điều tra, nghiên cứu tảo độc gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra - hàm lượng độc tố gây tiêu chảy (dsp) trong động vật thân mềm

Báo cáo chuyên đề - Đề tài KC-09-19: “Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác

Trang 1

Viện khoa học và công nghệ việt nam Viện tài nguyên và môi trường biển

=========000=========

Đề tài cấp nhà nước kc-09-19

“Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng

nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp

phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra”

Chủ nhiệm đề tài: TS Chu Văn Thuộc

Báo cáo chuyên đề

Hàm lượng độc tố gây tiêu chảy (DSP)

Trang 2

Báo cáo chuyên đề - Đề tài KC-09-19: “Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại ở một số vùng nuôi trồng thuỷ

sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu những tác hại do chúng gây ra”

I đặt vấn đề

Bệnh viêm dạ dày và đường tiêu hoá ở người do ăn phải động vật thân mềm hai mảnh vỏ có độc ở biển do tích luỹ độc tố gây tiêu chảy (DSP) Sự bùng phát các hiện tượng ngộ độc của độc tố DSP trước đây chỉ giới hạn trong các vùng nước lạnh và ấm ở vùng biển Đại Tây dương và Thái Bình Dương, ngoại trừ một số trường hợp đã được báo cáo đã xảy ra ở cả vùng nước nhiệt đới của ấn độ dương Có duy nhất hai tài liệu đề cập đến trường hợp độc tố DSP ở vùng Bắc Mỹ, nhưng số lượng này sẽ tăng lên do những kỹ thuật giám sát và phát hiện đã được hiện đại hơn Có trên 10.000 trường hợp ngộ độc được báo cáo trên khắp TG kể từ năm 1976 Triệu chứng nhiễm độc DSP ở

người được biết đến từ năm 1960 Các loài thuộc chi Dinophysis và Prorocentrum được

đề cập đến là nguyên nhân gây ra độc tố DSP ở phần lớn các trường hợp ngộ độc Tuy nhiên Yasumoto và cộng sự (1980) lần đầu tiên tìm và tách được các hợp chất là nguyên nhân gây độc từ các loài thuộc chi tảo Giáp Dinophysis ở Nhật Kể từ đó, các

hợp chất độc như okadac axít và Dinophysistoxin -1 đã được xác định từ D fortii , D

acuminata, D acuta, D norvegica, D tripos, D mitra, D caudata và Phalacroma (=

D ) rotundatum [Yasumoto, 1990] Các độc tố sau có ý nghĩa với độc tố DSP trong

các động vật kiểm tra và được tách chiết từ động vật thân mềm hai mảnh vỏ gồm: okadac axít và các dẫn xuất của nó, Dinophysistoxin (DTXs), pectenotoxin (PTXs), yessotoxin (YTXs) và các dẫn xuất của các loại độc tố trên Quá trình trao đổi chất ở các động vật biển như động vật thân mềm hai mảnh vỏ có thể làm thay đổi các độc tố

và quá trình hình thành nên các dẫn xuất của độc tố

Sự biến đổi các hợp phần độc tố, mức độ, khả năng có thể xuất hiện cùng với các loài tảo Giáp khác nhau, cách biệt địa lý, các điều kiện môi trường, thành phần và độ phong phú của các nhóm tảo khác nhau, và các loài động vật thân mềm hai mảnh vỏ cũng được coi là các nhân tố Điều này không phải chỉ xảy ra với độc tố DSP bởi vì các quá trình này cũng tương tự sự biến đổi độc tố của việc xuất hiện các độc tố gây tê liệt cơ (PSP) Sự biến đổi độc tố có thể là một vấn đề đối với các chương trình quan trắc của Chính phủ Nhìn chung việc đóng cửa các bãi nuôi thân mềm dựa trên cơ sở sự xuất hiện và phong phú của các loài nghi ngờ có độc nhiều hơn sự hiện diện của độc tố trong thức ăn hải sản [Sampayo và công sự, 1990] ở một số nước, việc thu mẫu

Trang 3

Sự tiêu thụ các hải sản đã bị nhiễm độc tố tảo có thể gây ra hàng loạt các triệu chứng bệnh lý về hệ thần kinh ở người Các bệnh lý và các triệu chứng lâm sàng quan trọng được tóm tắt trong các bảng 1

Bảng 1 Một số triệu chứng khi bị ngộ độc độc tố DSP [Anderson, 1996]

Thời gian ủ bệnh 30 phút đến nhiều giờ (hiếm khi sau

12 giờ) Triệu chứng – trường

Biện pháp chữa trị Tự phục hồi sau 3 ngày

Là chất kìm hãm hệ enzym protein phosphatase, acid okaidaic có thể là nhân

tố kích thích các khối u bướu

Liên quan đến kiểm soát vệ sinh an toàn thực phẩm của độc tố DSP có những vấn đề không tương thích trong các phương pháp và trong các tiêu chuẩn để cho các kết quả tin cậy Thử nghiệm trên động vật được ứng dụng rộng rãi đối với việc xác định độc tính của DSP Tuy nhiên có những sự khác nhau lớn trong quá trình thực hiện sự lựa chọn các thử nghiệm, đặc biệt sự phục hồi độc tính phụ thuộc rất lớn vào sự lựa chọn và

tỷ lệ các hợp chất hữu cơ được sử dụng trong quá trình chiết rút Phần lớn các nước đều thiết lập giới hạn phát hiện trong các phương pháp sử dụng phân tích Nước đầu tiên thiết lập giới hạn cho phép là Nhật Bản với mức 5MU/100g mô thân mềm nhuyễn thể (tương đương với 20 àg/100g mô) Giới hạn này cũng được thiết lập ở Hàn Quốc và New Zealand Phần lớn các nước ứng dụng phương pháp thử nghiệm trên chuột sẽ căn

cứ vào thời gian sống sót của chuột để xác định hàm lượng độc tố và các nước có các giới hạn khác nhau trong lĩnh vực này

Trang 4

Các loài ĐV động vật thân mềm hai mảnh vỏ và cá sống rạn là đối tượng chủ yếu tích luỹ độc tố tảo, tuy nhiên một số sinh vật biển khác như cua, rùa biển cũng có thể tích luỹ các độc tố này [Shưmway 1990, Landsberg 2002] Điều quan trọng là các

độc tố tảo không hề gây ra bất cứ mùi vị khác lạ nào cho thực phẩm biển, do đó ngư dân hoặc người tiêu thụ không thể nào phát hiện ngay lập tức sự có mặt của chúng mà chỉ có thể phát hiện bằng các phương pháp thử nghiệm sinh học hoặc phân tích hoá học Một vấn đề quan trọng nữa là các độc tố tảo không bị phá huỷ trong quá trình đun nấu

và chính vì vậy chúng có thể tồn tại ở cả các sản phẩm hải sản đóng hộp, cấp đông hoặc các sản phẩm chế biến khác

Giới hạn về an toàn cho phép của Quốc tế khi sử dụng cho toàn bộ phần thịt

động vật thân mềm hai mảnh vỏ đối với độc tố DSP là 20àgOA/100g mô đã được sử dụng Một số các nghiên cứu khác cũng khẳng định một điều các độc tố PSP được tích luỹ trong điệp (scallop) và chúng được đào thải rất chậm (Shumway và cs 1992) Đây chính là các nguyên nhân làm tăng sự không an toàn đối với người tiêu thụ thực phẩm hải sản

Sự nở hoa của các loài tảo gây hại, trong chiều hướng quan hệ chặt chẽ giữa chúng và các điều kiện môi trường hoàn toàn là các hiện tượng tự nhiên đang xảy ra và

đã xảy ra trong lịch sử, trong hai thập kỷ qua tác động lên sức khoẻ của cộng đồng và nền kinh tế thậm chí xuất hiện với tần xuất, cường độ ngày càng tăng và phân bố theo vùng địa lý

Sự tích luỹ của động vật thân mềm hai mảnh vỏ đối với một số loại độc tố như

độc tố ảnh thần kinh gây mất trí nhớ (ASP), độc tố gây tê liệt cơ (PSP) và độc tố gây tiêu chảy (DSP) là nguyên nhân gây tổn hại nghiêm trọng cho sức khoẻ cộng đồng cũng như ngành thuỷ sản Điều này đã trở thành một vấn đề đối với toàn cầu về sự gia tăng các trường hợp ngộ độc và tần xuất, cường độ lan rộng theo phân bố địa lý của các loài

vi tảo có chứa độc tố và các vấn đề này cũng đang xảy ra tại các nước Đông Nam á ở Việt Nam, người bị ngộ độc do ăn phải động vật thân mềm hai mảnh vỏ có độc tố chưa

được thống kê và báo cáo Tuy nhiên sự xuất hiện của các loài tảo tiềm tàng độc hại ở vùng biển Việt Nam đã được thống kê và báo cáo trong kết quả nghiên cứu của dự án HAB-Việt pha I [Larsen và cs., 2004]

Như chúng ta đã biết các loài thuộc chi Dinophysis và Prorocentrum được đề

Trang 5

hầu hết các vùng nghiên cứu Chi Dinophysis bao gồm các loài phân bố rộng, chúng rất khi hình thành nở hoa với mật độ tế bào cao Riêng với loài D.fortii với mật độ thấp

khoảng 20 tb/L đủ để ngộ độc gây tiêu chảy trên phạm vi rộng lớn [Yasumoto và cs.1980]

Chi Prorocentrum, các loài độc hại thường sống đáy và thường gặp trong vùng

nhiệt đới trên san hô chết trong các vũng vịnh kín [Grzebyk và cs 1994], chỉ có một số loài gây hại có đời sống trôi nổi và dễ hình thành nở hoa trên phạm vi rộng lớn như loài

Prorocentrum micans

Các nghiên cứu từ trước đến nay ở Việt Nam về lĩnh vực tảo độc đã cho thấy sự phân bố của các loài vi tảo tiềm tàng độc hại khá phong phú dọc theo các vùng ven biển, trong đó có một số loài bắt gặp với tần xuất xuất hiện nhiều và mật độ cao tại các

vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung và một số đầm nuôi tôm như Prorocentrum

minimum mật độ đạt tới 107 tb/L tại đầm tôm (Đồ Sơn – Hải Phòng) [Chu Văn Thuộc,

2002] Trong nghiên cứu của Nguyễn Văn Nguyên (2003) cho thấy loài Dinophysis

caudata phân bố phổ biến trong các vùng biển phía Bắc, mật độ của chúng biến động

rất mạnh, dao động từ 0 đến 3.000tb/L Nhưng mật độ này vẫn thấp hơn mật độ cao nhất đã bắt gặp ở vịnh Hạ Long là 6.000 tb/L [Chu Văn Thuộc, 2002] và 11.000tb/L

[Nguyễn Ngọc Lâm, 2002] Đặc biệt loài Dinophysis caudata được coi là nguyên nhân

chính gây ra độc tố DSP hoành hành ở nhiều nơi trên thế giới như vùng Địa Trung Hải [Aubry và cs 2000; Sidari, 1995; Tubaro và cs 1995] và vùng biển Atlantic [Mendez, 1991] Từ các kết quả nghiên cứu ở trên đã gợi ý khả năng tích luỹ độc tố của các sinh vật biển và khả năng bùng phát các hiện tượng ngộ độc ở người trong các khu vực đó Tuy nhiên, mối quan hệ giữa việc xuất hiện các loài tảo độc và việc tích luỹ độc tố trong động vật thân mềm hai mảnh vỏ vẫn chưa được hiểu biết rõ ràng do thiếu hệ thống quan trắc có tính hệ thống trong các vùng này

Hiện tại các nước phát triển, hàng năm phải chi phí một lượng kinh phí rất lớn cho nguồn kiểm soát thực phẩm biển Phần lớn các nước kết hợp việc quan trắc giám sát mật độ tảo với tiến hành phân tích, kiểm định độc tố DSP trong động vật thân mềm hai mảnh vỏ Độc tố DSP được quan trắc tại 45% các nước có biển và sử dụng phương pháp thử nghiệm trên chuột (chiếm khoảng 85%) Một số nước thực hiện phân tích bằng phương pháp hoá học, phần lớn sử dụng HPLC, một phần nhỏ các nước sử dụng

Trang 6

cứu Nhằm tìm hiểu biến động, hàm lượng và mối quan hệ giữa các loài tảo độc có khả năng sản sinh độc tố và khả năng tích luỹ độc tố của động vật thân mềm hai mảnh vỏ nhằm đưa ra được những cảnh báo về nguy cơ xảy ra các hiện tượng ngộ độc ở người tiêu dùng khi sử dụng hải sản làm thực phẩm

II Phương pháp nghiên cứu

2.1 Vật liệu nghiên cứu

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu

+ Vùng biển Hải Phòng: Vẹm xanh (Mytilus sp.) và Ngao (Meretrix meretrix) là

những đối tượng động vật thân mềm hai mảnh vỏ có giá trị kinh tế được nuôi chủ yếu tại hai vùng biển Cát Bà và Đồ Sơn (Hải Phòng) vừa phục vụ xuất khẩu thuỷ sản, vừa phục vụ chế biến đồ ăn hải sản cho khách du lịch tại chỗ

+ Vùng biển Thái Bình: Ngao (Meretrix sp.) là đối tượng được nuôi chủ yếu tại

các vùng ven biển Thái Bình và cũng là đối tượng được nghiên cứu hàm lượng các độc

tố vi tảo trong khuôn khổ của đề tài KC-09-19

+ Vùng biển Lăng Cô (TT Huế): Vẹm xanh (Mytilus sp.) là đối tượng thân mềm

hai vỏ được nuôi vừa cung cấp thực phẩm cho dân địa phương vừa là đồ hải sản được khách du lịch ưa chuộng trong các bữa ăn nên đã được chọn làm đối tượng nghiên cứu của đề tài

2.1.2 Tần xuất thu mẫu

+ Vẹm xanh và Ngao nuôi tại vùng biển Hải Phòng, được thu một tháng 2 lần và thu liên tục trong một năm từ tháng 5/2004 đến hết tháng 4 năm 2005 Tổng số mẫu

được tiến hành phân tích tại mỗi một điểm nghiên cứu là : Cát Bà 24 mẫu, Đồ Sơn: 24 mẫu

+ Ngao nuôi tại Thái Bình và Vẹm xanh nuôi tại vùng biển Lăng Cô (Huế) được thu mỗi tháng 1 lần cùng với các mẫu tảo và mẫu hoá nước tại vùng nghiên cứu

Ngoài ra còn sử dụng các số liệu đã được quan trắc liên tục trong 2 năm

2002-2004 của dự án JSPS trong khuôn khổ hợp tác song phương giữa Viện tài nguyên và

Trang 7

- Cát Bà: Vẹm xanh được đặt mua cả chùm to, đặt nuôi cố định trong một lồng nuôi, hàng tháng đến ngày tỉa thu mẫu theo một kích cỡ ổn định

- Thái Bình: Ngao cũng được thu trực tiếp ngay trên các vây nuôi hàng tháng theo một kích cỡ ổn định

- Vẹm xanh được thu trực tiếp ngay trong các lồng nuôi theo một kích cỡ ổn

định

- Mẫu động vật thân mềm hai mảnh vỏ sống sau khi thu, được chuyển ngay về phòng thí nghiệm với khoảng thời gian trong ngày và được mổ tách lấy nội quan theo quy trình sau:

+ 2 kg Ngao (hoặc vẹm) được rửa sạch bằng nước ngọt để loại bùn cát trên vỏ,

để ráo nước

+ Mổ, tách thịt và vỏ

+ Rửa thịt mẫu dưới vòi nước thật nhẹ nhàng để loại muối

+ Sau khi để ráo nước (trong 5 phút), mổ tách nội quan (phần có mầu nâu hoặc mầu sẫm hơn), cho vào lọ sạch

+ Nghiền nội quan bằng máy xay sinh tố hoặc cắt nhỏ rồi đem nghiền bằng cối

sứ (loại cối sứ sử dụng trong phòng thí nghiệm)

+ Sau khi mẫu được nghiền đồng nhất

Cân 5 g mẫu

+ 20 ml MeOH (80%) Trộn đều, Ly tâm

Trang 8

Tất cả các mẫu sau khi xử lý, được phân tích hàm lượng độc tố DSP theo phương pháp "OA-check" (Mitsubishi Kagaku Iatron, Inc., Nhật Bản) [Hallegraeff (Eds), 2004]

Các kit thử độc tố DSP đã được sản xuất bởi các nhà phân phối thương mại như phòng thí nghiệm SCETI, Tokyo, Nhật Bản (DSP – check) và kỹ thuật sinh học Rougier, Montreal, Canada

Việc kiểm tra đã sử dụng rất thành công việc phát hiện độc tố OA và DTX trong mô động vật thân mềm hai mảnh vỏ , đặc biệt là gan tuỵ (Chin và cs 1995; Carmody và

cs 1995 )

2.3 Phương pháp xử lý, tính toán hàm lượng độc tố trong các loài động vật thân mềm hai mảnh vỏ

2.3 1 Tính trung bình các chỉ số OD đo được trên máy (mẫu lặp 3 lần)

2.3.2 Phác thảo đồ thị tính toán: Bằng tay, hoặc sử dụng MS-Excel hoặc các phần

mềm tính toán khác

Phương trình và đồ thị đường chuẩn cho tính toán hàm lượng độc tố DSP trong các mẫu động vật thân mềm hai mảnh vỏ đã được xây dựng dựa trên các nồng độ chất chuẩn của OA standar

OA-Check

0.001 0.01 0.1 1 10 100 1000

Trang 9

III Kết quả nghiên cứu và thảo luận

Trong số các nhóm độc tố biển, nhóm độc tố DSP bao gồm các độc tố gây nhiều tranh cãi nhất Trong nhóm độc tố này bao gồm có 3 nhóm chính: okadaic a xít (OA) và

nhóm Dinophysistoxin (DTXs) được sản sinh từ các loài tảo thuộc chi Dinophysis và

Prorocentrum, nhóm độc tố pectenotoxin (PTXs) được sản sinh từ một số loài khác

thuộc chi Dinophysis và yessotoxins (YTXs) được sản sinh từ Gonyaulax grindleyi và

Lingulodinium polyedra [Yasumoto và cs., 1989; Satake và cs 1998; Tubaro và cs

1998]

Độc tố DSP ức chế enzym protein phosphatase – là enzym đóng vai trò điều hoà các quá trình trao đổi chất quan trọng của tế bào Hiện tượng tiêu chảy gây ra bởi độc tố DSP là do quá trình hydrate hoá các protein trong biểu mô thành ruột, làm rối loạn cân bằng nước [Van Dolah 2000] ngoài ra còn có rất nhiều bằng chứng cho rằng a xít okadaic là tác nhân kích thích sự phát triển của các khối u bưóu [Rossini 2000] Các

độc tố pectenotoxin [PTXs] và yessotoxins [YTXs] thường được xếp cùng nhóm với

độc tố DSP vì chúng thường cùng xuất hiện và cùng được tách chiết từ các động vật

Trang 10

3.1 Biến động hàm lượng độc tố DSP trong ngao (Meretrix meretrix) nuôi tại Đồ

Sơn – Hải Phòng

Cũng như các độc tố tảo ASP và PSP, độc tố DSP tích luỹ trong ngao nuôi tại Đồ Sơn được quan trắc với tần xuất 2 lần/tháng, kết quả phân tích hàm lượng độc tố DSP cho thấy ngao nuôi Đồ Sơn có tích luỹ loại độc tố này, nhưng hàm lượng rất thấp, dao

động từ 0 đến vài phần nghìn MU/g mô nội tạng Kết quả được biểu diễn trong hình 3.1

Đối với một số nước như Nhật Bản, Hàn Quốc và New Zealand , giới hạn an toàn cho phép với loại độc tố này là 0,5 MU/g (mô nội tạng) So với giới hạn cho phép này thì hàm lượng độc tố tích luỹ trong ngao thấp hơn rất nhiều lần

Trang 11

0 0.005

4 11/10

/04 11/1/0

5

05 20/3/0

5 5/

Hình 3.2 Mối tương quan giữa hàm lượng độc tố DSP trong ngao nuôi Đồ Sơn và mật

độ nhóm sản sinh độc tố chi Dinophysis quan trắc năm 2004-2005

Hình 3.2 cho thấy mối tương quan khá chặt chẽ giữa hàm lượng độc tố DSP

trong ngao nuôi và mật độ chi Dinophysis tại Đồ Sơn Đỉnh của hàm lượng độc tố và

đỉnh của mật độ thường không trùng nhau, nhưng đỉnh mật độ Dinophysis luôn đi trước Trong giai đoạn từ tháng 5 đến tháng 10, mật độ chi này luôn thấp và hàm lượng

độc tố DSP cũng thấp, giai đoạn từ tháng 10 năm 2004 đến tháng 4 năm 2005, mật độ dao động mạnh hơn đạt đến 120 tb/L, tuy không cao nhưng hàm lượng động tố DSP cũng dao động trong khoảng thời gian này và hình thành các đỉnh độc tố lớn hơn khoảng thời gian trước

3.1.1 Biến động hàm lượng độc tố DSP trong vẹm xanh (Mytilus sp.) nuôi tại Cát

Bà – Hải Phòng

Biến động hàm lượng độc tố DSP trong vẹm xanh nuôi Cát Bà cũng được quan trắc với tần xuất 2 lần/tháng Kết quả thu được cho thấy Vẹm xanh nuôi tại Cát Bà có tích luỹ loại độc tố gấy tiêu chảy DSP trong mô nội tạng, nhưng cũng như ngao nuôi ở

Trang 12

04 9/11/

04 5/12/

04 12/1/

2005 5/2/05

10/3/

05 5/4/

loại độc tố này cho thấy ở Cát Bà các loài thuộc chi Prorocentrum thường ít bắt gặp, trừ

P micans, nhưng loài này chưa có nghiên cứu nào đề cập đến khả năng sản sinh độc tố

trừ khả năng dễ bùng phát mật độ trên diện rộng Còn chi Dinophysis, loài phân bố chủ yếu là loài D caudata và co tháng bắt gặp D rotundata, trong nghiên cứu định tính số

loài có độc tố bắt gặp nhiều hơn nhưng mật độ rất thấp không gặp trong các mẫu định lượng Tìm hiểu mối tương quan giữa hàm lượng độc tố DSP trong vẹm xanh và mật độ

chi Dinophysis trong vùng biển này được kết quả trong hình 3.4 Kết quả trên hình 3.4

cho thấy mối tương quan không chặt chẽ giữa hàm lượng độc tố và mật độ, chi

Dinophysis luôn có mật độ cao trong khoảng thời gian từ tháng 5 đến tháng 9, còn hàm

lượng độc tố lại tạo thành đỉnh cao nhất vào đợt quan trắc I của tháng 2 năm 2005 khi

mà mật độ của chi Dinophysis trong khoảng thời gian này rất thấp, có khi = 0 Để có

thể có những kết luận hay lời giải thích hợp lý rất cần quan trắc tiếp hàm lượng độc tố

Trang 13

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4

11/5/2

004 26/5/0

4 9/

04 21/6/0

4 9/

04 20/7/0

4

4 17/9/0

4 30/9/0

4 13/10

/04 21/10

/04 9/11/0

4 23/11

/04

4 20/12

/04 12/1/2

5 18/3/0

5 5/

05 28/4/0

5

Thời gian thu mẫu

0 50 100 150 200

250

Hình 3.4 Tương quan giữa hàm lượng độc tố DSP được tích luỹ trong mô nội tạng của

vẹm xanh với mật độ chi Dinophysis trong vùng biển Cát Bà (quan trắc 2004-2005)

3.1.2 Biến động hàm lượng độc tố DSP trong ngao (Meretrix sp.) nuôi tại Tiền Hải

– Thái Bình

Ngao nuôi tại Thái Bình được thu mẫu với tần xuất 1lần/tháng, kết quả phân tích hàm lượng độc tố DSP trong ngao nuôi tại Thái Bình cho thấy ngao có tích luỹ độc tố DSP trong mô nội tạng nhưng cũng như ngao Đồ Sơn và vẹm xanh nuôi ở Cát Bà hàm lượng độc tố DSP trong ngao Thái Bình rất thấp, biến động ít, dao động từ 0,002 đến 0,008 MU/g mô nội tạng

Trang 14

Độc tố DSP trong ngao nuôi tại Thái Bình cũng đã được nhóm tác giả Nguyễn Văn Nguyên và cs (2004) nghiên cứu bằng phương pháp MBA và HPLC, kết quả thu

được cho thấy hàm lượng độc tố DSP rất thấp và hầu như tại các tháng quan trắc kết quả thu được cho âm tính (dưới mức độ phát hiện của phương pháp) trong bảng 3.1

Bảng 3.1 Kết quả phân tích hàm lượng độc tố DSP trong ngao (Meretrix meretrix) nuôi

tại Thái Bình bằng phương pháp MBA và HPLC

Thời

eq/100g)

HPLC (ng/100g)

từ vài phần trăm ng đến vài chục g/g mô nội tạng của động vật thân mềm hai mảnh vỏ

So với giới hạn an toàn của độc tố này là 20 àg/100 thịt hoặc 0,5 MU/g mô nội tạng thì tất cả các mẫu nghiên cứu đều nằm trong phạm vi an toàn cho người tiêu dùng với mức độ cao

Mặt khác, theo nghiên cứu của tác giả Nguyễn Văn Nguyên (2004) tại vùng biển

Trang 15

DSP tích luỹ trong ngao nuôi tại Thái Bình, đỉnh độc tố được tích luỹ cao nhất vào tháng 7 năm 2004, tiếp theo là trong các tháng 10, 11 năm 2004

Nghiên cứu của tác giả Nguyễn Văn Nguyên và cs 2004 cũng cho thấy không

có mối quan hệ giữa hàm lượng độc tố với mật độ tảo chi Dinophysis trong khu vùng

nghiên cứu Tương tự như vậy, Tubaro và cs 1995 cũng không tìm thấy mối tương quan

giữa mật độ Dinophysis caudata và hàm lượng độc tố ghi nhận trong vẹm xanh ở vùng

biển Địa Trung Hải

3.1.3 Biến động hàm lượng độc tố DSP trong vẹm xanh (Mytilus sp.) nuôi tại Lăng

Trang 16

Mặt khác, các kết qủa nghiên cứu định tính và định lượng về mật độ của các loài

thuộc chi Dinophysis và Prorocentrum do nhóm tác giả Đại Học Huế thực hiện cho

thấy chi Prorocentrum thường xuyên gây mật độ cao và rất cao trong các đầm nuôi tôm

Còn tại trạm thu mẫu ngoài cửa đầm (điểm nuôi vẹm xanh) mật độ các nhóm tảo độc

hại đều thấp dưới 100tb/L trừ nhóm Pseudonitzschia đạt trung bình 170 tb/L

Chi Dinophysis xuất hiện rải rác ở cả 5 trạm khảo sát và có mật độ thấp nhất

trong các nhóm tảo gây hại Vì vậy không thể thấy được mối tương quan giữa hàm

lượng độc tố DSP tích luỹ trong vẹm xanh và mật độ chi Dinophysis trong vùng biển

Lăng Cô

3.3 So sánh khả năng tích luỹ độc tố DSP trong ngao và vẹm xanh nuôi tại các

vùng nghiên cứu

Các đối tượng động vật thân mềm hai mảnh vỏ ngao và vẹm xanh được nuôi ở các

vùng nuôi trên có khả năng tích luỹ độc tố DSP khác nhau, vì sự tích luỹ này phụ thuộc

vào đối tượng động vật thân mềm hai mảnh vỏ , vào thành phần và mật độ các nhóm

loài có khả năng sản sinh độc tố và vào các yếu tố môi trường tại các vùng nuôi So

sánh hàm lượng độc tố tích luỹ trong ngao và vẹm nuôi tại Đồ Sơn, Cát Bà (Hải Phòng),

Thái Bình và Huế ta có kết quả trong bảng 3.2 và các hình 3.7, 3.8

Bảng 3.2 So sánh hàm lượng độc tố DSP tích luỹ trong mô nội tạng ngao và vẹm xanh

trong 4 vùng nghiên cứu trên

Số liệu quan trắc 2004-2005 Hàm

Trang 17

0 0.002

Trang 18

có những thời điểm cao hơn ở trong ngao So sánh với ngao và vẹm nuôi tại Hải Phòng nhận thấy vẹm xanh nuôi tại Cát Bà có hàm lượng độc tố tích luỹ cao nhất (đạt 1,239

MU/g mô nội tạng) So sánh mật độ chi Dinophysis tại 4 vùng nuôi trên nhận thấy khu

vực Hải Phòng, chi này gần như xuất hiện quanh năm, nhưng mật độ không cao đạt 120tb/L tại Đồ Sơn và khoảng 200 tb/L tại vùng biển Cát Bà Trong khi đó, chi

Dinophysis xuất hiện ở Thái Bình và Lăng Cô ít hơn thời gian trong năm nhưng có

tháng mật độ lại đạt cao hơn rất nhiều Đồ Sơn và Hải Phòng, cụ thể ở Thái Bình trạm

đạt cao nhất 600 tb/L và Huế đạt trung bình 375 tb/L Để có thể hiểu được cơ chế tích luỹ độc tố trong sinh vật cần rất nhiêù nghiên cứu bổ xung về cơ chế tích luỹ và đào thải độc tố của từng loại sinh vật, các tác nhân của môi trường ảnh hưởng đến khả năng sản sinh độc tố của các nhóm loài tảo có độc tố, các tác nhân môi trường ảnh hưởng đến khả năng tích luỹ độc tố trong các đối tượng sinh vật dựa trên cơ sở sức chống chịu của

hệ thần kinh các sinh vật đối với độc tố và mật độ các loài tảo độc có mặt phù hợp với khả năng ăn lọc của chúng

3.4 So sánh hàm lượng độc tố và độ an toàn thực phẩm trong động vật thân mềm hai mảnh vỏ thuộc 4 vùng nuôi trên

Như chúng ta đã biết độc tố DSP gây ảnh hưởng đến hệ tiêu hoá, các nhóm độc

tố thuộc DSP kích thích trực tiếp đối với quá trình co thắt các cơ trơn của hệ tiêu hoá (Bialojan và Takai, 1988; Haystead và cs 1989) Chính vì vậy việc quan trắc loại độc tố này và mật độ các nhóm loài có khả năng sản sinh ra loại độc tố DSP đã được rất nhiều nước thực hiện

Thông thường chương trình quan trắc DSP được thực hiện vùng ven bờ Atlantic

từ những năm 1990 bằng phương pháp thử nghiệm trên chuột và HPLC (Yasumoto và

cs 1984) Nếu có kết quả dương tính trong thử chuột hoặc mật độ nhóm tế bào có khả năng sản sinh độc tố DSP được quan trắc cao trong mẫu thực vật phù du, lập tức được kiểm tra lại hàm lượng độc tố bằng phương pháp phân tích HPLC hoặc ELISA

Đan Mạch, giới hạn mật độ của các loài tảo độc hại được quy định trong bảng sau, giới hạn này được xây dựng dựa trên các thông tin từ các nguồn tài liệu lưu trữ cùng với các quy định cơ bản, giới hạn này có thể thay đổi tuỳ theo tình hình thực tế nếu cần thiết Trong suốt các năm quan trắc cho thấy thậm chí mật độ của các loài

Trang 19

Bảng 3.3 Một số giới hạn về mật độ của các loài tảo có khả năng sản sinh độc tố

của Đan Mạch

khu khai thác đóng cửa

Dưới đây là phương pháp phân tích và giới hạn về hàm lượng độc tố cho phép

trong khai thác và đóng cửa các khu nuôi trồng thuỷ sản của một số nước (nguồn của

Shumway và cs 1996)

Bảng 3.4 Phương pháp phân tích và giới hạn cho phép đối với độc tố DSP

DSP Nước

Giới hạn nồng độ tiêu chuẩn Phương pháp phân tích

Trang 20

Trong số những loài Dinophysis phân bố ở Việt Nam thì loài Dinophysis

caudata thường có mật độ cao hơn các loài khác trong chi và xuất hiện thường xuyên

nhất nên có thể coi là nguồn sản sinh độc tố chủ yếu trong các khu vực nghiên cứu Kết quả nghiên cứu cho thấy loài này có mặt khá thường xuyên, nhưng mật độ trong thời gian nghiên cứu luôn thấp

Ngược lại khi so sánh giới hạn cho phép trong sử dụng và khai thác các đối tượng động vật thân mềm hai mảnh vỏ của các nước trong cộng đồng châu Âu và một

số nước châu á cho thấy với mức quy định giới hạn hàm lượng độc tố DSP là 20àg/100g thịt tương đương với 0,05MU/g thịt và giới hạn 0,5 MU/g mô nội tạng của Nhật bản thì nhìn chung các đối tượng ngao và vẹm xanh nuôi tại các vùng nghiên cứu đều nằm trong giới hạn an toàn cho phép sử dụng làm thực phẩm cho người tiêu dùng nhiều lần, trừ vẹm xanh nuôi ở Cát Bà (Hải Phòng) Vẹm xanh nuôi ở Cát Bà có tích luỹ độc tố DSP tại các tháng thấp nhưng trong đợt quan trắc cuối tháng 1 và đợt đầu của tháng 2 năm 2005, hàm lượng độc tố DSP đã vượt quá giới hạn cho phép sử dụng hơn 2 lần Tuy nhiên đây không phải là mùa thu hoạch các đối tượng này cũng như không phải mùa du lịch vì vậy đã không có ghi nhận nào về trường hợp xảy ra ngộ độc độc tố này tại Cát

Bà trong khoảng thời gian vẹm xanh tích luỹ hàm lượng độc tố cao nhất trong năm quan trắc

Mặt khác,khu vực thường xuyên xảy ra ngộ độc DSP trên thế giới như ở Địa

Trung Hải, mật độ của loài Dinophysis caudata chỉ dao động từ 300 tb/L (Senicheva, 1994) đến 1000 tb/L (Sidara, 1995) Mật độ của các loài Dinophysis caudata trong các

vùng nghiên cứu thấp nhưng có thời điểm cao hơn cả vùng Địa Trung Hải, tuy nhiên không tìm thấy mối tương quan chặt chẽ giữa mật độ của chi này và hàm lượng độc tố tích luỹ trong ngao và vẹm xanh

Trong một vài nghiên cứu trước đây đối với loài ngao thu tại vùng biển Hạ Long, Cát Bà đã bắt gặp hàm lượng độc tố DSP khá cao (Theo Sato S., tài liệu chứ công bố)

hoặc đối với Meretrix lyrata tại Cần Giờ cũng đã có những thời điểm tích luỹ độc tố

DSP cao hơn gấp nhiều lần ngưỡng an toàn tiêu dùng (theo NAFIQUACENS, thông tin nội bộ) [Nguyễn Văn Nguyên, 2004] Vì vậy rất cần có hệ thống quan trắc mật độ của nhóm loài có khả năng sản sinh độc tố này và hàm lượng độc tố được tích luỹ trong các

đối tượng động vật thân mềm hai mảnh vỏ có giá trị kinh tế để cảnh báo nguy cơ bùng

Trang 21

Kết luận và kiến nghị

Kết luận

Đây là những kết quả nghiên cứu đầu tiên về khả năng tích luỹ độc tố DSP trong ngao và vẹm xanh nuôi ở khu vực Hải Phòng và Huế trừ ngao nuôi Thái Bình đã đ−ợc công bố bởi nhóm tác giả Nguyễn Văn Nguyên (2004) Kết quả nghiên cứu đ−ợc cho thấy:

- Các nghiên cứu đã phát hiện trong ngao và vẹm xanh nuôi tại 4 vùng nghiên cứu có tích luỹ độc tố gây tiêu chảy DSP

+ Đối với Ngao nuôi ở vùng biển Đồ Sơn, hàm l−ợng rất thấp, dao động từ 0 đến vài phần nghìn MU/g mô nội tạng (cao nhất đạt 0,021 MU/g)

+ Đối với vẹm xanh nuôi ở Cát Bà, cũng nh− ngao nuôi ở Đồ Sơn, độc tố này

đ−ợc tích luỹ rất thấp, phần lớn các tháng có hàm l−ợng độc tố không đáng kể Nh−ng biến động hàm l−ợng độc tố này ở Cát Bà lại xảy ra rất mạnh, dao động từ 0,003 đến 1,

239 MU/g mô nội tạng (đợt quan trắc I của tháng 2 năm 2005)

+ Đối với Ngao nuôi ở Thái Bình, hàm l−ợng độc tố DSP cũng rất thấp, biến

động ít, dao động từ 0,002 đến 0,008 MU/g mô nội tạng (tháng 7 năm 2004)

+ Hàm l−ợng độc tố trong vẹm xanh nuôi ở Lăng Cô có hàm l−ợng rất thấp, biến

động không mạnh, dao động trong khoảng 0,002-0,01 MU/g mô nội tạng (tháng 6 và tháng 11 năm 2004)

- So sánh các kết quả nghiên cứu về khả năng tích luỹ độc tố trong ngao và vẹm xanh nuôi tại 4 vùng nghiên cứu, nhận thấy:

+ Độc tố DSP tích luỹ trong vẹm và ngao đều có biến động không mạnh, hàm l−ợng thấp, độc tố DSP tích luỹ ở trong vẹm có những thời điểm cao hơn ở trong ngao, nh−ng nhìn chung đều dao động trong khoảng từ vài phần nghìn đến phần chục MU/g mô nội tạng, trừ vẹm xanh nuôi ở Cát Bà có hàm l−ợng độc tố tích luỹ cao nhất (đạt 1,239 MU/g mô nội tạng)

+ So sánh mật độ chi Dinophysis tại 4 vùng nuôi trên nhận thấy khu vực Hải

Phòng, chi này gần nh− xuất hiện quanh năm, nh−ng mật độ không cao đạt 120tb/L tại

Đồ Sơn và khoảng 200 tb/L tại vùng biển Cát Bà Trong khi đó, chi Dinophysis xuất

Trang 22

- So sánh giới hạn cho phép trong sử dụng và khai thác các đối tượng động vật thân mềm hai mảnh vỏ của các nước trong cộng đồng châu Âu và một số nước châu á cho thấy với mức quy định giới hạn hàm lượng độc tố DSP là 20àg/100g thịt tương

đương với 0,05MU/g thịt và giới hạn 0,5 MU/g mô nội tạng của Nhật bản thì nhìn chung các đối tượng ngao và vẹm xanh nuôi tại các vùng nghiên cứu đều nằm trong giới hạn an toàn cho phép sử dụng làm thực phẩm cho người tiêu dùng nhiều lần, trừ vẹm xanh nuôi ở Cát Bà (Hải Phòng) Trong đợt quan trắc cuối tháng 1 và đợt đầu của tháng 2 năm 2005, hàm lượng độc tố DSP trong vẹm xanh Cát Bà đã vượt quá giới hạn cho phép sử dụng hơn 2 lần Tuy nhiên đây không phải là mùa thu hoạch các đối tượng này cũng như không phải mùa du lịch vì vậy đã không có ghi nhận nào về trường hợp xảy ra ngộ độc độc tố này tại Cát Bà trong khoảng thời gian vẹm xanh tích luỹ hàm lượng độc tố cao nhất trong năm quan trắc

Kiến nghị

Để có thể hiểu được cơ chế tích luỹ độc tố trong sinh vật cần rất nhiêù nghiên cứu bổ xung về cơ chế tích luỹ và đào thải độc tố của từng loại sinh vật, các tác nhân của môi trường ảnh hưởng đến khả năng sản sinh độc tố của các nhóm loài tảo có độc

tố, các tác nhân môi trường ảnh hưởng đến khả năng tích luỹ độc tố trong các đối tượng sinh vật dựa trên cơ sở sức chống chịu của hệ thần kinh các sinh vật đối với độc tố và mật độ các loài tảo độc có mặt phù hợp với khả năng ăn lọc của chúng

Trang 23

Tài liệu tham khảo

Nguyễn Văn Nguyên và cs, 2004 Điều tra nghiên cứu tảo độc hại tại ba vùng nuôi

ngao tập trung tại Thái Bình, Nam Định và Thanh Hoá Báo cáo đề tài cấp Bộ Thuỷ sản, Hải Phòng 2003, 97 trang

Andersen P., 1996 Design and Implementation of some Harmful Algal Monitoring

Systems IOC Technical Series No 44, UNESCO

Chu Van Thuoc, Tran Van Dien (2003), An overview of current activities relating to

phytoplankton monitoring in coastal waters of North Vietnam In: Furuya K et

al (2003), Workshop on Red Tide Monitoring in Asian Coastal Waters, March 10-12, 2003 at the University of Tokyo

Fleming, L.E., J.A Bean & D.G Baden 1995 Epidemiology and public health Pp

475-487 - In G.M Hallegraeff, D.M Anderson, & A.D Cembella (Eds.)

Manual on Harmful Marine Microalgae: IOC Manuals and Guides No 33

UNESCO

Hallegraeff G.M., Anderson D M and Cembella A.D (Edi), 2004 Manual on Harmful

Marine Microalgae UNESCO Publishing 793 pp

Huyen N.T.M., Thuoc C.V., Ogata T., Sato S., Takata Y., Kodama M and Fukuyo Y.,

2006 Seasonal variation of paralytic and amnesic shellfish toxicities in bivalves and microalgae in Haiphong area, Vietnam In Coastal Marine Science 30(1): 000-000, 2006

Larsen J and N.L Nguyen (editors) 2004 Potentially toxic microalgae of Vietnamese

waters In: Opera Botanica 140 Copenhagen 2004

Lee, J.S., M Murata & T Yasumoto 1989 Analytical methods for determination of

diarrhetic shellfish toxins - Mycotoxins and phycotoxins'88 (Eds Natori,

S.Hashimoto, K.and Ueno, Y.), 327-334

Murata, M., M Kumagai, J.S Lee & T.Yasumoto 1987 Isolation and structure of

yessotoxin, a novel polyether compound implicated in diarrhetic shellfish

poisoning - Tetrahedron Lett 28: 5869-5872

Shimizu Y., Gupta S., Masuda K., Maranda L., Walker C.K and Wang R., 1989

Trang 24

Shumway, S.E., H.P.von Egmond, J.W.Hurst, & L.L.Bean (1995) Management of

shellfish resources In G.M Hallegraeff, D.M Anderson, & A.D Cembella

(Eds.), Manual on Harmful Marine Microalgae (pp 433-463) UNESCO

Sournia A (EDS), 1978 Phytoplankton Manual UNESCO

Usup G., Leaw C.P., Lim P.T, and Ahmad A., 2002 Probable toxin producer

responsible for the first occurrence of paralytic shellfish poisoning on the east coast of Peninsula Malaysia Malays Appl Biol 31(2): 29-35

Yasumoto, T., M Murata, Y Oshima & M Sano 1985 Diarrhetic shellfish toxins -

Tetrahedron 41: 1019-1025

Trang 25

Viện Tài nguyên và Môi trường Biển

Đề tài KC-09-19

-

Biểu kết quả phân tích và tính toán hàm lượng độc tố tảo

trong động vật thân mềm hai mảnh vỏ

Loại độc tố: DSP (okadaic acid)

Loài động vật hai mảnh vỏ dùng cho phân tích: Ngao (Meretrix meretrix)

Nội quan dùng cho phân tích: Gan + tuỵ

Địa điểm thu mẫu: Đồ Sơn

Thời gian thu mẫu: 10-5-2004

Khối lượng mẫu hai mảnh vỏ đã thu: 2kg

Trọng lượng mẫu nội tạng sau xử lý: 20g

Tỷ lệ pha loãng của mẫu(g/ml): 1/2

1 1,221

Trang 26

Đề tài KC-09-19

-

Thời gian thu mẫu: 25/5/2004

Tỷ lệ pha loãng của mẫu(g/ml): 1:2

1 0,859

Trang 27

Đề tài KC-09-19

-

1 0,859

Trang 28

Đề tài KC-09-19

-

1 1,461

Trang 29

Đề tài KC-09-19

-

1 1,348

Trang 30

Đề tài KC-09-19

-

1 1,412

Trang 31

Đề tài KC-09-19

-

1 1,326

Trang 32

Đề tài KC-09-19

-

1 1,423

Trang 33

Đề tài KC-09-19

-

1 1,08

Trang 34

Đề tài KC-09-19

-

1 1,055

Trang 35

Đề tài KC-09-19

-

1 1,094

Trang 36

Đề tài KC-09-19

-

1 1,365

Trang 37

Đề tài KC-09-19

-

1 1,385

Trang 38

Đề tài KC-09-19

-

1 1,243

Trang 39

Đề tài KC-09-19

-

1 1,379

Trang 40

Đề tài KC-09-19

-

1 1,205

1,215 0,024 0,000 0,00

Định dạng
Số trang	115
Dung lượng	594,98 KB