Viện khoa học công nghệ việt nam Viện tài nguyên môi trờng biển 0o0 Đề tài cấp nhà nớc kc-09-19 Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây Chủ nhiệm đề tài: TS Chu Văn Thuộc Báo cáo chuyên đề ¶nh h−ëng mét sè u tè m«i tr−êng tíi sù phát triển số loài tảo giáp độc hại điều kiện phòng thí nghiệm Ngời thực hiện: Phạm Thế Th, Nguyễn Thị Minh Huyền, Trần Mạnh Hà Nguyễn Thị Thu Phòng Sinh vật phù du Vi sinh vật Biển Viện Tài nguyên Môi trờng Biển Tel (031) 565 495 Fax (031) 761 521 e-mail: Planktondept@imer.ac.vn 6132-24 02/10/2006 Hải Phòng, tháng 4/2006 Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chóng g©y ra” Môc Lôc Môc Lôc i Danh mục chữ viết t¾t ii i Mở Đầu II Phơng pháp nghiên cứu 2.1 Đối tợng nghiên cứu .2 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phơng pháp thu mẫu tảo độc hại (tảo sống) trờng 2.2.2 Phơng pháp phân lập, làm giữ giống tảo điều kiện phòng thí nghiệm 2.2.2.1 Phơng pháp phân lập làm .2 2.2.2.2 Phơng pháp giữ giống tảo độc hại phòng thí nghiệm .3 2.2.3 Phơng pháp thiết kế thí nghiệm 2.2.3.1 ThÝ nghiƯm ¶nh h−ëng cờng độ ánh sáng tới phát triển t¶o 2.2.3.2 ThÝ nghiƯm ¶nh h−ëng cđa độ mặn tới phát triển tảo 2.2.3.3 Thí nghiệm ảnh hởng nhiệt độ tới phát triĨn cđa t¶o .4 2.2.3.4 ThÝ nghiƯm ¶nh h−ëng cđa mi dinh d−ìng tíi sù ph¸t triĨn cđa t¶o 2.2.3 Phơng pháp xử lý sè liÖu III Kết thảo luận 3.1 Ph©n lập, nuôi thành công số loài tảo phát triển vi tảo 3.1.1 Phân lập nuôi thành công số loài tảo .6 3.1.2 Sự phát triển tảo 3.2 ảnh hởng cờng độ ánh sáng tới phát triển tảo .7 3.2.1 Chi t¶o Alexandrium 3.2.1.1 Loài tảo Alexandrium affine .7 3.2.1.2 Loài tảo Alexandrium minutum 3.2.2 Chi t¶o Prorocentrum 10 3.2.2.1 Loài tảo Proroxentrum cf mexicanum 10 3.3 ảnh hởng độ mặn tới phát triển t¶o 11 3.3.1 Chi t¶o Alexandrium 11 3.3.1.1 Loài tảo Alexandrium affine .11 ViÖn Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây 3.3.1.2 Loài tảo Alexandrium minutum .13 3.3.1.3 Loài tảo Alexandrium tamarense .14 3.3.2 Chi t¶o Prorocentrum 15 3.3.2.1 Loài tảo Prorocentrum cf mexicanum 15 3.3.2.2 Loài tảo Prorocentrum micans 16 3.4 ảnh hởng nhiệt độ tới phát triển cđa t¶o .18 3.4.1 Chi t¶o Alexandrium 18 3.4.1.1 Loài tảo Alexandrium minutum 18 3.4.1.2 Loài tảo Alexandrium affine 19 3.4.2 Chi t¶o Prorocentrum 21 3.4.2.1 Loài tảo Prorocentrum cf mexicanum 21 3.4.2.2 Loài tảo Prorocentrum micans 22 3.5 ảnh hởng nồng độ muối dinh dỡng tới phát triển tảo 24 3.5.1 ¶nh h−ëng cđa mi nitrat - NO3- tới phát triển tảo 25 3.5.1.1 Loài tảo Alexandrium minutum 25 3.5.1.2 Loài tảo Prorocentrum cf mexicanum .29 3.5.2 ¶nh h−ëng cđa mi phèt ph¸t - PO4-3 tíi sù ph¸t triĨn tảo 34 3.5.2.1 Loài tảo Alexandrium minutum 34 3.5.2.2 Loài tảo Prorocentrum cf mexicanum 38 3.6 Vài nhận định khả thúc đẩy bùng phát mật độ tảo sè yÕu tè m«i tr−êng chÝnh 42 IV KÕt luËn kiến nghị 45 4.1 KÕt luËn .45 KiÕn nghÞ .45 Tài liệu tham khảo 47 5.1 Tµi liƯu tiÕng ViƯt .47 5.2 Tµi liƯu tiÕng Anh: .48 Phô Lôc 50 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây Danh sách chữ viết tắt ADN : Axit dinucleic CĐAS : Cờng độ ánh sáng TDPCTB: Tốc độ phân chia tế bào ANOVA : Phân tÝch ph−¬ng sai (Analysis of Variance) TN ThÝ nghiƯm : _ Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chóng g©y ra” I Mở đầu Trong thuỷ vực có nhiều loài tảo có khả sản sinh độc tố gây chứng bệnh thần kinh tiêu hoá ngời Nhiều loài tảo khác không chứa độc tố nhng bùng phát số lợng cá thể lại gây hại tới sinh vật khác hệ sinh thái Những loài tảo mang hai đặc điểm đợc gọi tảo độc hại Sự nở hoa tảo độc hại (Thuỷ triều đỏ) tợng tự nhiên với mật độ lên tới hàng triệu tế bào/lít đà gây nhiều thiệt hại kinh tế, sức khoẻ ngời ảnh hởng mạnh mẽ đến môi trờng sinh thái Đặc biệt xuất chúng ngày gia tăng tần số xuất phân bố địa lý Trong tổng số khoảng 5000 loài thực vật phù du biển đà đợc phát hiện, có khoảng 300 loài có khả gây thuỷ triều đỏ [Souria, 1995], khoảng 1/4 số có khả sản sinh độc tố mối đe doạ, chí tàn phá khu hệ động, thực vật bao gồm thiệt hại ngời Khi nở hoa chúng làm cạn kiệt ôxy làm tăng hàm lợng amoniac thuỷ vực, gây tắc nghẽn phá huỷ mang cá Hàng năm giới có khoảng 2000 ngời bị ngộ độc (số ngời chết chiếm 15%) ăn phải động vật nhuyễn thể, cá đà nhiễm độc tố tảo [Hallegraeff et al.1995] Trong năm từ 1987 đến 1991, vùng biển Seto Inland Kyu Syu (Nhật Bản) đà có hàng ngàn trờng hợp bùng phát tảo độc hại với thiệt hại lên tới vài tỷ yên [Andersen 1996], Gần đây, vào tháng 3; năm 1998, bùng nổ tảo Gyrodinium, Alexandrium Cochlodinium vùng biển Hồng Kông đà ảnh hởng nghiêm trọng tới 2/3 nghề nuôi cá lồng khu vực gây thiệt hại khoảng 42 triệu đô la Mỹ Cũng nh nớc giới, Việt Nam đà bị thiệt hại nặng nề tợng thuỷ triều đỏ gây nên, ví dụ nh vịnh Văn Phong - Bến Gỏi bùng phát tảo Noctiluca vào tháng 5;6 năm 1995 đà làm cho trại nuôi tôm hùm khu vực bị thiệt hại hàng tỷ đồng [Nguyễn Ngọc Lâm cộng sự, 1996] Trong tháng năm 2002, tảo Phaeocystis gây tợng thuỷ triều đỏ trải dài khoảng 30 km biển Bình Thuận đà huỷ diệt hầu hết loài thuỷ sinh vật vùng bị tác động [Báo tuổi trẻ số 31-2002/ngày 11-8-2002] Sự gia tăng tợng thuỷ triều đỏ vùng biển thuỷ vực khác đà gây nhiều thiệt hại kinh tế, ngời môi trờng sinh thái Từ đặt nhiệm vụ cấp bách cho nhà khoa học tìm hiểu chế bùng phát chúng nhằm đa giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu ảnh hởng xấu tảo độc hại gây tiến tới kiểm soát đợc bùng phát chúng Để góp phần tìm hiểu chế bùng phát tảo độc hại đà thực nội dung nghiên cứu với tiêu đề ảnh hởng số yếu tố môi trờng tới phát triển số loài tảo giáp độc hại điều kiện phòng thí nghiÖm” _ Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây II ®èi tợng Phơng pháp nghiên cứu 2.1 Đối tợng nghiên cứu Đối tợng nghiên cứu loài tảo tiềm tàng độc hại thuộc chi Alexandrium, Prorocentrum đà đợc phân lập từ mẫu thu vùng nuôi trồng thuỷ sản ven biển phía Bắc Việt Nam (Đồ Sơn Cát Bà) năm 2004 2005, loài tảo đợc phân loại tới loài phơng pháp hình thái kinh hiển vi, hiển vi điện tử chuyên gia Nhật Bản đợc kiểm định lại phơng pháp sinh học phân tử 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phơng pháp thu mẫu tảo độc hại (tảo sống) trờng - Mẫu tảo sống ®−ỵc thu b»ng l−íi vít thùc vËt phï du víi mắt lới 20àm, sau bảo quản mẫu điều kiện mát (15 - 22oC đá lạnh) đa phòng thí nghiệm để tiếp tục xử lý - Thu mẫu tảo bám đáy để nuôi cách: ngắt nhẹ tản rong biển cành san hô chÕt cho vµo lä, bỉ sung n−íc biĨn läc, sau giữ điều kiện mát đá lạnh đa phòng thí nghiệm Trớc phân lập, để mẫu tảo sống buồng nuôi có điều kiện môi trờng tơng đối ổn định nhiệt độ, cờng độ ánh sáng 2.2.2 Phơng pháp phân lập, làm giữ giống tảo điều kiện phòng thí nghiệm 2.2.2.1 Phơng pháp phân lập làm - Tiến hành phân lập, nhặt tế bào pipet pasteur đà qua xử lý đèn cồn, phân lập mẫu tảo kính hiển vi đảo ngợc Tiến hành rửa tế bào đà phân lập đợc qua nớc biển lọc nhiều lần Sau chuyển chúng vào môi trờng nuôi Tiếp theo, cấy tế bào vào "giếng" "vỉ nuôi" nuôi điều kiện môi trờng ổn định buồng nuôi Khi số lợng tế bào tảo giếng nuôi đà tăng lên, chuyển sang ống nghiệm tích lớn hơn, tảo phân lập cha đợc phải tiến hành phân lập lại Tiếp tục chuyển mẫu nuôi sang bình tam giác tích lớn (100; 250 ml) mật độ tảo ống nghiệm đà phát triển cao Phân lập tảo đáy: số loài bơi linh động nh Coolia monotis, Prorocentrum cf mexicanum, Amphidinium carterae tiến hành phân lập nh tảo phù du Đối với loài tảo thờng bám chặt vào vật thể đáy nh Prorocentrum lima, P emarginatum, cách phân lập nh sau: dựa vào tập tính tảo đáy thờng _ ViÖn Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây lên bề mặt vào ban đêm, gặp vật chắn bám vào, tiến hành đặt lamen lên bề mặt đĩa petri đựng mẫu tảo sống để qua đêm Sau cho mảnh lamen vào giếng vỉ nuôi, ống nghiệm đà có sẵn môi trờng nuôi Sau khoảng tuần, tiến hành kiểm tra dới kính hiển vi chọn giếng giống để làm thí nghiệm Nếu cha có giống thuần, phải tiến hành lặp lại công việc Kiểm tra sinh trởng phát triển mẫu nuôi hàng ngày cách đếm số lợng tế bào dới kính hiển vi đảo ngợc 2.2.2.2 Phơng pháp giữ giống tảo độc hại phòng thí nghiệm Sau đà có nguồn giống tảo qua phân lập việc khó khăn quan trọng làm giầu giữ giống Việc giữ giống tảo thờng phải kết hợp đồng thời nhiều yếu tố môi trờng nh: - Điều kiện vô trùng: điều quan trọng trớc tiên tránh bị lây nhiễm loài khác Các dụng cụ nu«i (thủ tinh, nhùa), m«i tr−êng dinh d−ìng, n−íc biĨn phải đợc khử trùng Trong số trờng hợp để tránh bị kết tủa nớc biển khử trùng nồi áp suất sử dụng phơng pháp khử trùng qua màng lọc - Chiếu sáng nhiệt độ: để trì giữ giống tảo, thông thờng ta chọn phơng án dùng ánh sáng yếu nhiệt độ 15-200C để hạn chế sinh trởng phát triển chúng Buồng nuôi phải có trang thiết bị điều khiển trì đợc ánh sáng nhiệt ®é - CÊy trun: tÇn sè cÊy trun phơ thc vào điều kiện giữ giống tuỳ thuộc loài tảo Các dạng tảo đơn bào tảo dạng sợi không chuyển động đợc cấy truyền với tần số tha so với loài có roi Theo dõi giống thờng xuyên để cấy truyền vào thời gian phù hợp - Môi trờng dinh dỡng: có nhiều loại môi trờng dinh dỡng dùng cho nuôi tảo điều kiện phòng thí nghiệm Nhng để đảm bảo tốt cho sinh trởng tảo cần lu ý số điểm: + Nồng độ mặn (NaCl), thờng phụ thuộc vào nguồn gốc sinh thái thể tảo + Nguồn nitơ, cacbon, phốt phát, số ion khác + pH yếu tố vi lợng khác nh vitamin 2.2.3 Phơng pháp thiết kế thí nghiệm 2.2.3.1 Thí nghiệm ảnh hởng cờng độ ánh sáng tới phát triển tảo Thí nghiệm đợc tiến hành mức cờng độ ánh sáng khác ( 500lux, 1000lux, 2000lux 3000lux), yếu tố môi trờng khác đợc trì ổn định nh sau: Chu kỳ sáng : tối 14h : 10h Nhiệt độ ~240C; S = 24 tuỳ loài; pH~7,8 _ ViƯn Tµi nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây Tảo đợc nuôi môi trờng IMK Tại cờng độ ánh sáng, thí nghiệm đợc lặp lại lÇn víi lä gièng vỊ thĨ tÝch mật độ tế bào giống Hàng ngày kiểm tra phát triển tảo cách đếm số lợng tế bào dới kính hiển vi buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml 2.2.3.2 Thí nghiệm ảnh hởng độ mặn tới phát triển tảo Thí nghiệm đợc tiến hành độ mặn khác (S1=5; S2=10; S3= 15 ; S4=20; S5=25; S6=30 S7=35), cờng độ ánh sáng 3000lux yếu tố môi trờng khác đợc trì ổn định nh sau: Chu kỳ sáng : tối 14h : 10h Nhiệt độ ~240C; pH~7,8 Tảo đợc nuôi môi trờng IMK Tại độ muối, thí nghiệm đợc lặp lại lần với lọ giống thể tích mật độ tế bào giống Mật độ tế bào tảo đợc kiểm tra ngày lần cách đếm số lợng tế bào dới kính hiển vi buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml 2.2.3.3 Thí nghiệm ảnh hởng nhiệt độ tới phát triển tảo Thí nghiệm đợc tiến hành mức nhiệt độ khác (35; 30; 25 200C), yếu tố môi trờng khác đợc trì ổn định nh sau: Chu kỳ sáng : tối 14h : 10h; cờng độ ánh sáng 3000Lux; S = 24 tuỳ loài; pH~7.8 Tảo đợc nuôi môi trờng IMK Tại mức nhiệt độ, thí nghiệm đợc lặp lại lần với lọ giống thể tích mật độ tế bào giống Kiểm tra phát triển tảo cách đếm số lợng tế bào tảo hai ngày lần dới kính hiển vi buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml 2.2.3.4 ThÝ nghiƯm ¶nh h−ëng cđa mi dinh d−ìng tới phát triển tảo Mỗi loại muối dinh dỡng đợc thí nghiệm hai nồng độ khác nhau: nồng độ thứ (N1) thấp nồng độ môi trờng chuẩn (IMK) lần, nồng độ thứ hai (N3) cao nồng độ môi trờng lần nồng độ môi trờng chuẩn (N2) nồng độ đối chứng Các yếu tố môi trờng khác đợc giữ ổn định: Cờng độ ánh sáng 3000Lux; Chu kỳ sáng : tối 14h : 10h Nhiệt độ ~240C; S = 24 tuỳ loài; pH~7,8 Tại nồng độ mặn dinh dỡng, thí nghiệm đợc lặp lại lần với lọ giống thể tích mật độ tế bào giống Trớc đặt thí nghiệm nồng độ muối dinh dỡng (NO3-; PO4-3; NO22-; H4+; SiO32-) đợc đo mẫu nớc đợc lấy lần giai đoạn: đầu pha log, cuối pha log cuối pha cân để kiểm tra nồng độ muối dinh dỡng (NO3-; PO4-3) Kiểm tra phát triển tảo cách đếm số lợng tế bào tảo hai ngày lần dới kính hiển vi buồng đếm Sedgewick-Rafter thể tích 1ml 2.4 Phơng pháp xử lý số liệu - Số liệu đợc cập nhật, tính toán vẽ đồ thị phần mềm EXCEL _ Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây - KÕt thí nghiệm đợc kiểm tra độ tin cậy phơng pháp phân tích ANOVA yếu tố dựa chơng trình thống kê phần mềm EXCEL (tools-Analysis-ANOVA one way): Giả thiết H0 yếu tố thí nghiệm ảnh hởng thật với phát triển tảo Nếu kết thí nghiệm có Ftính toán > Ftra bảng giả thiết H0 bị bác bỏ hay u tè thÝ nghiƯm cã ¶nh h−ëng thËt sù tíi phát triển loài tảo thí nghiệm với độ tin cậy 95% ( = 0,05) Nếu kết thí nghiệm có Ftính toán < Ftra bảng giả thiết H0 đợc chấp nhận hay kết khác thí nghiệm ngẫu nhiên - Hệ số tơng quan đợc tính phơng pháp phân tích tơng quan hồi quy tuyến tính lớp chơng trình thống kê phần mềm EXCEL (tools-Analysis-regression) - Tốc độ phân chia tế bào đợc tính theo công thức: T = (Mn+1 – Mn) / Mn Trong ®ã: T : tốc độ phân chia tế bào Mn : số lợng tế bào ngày đếm n Mn+1 : số lợng tế bào ngày đếm n+1 _ ViƯn Tµi nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây III Kết nghiên cứu thảo luận 3.1 Phân lập, nuôi thành công số loài tảo phát triển vi tảo 3.1.1 Phân lập nuôi thành công số loài tảo Cùng với trình thu mẫu tảo phù du đà đồng thời thu mẫu tảo sống hai trạm thu mẫu Đồ Sơn Cát Bà, sau 12 tháng thu mẫu phân lập loài tảo độc hại đà phân lập nuôi thành công 12 chủng tảo độc hại thuộc ngành tảo giáp Nuôi thu sinh khối để phục vụ cho mục đích phân tích độc tố nh làm nguyên liệu cho việc nghiên cứu kính hiển vi điện tử ph©n tÝch sinh häc ph©n tư Sau thùc hiƯn phân loại kính hiển vi huỳnh quang kiểm tra phơng pháp sinh học phân tử 12 chủng tảo đà đợc phân lập có loài tảo đà đợc khẳng định, là: Alexandrium minutum; Alexandrium affine; Alexandrium tamarense; Prorocentrum cf mexicanum vµ Prorocentrum micans Sau phân lập nuôi thành công loài tảo giáp đà tiến hành thí nghiệm ảnh hởng số yếu tố môi trờng tới phát triển loài, qua thời gian thực đề tài đà thu đợc số kết khả quan kết đợc trình bày phần sau báo cáo Tuy nhiên điều kiện thực thí nghiệm khoảng thời gian có hạn sở vật chất phòng thí nghiệm cha đầy đủ nên số thí nghiệm cha cho kết nh mong muốn 3.1.2 Sự phát triển tảo Sự sinh trởng phát triển vi tảo đà đợc đề cập nhiều tác giả khác nhau, Đặng Đình Kim (1999) , nhìn chung phát triển vi tảo đờng cong gồm giai đoạn hay pha nh hình Theo đờng cong sinh trởng (Hình 1) vi tảo kết thí nghiệm ta thấy: - Pha lag: tảo bắt đầu thích nghi với môi trờng nuôi, bắt đầu hấp thu chất dinh dỡng tiến hành phân cắt tế bào nhng với tốc độ chậm, môi trờng thay đổi qúa nhiều so với môi trờng sống cũ tảo thời gian giai đoạn dài, chí tảo chết - Pha log: quần thể tế bào tảo đà thích nghi với môi trờng nuôi, mật độ tăng nhanh với tốc độ theo hàm số mũ, kích thớc lớn tế bào lớn, sắc tố nhiều chuyển động mạnh, có loài biểu chuỗi tế bào dài, nhìn mắt thờng bên có xuất nhiều khí thành bình, tảo hấp thụ chất dinh dỡng mạnh, quang hợp xảy tốt phân chia tế bào mạnh, thời gian pha tốt để dùng làm giống cho thí nghiệm hay chuyển sang môi trờng nuôi míi _ Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây Nh− vËy, mi dinh d−ìng cã vai trß hÕt søc quan träng phát triển sinh vật nói chung tảo nói riêng Các muối dinh dỡng có vai trò cung cấp nguyên liệu cấu thành hợp chất thành phần cấu tạo tế bào tảo thông qua trình quang hợp muối dinh dỡng vừa yếu tố kích thích phát triển nhng nồng độ cao thấp lại trở thành yếu tố giới hạn phát triển tảo Phốt nguyên tố thành phần tảo có vai trò đa số trình sảy tế bào, đặc biệt trình truyền lợng tổng hợp axit nuclêic Mỗi loài tảo lại có ngỡng sinh thái riêng loại muối dinh dỡng từ kết thí nghiệm đà đạt đợc thấy rằng, phát triển loài tảo đà thí nghiệm có mối tơng quan chặt với nồng độ muối dinh dỡng có môi trờng, nồng độ muối dinh dỡng môi trờng cao quần thể có phát triển nhanh kích thớc quần thể đạt lớn Trong nồng độ loại muối dinh dỡng loài tảo Alexandrium minutum phát triển tốt nồng độ muối PO4-3 5,22 mg/l Loài tảo Prorocentrum cf mexicanum phát triển tốt nồng độ muối PO4-3 2,39 mg/l Kết phù hợp với nhận định tác giả Nguyễn Văn Nguyên loài tảo Alexandrium Prorocentrum có mối tơng quan chặt tới nồng độ muối dinh dỡng PO4-3 NO3- [Nguyễn Văn Nguyên, 2003] Mặt khác, thông qua hình 21a thấy kết phát triển quần thể tảo thí nghiệm nớc biển thấp rõ rƯt so víi c¸c thÝ nghiƯm kh¸c cã bỉ sung môi trờng nồng độ muối dinh dỡng PO4-3 có thay đổi, điều chứng tỏ phát triển tảo không phụ thuộc nhiều vào nồng độ muối PO4-3 mà phụ thuộc vào nhiều loại muối dinh dỡng khác nữa, ®ã chóng ta thÊy, cho dï t¹i nång ®é muối dinh dỡng PO4-3 khác thí nghiệm N2, N3 N4 nhng nhìn chung quần thể có phát triển tơng đối đồng phát triển mạnh quần thể nớc biển nhiều 3.6 Vài nhận định khả thúc đẩy bùng phát mật độ tảo số yếu tố môi trờng Từ kết thu đợc thấy rằng, phát triển loài tảo đà thí nghiệm có mối tơng quan tỷ lệ thuận với cờng độ ánh sáng, cờng độ ánh sáng tăng quần thể tế bào có phát triển tăng nhanh, pha lag pha log ngắn, kích thớc quần thể lớn, điều đợc minh chứng thông qua giá trị hệ số tơng quan lớn, hầu hết loài tảo thí nghiệm có hệ số tơng quan nằm khoảng 0,9 - Do đó, ánh sáng đóng vai trò quan trọng việc thúc đẩy bùng phát mật độ tảo mà yếu tố khác vào trạng thái ổn định, điều đợc thấy rõ thí nghiệm, tất yếu tố môi trờng đợc giữ ổn định cờng độ ánh sáng thay đổi, kết cờng độ _42 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây ¸nh sáng khác đà cho phát triển quần thể tảo khác kích thớc, tốc độ phân chia thời gian phát triển, thực tế cờng độ ánh sáng yếu tố làm phân hoá biến động số lợng loài nh mật độ theo chu kỳ ngày đêm, tuần trăng vµ theo mïa rÊt râ rƯt TiÕp theo lµ tíi yếu tố nhiệt độ, nh cờng độ ánh sáng nhiệt độ đóng vai trò quan trọng phát triển tảo nói chung loài tảo độc hại nói riêng, điều đợc khẳng định thông qua giá trị hệ số tơng quan lớn (0,9 ngoại trừ thí nghiệm loài tảo A affine) hay nói cách khác, tơng quan tuyến tính chặt, loài tảo đà thí nghiệm có phát triển tốt nhiệt độ 250C nhng nhiệt độ môi trờng nớc tăng lên 300C lại bắt đầu đóng vai trò giới hạn phát triển, điều thấy qua việc tính tính toán phơng trình hồi quy tuyến tính lớp thí nghiệm cho hệ số hồi quy âm hay nói cách khác mối tơng quan nghịch Do đó, yếu tố nhiệt độ vừa có vai trò thúc đẩy phát triển nhng yếu tố giới hạn phát triển vợt qua vùng tối thích loài Khi cờng độ ánh sáng nhiệt độ môi trờng nớc tối thích cho phát triển tảo yếu tố độ muối lại trở nên định cho bùng phát mật độ chúng, loài tảo đà đợc thí nghiệm có phát triển tốt độ muối tơng đối khác nhau, ta thấy ngỡng sinh thái loài tảo khác độ muối, độ muối thích nghi cho phát triển loài nhng lại ngỡng giới hạn với loài tảo khác Muối dinh dỡng đóng vai trò cung cấp nguồn nguyên liệu cho việc xây dựng, cấu trúc tế bào lợng cho hoạt động sống tế bào thông qua trình quang hợp Do muối dinh dỡng đóng vai trò quan trọng phát triển tảo nói chung tảo độc hại nói riêng, kết tính hệ số tơng quan hầu hết loài tảo đà thí nghiệm có tơng quan tuyến tính chặt với nồng độ muối dinh dỡng PO4-3 NO3- (0,9 < R < 1) XÐt tỉng qu¸t chung, sù ph¸t triĨn tảo chịu ảnh hởng đồng thời nhiều yếu tố khác nhau, không yếu tố môi trờng đơn nh nhiệt độ, ánh sáng, độ muối mà chịu ảnh hởng nhiều yếu tố hữu sinh khác nh mối quan hệ nội quần thể, mật độ giống ban đầu hay tình trạng sinh lý giống ngợc lại loài sinhvật nói chung tảo nói riêng lại có sinh thái riêng, điều kiện môi trờng tối u cho phát triển loài tảo nhng lại không tốt cho phát triển loài tảo khác nên nhận định nở hoa tảo tự nhiên nh sau: Khi thời tiết vào mùa ma, trời ma to làm rửa trôi lớp dinh dỡng bề mặt lục địa theo sông suối đổ biển làm cho hàm lợng muối dinh dỡng vùng ven bờ tăng lên, sau ma trời lại nắng to có nghĩa cờng độ ánh sáng cung cấp cho vực nớc tăng lên, đồng thời với việc trời nắng ấm sau ma nhiệt độ nớc tăng theo thời điểm có điều kiện thuận lợi cho loài tảo a với ®é muèi _43 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây vïng bùng phát mật độ Hay vào thời kỳ mùa đông nhiệt độ nớc tầng mặt thờng lạnh so với tầng đáy gradien nhiệt độ làm cho khối nớc ấm từ dới trồi lên bề mặt, nớc lạnh bề mặt chìm xuống dới, đồng thời với trình loại muối dinh dỡng từ đáy đợc sinh tợng phân huỷ hoá lý đợc đa lên bề mặt theo khối nớc hay điều kiện địa hình khu vực nh chế độ thuỷ lý thuỷ hoá đà làm cho khối nớc bị sáo trộn, kết trình làm cho hàm lợng dinh dỡng lớp nớc tầng mặt cao nhiệt độ ấm lên, tạo điều kiện thuận lợi cho bùng phát mật độ loài tảo khu vùc VËy, Sù në hoa cđa n−íc chÞu ảnh hởng mạnh mẽ điều kiện ngoại cảnh nh− c¸c u tè dinh d−ìng, tÝnh chÊt thủ lý – thủ ho¸ cịng nh− cÊu tróc vËt lý cđa cột nớc, điều kiện thời tiết nh nhiệt độ, ¸nh s¸ng, thêi gian chiÕu s¸ng, søc giã, m−a …Nh÷ng chế bên tế bào loài gây nở hoa đảm bảo cho khả phát triển chiếm u điều kiện stress môi trờng nh khả cố định Nitơ, tích luỹ dinh dỡng nội bào (P;N) Do hệ thống giám sát nhằm ngăn cản nở hoa tảo bảo vệ nguồn lợi thuỷ hải sản cần phải xem xét vận dụng mối liên quan tổng thể yếu tố sinh học, vật lý hoá học có lợi cho phát triển loài tảo độc hại _44 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây IV Kết luận kiến nghị 4.1 Kết luận Qua kết thí nghiệm đà đợc phân tích trên, đa số kết luận sau: Các yếu tố môi trờng đà thí nghiệm có ¶nh h−ëng thËt sù tíi sù ph¸t triĨn cđa c¸c loài tảo thí nghiệm có mối tơng quan tuyến tính tơng đối chặt đến chặt với phát triển loài tảo đà thí nghiệm Trong mức cờng độ ánh sáng đà thí nghiệm, loài tảo có phát triển tốt cờng ®é ¸nh s¸ng 3000Lux Qua ®é muèi kh¸c đà đợc thí nghiệm, loài tảo Alexandrium affine có phát triển tốt khoảng độ muối 15 - 30 nhng phát triển nhanh 20, loài Alexandrium minutum có phát triển tốt khoảng 10 - 25 nhng tốt 25, loài Proroxentrum cf mexicanum Proroxentrum micans cha đạt đợc kết rõ ràng Trong mức nhiệt độ đà thí nghiệm loài tảo Alexandrium minutum, Prorocentrum micans, Prorocentrum cf mexicanum có phát triển tốt nhiệt độ 200C nhng loài tảo Alexandrium affine phát triển tốt nhiệt độ 250C Có tơng quan thuận chặt phát triển loài tảo Alexandrium minutum tơng đối chặt loài Prorocentrum cf mexicanum với nồng độ muối dinh dỡng NO3- Quần thể tế bào tảo Alexandrium minutum phát triển tốt nồng độ muối NO3- 1,25 mg/l loài tảo Prorocentrum cf mexicanum nồng độ muối NO3- mg/l Có mối tơng quan thuận chặt phát triển loài tảo đà thí nghiệm với nồng độ muối dinh dỡng PO4-3 Quần thể tế bào tảo Alexandrium minutum phát triển tốt nồng độ muối PO4-3 5,22 mg/l loài tảo Prorocentrum cf mexicanum nồng độ 2,39 mg/l 4.2 kiến nghị Qua năm thực đề tài đà thu đợc số kết ban đầu, hoàn cảnh nghiên cứu sinh thái loài, tảo độc hại nói riêng nh tảo nói chung hớng nghiên cứu khó, tốn nhiều thời gian, công sức đòi hỏi nhiều trang thiết bị đắt tiền Tuy nhiên hớng nghiªn cøu mang nhiỊu ý nghÜa vỊ lý thut cịng nh ứng dụng thực tế, nên để phát triển hớng nghiên cứu nh để hoàn thiện mục tiêu nghiên cứu chế bùng phát mật độ tảo có số kiến nghị nh sau: _45 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng g©y ra” - - - - - Cần tiếp tục thực lặp lại thí nghiệm nh thí nghiệm ngỡng sinh thái rộng để có đợc kết luận xác mang nhiều ý nghĩa Thực thí nghiệm nghiên cứu đồng thời hay nhiều yếu tố môi trờng tác động lên phát triển tảo nhằm đánh giá đợc vai trò yếu tố môi trờng việc tác động tới phát triển tảo Kết hợp thí nghiệm điều kiện phòng thí nghiệm thí nghiệm tự nhiên để có so sánh khả ứng dụng kết nghiên cứu phòng thí nghiệm vào thực tế Nghiên cứu khả sản sinh độc tố loài tảo nuôi giai đoạn khác trình phát triển loài Tìm hiểu biến động hàm lợng loại độc tố tảo điều kiện môi trờng khác nhau, tìm hiểu khả hay chế sản sinh độc tố tảo Nghiên cứu chế gây hại loài tảo độc hại tới loài sinh vật khác nói chung ngời nói riêng nh tới môi trờng Nghiên cứu sinh lý tế bào tảo điều kiện phòng thí nghiệm khác Nghiên cứu phơng pháp kìm hÃm phát triển loài tảo độc hại nh bùng phát mật độ tảo điều kiện phòng thí nghiệm tự nhiên, đa giải pháp ngăn chặn bùng phát mật độ tảo Những loài tảo độc hại phổ biến cần đợc nghiên cứu _46 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng g©y ra” Tài liệu tham khảo 5.1 Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Văn Nguyên cộng sự, 2003 Điều tra nghiên cứu tảo độc hại ba vùng nuôi ngao tập trung Thái Bình, Nam Định Thanh Hóa Báo cáo tổng kết đề tài Viện nghiên cứu Hải Sản Đặng Đình Kim, 1998 Công nghệ sinh học Vi tảo Nhà xuất Nông nghiệp Chu Văn Mẫn, 2001 ứng dụng tin học sinh học Nhà xuất đại học quốc gia Hà Nội Chu văn Thuộc ctv, 1999 Nghiên cứu phần loài, phân bố tảo độc hại số yếu tố môi trờng liên quan tới tợng nở hoa số loài tảo vùng cửa sông, ven biển miền bắc Việt Nam Báo cáo tổng kết đề tài Phân viện Hải Dơng học Hải Phòng, Trung tâm Khoa học Tự nhiên Công nghệ Quốc gia Chu văn Thuộc, 2002 Nghiên cứu thành phần loài, phân bố thăm dò khả gây hại số loài tảo độc hại (Harmful algae) thuộc ngành tảo gi¸p (Dinophyta) ë vïng ven biĨn ViƯt Nam Ln ¸n Tiến sỹ sinh học Nguyễn Thị Minh Huyền ctv, 2003 Một số dẫn liệu ảnh hởng chất dinh dỡng mật độ tế bào quần xà thực vật phù du Vịnh Hạ Long Tuyển tập Tài nguyên Môi trờng biển, Tập X Trang 182-191 Nhà xuất khoa học kỹ thuật Trần Văn Tựa ctv, 2005 Một số kết nghiên cứu sinh học tảo độc biển điều kiện phòng thí nghiệm Báo cáo đề tài nhánh thuộc đề tài cấp nhà nớc KC 09 19 Viện Công nghệ môi trờng, Viện Khoa học Công nghệ Viêt Nam Vũ Dũng Đỗ Văn Khơng, 2001 Biến động sè u tè m«i tr−êng ao nu«i t«m só thay nớc khu vực Hải Phòng Tuyển tập công trình nghiên cứu nghề cá biển, tập II Trang 402-415 Nhà xuất Nông nghiệp Vũ Trung Tạng, 1994 Các hệ sinh thái cửa sông Việt Nam Nhà xuất khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Vũ trung Tạng, 2000 Cơ sở Sinh thái học Nhà xuất Giáo dục Vũ trung Tạng, 2004 Sinh học sinh thái học biển Nhà xuất đại học quốc gia Hµ Néi _47 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây 5.2 Tµi liƯu tiÕng Anh: Andersen, P., 1996 Design and implementation of some harmful algal monitoring systems Intergovernmental Oceanographic Commission Technical Series No 44 UNESCO Paris 102 pp Anderson, D M., P Andersen, M V Bricelj, J J Cullen, J E J Rensel, 2001 Monitoring and management strategies for harmful algal bloom in coastal waters APEC # 201-MR-01.1, Asia Pacific Economic Programs, Singapore, and Intergonvernmental Oceanography Commission Technical Serries No.59 Paris Boomnyapiwat S, 1999a Distribution, abundance and species composition of phytoplankton in the South China Sea, Area I: Gulf of Thailand and East coast of Peninsular Malaysia Pp 111-134, in: Proceedings of the first technical seminar on marine fisheries resources survey in the south china sea Area I: Gulf of Thailand and East coast of Peninsular Malaysia SEAFDEC, Thailand Dodgle, J.D., 1982 Marien dinoflagellates of the British Isles, Her Majesty’s Stationery Office, London Faust, M.A., J Larsen & ø.J.Moestrup, 1999 Potentially toxic phytoplankton: Genus Prorocentrum (Dinophyceae) Pp 1-23, in: Lindley, J.A (eds.) ICES identification leaflets for plankton Leaflet No.184 -International Council for the Exploitation of the Sea Fukuyo Y., Takano H., Chihara M and Matsuoka K., 1990 Red tide organisms in Japan- An illustrated taxonomic guide, Uchida Rokakuho, Tokyo, Japan Guanhong, H., H Weijian, F Gang, X Ning, C Jufang, J Tianjiu, X Longchu and L Yumin., 2002 Grey analysis of red tide produced by superior alga in Dapengwan Bay, South China Sea Shengtai Xuebao 22 (6): 822-827 Hak Gyoon Kim et al, 1996 Enviromental physiology of Alexandrium tamarense isolated from Chinhae Bay, the south sea of Korea Harmful and Toxic Algal Blooms, pp 57-60 Intergovermental Oceanographic commission of UNESCO Hallegraeff, G.M, D.M Anderson & A.D Cembella, 1995 Manual on harmful marine microalgae IOC Manuals and Guides No 33 UNESCO 1995 Iriarte, J.L & G A Fryxell, 1995 Micro-phytoplankton at the Equatorial Pacific (140 degree W) during the JGOFS EqPac Time Series studies: March to April and October 1992 DEEP-SEA RES 42 (2-3): 559-583 J Larsen & N.L.Nguyen, 2004 Potentially toxic microalgae of Vietnamese waters Opera Botanica 140 Copenhagen _48 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng g©y ra” Lu, D.D & Goebel, J., 2001 Five red tide species in genus Prorocentrum including the description of Prorocentrum donghaiense Lu sp nov from the East China Sea Chinese Journal of Oceanology and Limnology 19 (4): 337-344 (abstract) Lush G J and G.M Hallegraeff, 1996 High toxicity of the red tide Dinoflagellate Alexandrium minutum to the Brine shrimp Artemia salina Harmful and Toxic Algal Blooms, pp 389-392 Intergovermental Oceanographic commission of UNESCO Mingyuan, Z., L Ruixiang, M Xueyan and J Rubao, 1997 Harmful algal blooms in China Seas Haeyang Yon'gu, (Seoul) 19 (2): 173-184 Nguyen-Ngoc L, 2003 An autecological study of the potentially toxic dinoflagellate Alexandrium affine isolated from Vietnamese waters Harmful Algae, vol 3, pp 117-129 www.elsevier.com/locate/hal Rhodora, V A, Y Fukuyo, L Yap and H Takayama, 2002 First record of a Proroentrum minimum bloom coninciding a mass fish kill in Bolinao, Pangasinan, Northern Philippines Procedings of the X International Conference on Harmful Algae Florida, USA, October 2002 (abstract) Taylor, F J R, 1976 Dinoflagellates from the International Indian Ocean Expendition- A report on material collected by the R V “Anton Bruun” 1963 1964, Stuttgart Tumpak S., D P Praseno and Y Fukuyo, 2000 Harmful algal blooms in Indonesia waters Pp 124-128, in: Hallegraeff, M G., S I Blackburn, C J Bolch and R J Lewis (eds.) Harmful Algal Blooms - Procedings of the IX International Conference on Toxix Phytoplankton Intergovernmental oceanographic commission of UNESCO 2001 Sou Nagasoe et al, 2005 Effects of temperature, salanity and irradiance on the growth of the red tide dinoflagellate Gryrodinium instriatum Freudenthal et Lee Harmful Algae xxx (2005) xxx-xxx www.elsevier.com/locate/hal _49 Viện Tài nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng phụ lục Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng cờng độ ánh sáng tới phát triển tảo Alexandrium afine Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 5,02x107 4,7x107 9,7x107 Bậc tự 130 134 Trung b×nh b×nh ph−ong 1,26x107 3,6x105 Ftính toán P-value F0.05 34,68 1,1x10-19 2,44 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng cờng độ ánh sáng tới phát triển tảo Alexandrium minutum Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 6,5x109 7,8x109 1,4x1010 Bậc tự 130 134 Trung b×nh b×nh ph−ong 1,6x109 5,9x107 FtÝnh toán P-value F0.05 27.63 1,9x10-16 2,44 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng cờng độ ¸nh s¸ng tíi sù ph¸t triĨn cđa t¶o Proroxentrum mexicanum Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 1,8x108 8,3x107 2,7x108 Bậc tự 137 141 Trung bình F bình phong tính toán 46997798 77,11 609467,3 P-value F0.05 4x10-34 2,44 B¶ng KÕt qu¶ phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng độ mặn tới phát triển tảo Alexandrium affine Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình Bậc Trung bình phơng tự bình phong 1,32x109 2,58x109 3,9x109 96 103 1,89x108 2,68x107 FtÝnh to¸n P-value F0.05 7,02 9,34x10-7 2,11 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng độ mặn tới phát triển tảo Alexandrium minutum Nguồn biến sai Tổng bình Bậc Trung bình Ftính toán P-value F0.05 Giữa nhóm Trong nhóm Tổng phơng 2,86x1010 4,32x1010 7,18x1010 tù 112 119 b×nh ph−ong 4,09x109 10,60 3,52x10-10 3,85x108 2,09 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng độ mặn tới phát triển tảo Alexandrium tamarense Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 1,02x 109 4,91x109 5,93x109 BËc tù 136 143 Trung b×nh F bình phong tính toán 1,45x108 4,02 3,61x10 P-value F0.05 0.0005 2,08 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng độ mặn tới phát triển tảo Prorocentrum mexicanum Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 1,05x1010 1,63x1010 2,69x1010 BËc tù 88 95 Trung b×nh P-value F bình phong tính toán 1,51x109 8,13 1,32x10-7 1,85x108 F0.05 2,12 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng độ mặn tới phát triển tảo Prorocentrum micans Nguồn biến sai Tổng bình phơng Bậc tự Trung bình bình phong Ftính toán Giữa nhóm 3,49109 4,99108 7,23 Trong nhóm 7,18109 104 6,9x107 Tæng 1,071010 111 P-value F0.05 4,82x10-7 2,09 Bảng Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng nhiệt độ tới phát triển tảo Alexandrium minutum Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 8,1x1010 9,9x1010 1,8x1011 BËc tù 110 114 Trung b×nh b×nh ph−ong 2x1010 9x108 Ftính toán P-value F0.05 22,39 1,5x10-13 2,45 Bảng10 Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng nhiệt độ tới phát triển tảo Alexandrium affine Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 1,59x109 4,68x109 6,27x109 Bậc tự 104 107 Trung b×nh b×nh ph−ong 5,31x108 4,5x107 FtÝnh toán P-value F0.05 11,79 1,04x10-6 2,69 Bảng11 Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng nhiệt độ tới phát triển tảo Prorocentrum mexicanum Tổng bình Bậc Trung bình F0.05 Nguồn biến sai Ftính toán P-value phơng tự bình phong Giữa nhóm 8,75x109 2,19x109 10,33 3,86x10-7 2,45 Trong c¸c nhãm 2,33x1010 110 2,12x109 Tổng 3,2x1010 114 Bảng12 Kết phân tích ANOVA-một yếu tố ảnh hởng nhiệt độ tới phát triển tảo Prorocentrum micans Nguồn biến sai Tổng bình phơng Bậc tự Trung bình bình phong Ftính toán P-value F0.05 Giữa nhóm 7,65x109 1,91x109 13,88 2,14x10-9 2,44 Trong c¸c nhãm 1,72x1010 125 1,38x108 Tỉng 2,49x1010 129 Bảng 14 Kết phân tích ANOVA- yếu tố ảnh hởng nồng độ muối dinh dỡng NO3- tới phát triển tảo Alexandrium minutum Tổng bình phơng Giữa nhóm 1,9x105 Trong nhóm 3,6x106 Tổng 5,5x106 Nguån biÕn sai BËc tù 44 47 Trung bình F bình phong tính toán 636163,8 7,73 82267,45 P-value F0.05 3x10-4 2,82 Bảng 16 Kết phân tích ANOVA- yếu tố ảnh hởng nồng độ muối dinh dỡng NO3-tới phát triển tảo Prorocentrum cf mexicanum Tổng bình phơng Giữa nhóm 7,8x106 Trong nhãm 1,8x106 Tỉng 9,7x106 Ngn biÕn sai BËc Trung b×nh P-value F tự bình phong tính toán 2,6x106 91,49 4,16x10-23 64 2,8x104 67 F0.05 2,75 B¶ng 18 KÕt phân tích ANOVA- yếu tố ảnh hởng nồng độ muối dinh dỡng PO4-3 tới phát triển tảo Alexandrium minutum Nguồn biến sai Giữa nhóm Trong nhóm Tổng Tổng bình phơng 3,39x109 1,07x1010 1,41x1010 Bậc Trung bình F tự bình phong tính toán 1,13x109 4,66 44 2,43x10 47 P-value F0.05 0,007 2,82 Bảng 21 Kết phân tích ANOVA- yếu tố ảnh hởng nồng độ muối dinh dỡng PO4-3 tới phát triển tảo Prorocentrum cf mexicanum Nguồn biến sai Tổng bình phơng Bậc Trung bình F tự bình phong tính toán Giữa nhóm 1,81x108 4,5x107 Trong c¸c nhãm 1,28x108 55 2,3x106 Tỉng 3,09x108 59 19,39 P-value F0.05 5,3x10-10 2,54 Một số hình ảnh thực thí nghiệm sinh thái tảo phòng thí nghiệm Hình Phân lập loài tảo độc hại kính lúp soi Hình Các loài tảo độc hại đà đợc phân lập Hình ảnh huỳnh quang loài tảo độc hại đà đợc phân lập Hình ảnh hiển vi loài tảo Prorocentrum mexicanum Hình Thí nghiệm điều kiện môi trờng khác tới phát triển tảo Hình Theo dõi phát triển tảo theo thời gian thí nghiệm Thành phần môi trờng nuôi vi tảo đợc sử dụng thí nghiệm Thành phần môi trờng IMK (Keller et al 1987) Thành phần NaNO3 Na2HPO4 K2 HPO4 NH4Cl Fe – EDTA Mn – EDTA Na2 – EDTA ZnSO4.7H2O Nång ®é ( mg/l ) 200 mg 1,4 mg mg 2,68 mg 5,2 mg 0,332 mg 37,2 mg 0,023 mg Thành phần CoSO4 7H2O Na2MoO4 2H2O CuSO4 7H2O H2 SeO3 Thiamin – HCl Biotin Vitamin B12 MnCl2.4H2O Nång ®é ( mg/l ) 0,014 mg 0,0073 mg 0,0025 mg 0,0017 mg 0,2 mg 0,0015 mg 0,0015 mg 0,18 mg Định mức đủ 1000 mL với nớc biển lọc vµ khư trïng tr−íc bỉ sung vitamin N−íc biĨn ®−ỵc läc b»ng giÊy läc GF/C ... nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng. .. nguyên Môi trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng. .. trờng Biển, 246 Đà Nẵng; TP Hải Phòng Đề tài: Điều tra, nghiên cứu tảo độc, tảo gây hại số vùng nuôi trồng thuỷ sản tập trung ven biển, đề xuất giải pháp phòng ngừa, giảm thiểu tác hại chúng gây