnhcủa Cellulase. Ở nhiệt độ 50oC thì hoạttính hầu như không thay đổi Ở nhiệt độ 60oC khi sock nhiệt ở thời gian là 90 phút thì hoạttínhcủaCellulase đạt giá trị cao nhất là 0.6UI/ml. cao gấp 2 lần so với hoạttính không được sock nhiệt Khảo sáthoạttìnhcủa Cellulase. Ở nhiệt độ 70oC hoạttínhcủa cellulose có chiều hường giảm dần Biểu đồ thể hiện sự thay đổi hoạttínhcủaCellulase ... Shocknhiệt đối với PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM Thực hiện ở 3 mức nhiệt độ 50, 60 và 70 độ C Khảo sáthoạttính của LiP Ở nhiệt độ 50oC hoạttínhcủa LiP chưa có sự thay đổi bức phá cao, nếu tăng thời gian shocknhiệt lên thì hoạttínhcủa LiP tăng dần Khảo sáthoạttìnhcủa LiP Ở nhiệt độ 60oC hoạttính LiP đạt cực đại ở thời gian là 120 phút (0.077UI/ml) khi tăng dần thời gian shocknhiệt lên tới 180 phút thì hoạttínhcủa LiP ... ngày nuôi cấy lắc. Ta thu chế phẩm có hoạttính LiP cao nhất là từ ngày thứ 5 đến ngày thứ 7 Hoạt tínhcủa MnP vàCellulase đạt đươc mức cao nhất là ngày thứ 7 Vậy qua kết quả khảo sáthoạttính LiP, MnP vàCellulase theo thời gian nuôi cấy lắc Phanerochaete chrysosporium, nhận thấy thu được ngày thứ 7 sẽ cho hoạttínhcủa 3 loại Enzyme ở mức cao nhất PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA LIP, MNP VÀ CELLULASE CỦA PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUM ... lên tới 180 phút thì hoạttínhcủa LiP giảm chỉ còn 0.021UI/ml So với mẫu chuẩn khi chưa shocknhiệt là 0.033UI/ml Khảosáthoạttìnhcủa LiP Ở nhiệt độ 70oC hoạttính LiP cao nhất trong thời gian 15 phút là 0.5UI/ml và sau đó giảm dần, khi tăng thời gian lên tới 90 phút thì hoạt tình chỉ còn 0.018UI/ml Biểu đồ thể hiện sự thay đổi hoạttínhcủa LiP Shocknhiệt đối với PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUMKhảosáthoạttìnhcủa MnP ... chiếu tiaUV trong vòng 45 phút 5. Kết Quả TiaUV có tác dụng làm tăng hoạttínhcủa cellulase, không có tác động rõ đối với hoạttính LiP và làm giảm hoạttínhcủa MnP: Hoạttínhcellulase đạt 1.51UI/ml (gấp 5 lần so với ban đầu là 0.28UI/ml) dưới tác động củatiaUV trong 30 phút Hoạttính LiP đạt được 0.0485UI/ml (ban đầu là 0.0328UI/ml) dưới tác động củatiaUV trong 30 phút Hoạttính MnP củaPhanerochaete ... II) PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT HOẠT TÍNH CỦA LIP, MNP VÀ CELLULASE CỦA PHANEROCHAETECHRYSOSPORIUMBẰNGTIAUV 1. Nguyên liệu Chủng nấm mục trắng Phanerochaetechrysosporium được Phòng sinh học phân tử trường Đại học Khoa học tự nhiên phân lập từ thân gỗ mục 3. Nguyên tắc của phương pháp TiaUV là tia tử ngoại có bước sóng trung gian (giữa ánh sáng nhìn thấy được vàtia X). Tác dụng củatia ... Sau đây là các đồ thị biểu thị sự thay đổi hoạttínhcủa LiP, MnP, cellulasse theo thời gian khi được chiếu trên tiaUV Qua đồ thị trên ta nhận thấy rằng tiaUV có ảnh hưởng đến hoạttính LiP của Phanerochaetechrysosporium Sau đó cho lượng vi sinh vật này vào môi trường PGB và nuôi cấy lắc Nếu Phanerochaetechrysosporium chịu tác động củatiaUV trong 30 phút thì hoạttính LiP đạt được ... Khảosáthoạttìnhcủa MnP Ở nhiệt độ 50oC hoạttínhcủa MnP thay đổi không đáng kể Ở nhiệt độ 60oC thì MnP đạt cực đại tại thời điểm 60 phút, tăng gấp đôi so với khi không sock nhiệt (từ 60UI/ml tăng lên 120UI/ml) Khảo sáthoạttìnhcủa MnP Ở nhiệt độ 70oC thì hoạttínhcủa MnP giảm rất thấp chỉ 0.45UI/ml ở thời gian là 15 phút và ở 60 phút là 0.15UI/m Biểu đồ thể hiện sự thay đổi hoạttínhcủa MnP Khảosáthoạttìnhcủa Cellulase. ... 30 phút, hoạttính đạt 1.51UI/ml, tăng khoảng 5 lần so với ban đầu là (0.28UI/ml). Nhưng nếu thời gian chiếu UV tăng lên đến 45 phút thì hoạttínhcellulase giảm xuống gần bằng 0 (0.1025UI/ml) Vậy nếu Phanerochaetechrysosporium chịu tác động củatiaUV thì chỉ có hoạt tínhcủa LiP vàcellulase tăng còn MnP sẽ giảm vàbằng 0 . KH O SÁT HO T TÍNH LIGNIN Ả Ạ PEROXIDASE, MANGANESE PEROXIDASE, CELLULASE C A CH NG Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM KHI B X LÝ Ị Ử B NG SHOCK NHI T VÀ TIA UV Ệ Nhóm th c hi n:. KH O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀ CELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM B NG Ằ TIA UV. II. KH O SÁT HO T TÍNH C A LiP, MnP Ả Ạ Ủ VÀ CELLULASE THEO TH I GIAN NUÔI Ờ C Y Ấ PHANEROCHAETE. O SÁT HO T TÍNH ƯƠ Ả Ạ C A LIP, MNP VÀ CELLULASE C A Ủ Ủ PHANEROCHAETE CHRYSOSPORIUM B NG SHOCK NHI T và CHI U UV Ệ Ế I. PH NG PHÁP ƯƠ SHOCK NHI TỆ 1. Nguyên li uệ Chủng nấm mục trắng Phanerochaete