(Đồ án HCMUTE) trích ly chất màu từ hạt dành dành(gardenia jasminoides ellis) bằng phương pháp trích ly hai pha nước

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGÀNH CƠNG NGHỆ HĨA HỌC TRÍCH LY CHẤT MÀU TỪ HẠT DÀNH DÀNH (Gardenia jasminoides Ellis) BẰNG PHƯƠNG PHÁP TRÍCH LY HAI PHA NƯỚC GVHD: VÕ THỊ NGÀ SVTH: ĐƯỜNG TIỂU PHỤNG SKL008866 Tp Hồ Chí Minh, tháng 01/2022 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC TRÍCH LY CHẤT MÀU TỪ HẠT DÀNH DÀNH (Gardenia jasminoides Ellis) BẰNG PHƯƠNG PHÁP TRÍCH LY HAI PHA NƯỚC Sinh viên thực hiện: Đường Tiểu Phụng Mã số sinh viên: 17128049 Giáo viên hướng dẫn: TS Võ Thị Ngà Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC TRÍCH LY CHẤT MÀU TỪ HẠT DÀNH DÀNH (Gardenia jasminoides Ellis) BẰNG PHƯƠNG PHÁP TRÍCH LY HAI PHA NƯỚC Sinh viên thực hiện: Đường Tiểu Phụng Mã số sinh viên: 17128049 Giáo viên hướng dẫn: TS Võ Thị Ngà Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 i TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HCM KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC VÀ THỰC PHẨM BỘ MƠN CƠNG NGHỆ HĨA HỌC -oOo - NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: ĐƯỜNG TIỂU PHỤNG MSSV: 17128049 Ngành: Công nghệ Kỹ thuật Hóa học Chun ngành: Cơng nghệ Kỹ thuật Hóa Hữu Tên khóa luận: Trích ly chất màu từ hạt dành dành (Gardenia jasminoides Ellis) phương pháp trích ly hai pha nước Nhiệm vụ: - Tìm hiểu tổng quan crocin, phương pháp trích ly chất màu, sở để lựa chọn phương pháp trích ly hai pha nước cho q trình trích ly chất màu crocin từ hạt dành dành - Xây dựng phương pháp xác định thành phần dịch trích - Xây dựng điều kiện trích ly chất màu crocin từ hạt dành dành phương pháp ATPE: -  Khảo sát chọn tỷ lệ muối citrate hỗn hợp muối phosphate;  Xây dựng đường cong hai pha;  Khảo sát chọn thành phần hệ APTS;  Khảo sát điều kiện ảnh hưởng q trình trích ly Đánh giá hiệu trích ly Ngày giao khóa luận: 23/02/2021 Ngày hồn thành khóa luận: 03/01/2022 Họ tên người hướng dẫn: TS VÕ THỊ NGÀ Nội dung hướng dẫn: Tồn khóa luận Nội dung u cầu khóa luận tốt nghiệp thơng qua Trưởng mơn Cơng nghệ Hóa Học Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng 01 năm 2022 TRƯỞNG BỘ MÔN NGƯỜI HƯỚNG DẪN TS Võ Thị Ngà i TRƯỜNG ĐH SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP.HCM CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA CN HÓA HỌC & THỰC PHẨM Độc lập - Tự - Hạnh phúc BỘ MÔN CÔNG NGHỆ HÓA HỌC PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGÀNH CƠNG NGHỆ KỸ THUẬT HĨA HỌC KHĨA 2017 (NGƯỜI HƯỚNG DẪN) THÔNG TIN CHUNG Họ tên người hướng dẫn: VÕ THỊ NGÀ Đơn vị công tác: Khoa CNHH&TP, trường ĐH SPKT TPHCM Học hàm, học vị: Tiến sĩ Chuyên ngành: Hoá hữu Họ tên sinh viên: ĐƯỜNG TIỂU PHỤNG MSSV: 17128049 Chuyên ngành: Hoá hữu Tên đề tài: Trích ly chất màu từ hạt dành dành (Gardenia jasminoides Ellis) phương pháp trích ly dung mơi hai pha nước NHẬN XÉT VỀ KHĨA LUẬN 2.1 Hình thức Tổng số trang: 86 Số tài liệu tham khảo: 54 Số chương: Số bảng: Sơ đồ: Số hình: 20 Phần mềm tính tốn: Excel, Matlab Bố cục: rõ ràng, hợp lý Hành văn: tương đối mạch lạc, đơi chỗ cịn viết câu dài Sử dụng thuật ngữ chuyên môn: phù hợp 2.2 Mục tiêu nội dung Mục tiêu đề có định hướng rõ ràng mang tính thực tế cao Mục tiêu trích ly hoạt chất màu vàng crocin từ hạt dành dành với định hướng tách crocin geniposide phương pháp trích ly dung mơi hai pha nước, với nội dung cụ thể: - Xây dựng phương pháp xác định thành phần dịch trích - Xây dựng điều kiện trích ly chất màu crocin từ hạt dành dành phương pháp ATPE:     Khảo sát chọn tỷ lệ muối citrate hỗn hợp muối phosphate; Xây dựng đường cong hai pha; Khảo sát chọn thành phần hệ APTS; Khảo sát điều kiện ảnh hưởng q trình trích ly - Đánh giá hiệu trích ly 2.3 Kết đạt Kết đạt đáp ứng phần lớn mục tiêu đề Kết khảo sát chọn lựa hỗn hợp muối gồm sodium citrate: (K2HPO4:KH2PO4, 18:7, w/w) tỷ lệ 80:20 dùng hệ ATPS Xác định thành phần hệ hai pha nước ATPS tối ưu Xác định điều kiện trích ly tỷ lệ mẫu nghiên cứu : i dung mơi, nhiệt độ trích ly, hàm lượng muối trung tính bổ sung Do hạn chế điều kiện nghiên cứu nên việc định hướng tách geniposide chưa áp dụng xuyên suốt q trình khảo sát 2.4 Ưu điểm khóa luận Khố luận tốt nghiệp với khối lượng cơng việc nhiều 2.5 Những thiếu sót khóa luận Điểm hạn chế khoá luận chưa tối ưu hoá điều kiện trích ly nhằm chuyển geniposide xuống pha nhiều Cần hoàn thiện số lỗi biên tập báo cáo NHẬN XÉT TINH THẦN VÀ THÁI ĐỘ LÀM VIỆC CỦA SINH VIÊN  Kỹ làm việc phịng thí nghiệm tỷ mỉ kiên trì  Tác phong làm việc nghiêm túc, tận tuỵ chủ động cơng việc  Có tinh thần trách nhiệm cao ĐỀ NGHỊ VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA NGƯỜI HƯỚNG DẪN Được bảo vệ x Bổ sung thêm để bảo vệ Không bảo vệ ĐÁNH GIÁ CỦA NGƯỜI HƯỚNG DẪN Nội dung đánh giá Điểm tối đa Chất lượng viết 30 Hình thức trình bày (đẹp, rõ ràng, tài liệu tham khảo 20 đầy đủ/đa dạng…) Bố cục viết (chặt chẽ, cân đối) 10 Nội dung khóa luận 60 STT Điểm đánh giá 24 Phương pháp nghiên cứu phù hợp, đảm bảo độ tin cậy, xử lý số liệu Nội dung thực hiện, kết đề tài đảm bảo tính khoa học, cơng nghệ Kết luận phù hợp với mục tiêu, nội dung nghiên cứu 20 16 49 17 20 17 10 Hiệu ứng dụng chuyển giao công nghệ Kỹ năng, thái độ sinh viên 10 10 10 Kỹ thực nghiệm, xử lý tình 5 Thái độ làm việc nghiêm túc 5 100 83 TỔNG ổn Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2022 Giảng viên hướng dẫn TS Võ Thị Ngà i CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐH SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP.HCM KHOA CN HĨA HỌC & THỰC PHẨM BỘ MƠN CƠNG NGHỆ HĨA HỌC Độc lập - Tự - Hạnh phúc - -PHIẾU ĐÁNH GIÁ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGÀNH CƠNG NGHỆ KỸ THUẬT HĨA HỌC KHĨA 2017 (NGƯỜI PHẢN BIỆN) THƠNG TIN CHUNG Họ tên người phản biện: Nguyễn Vinh Tiến Đơn vị công tác: khoa CNHH&TP, ĐH SPKT TPHCM Học hàm, học vị: Tiến sĩ Chuyên ngành: Hóa học Họ tên sinh viên: Đường Tiểu Phụng MSSV: 17128049 Chuyên ngành: Cơng nghệ Kỹ thuật Hóa hữu Tên đề tài: TRÍCH LY CHẤT MÀU TỪ HẠT DÀNH DÀNH (Gardenia jasminoides Ellis) BẰNG PHƯƠNG PHÁP TRÍCH LY HAI PHA NƯỚC Mã số khóa luận: NHẬN XÉT VỀ KHĨA LUẬN 2.1 Hình thức Tổng số trang: 72 Phần mềm tính tốn: Matlab, Excel Bố cục: hợp lý Hành văn: dễ hiểu Sử dụng thuật ngữ chun mơn: có sử dụng, phù hợp 2.2 Mục tiêu nội dung - Mục tiêu trích ly hoạt chất màu vàng crocin từ hạt dành dành (Gardenia jasminoides Ellis) với định hướng tách crocin geniposide phương pháp trích ly hai pha nước gồm nước, ethanol, hỗn hợp muối phosphate, natri citrate - Nội dung: + Khảo sát dung môi loại chất béo khỏi bột hạt dành dành + Khảo sát tỉ lệ hỗn hợp muối citrate/phosphate xây dựng giản đồ pha hệ pha nước + khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ dịch trích dành dành/hệ hai pha nước, nhiệt độ nồng độ NaCl đến khả thu hồi crocin 2.3 Kết đạt 2.4 Ưu điểm khóa luận - khối lượng cơng việc hồn thành lớn - SV biết sử dụng Matlab để giải hệ phương trình i - có cố gắng bàn luận kết thu được, đối chiếu với nghiên cứu khác rút kinh nghiệm thiếu sót thực nghiệm 2.5 Những thiếu sót khóa luận - Trong file luận văn bị thiếu phiếu giao nhiệm vụ khóa luận xác nhận giáo viên hướng dẫn Trưởng Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học - Phần tóm tắt luận văn sơ sài, khơng thể nội dung luận văn Ở tóm tắt kết khơng phải tóm tắt luận văn - Thiếu tổng quan dành dành thành phần khác có hạt dành dành ngồi crocin geniposide, chất ảnh hưởng đến kết đo nồng độ UV-vis - Thiếu trình bày quy trình thực nghiệm xác định nồng độ crocin pha pha (pha loãng lần, dung mơi gì), quy trình định lượng geniposide HPLC, cách khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ, cách thay đổi nồng độ NaCl mà không làm thay đổi hàm lượng nước hệ - Ở trang 26, tài liệu [39] [53] trích dẫn câu khơng phù hợp, khiến người đọc hiểu lầm giá trị nhiệt độ giá trị nồng độ NaCl tham khảo từ tài liệu trên, thực tế khơng phải - Một số câu viết khó hiểu sai nghĩa: + “crocin với độ tinh khiết 99,6% có hoạt tính chống oxy hóa nồng độ lên đến 40 ppm” (trang 2) Chắc chắn crocin 40 ppm chống oxy hóa tốt khơng phải “lên đến” 40 ppm + “nếu có anion xét tới cation nhằm tăng hiệu ứng tách muối lên kích thước cation giảm” (trang 6) Câu cần viết lại, thêm dấu phẩy phù hợp để rõ nghĩa + “lựa chọn điểm vùng tách pha với thành phần hỗn hợp 2,5% EtOH, 2,9% hỗn hợp ba muối, 4,5% H2O 0,1% nguyên liệu thô, w/w Lượng mẫu điều chỉnh 0,5 g (trang 21).” Ở % khối lượng chất bị tính sai! + Trục CPA chia thành ba phần dựa vào quy tắc cánh tay đòn.” (trang 36) Việc chia thành phần đâu có liên quan đến quy tắc cánh tay đòn + “Theo nguyên tắc cân hồ tan, đạt đến ngưỡng định dung dịch trở nên bão hồ khơng thể hồ tan thêm Lượng crocin dư (khơng thể hoà tan vào pha trên) nằm bề mặt phân chia pha xuống pha Nếu tiếp tục tăng thêm lượng crocin (bằng cách tăng tỷ lệ mẫu nghiên cứu:dung mơi) làm cân chuyển dịch theo chiều ngược lại, nghĩa crocin xuống pha dưới” Nguyên lý dịch chuyển cân khơng nói Khi tăng hàm lượng mẫu crocin đồng thời phân bố vào pha phân bố tối đa vào pha sau bị đẩy xuống pha - Dùng sai thuật ngữ: giá trị nồng độ tối đa ức chế half maximal inhibitory concentration (IC50) (trang 3); ngâm ethanol 99.5% (trong sơ đồ 2.4 trang 20 Chất lỏng trộn với chất lỏng khơng gọi “ngâm”); hiệu suất thu hồi crocin/geniposide so với mẫu vật liệu (mg/g) (chữ “hiệu suất thu hồi” thường dùng với ý nghĩa % hoạt chất bột ban đầu thu lại sau q trình trích ly, chỗ dường dư chữ “hồi”) - mục 2.2.4.4 Xây dựng xác định độ dài đường nối hai điểm-TLL cần có hình giản đồ minh họa với đường điểm nói tới đoạn văn để giúp người đọc dễ hiểu quy trình - Trong hình 3.4, nên đặt tên ống nghiệm tỉ lệ citrate-phosphate để người đọc khơng phải tìm xuống phần phụ lục - Hình 3.5 thể đại lượng biểu đồ cột, trục y bên trái vừa thể hệ số phân bố, vừa thể %hiệu suất thu hồi crocin pha với đơn vị khác Cách lựa chọn biểu đồ cột chưa hợp lý cho việc thể đồng thời loại số liệu i - Trong phần thực nghiệm kết quả, tác giả nói việc hồi quy đường giản đồ pha phương trình 2.4, 2.5 2.6, bảng kết 3.2 lại có thơng số phương trình 2.5 2.6 Hãy chỉnh lại cho khớp phần phương pháp kết - Thuật ngữ “mẫu nghiên cứu” xuất nói q trình trích ly lại khơng nói rõ gì, khiến người đọc khó hiểu mẫu bột hay mẫu dịch trích sau định mức lên 100 mL - Kết luận việc tăng nhiệt độ từ 27 đến 50 oC làm giảm hiệu suất thu hồi crocin không thuyết phục gượng ép, kết cho thấy giá trị hiệu suất thu hồi dường không khác biệt nhiệt độ khảo sát Phần biện luận việc nước từ pha xuống pha tăng nhiệt độ có thiếu thuyết phục Dựa việc hệ số phân bố giảm, dự đốn ethanol nước từ pha xuống pha - Nhìn vào kết bảng 3.8, khó lịng khẳng định NaCl có ảnh hưởng đáng kể đến thơng số bảng giá trị rât gần Độ lệch chuẩn tương đối kết khoảng 0.030.2% nhỏ sai số gây thao tác thực nghiệm lặp lại Có vẻ tác giả lấy kết đo lặp lần độ hấp thụ mẫu, đo độ hấp thụ mẫu lặp CÂU HỎI PHẢN BIỆN Tại natri citrate thay cho phần hỗn hợp muối phosphate? Tại tăng tỉ lệ citrate/phosphate hệ số phân bố giảm? Trong Hình 3.4, ống nghiệm TN3 cho thấy pha có màu vàng, hệ số phân bố lại cao nhất? Dung dịch chứa K2HPO4/KH2PO4=18/7 có pH =7, thêm muối natri citrate pH thay đổi nào? Sự thay đổi có gây phản ứng crocin trích ly thực nhiệt độ cao hay thời gian dài hay không? Khi khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ, tác giả kiểm soát nhiệt độ 27℃; 35℃; 50℃ nào, đặc biệt 27 oC? Tại chọn nhiệt độ này? Hệ số phân bố có phụ thuộc vào nồng độ chất tan hệ dung môi hay không? Tại hệ số lại thay đổi gần 10 lần hàm lượng dịch trích cao tăng từ 0,5% đến 4% (bảng 3.6)? Khi thêm 0,5 g “mẫu nghiên cứu” vào 9,9 g hệ (phụ lục 3.3) tỉ lệ thành phần nước, muối, ethanol có thay đổi hay khơng có ảnh hưởng đến kết Vr, Yt K? Điểm tới hạn Cp xác định cách giản đồ pha? Trình bày ví dụ quy tắc cánh tay địn giản đồ thu nghiên cứu Hãy trình bày thành phần chất có hệ trích ly chứa 4% mẫu nghiên cứu Các số liệu để tính kiểm định LSD dựa kết đo UV-vis lần trích ly hay lần trích ly lặp lại? Trên sắc kí đồ HPLC, peak unknown gì? đâu peak crocin geniposide? Note: thời gian lưu geniposide Luận văn Trương Thị Khánh Vân 6.1-6.2 phút 10 Tại việc loại bỏ chất béo (không phân cực) lại giúp việc trích ly crocin geniposide (phân cực) dễ dàng hơn? Màu vàng dung môi loại béo có phải crocin khơng? ĐỀ NGHỊ VÀ ĐÁNH GIÁ CỦA PHẢN BIỆN Được bảo vệ X Bổ sung thêm để bảo vệ Không bảo vệ ĐÁNH GIÁ CỦA NGƯỜI PHẢN BIỆN STT Nội dung đánh giá Chất lượng viết Điểm tối đa 30 i Điểm đánh giá 26 Hình thức trình bày (đẹp, rõ ràng, tài liệu tham khảo đầy đủ/đa dạng…) Bố cục viết (chặt chẽ, cân đối) 20 Nội dung khóa luận 70 56 Phương pháp nghiên cứu phù hợp, đảm bảo độ tin cậy, xử lý số liệu Nội dung thực hiện, kết đề tài đảm bảo tính khoa học, cơng nghệ 20 15 30 24 Kết luận phù hợp với mục tiêu, nội dung nghiên cứu 10 Hiệu ứng dụng 10 100 TỔNG 10 17 82 Tp Hồ Chí Minh, ngày 27 tháng 11 năm 2021 Giảng viên phản biện i Tỷ lệ thành phần muối potassium phosphate 0,2 63 i Tỷ lệ thành phần muối potassium phosphate 0,5 Tỷ lệ thành phần muối potassium phosphate 0,95 64 i Phụ lục 3.5 Khảo sát lựa chọn TLL Phụ lục 3.5.1 Kết tính tốn hàm lượng muối pha Điểm Khối lượng muối ban đầu (g) Khối lượng đĩa (g) Khối lượng dung dịch (g) Khối lượng sau sấy (g) Khối lượng muối pha (g) Khối lượng dung dịch pha (g) D 3,866 38,3551 49,1386 41,8196 3,4645 10,7835 D 3,866 38,3551 49,0386 41,7521 3,3970 10,6835 D 3,866 38,3551 49,0586 41,7652 3,4101 10,7035 41,779 3,424 10,724 Lần đo Trung bình E 4,140 38,6520 49,7545 42,5427 3,8907 11,1025 E 4,140 38,6520 49,8645 42,6121 3,9601 11,2125 E 4,140 38,6520 49,8045 42,5831 3,9311 11,1525 42,579 3,927 11,156 Trung bình A 4,412 38,1692 49,6886 42,4345 4,2653 11,5194 A 4,412 38,1692 49,7086 42,4545 4,2853 11,5394 A 4,412 38,1692 49,6386 42,4945 4,3253 11,4694 42,461 4,292 11,509 Trung bình Từ kết tính xác định khối lượng muối pha cac điểm D, E A 3,424 ± 0,036 (g), 3,927 ± 0,035 (g), 4,292 ± 0,031 (g) Phụ lục 3.5.2 Kết đo xử lý số liệu UV-Vis Lần đo Điểm Thể tích pha Thể tích pha Abs_pha Abs_pha Nồng độ crocin_ pha (mg/L) Nồng độ crocin_pha (mg/L D 9,5000 9,0000 0,2158 0,7793 102,3479 7,392 D 9,3500 9,1000 0,2172 0,7795 103,0118 7,394 D 9,5000 9,0000 0,2162 0,7797 102,5376 7,396 9,450 9,033 0,216 0,780 102,632 7,394 Trung bình 65 i E 9,2500 9,2500 0,2243 0,3538 106,3792 3,356 E 9,3500 9,2500 0,2229 0,3557 105,7152 3,374 E 9,2500 9,2500 0,2241 0,3547 106,2843 3,364 9,283 9,250 0,224 0,355 106,126 3,365 Trung bình A 9,7500 9,0000 0,2186 0,2257 103,6758 2,141 A 9,7500 9,0000 0,2189 0,2266 103,8181 2,149 A 9,5000 9,2500 0,2198 0,2252 104,2450 2,136 9,667 9,083 0,219 0,226 103,913 2,142 Trung bình Phụ lục 3.5.3 Kết phân tích ANOVA kiểm định LSD Tỷ lệ thể tích (Vr) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,00586768 0,00293384 6,48 0,0317 Within groups 0,00271729 0,000452881 Total (Corr.) 0,00858497 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Vr_E 1,0036 X Vr_D 1,04619 Vr_A 1,06456 X X Hệ số phân bố (K) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 1798,99 0,210118 1799,2 Df Mean Square 899,496 0,0350197 F-Ratio 25685,43 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD K_D K_E K_A Count 3 Mean 13,8807 31,5405 48,5097 66 i Homogeneous Groups X X X P-Value 0,0000 Hiệu suất thu hồi crocin pha (Yt) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 33,4154 0,0159168 33,4313 Df Mean Square 16,7077 0,00265279 F-Ratio 6298,16 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Yt_D Yt_E Yt_A Count 3 Mean 93,5567 96,9375 98,0994 Homogeneous Groups X X X Hiệu suất thu crocin so với bột nguyên liệu (Ycrocin) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 0,180421 0,0385834 0,219004 Df Mean Square 0,0902103 0,00643057 F-Ratio 14,03 P-Value 0,0055 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Ycrocin_D Ycrocin_E Ycrocin_A Count 3 Mean 9,69857 9,85191 10,0446 Homogeneous Groups X X X Phụ lục 3.6 Khảo sát điểm tối ưu Phụ lục 3.6.1 Kết đo xử lý số liệu UV-Vis Lần đo Điểm Thể tích pha (mL) Thể tích pha (mL) Abs_pha Abs_pha Nồng độ crocin_ pha (mg/L) Nồng độ crocin_pha (mg/L X 18,2500 2,7500 0,1082 0,2389 51,3162 3,3991 X 18,2500 2,7500 0,1086 0,2383 51,5059 3,3906 X 18,3500 2,7500 0,1078 0,2368 51,1265 3,3692 18,2833 2,7500 0,108 0,238 51,316 3,386 14,0000 6,1000 0,1509 0,2346 71,5676 2,2253 Trung bình Y 67 i Y 13,9500 6,0000 0,1521 0,2354 72,1367 2,2329 Y 14,0000 6,0000 0,1515 0,2362 71,8522 2,2405 13,9833 6,0333 0,1515 0,2354 71,8522 2,2329 Trung bình A 9,7500 9,0000 0,2186 0,2257 103,6758 2,141 A 9,7500 9,0000 0,2189 0,2266 103,8181 2,149 A 9,5000 9,2500 0,2198 0,2252 104,2450 2,136 9,6667 9,0833 0,2191 0,2258 103,9130 2,142 Trung bình Z 7,0000 11,0000 0,3188 0,2861 151,1979 2,7138 Z 7,2500 10,7500 0,3166 0,2873 150,1545 2,7252 Z 7,1000 11,0000 0,3181 0,2868 150,8659 2,7204 7,1167 10,9167 0,3178 0,2867 150,7394 2,7198 Trung bình W 4,0000 13,0000 0,5481 0,3153 259,9484 2,9908 W 3,8500 13,1000 0,5491 0,3142 260,4227 2,9803 W 4,0000 13,0000 0,5474 0,3147 259,6164 2,9851 3,9500 13,0333 0,5482 0,3147 259,9958 2,9854 Trung bình Phụ lục 3.6.2 Kết phân tích ANOVA kiểm định LSD Tỷ lệ thể tích pha (Vr) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 81,2592 0,00472124 81,2639 Df 10 14 Mean Square 20,3148 0,000472124 F-Ratio 43028,55 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Vr_W Vr_Z Vr_A Vr_Y Vr_X Count 3 3 Mean 0,303093 0,652079 1,06456 2,31781 6,64848 68 i Homogeneous Groups X X X X X P-Value 0,0000 Hệ số phân bố (K) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr,) 8735,97 0,488214 8736,45 10 14 2183,99 0,0488214 44734,29 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count 3 3 K_X K_Y K_A K_Z K_W Mean 15,1542 32,1794 48,5097 55,4236 87,0899 Homogeneous Groups X X X X X Hiệu suất thu hồi crocin pha (Yt) ANOVA Table Source Between groups Sum of Squares 13,9528 Df Mean Square 3,4882 Within groups Total (Corr,) 0,0273203 13,9801 10 14 0,00273203 F-Ratio 1276,78 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Yt_W Yt_Z Yt_A Yt_Y Yt_X Count 3 3 Mean 96,3484 97,3062 98,0994 98,6769 99,0172 Homogeneous Groups X X X X X Hiệu suất thu hồi so với bột nguyên liệu (Ycrocin) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 2,82888 0,166836 2,99571 Df 10 14 Mean Square 0,707219 0,0166836 F-Ratio 42,39 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Ycrocin_X Ycrocin_A Ycrocin_Y Count 3 Mean 9,38225 10,0446 10,0473 69 i Homogeneous Groups X X X P-Value 0,0000 Ycrocin_W Ycrocin_Z 3 10,2696 10,7272 X X Phụ lục 3.7 Khảo sát tỷ lệ mẫu nghiên cứu:dung môi Phụ lục 3.7.1 Kết đo xử lý số liệu UV-Vis Lần đo Tỷ lệ mẫu nghiên cứu:dung môi (%) 0,5 6,7500 0.5 Thể tích Thể tích pha pha (mL) (mL) Abs_pha Abs_pha Nồng độ crocin_ pha (mg/L) Nồng độ crocin_pha (mg/L) 10,7500 0,1527 0,0471 72,4213 0,4468 6,7500 10,8000 0,1537 0,0468 72,8956 0,4439 0.5 6,8500 10,7500 0,1513 0,0475 71,7573 0,4506 Trung bình 6,7833 10,7667 0,1418 0,0471 72,3581 0,4471 1 6,7500 10,7500 0,2813 0,2117 133,4127 2,0081 6,8500 10,6500 0,2798 0,2124 132,7013 2,0147 6,8500 10,7500 0,2803 0,2119 132,9384 2,0100 6,8167 10,7167 0,2802 0,2120 133,0174 2,0109 Trung bình 6,7500 10,7500 0,5580 2,0905 264,6437 19,8293 2 6,6500 10,8500 0,5598 2,0686 265,4974 19,6216 6,7500 10,8500 0,5589 2,0775 265,0705 19,7060 6,7167 10,8167 0,5589 2,0789 265,0705 19,7190 Trung bình 6,7500 10,7500 0,8773 1,5761 416,0787 14,9500 6,7500 10,6500 0,8778 1,5798 416,3158 14,9851 3 6,8000 10,7000 0,8768 1,5771 415,8416 14,9595 6,7667 10,7000 0,8773 1,5777 416,0787 14,9649 Trung bình 6,5000 11,0000 1,1581 3,4845 549,2542 33,0520 6,7500 10,8500 1,1573 3,4952 548,8748 33,1535 6,5000 11,0000 1,1578 3,4743 549,1119 32,9553 6,5833 10,9500 1,1577 3,4847 549,0803 33,0536 Trung bình Phụ lục 3.7.2 Kết phân tích ANOVA kiểm định LSD Tỷ lệ thể tích pha (Vr) 70 i ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr,) 0,00233207 0,000995785 0,00332785 10 14 0,000583017 0,0000995785 5,85 0,0108 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Vr_4% Vr_2% Vr_0,5% Vr_3% Vr_1% Count 3 3 Mean 0,601313 0,620977 0,630039 0,632408 0,636103 Homogeneous Groups X X X X X Hệ số phân bố (K) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr,) 46378,9 12,5097 46391,4 10 14 11594,7 1,25097 9268,56 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD K_2% K_4% K_3% K_1% K_0,5% Count 3 3 Mean 13,4427 16,6119 27,8037 66,1481 161,858 Homogeneous Groups X X X X X Hiệu suất thu hồi crocin pha (Yt) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr,) 211,352 0,105355 211,457 10 14 52,838 0,0105355 5015,22 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Yt_2% Yt_4% Yt_3% Yt_1% Count 3 3 Mean 89,3014 90,8959 94,6187 97,6784 71 i Homogeneous Groups X X X X Yt_0,5% X 99,0288 Hiệu suất thu hồi so với bột nguyên liệu (Ycrocin) ANOVA Table Source Between groups Sum of Squares 1,61515 Df Mean Square 0,403788 Within groups 0,0952822 10 0,00952822 Total (Corr,) 1,71043 14 F-Ratio 42,38 P-Value 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Ycrocin_2% Ycrocin_4% Ycrocin_1% Ycrocin_3% Ycrocin_0,5% Count 3 3 Mean 8,90188 9,0369 9,06722 9,38487 9,81618 Homogeneous Groups X X X X X Phụ lục 3.8 Kết khảo sát nhiệt độ Phụ lục 3.8.1 Kết đo xử lý số liệu UV-Vis Lần đo Nhiệt độ (℃) Thể tích pha (mL) Thể tích pha (mL) Abs_pha Abs_pha Nồng độ crocin_ pha (mg/L) Nồng độ crocin_pha (mg/L) 27 6,5000 11,0000 0,1902 0,1101 90,2065 1,0443 27 6,7500 10,7500 0,1834 0,1221 86,9815 1,1582 27 6,5000 10,9500 0,1898 0,1117 90,0168 1,0595 Trung bình 6,5833 10,9000 0,1915 0,1146 89,0683 1,0873 35 6,5000 11,0000 0,1894 0,1500 89,8271 1,4228 35 6,7500 10,7500 0,1822 0,1591 86,4123 1,5091 35 6,5000 11,0000 0,1891 0,1588 89,6848 1,5063 Trung bình 6,5833 10,9167 0,1919 0,1560 88,6414 1,4794 50 6,2500 11,2500 0,1952 0,1731 92,5779 1,6419 50 6,2500 11,2500 0,1921 0,1726 91,1076 1,6372 50 6,5000 11,0000 0,1887 0,1734 89,4951 1,6448 6,3333 11,1667 0,1943 0,1730 91,0602 1,6413 Trung bình 72 i Phụ lục 3.8.2 Kết phân tích ANOVA kiểm định LSD Tỷ lệ thể tích pha (Vr) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 0.00264406 0.00259667 0.00524073 Df Mean Square 0.00132203 0.000432779 F-Ratio 3.05 P-Value 0.1216 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Vr_50℃ Count Mean 0.56734 Homogeneous Groups X Vr_35℃ 0.603242 X Vr_27℃ 0.604141 X Hệ số phân bố (K) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr.) Sum of Squares 1222.65 94.9463 1317.6 Df Mean Square 611.326 15.8244 F-Ratio 38.63 P-Value 0.0004 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD K_50℃ Count Mean 55.4814 K_35℃ 59.9777 K_27℃ 82.146 Homogeneous Groups X X X Hiệu suất thu hồi crocin pha (Yt) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1.86876 0.934378 169.69 0.0000 Within groups Total (Corr.) 0.033039 1.90179 0.00550649 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Yt_50℃ Count Mean 96.9189 73 i Homogeneous Groups X Yt_35℃ Yt_27℃ 3 97.3065 98.0192 X X Hiệu suất thu hồi so với bột nguyên liệu (Ycrocin) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr,) 0,0585306 0,033704 0,0922346 0,0292653 0,00561734 5,21 0,0488 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Count Mean Ycrocin_50℃ 11,5317 Homogeneous Groups X Ycrocin_35℃ 11,6674 XX Ycrocin_27℃ 11,7238 X Phụ lục 3.9 Kết khảo sát nồng độ NaCl Phụ lục 3.9.1 Kết đo xử lý số liệu UV-Vis Lần đo Nồng độ NaCl (M) Thể tích pha (mL) Thể tích pha (mL) Abs_pha Abs_pha Nồng độ crocin_ pha (mg/L) Nồng độ crocin_pha (mg/L) 6,5000 11,0000 0,1895 0,1154 89,8745 1,0946 6,7500 10,7500 0,1836 0,1161 87,0763 1,1013 6,7500 10,7500 0,1829 0,1157 86,7443 1,0975 6,6667 10,8333 0,1853 0,1157 87,8984 1,0978 Trung bình 0,1 6,7500 10,7500 0,1830 0,1161 86,7917 1,1013 0,1 6,7500 10,7500 0,1828 0,1171 86,6969 1,1107 0,1 6,5000 11,0000 0,1895 0,1178 89,8745 1,1174 6,6667 10,8333 0,1851 0,1170 87,7877 1,1098 Trung bình 0,3 6,7500 10,7500 0,1829 0,1181 86,7443 1,1202 0,3 6,5000 11,0000 0,1891 0,1178 89,6848 1,1174 0,3 6,7500 10,7500 0,1832 0,1188 86,8866 1,1269 6,6667 10,8333 0,1851 0,1182 87,7719 1,1215 Trung bình 0,5 6,5000 11,0000 0,1911 0,1130 90,6333 1,0719 0,5 6,5000 11,0000 0,1908 0,1103 90,4911 1,0462 74 i 0,5 Trung bình 6,7500 10,8500 0,1836 0,1120 87,0763 1,0624 6,5833 10,9500 0,1885 0,1118 89,4002 1,0602 1,0 6,5000 10,7500 0,1889 0,1243 89,5900 1,1790 1,0 6,6500 10,8500 0,1840 0,1249 87,2660 1,1847 1,0 6,6500 10,8500 0,1845 0,1267 87,5032 1,2018 6,6000 10,8167 0,1858 0,1253 88,1197 1,1885 Trung bình Phụ lục 3.9.2 Kết phân tích ANOVA kiểm định LSD Tỷ lệ thể tích pha (Vr) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 0,000465911 0,00343249 0,0038984 Df 10 14 Mean Square 0,000116478 0,000343249 F-Ratio 0,34 P-Value 0,8454 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Vr_0_5 M Vr_1 M Vr_0_3 M Vr_0_1 M Vr_0 M Count Mean Homogeneous Groups 3 3 0,601313 0,610153 0,615574 0,615574 0,615574 X X X X X Hệ số phân bố (K) ANOVA Table Source Between groups Within groups Total (Corr,) Sum of Squares 160,572 30,9164 191,489 Df 10 14 Mean Square 40,143 3,09164 F-Ratio 12,98 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD K_1 M K_0_3 M K_0_1 M K_0 M K_0_5 M Count Mean Homogeneous Groups 3 3 74,1514 78,2673 79,0991 80,072 84,3377 X X X X X 75 i P-Value 0,0006 Hiệu suất thu hồi crocin pha (Yt) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups Within groups Total (Corr,) 0,0858424 0,00928123 0,0951237 10 14 0,0214606 0,000928123 23,12 0,0000 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Yt_1 M Yt_0_3 M Yt_0_1 M Yt_0 M Yt_0_5 M Count 3 3 Mean 97,837 97,9654 97,9863 98,0103 98,0651 Homogeneous Groups X X X XX X Hiệu suất thu hồi so với bột nguyên liệu (Ycrocin) ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,0287755 0,00719388 10,09 0,0015 Within groups 0,00713029 10 0,000713029 Total (Corr,) 0,0359058 14 Multiple Range Tests Method: 95.0 percent LSD Ycrocin_1 M Ycrocin_0_3 M Ycrocin_0_1 M Ycrocin_0 M Ycrocin_0_5 M Count 3 3 Mean 11,6303 11,6997 11,7016 11,7165 11,7672 76 i Homogeneous Groups X X X X X S i K L 0