Nghiên cứu điều chế gum ngừa sâu răng chứa lactobacillus brevis nb10

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁI THỊ QUỲNH NHƯ NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ GUM NGỪA SÂU RĂNG CHỨA LACTOBACILLUS BREVIS NB10 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁI THỊ QUỲNH NHƯ NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ GUM NGỪA SÂU RĂNG CHỨA LACTOBACILLUS BREVIS NB10 NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM VÀ BÀO CHẾ THUỐC Mã số: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS TRẦN VĂN THÀNH THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu tơi hướng dẫn khoa học thầy PGS.TS Trần Văn Thành Các số liệu, kết luận văn trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khoa học khác Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 25 tháng 11 năm 2021 THÁI THỊ QUỲNH NHƯ NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ GUM NGỪA SÂU RĂNG CHỨA VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 TÓM TẮT Đặt vấn đề: Streptococcus mutans tác nhân hình thành mảng bám răng, gây sâu Chủng Lactobacillus brevis NB10 phân lập từ nước bọt người khoẻ mạnh chứng minh có khả ức chế tăng trưởng hình thành biofilm S mutans in vitro Nghiên cứu bào chế gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 bước để ứng dụng chủng probiotic phòng ngừa mảng bám sâu Mục tiêu: Xây dựng công thức bào chế gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 với lượng vi khuẩn tối thiểu 107 CFU/viên Đối tượng phương pháp: - Xây dựng công thức bột nguyên liệu đông khô chứa L brevis NB10: khảo sát chọn lựa tác nhân bảo vệ phù hợp sorbitol, mannitol, xylitol, lactose, maltodextrin, sữa tách béo kali ascorbat - Xây dựng công thức bào chế gum nhai chứa L brevis NB10: sử dụng phương pháp dập thẳng với gum HIG04 (Health in Gum®) Các tác dược xylitol, hương dâu, glycerin, aerosil, talc magnesi stearat sử dụng để tạo gum nhai chất dễ nhai, vị ngọt, mùi thơm phù hợp Kết quả: - Công thức nguyên liệu đông khô L brevis NB10: maltodextrin 6%; sữa tách béo 6% kali ascorbate 0,25% Tỷ lệ sống sót vi khuẩn sau đơng khơ đạt 75,5 ± 7,6% - Công thức gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10: bột đông khô L brevis NB 10 (> 109 CFU/g) 10%; xylitol 10%; hương dâu 2%; glycerin 1,5%; aerosil 2,5%; talc 1,5%; magnesi sterate 1,5% gum HIG04 71% Tỷ lệ vi khuẩn sống sót sau dập viên đạt 34,34 ± 0,55 % Gum nhai ổn định tối thiểu tháng ºC ± ºC Kết luận: Đã xây dựng công thức gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 với lượng vi khuẩn tối thiểu 107 CFU/viên Từ khoá: Lactobacillus brevis NB10, gum nhai chứa lợi khuẩn, probiotic ABSTRACT FORMULATION OF CHEWING GUM CONTAINING LACTOBACILLUS BREVIS NB10 Background: Streptococcus mutans is a major pathogen that initiates dental plaque and dental caries Lactobacillus brevis NB10 was isolated from human saliva, showing in vitro effect on inhibiting the growth and the biofilm formation of S mutans Formulation of chewing gum containing L brevis NB10 is the next step in using this probiotic for the prevention of dental diseases Objectives: to formulate chewing gum containing at least 107 CFU/tablet of L brevis NB10 Methods: - Preparation of freeze-dried powder containing L brevis NB10: cryoprotectants such as sorbitol, mannitol, xylitol, lactose, maltodextrin, skim milk, and potassium ascorbate were selected to formulate freeze-dried powder showing the highest bacterial survival rate - Preparation of chewing gum containing L brevis NB10: chewing gum tablets are made by direct compression method using HIG04 gum base (Heath in Gum ®) Other ingredients such as xylitol, strawberry flavor powder, glycerin, aerosil, talc, and magnesium stearate were selected to formulate chewing gum with suitable chewing feel, taste, and flavor Results: - The formulation of freeze-dried powder containing L brevis NB10: 6% maltodextrin, 6% skim milk, and 0.25% potassium ascorbate The bacterial survival rate after freeze-drying is 75.5 ± 7.6% - The formulation of chewing gum containing L brevis NB10: 10% freeze-dried L brevis NB10 powder (> 109 CFU/g); 10% xylitol; 2% strawberry flavor powder; 1.5% glycerin; 2.5% aerosil; 1.5% talc; 1.5% magnesium stearate, and 71% HIG04 gum base The bacterial survival rate after tablet compression is 34.34 ± 0.55 % The product is stable for at least a month at ºC ± ºC Conclusion: This study was successful in formulating of chewing gum containing at least 107 CFU/tablet of L brevis NB10 Keywords: Lactobacillus brevis NB10, medicated chewing gum, probiotic MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC BẢNG vii ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Probiotic – Lợi khuẩn 1.1.1 Yêu cầu chủng probiotic 1.1.2 Tác dụng dược lý probiotic 1.1.2 Liều lượng probiotic 1.2 Đặc điểm chi Lactobacillus 1.3 Tổng quan L brevis 1.4 Tổng quan L brevis NB10 1.5 Tổng quan phương pháp đông khô 1.5.1 Các giai đoạn q trình đơng khô 1.5.2 Vai trò tác nhân bảo vệ 10 1.6 Tổng quan gum dược phẩm 11 1.6.1 Định nghĩa 12 1.6.2 Ưu điểm gum dược phẩm 12 1.6.3 Các loại gum 12 1.6.4 Các thành phần cần thiết gum dược phẩm 15 1.6.5 Các phương pháp sản xuất MCG 16 1.7 Xây dựng công thức MCG 18 1.8 Các tiêu chí đánh giá MCG 18 1.8.1 Theo thông số kỹ thuật Dược Điển Châu Âu 18 1.8.2 Kiểm tra hiệu suất sản phẩm 18 1.9 Tổng quan gum probiotic 21 1.10 Một số tá dược sử dụng nghiên cứu 22 1.11 Một số MCG nghiên cứu 27 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 i 2.1 Đối tượng nghiên cứu 30 2.2 Địa điểm nghiên cứu 30 2.3 Vật liệu, trang thiết bị 30 2.4 Phương pháp nghiên cứu 33 2.4.1 Sơ đồ thực nghiên cứu 33 2.4.2 Phương pháp xác định số lượng vi khuẩn L brevis NB10 33 2.4.3 Xác định đường cong tăng trưởng L.brevis NB10 34 2.4.4 Xây dựng đường tương quan độ hấp thu OD600 lượng vi khuẩn L brevis NB10 sống 35 2.4.5 Phương pháp thu sinh khối vi khuẩn L brevis NB10 35 2.4.6 Xây dựng công thức môi trường đông khô vi khuẩn L brevis NB10 36 2.4.7 Đánh giá bột đông khô chứa L brevis NB10 38 2.4.8 Đánh giá độ ổn định vi khuẩn L brevis NB10 nguyên liệu gum nhai 38 2.4.9 Xây dựng công thức gum chứa L brevis NB10 38 2.4.10 Bào chế gum nhai chứa L brevis NB10 40 2.4.11 Phương pháp đánh giá bột bán thành phẩm 41 2.4.12 Phương pháp đánh giá tính chất gum nhai chứa L brevis NB10 42 CHƯƠNG KẾT QUẢ 44 3.1 Đường cong tăng trưởng vi khuẩn L brevis NB10 44 3.2 Xây dựng đường tương quan độ hấp thu OD 600 nm số lượng vi khuẩn L brevis NB10 sống 44 3.3 Xây dựng công thức môi trường đông khô chứa vi khuẩn L brevis NB10 46 3.3.1 Khảo sát công thức môi trường đông khô chứa vi khuẩn L brevis NB10 46 3.3.2.Bào chế nguyên liệu bột đông khô chứa vi khuẩn L brevis NB10 54 3.3.3.Theo dõi độ ổn định nguyên liệu bột đông khô vi khuẩn L brevis NB10 57 3.4 Xây dựng công thức gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 58 i 3.4.1 Khảo sát khối lượng viên 58 3.4.2 Khảo sát lượng tá dược điều vị 60 3.4.3 Khảo sát tỷ lệ chất điều hương 62 3.4.4 Khảo sát khối lượng chất làm mềm gum nhai 63 3.4.5 Khảo sát lương tá dược trơn bóng 64 3.4.6 Điều chế gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 67 3.4.7 Theo dõi độ ổn định gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 72 CHƯƠNG BÀN LUẬN 74 4.1 Xây dựng công thức môi trường đông khô chứa vi khuẩn L brevis NB10 74 4.2 Xây dựng công thức gum nhai chứa vi khuẩn L brevis NB10 78 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 81 5.1 Kết luận 81 5.2 Đề nghị 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh analysis of the Lactobacillus brevis species", BMC genomics, 20 (1), pp 1-15 27 Fonseca F, Cenard S, Passot S, (2015), Freeze-drying of lactic acid bacteria, Springer, pp 477-488 28 Gadhavi A, Patel B, Patel D, Patel C, (2011), "Medicated Chewing Gum-A 21st Century Drug Delivery Sysytem", International journal of pharmaceutical sciences research, (8), pp 1961 29 Garcia-Amezquita L, Welti-Chanes J, Vergara-Balderas F, Bermúdez-Aguirre D, (2016), "Freeze-drying: the basic process", Encyclopedia of Food and Health, pp 104 - 109 30 Gupta P, Jain M, Sharma S, Vidhyadhari A, et al, (2019), "Medicated Chewing Gum– A Modernistic Drug Delivery System", International Journal of Pharmacy Life Sciences, 10 (7), pp 6319 - 6330 31 Hanh N T H, Anh L T, (2020), "Isolation of Lactic acid bacteria showing antagonistic activity against Streptococcus mutans", MedPharmRes, (2), pp 23-33 32 Hasslöf P, Hedberg M, Twetman S, Stecksén-Blicks C, (2010), "Growth inhibition of oral mutans streptococci and candida by commercial probiotic lactobacilli-an in vitro study", BMC oral health, 10 (1), pp 1-6 33 Hayes C, (2001), "The effect of non‐cariogenic sweeteners on the prevention of dental caries: a review of the evidence", Journal of dental education, 65 (10), pp 1106-1109 34 Jacobsen J, Christrup L L, Jensen N-H, (2004), "Medicated chewing gum", American journal of drug delivery, (2), pp 75-88 35 Jalali M, Abedi D, Varshosaz J, Najjarzadeh M, et al, (2012), "Stability evaluation of freeze-dried Lactobacillus paracasei subsp tolerance and Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus in oral capsules", Research in pharmaceutical sciences, (1), pp 31 36 John A, Kumar K K, Dinesh Kumar B, (2019), "Medicated chewing gum: modern drug delivery system", UJPSR, (1), pp 29-39 37 Jójárt I, Kása Jr P, Kelemen A, Pintye-Hódi K, (2016), "Study of the compressibility of chewing gum and its applicability as an oral drug delivery system", Pharmaceutical development technology, 21 (3), pp 321-327 38 Kang M-S, Kim Y-S, Lee H-C, Lim H-S, et al, (2012), "Comparison of temperature Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh and additives affecting the stability of the probiotic Weissella cibaria", Chonnam medical journal, 48 (3), pp 159-163 39 Kaur K, Nekkanti S, Madiyal M, Choudhary P, (2018), "Effect of chewing gums containing probiotics and xylitol on oral health in children: a randomized controlled trial", Journal of International Oral Health, 10 (5), pp 237 40 Kaushik P, Kaushik D, (2019), "Medicated Chewing Gums: Recent Patents and Patented Technology Platforms", Recent patents on drug delivery formulation, 13 (3), pp 184-191 41 Khatun S, Sutradhar K B, (2012), "Medicated chewing gum: An unconventional drug delivery system", International Current Pharmaceutical Journal, (4), pp 86-91 42 Kim A I, Akers M J, Nail S L, (1998), "The physical state of mannitol after freezedrying: effects of mannitol concentration, freezing rate, and a noncrystallizing cosolute", Journal of pharmaceutical sciences, 87 (8), pp 931-935 43 Konar N, Palabiyik I, Toker O S, Sagdic O, (2016), "Chewing gum: Production, quality parameters and opportunities for delivering bioactive compounds", Trends in Food Science Technology, 55 pp 29-38 44 Koulourides T, Bodden R, Keller S, Manson-Hing L, et al, (1976), "Cariogenicity of nine sugars tested with an intraoral device in man", Caries Research, 10 (6), pp 427-441 45 Krasaekoopt W, Bhandari B, Deeth H C, Technology, (2006), "Survival of probiotics encapsulated in chitosan-coated alginate beads in yoghurt from UHT-and onventionally treated milk during storage", LWT-Food Science, 39 (2), pp 177-183 46 Kurtmann L, Carlsen C U, Risbo J, Skibsted L H, (2009), "Storage stability of freeze– dried Lactobacillus acidophilus (La-5) in relation to water activity and presence of oxygen and ascorbate", Cryobiology, 58 (2), pp 175-180 47 Kvist C, Andersson S B, Fors S, Wennergren B, et al, (1999), "Apparatus for studying in vitro drug release from medicated chewing gums", International journal of pharmaceutics, 189 (1), pp 57-65 48 Lang C, Böttner M, Holz C, Veen M, et al, (2010), "Specific Lactobacillus/Mutans Streptococcus co-aggregation", Dent Res, 89 (2), pp 175-179 49 Lee S-B, Kim D-H, Park H-D, (2016), "Effects of protectant and rehydration conditions on the survival rate and malolactic fermentation efficiency of freeze-dried Lactobacillus plantarum JH287", Applied microbiology biotechnology, 100 (18), pp Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 7853-7863 50 Liao X, Krishnamurthy R, Suryanarayanan R, (2007), "Influence of processing conditions on the physical state of mannitol—implications in freeze-drying", Pharmaceutical research, 24 (2), pp 370-376 51 Maggi L, Segale L, Conti S, Machiste E O, et al, (2005), "Preparation and evaluation of release characteristics of 3TabGum, a novel chewing device", European journal of pharmaceutical sciences, 24 (5), PP 487-493 52 Mäkinen K, Chen C-Y, Mäkinen P-L, Bennett C, et al, (1996), "Properties of whole saliva and dental plaque in relation to 40-month consumption of chewing gums containing xylitol, sorbitol or sucrose", Caries research, 30 (3), pp 180-188 53 Makwana A, Sameja K, Raval V, Asodiya H, et al, (2011), "Chewing gum: A modern approach to oral mucosal drug delivery", Int J Pharm Res Dev, pp 1-16 54 Martinez R, Bedani, R., & Saad, S , (2015), "Scientific evidence for health effects attributed to the consumption of probiotics and prebiotics: An update for current perspectives and future challenges", British Journal of Nutrition, 114 (12), pp 19932015 55 Maslii Y, Ruban О, Kutsenko S, (2020), "Selection of flavour additives and method of their introduction in the composition of compressed medicated chewing gums", EUREKA: Health Sciences, (2), pp 59-66 56 Ming L C, Abd Rahim R, Wan H Y, Ariff A B, (2009), "Formulation of protective agents for improvement of Lactobacillus salivarius I 24 survival rate subjected to freeze drying for production of live cells in powderized form", Food Bioprocess Technology, (4), pp 431-436 57 Miyamoto-Shinohara Y, Imaizumi T, Sukenobe J, Murakami Y, et al, (2000), "Survival rate of microbes after freeze-drying and long-term storage", Cryobiology, 41 (3), pp 251-255 58 Morichi T, (1974), "Preservation of lactic acid bacteria by freeze-drying", Japan Agricultural Research Quarterly, (3), pp 171-176 59 Nag A, Das S, (2013), "Effect of trehalose and lactose as cryoprotectant during freeze‐drying, in vitro gastro‐intestinal transit and survival of microencapsulated freeze‐dried Lactobacillus casei 431 cells", International Journal of Dairy Technology, 66 (2), pp 162-169 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 60 Pagare P K, Satpute C S, Jadhav V M, Kadam V, (2012), "Medicated chewing gum: A novel drug delivery system", Journal of applied pharmaceutical science, (06), pp 40-54 61 Paliy A, Gujvinska S, Alrawashdeh M, Shkromada O, et al, (2020), "Selection of technological regime and cryoprotector for lyophilization of lactobacteria (Lactobacillus spp.)", Ukrainian Journal of Ecology, 10 (4), pp 184 - 190 62 Paradkar M, Gajra B, Patel B, (2016), "Formulation development and evaluation of medicated chewing gum of anti-emetic drug", Saudi pharmaceutical journal, 24 (2), pp 153-164 63 Patel Y, Shukla A, Saini V, Shrimal N, et al, (2011), "Chewing gum as a drug delivery system", International Journal of Pharmaceutical Sciences Research, (4), pp 748 64 Pharmacopeia United, (2018), National Formulary: NF 36, Rockville, MD United States Pharmacopeial Convention, pp 1174 65 Pundir S, Verma A, (2014), "Oral disintegrating preparation-medicated chewing gum", Pharma Utility, (1 - 2), 66 Pyar H, Peh K-K, (2014), "Cost effectiveness of cryoprotective agents and modified De-man Rogosa Sharpe medium on growth of Lactobacillus acidophilus", Pakistan journal of biological sciences: PJBS, 17 (4), pp 462-471 67 Qaziyani S D, Pourfarzad A, Gheibi S, Nasiraie L R, (2019), "Effect of encapsulation and wall material on the probiotic survival and physicochemical properties of synbiotic chewing gum: study with univariate and multivariate analyses", Heliyon, (7), pp e02144 68 Reddy K B P K, Awasthi S P, Madhu A N, Prapulla S G, (2009), "Role of cryoprotectants on the viability and functional properties of probiotic lactic acid bacteria during freeze drying", Food Biotechnology, 23 (3), pp 243-265 69 Renu J D, Jalwal P, Singh B, (2015), "Chewable tablets: a comprehensive review", The Pharma Innovation Journal, (5), pp 100-105 70 Roos Y, Pehkonen K, (2010), "21 Entrapment of Probiotic Bacteria in Frozen Cryoprotectants and Viability in Freeze Drying", Water Properties in Food, Health, Pharmaceutical Biological Systems: ISOPOW 10, pp 285 71 Rowe R C, Sheskey P, Quinn M, (2009), Handbook of pharmaceutical excipients, Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Libros Digitales-Pharmaceutical Press, pp 185 - 188, 283 - 286, 359 - 361, 364-369, 402 - 407, 418-420, 424 - 428, 626, 679 - 682, 728 - 730, 786 - 789 72 Ruban O, Masliy J S, (2014), "Technological peculiarities for obtaining of medicated chewing gums", News of Pharmacy Ukraine, pp 32-34 73 Sadguruprasad L T, Basavaraj M, (2018), "Statistical modelling for optimized lyophilization of Lactobacillus acidophilus strains for improved viability and stability using response surface methodology", AMB Express, (1), pp 1-11 74 Semwal R, Semwal D K, Badoni R, (2010), "Chewing gum: A novel approach for drug delivery", Mouth, pp 75 Sharma S, Agarwal N, Verma P, (2012), "Probiotics: the emissaries of health from microbial world", Appl Pharm Sci, (1), pp 138-143 76 Siaterlis A, Deepika G, Charalampopoulos D, (2009), "Effect of culture medium and cryoprotectants on the growth and survival of probiotic lactobacilli during freeze drying", Letters in Applied Microbiology, 48 (3), pp 295-301 77 Söderling E, Trahan L, Tammiala‐Salonen T, Häkkinen L, (1997), "Effects of xylitol, xylitolsorbitol, and placebo chewing gums on the plaque of habitual xylitol consumers", European journal of oral sciences, 105 (2), pp 170-177 78 Stefanello R F, Nabeshima E H, Iamanaka B T, Ludwig A, et al, (2019), "Survival and stability of Lactobacillus fermentum and Wickerhamomyces anomalus strains upon yophilisation with different cryoprotectant agents", Food Research International, 115 pp 90-94 79 Surana A S, (2010), "Chewing gum: A friendly oral mucosal drug delivery system", Int J Pharm Sci Rev Res, (2), pp 68-71 80 Tahmourespour A, Salehi R, Kermanshahi R, Eslami G, (2011), "The anti-biofouling effect of Lactobacillus fermentum-derived biosurfactant against Streptococcus mutans", Biofouling, 27 (4), pp 385-392 81 Tang H W, Abbasiliasi S, Murugan P, Tam Y J, et al, (2020), "Influence of freezedrying and spray-drying preservation methods on survivability rate of different types of protectants encapsulated Lactobacillus acidophilus FTDC 3081", Bioscience, biotechnology, biochemistry, 84 (9), pp 1913-1920 82 Tanzer J, (1995), "Xylitol chewing gum and dental caries", International dental journal, 45 (1 Suppl 1), pp 65-76 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 83 Teixeira P, (1999), "Lactobacillus: Lactobacillus brevis", Encyclopedia of Food Microbiology, pp 418-424 84 Tong Z, Zhou L, Li J, Kuang R, et al, (2012), "An in vitro investigation of Lactococcus lactis antagonizing cariogenic bacterium Streptococcus mutans", Archives of oral biology, 57 (4), pp 376-382 85 Ughade M A, Wasankar S R, Deshmukh A D, Burghate R M, et al, (2012), "Medicated chewing gum: Modern approach to mucosal drug delivery", Asian Journal of Research in Pharmaceutical Science, (4), pp 150-159 86 Viljoen J M, van der Walt S, Hamman J H, (2021), "Formulation of Medicated Chewing Gum Containing Sceletium tortuosum and Process Optimization Utilizing the SeDeM Diagram Expert System", AAPS PharmSciTech, 22 (3), pp 1-15 87 Vos P, Garrity G, Jones D, Krieg N R, et al, (2011), Bergey's manual of systematic bacteriology: Volume 3: The Firmicutes, Springer Science & Business Media, pp 464 - 511 88 World Health Orginization, (2018), "Oral health", www.who.int (2018) [Online] Available: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/oral health [Accessed: 2020/2010/2019] 89 Yakovenko O, Masliy J S, (2016), "The choice of excipients in the composition of a medicated chewing gum", International Conference of pharmacy student, p 11 90 Yang X, Andersen J, Dinovi M, Veerabhadra M, "Magnesium stearate", of certain food additives contaminants, pp 37 91 Yeo S, Shin H S, Lee H W, Hong D, et al, (2018), "Determination of optimized growth medium and cryoprotective additives to enhance the growth and survival of Lactobacillus salivarius", Journal of microbiology, 28 (5), pp 718-731 92 Zhao G, Zhang G, (2005), "Effect of protective agents, freezing temperature, rehydration media on viability of malolactic bacteria subjected to freeze-drying", Appl Microbiol, 99 (2), pp 333-338 93 https://www.grandviewresearch.com/industry-analysis/probiotics-marke Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-1 PHỤ LỤC PHỤ LỤC KẾT QUẢ XÂY DỰNG ĐƯỜNG TƯƠNG QUAN OD600 VÀ LƯỢNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 PL-2 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THEO DÕI ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA CÁC BỘT ĐÔNG KHÔ Ở NHIỆT ĐỘ PHÒNG PL-3 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA XYLITOL LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 PL-4 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA HƯƠNG DÂU LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 PL-5 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA GLYCERIN LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 PL-6 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA TÁ DƯỢC TRƠN BÓNG LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 PL-7 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SỐ LƯỢNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 TRONG BỘT TRỘN HOÀN TẤT PL-8 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SỐ LƯỢNG VI KHUẨN L brevis NB10 TRONG GUM NHAI PL-9 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-2 PHỤ LỤC KẾT QUẢ XÂY DỰNG ĐƯỜNG TƯƠNG QUAN OD600 VÀ LƯỢNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R R Square Adjusted R Square Standard Error 0.999680022 0.999360147 0.999232177 0.043885223 Observations ANOVA df SS Regression Residual Total Coefficients MS F 15.04002 15.04002 7809.297 Significance F 3.52E-09 0.00963 0.001926 15.04965 Standard Error t Stat P-value Lower 95% Upper 95% Lower 95.0% Upper 95.0% Intercept 5.014231828 0.031399 159.6924 1.83E-10 4.933517 5.094946 4.933517 5.094946 X Variable 2.578568773 0.029179 88.37023 3.52E-09 2.503561 2.653576 2.503561 2.653576 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-3 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THEO DÕI ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA CÁC BỘT ĐƠNG KHƠ Ở NHIỆT ĐỘ PHỊNG Lượng vi khuẩn L brevis NB10 sống trung bình Thời gian theo dõi (ngày) Log (CFU/g) Man:STB Mal:STB (3:7) Mal:STB (5: 5) (3:7) 10% 10% 12% 9,61 9,55 9,57 8,94 9,18 9,48 8,81 9,00 8,80 10 8,36 8,60 8,62 14 8,43 8,30 8,61 21 8,38 8,00 8,34 30 8,15 7,11 7,97 60 4,48 5,26 6,30 75 3,30 4,72 5,95 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-4 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA XYLITOL LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Column Column Column Column Column Count 6 6 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.004253333 0.085533333 Total 0.089786667 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Sum 48.7 48.67 48.79 48.79 48.87 df 25 29 Average 8.116666667 8.111666667 8.131666667 8.131666667 8.145 Variance 0.000746667 0.001736667 0.006776667 0.002736667 0.00511 MS F P-value F crit 0.001063333 0.310795012 0.86801413 2.75871047 0.003421333 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-5 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA HƯƠNG DÂU LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average 8.145 Variance Column 48.87 Column 48.61 8.10166667 0.00129667 Column 48.48 Column 48.79 8.13166667 0.00273667 8.08 0.00583 0.00264 ANOVA Source of Variation SS df MS Between Groups 0.01547917 Within Groups 0.06251667 20 0.00312583 Total 0.07799583 23 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn F P-value F crit 0.00515972 1.65067093 0.20956178 3.09839121 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-6 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA GLYCERIN LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Column Column Column Column Count 6 6 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.00775 0.09103333 Total 0.09878333 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Sum Average Variance 48.79 8.13166667 0.00565667 48.6 8.1 0.00424 48.51 8.085 0.00495 48.72 8.12 0.00336 df MS F P-value F crit 0.00258333 0.56755767 0.64277274 3.09839121 20 0.00455167 23 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-7 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA TÁ DƯỢC TRƠN BÓNG LÊN VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Column Column Column ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Count 6 SS 0.00943333 0.06076667 0.0702 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Sum Average Variance 48.59 8.09833333 0.00445667 48.91 8.15166667 0.00533667 48.66 8.11 0.00236 df MS F P-value F crit 0.00471667 1.16428963 0.33881471 3.68232034 15 0.00405111 17 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-8 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SỐ LƯỢNG VI KHUẨN LACTOBACILLUS BREVIS NB10 TRONG BỘT TRỘN HOÀN TẤT VỊ TRÍ Số lượng vi khuẩn L brevis NB10 (Log CFU/g) LÔ LÔ LÔ 8.32 8.31 8.35 8.41 8.34 8.29 8.34 8.39 8.32 8.36 8.29 8.28 8.42 8.32 8.31 8.37 8.33 8.31 0.04 0.04 0.03 Trung bình SD Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Column Column Column ANOVA Source of Variation SS Between Groups 0.00933333 Within Groups 0.0164 Total 0.02573333 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Sum 41.85 41.65 41.55 df Average 8.37 8.33 8.31 Variance 0.0019 0.00145 0.00075 MS F P-value 0.00466667 3.41463415 0.06700185 12 0.00136667 14 F crit 3.88529383 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-9 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ SỐ LƯỢNG VI KHUẨN L brevis NB10 TRONG GUM NHAI Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Column 10 81.58 8.158 0.00555111 Column 10 81.28 8.128 0.00426222 Column 10 80.97 8.097 0.00284556 ANOVA Source of Variation Between Groups SS 0.01860667 Within Groups Total 0.11393 0.13253667 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn df MS F P-value F crit 0.00930333 2.20477486 0.12974114 3.35413083 27 0.00421963 29