Nghiên cứu sản xuất bộ mẫu ngoại kiểm đồng thời cho hai xét nghiệm huyết thanh học hbsag và anti hcv

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH  LÊ TRẦN BẢO UYÊN NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT BỘ MẪU NGOẠI KIỂM ĐỒNG THỜI CHO HAI XÉT NGHIỆM HUYẾT THANH HỌC HBsAg VÀ anti-HCV LUẬN VĂN THẠC SỸ DƢỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƢỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH  LÊ TRẦN BẢO UYÊN NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT BỘ MẪU NGOẠI KIỂM ĐỒNG THỜI CHO HAI XÉT NGHIỆM HUYẾT THANH HỌC HBsAg VÀ anti-HCV NGÀNH : KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ : 8720210 LUẬN VĂN THẠC SỸ DƢỢC HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN THỊ MINH THUẬN TS TRẦN TƠN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu chúng tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tơi xin chịu trách nhiệm lời cam đoan Tác giả luận văn Lê Trần Bảo Uyên NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT BỘ MẪU NGOẠI KIỂM ĐỒNG THỜI CHO HAI XÉT NGHIỆM HUYẾT THANH HỌC HBsAg VÀ anti-HCV TÓM TẮT Đặt vấn đề: Ngoại kiểm tra chất lượng công cụ góp phần đảm bảo chất lượng góp phần liên thông kết xét nghiệm Mục tiêu: Nghiên cứu sản xuất mẫu ngoại kiểm cho chương trình thử nghiệm thành thạo xét nghiệm huyết học chứa đồng thời HBsAg anti-HCV Đối tƣợng Phƣơng pháp nghiên cứu: Bộ panel mẫu thiết kế 12 mẫu gồm: mẫu âm tính, mẫu dương tính HBsAg, mẫu dương tính anti-HCV, mẫu dương tính đồng thời HBsAg anti-HCV; đánh giá độ đồng nhất; độ ổn định độ vô khuẩn Sử dụng mẫu để thử nghiệm triển khai chương trình ngoại kiểm xét nghiệm huyết học chứa đồng thời HBsAg anti-HCV cho khu vực phía Nam Tây Nguyên Kết quả: Xây dựng thành công mẫu ngoại kiểm đạt tiêu chí độ ổn định, độ đồng độ vơ khuẩn 100 phịng xét nghiệm tham gia đánh giá chất lượng xét nghiệm huyết học HBsAg anti-HCV chương trình ngoại kiểm thử nghiệm sử dụng mẫu chuẩn Bộ mẫu tối ưu gồm mẫu âm tính, mẫu dương tính HBsAg mẫu dương tính anti-HCV, mẫu dương tính đồng thời HBsAg anti-HCV Kết luận: Bộ mẫu ngoại kiểm đồng thời cho hai xét nghiệm huyết học HBsAg anti-HCV xây dựng sử dụng rộng rãi chương trình thử nghiệm thành thạo cho phịng xét nghiệm Việt Nam Từ khóa: Ngoại kiểm, HBsAg anti-HCV, mẫu RESEARCH FOR PRODUCTION OF EXTERNAL QUALITY CONTROL PANELS FOR DUAL HBsAg AND anti-HCV SEROLOGICAL TESTING ABTRACT Introduction: External Quality Assessment (EQA) is one of the methods that provide quality assurance and contribute in test result synchronization Objectives: The aim of this study is to produce EQA samples for the proficiency dual HBsAg and anti-HCV serological testing Materials and methods: Each panel is contained 12 samples including negatives, positives for HBsAg, positives for anti-HCV, positives for dual HBsAg and antiHCV evaluated stability, homogeneity and sterility These panels have been applied in the EQA program for dual HBsAg and anti-HCV serological testing, taking place laboratories in Southern and Central Highland areas Results: The results have shown that the samples in the panel which have been met homogeneity, stability and sterility 100 laboratories have used these samples to evaluate the quality of HBsAg and anti-HCV serological testing through EQA program Optimal panel includes negative, positive for HBsAg, positive for antiHCV, positive for dual HBsAg and anti-HCV Conclusion: The EQA samples for dual HBsAg and anti-HCV serological test have been developed in order to use widely in the proficiency test for testing laboratories in Vietnam Keywords: External quality assessment; dual HBsAg and anti-HCV, panel MỤC LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BIỂU ĐỒ DANH MỤC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan virus viêm gan B virus viêm gan C 1.2 Các phương pháp xét nghiệm phát HBV HCV 1.3 Tổng quan chất lượng xét nghiệm .15 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .23 2.1 Đối tượng nghiên cứu .23 2.2 Đối tượng tham gia 23 2.3 Nguyên liệu, hoá chất trang thiết bị 23 2.4 Phương pháp nghiên cứu 25 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ .33 3.1 Xây dựng mẫu ngoại kiểm xét nghiệm đồng thời HBsAg anti-HCV 33 3.2 Kết ứng dụng mẫu chuẩn để thử nghiệm chương trình ngoại kiểm xét nghiệm huyết học đồng thời HBsAg anti-HCV khu vực phía Nam Tây Nguyên 51 CHƢƠNG 4: BÀN LUẬN 61 4.1 Nguyên liệu sản xuất 61 4.2 Kiểm tra đặc tính mẫu test khẳng định 62 4.3 Phân phối mẫu 63 4.4 Đánh giá chất lượng mẫu 63 4.5 Tối ưu hoá số lượng mẫu panel 63 4.6 Triển khai thí điểm chương trình ngoại kiểm 64 4.7 Tính khả thi chương trình ngoại kiểm sử dụng panel 65 CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .67 5.1 Kết luận 67 5.2 Kiến nghị 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt ANOVA Analysis of variance Phân tích phương sai Anti-HBs Hepatitis B surface antibody Kháng thể bề mặt virus viêm gan B Anti-HBc Hepatitis B core antibody Kháng thể lõi virus viêm gan B Anti-HBC Hepatitis B core antibody Kháng thể lõi virus viêm gan B IgM Immunoglobulin M globulin miễn dịch M Anti-HCV Anti-hepatitis C virus antibody Kháng thể kháng virus viêm gan C ADN Deoxyribonucleic acid Acid deoxyribonucleic ARN Ribonucleic acid Acid ribonucleic CLIA Chemiluminescence immunoassay Kỹ thuật miễn dịch hóa phát quang CV Coefficient of variation Hệ số biến thiên CLSI Clinical and Laboratory Viện tiêu chuẩn phịng thí nghiệm Standards Institute lâm sàng Hoa Kỳ ECLIA Electro-chemiluminescence Kỹ thuật miễn dịch điện hóa phát Immunoassay quang EQA External quality assessment Ngoại kiểm tra chất lượng ELISA Enzyme-linked Kỹ thuật miễn dịch hấp phụ gắn Immunosorbent assay men HBV Hepatitis B virus Virus viêm gan B HBsAg Hepatitis B surface antigen Kháng nguyên bề mặt virus viêm gan B HBcAg Hepatitis B core antigen Kháng nguyên lõi virus viêm gan B HBeAg Hepatitis B envelope antigen Kháng nguyên vỏ nhân virus Từ viết tắt Tiếng Anh Tiếng Việt viêm gan B HCVcAg Hepatitis C virus core antigen Kháng nguyên lõi virus viêm gan C HCV Hepatitis C virus Huyết tương tươi đông lạnh HTTĐL HTLV Virus viêm gan C Human T-cell lymphotropic Virus IEC International Electrotechnical Commission IVDs In vitro diagnostic ISO International Organization for Standardization IUPAC PT Tổ chức tiêu chuẩn hóa quốc tế Hiệp hội quốc tế hóa học and Applied Chemistry túy ứng dụng Proficiency testing Thử nghiệm thành thạo Phịng xét nghiệm Signal to cut-off ratio Tín hiệu mẫu so với ngưỡng Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN WHO Các chẩn đoán in vitro International Union of Pure PXN S/CO Ủy ban kỹ thuật điện quốc tế World Health Organization Tổ chức y tế giới DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc hạt Dane Hình 1.2 Cấu trúc gen HBV Hình 1.3 Cấu trúc HCV-ARN Hình 1.4 Phản ứng điện hoá phát quang bề mặt điện cực 12 Hình 1.5 Cách xác định vị trí kháng nguyên que xét nghiệm 15 Hình 1.6 Sơ đồ hoạt động PXN 16 Hình 1.7 Các phương pháp ngoại kiểm tra 17 Hình 3.5 Kiểm tra độ vô trùng mẫu thạch MH (a) thạch Sabouraud (b) 41 Hình 3.6 Kết xác định đặc tính (a) HBsAg (b) anti-HCV mẫu điều kiện vận chuyển sinh phẩm nhanh 44 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục 116 Kết phân tích thống kê độ ổn định anti-HCV điều kiện 2-8 oC sau 30 ngày mẫu HBC-08 F-Test Two-Sample for Variances Mean Variance Observations df F P(F