Nghiên cứu bào chế trà hòa tan đảng sâm (codonopsis javanica (blume) hook f )

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - LÊ THỊ THU NGUYỆT NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ TRÀ HÒA TAN ĐẢNG SÂM (Codonopsis javanica (Blume) Hook.f.) LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH - LÊ THỊ THU NGUYỆT NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ TRÀ HÒA TAN ĐẢNG SÂM (Codonopsis javanica (Blume) Hook.f.) Ngành: Công nghệ dược phẩm bào chế thuốc Mã số: 8720202 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN ĐỨC HẠNH TS NGUYỄN TRƯỜNG HUY THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – NĂM 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác KÝ TÊN LÊ THỊ THU NGUYỆT Luận văn thạc sĩ – khóa: 2019 – 2021 Chuyên ngành: Công nghệ dược phẩm bào chế thuốc Mã số: 8720202 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ TRÀ HÒA TAN ĐẢNG SÂM (Codonopsis javanica (Blume) Hook.f.) Lê Thị thu Nguyệt Người hướng dẫn: TS Nguyễn Đức Hạnh TS Nguyễn Trường Huy Đặt vấn đề Đảng sâm (Codonopsis javanica) vị thuốc quý có nhiều tác dụng dược lý nghiên cứu sử dụng từ xưa y học cổ truyền Trong đó, polysaccharid lobeyolin thành phần có tác dụng dược lý rễ Đảng sâm Hiện nay, Việt Nam giới chưa có cơng trình nghiên cứu dạng bào chế trà hòa tan Đảng sâm với hàm lượng polysaccharid lobetyolin kiểm sốt Từ thực tế đó, đề tài “Nghiên cứu bào chế trà hòa tan Đảng sâm (Codonopsis javanica (Blume) Hook.f.)” thực Đối tượng phương pháp ngiên cứu Đối tượng nghiên cứu: Dược liệu Đảng sâm (Codonopsis javanica) cung cấp Công ty TNHH Cao Lâm (Lâm Đồng) Phương pháp nghiên cứu: Phương pháp định lượng polysaccharid dịch chiết Đảng sâm xây dựng thẩm định theo hướng dẫn ICH Khảo sát ảnh hưởng biến độc lập (tỷ lệ dung môi/dược liệu, số lần chiết nồng độ ethanol) biến phụ thuộc (hiệu suất chiết cao Đảng sâm, hiệu suất chiết polysaccharid hiệu suất chiết lobetyolin) quy trình chiết xuất tối ưu hóa phần mềm BCPharsoft OPT Dịch chiết đậm đặc Đảng sâm phối hợp với tá dược maltodextrin để cải thiện hiệu suất sấy phun Sau đó, sản xuất thử cao Đảng sâm quy mô 10 kg dược liệu dự thảo TCCS cho cao Đảng sâm Khảo sát ảnh hưởng tá dược maltodextrin, lactose phun sấy, suscrose phun sấy hỗn hợp tá dược độn lên lưu tính cao Đảng sâm Từ đó, xác định cơng thức trà hịa tan Đảng sâm nâng cỡ lơ quy mơ 5000 gói trà hòa tan Tiến hành dự thảo TCCS trà hòa tan Đảng sâm Kết Phương pháp định lượng polysaccharid dịch chiết Đảng sâm xây dựng thẩm định thành cơng Quy trình chiết xuất dược liệu Đảng sâm tối ưu hóa với điều kiện chiết: tỷ lệ dung môi:dược liệu 18:1, dung môi chiết ethanol 28% số lần chiết lần Dịch Đảng sâm đậm đặc phối hợp 15% maltodextrin trước sấy phun cải thiện tính chất hiệu suất sấy phun Từ đó, sản xuất thành cơng cao Đảng sâm với quy mô 10kg dược liệu, hiệu suất sấy phun trung bình 44,86% Từ kết kiểm nghiệm lô cao Đảng sâm đề xuất mức chất lượng phù hợp Cơng thức trà hịa tan với 30% cao Đảng sâm phối hợp với 70% hỗn hợp tá dược maltodextrin:lactose phun sấy tỷ lệ 8:2 (kl/kl) cải thiện tỷ số Hausner số nén nằm mức khá, góc nghỉ nhỏ 30o tốc độ chảy 39,02 g/s Từ kết kiểm nghiệm lô cao trà hòa tan Đảng sâm đề xuất mức chất lượng phù hợp Kết luận Xây dựng quy trình sản xuất cao Đảng sâm tiêu chuẩn hóa chát lượng cao Đảng sâm Xây dựng công thức trà hịa tan Đảng sâm tiêu chuẩn hóa chất lượng trà hịa tan Đảng sâm Từ khóa: Đảng sâm, mối liên quan nhân quả, tối ưu hố, cao khơ phun sấy, trà hòa tan Master’s thesis - Academic Course: 2019 – 2021 Speciality: Pharmaceutical tachnology and pharmaceutic Speciality code: 8720202 STUDY ON PREPARATION OF Codonopsis javanica (Blume) Hook.f INSTANT TEA By Le Thi Thu Nguyet Supervisor: Ph.D Nguyen Duc Hanh and Ph.D Nguyen Truong Huy ABSTRACT Introduction Radix Codonopsis javanica is a traditional medicine used effectively Polysaccharid and lobetyolin are the major bioactive components of Radix Codonopsis javanica Currently, in Vietnam and the world, there has been no research on the preparation of instant tea with controlled polysaccharide content and lobetyolin content According to this issue, a study on preparation of Codonopsis javanica (blume) hook.f instant tea is conducted Materials and methods Materials: Radix Codonopsis javanica herbal were provided by Cao Lam Company Limited in Lam Dong province Methods: The quantitative method of polysaccharide in Codonopsis javanica extract was valiated according to ICH The effects of three independent variables (solvent/material ratios, extraction times and ethanol concentration) on dependent variables (the extraction yield, polysaccharid extraction yield and lobetyolin extraction yield) and the optimized extraction process were investigated employing the BCPharSoft OPT software Codonopsis javanica concentration liquid extract were combined maltodextrin (w/w) before spray-drying to improve the yield of spray-dried process Then, Codonopsis javanica extract was produced on a scale of 10 kg of herbals and Inhouse Specification of Codonopsis javanica extract instant tea will be estacilished Investigate the effect excipients: maltodextrin, spray dried lactose, spray dried succrose and excipients mixture on the flowability Then, the formulation of Codonopsis javanica extract instant tea was dertermined Finally, In-house Specification of Codonopsis javanica extract instant tea will be estacilished Results The quantitative method of polysaccharide dertemination Codonopsis javanica extract successfully developed The extraction of Codonopsis javanica was optimized with extraction times, solvent/material ratio and ethanol concentration of the extraction process were found to be 3, 18 and 28%, Codonopsis javanica spray-dried extract contained 15% maltodextrin (w/w) showed improved the yield of spray-dried process Then, Codonopsis javanica extract was produced successfully on a scale of 10 kg of herbals and the avarage of yield of spray-dried process was 44.86% In-house Specification of Codonopsis javanica extract successfully was established Instant tea formulation with 30% Codonopsis javanica extract combined with 70% of the excipient mixture maltodextrin:lactose spray-dried at the ratio 8:2 (w/w) has improved the Hausner ratio and the compression index is at a good level, angle of repose is less than 30o and flowability is 39.02 g/s Finally, In-house Specification of Codonopsis javanica instant tea successfully was established Conclusion Process for preparation Codonopsis javanica spray-dried extract and In-house Specification successfully Codonopsis javanica instant tea formulation and In-house Specification successfully established Key words: Codonopsis javanica, causal relationship, optimization, powder, instant tea MỤC LỤC DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH ix MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 ĐẢNG SÂM VIỆT NAM 1.1.1 Phân bố sinh thái đặc điểm thực vật 1.1.2 Bộ phận dùng, thu hái chế biến .4 1.1.3 Thành phần hóa học 1.1.4 Tác dụng dược lý 1.1.5 Công dụng cách dùng 1.1.6 Tổng quan polysaccharid .7 1.1.7 Tổng quan lobetyolin .7 1.2 CHIẾT XUẤT DƯỢC LIỆU .8 1.2.1 Đại cương chiết xuất dược liệu 1.2.2 Phương pháp chiết hồi lưu nóng .9 1.2.3 Nghiên cứu mối liên quan nhân tối ưu hóa quy trình chiết xuất dược liệu sử dụng phần mềm thông minh 10 1.3 CAO DƯỢC LIỆU 11 1.3.1 Định nghĩa .11 1.3.2 Phương pháp điều chế .12 1.4 CAO KHÔ SẤY PHUN 12 1.4.1 Tổng quan công nghệ sấy phun 12 1.4.2 Ưu nhược điểm công nghệ sấy phun 13 1.4.3 Quá trình sấy phun 13 1.5 TRÀ HÒA TAN .14 1.5.1 Khái niệm 14 1.5.2 Các phương pháp sản xuất trà hòa tan 14 i 1.5.3 Một số chế phẩm trà hòa tan ĐS thị trường 15 1.6 TỔNG QUAN VỀ CÁC TÁ DƯỢC SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU .16 1.6.1 Maltodextrin 16 1.6.2 Lactose sấy phun .16 1.6.3 Sucrose sấy phun 17 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 19 2.1.1 Ngun liệu, dung mơi, hóa chất 19 2.1.2 Dụng cụ, trang thiết bị 19 2.1.3 Phần mềm 20 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.2.1 Kiểm nghiệm nguyên liệu ĐS 21 2.2.2 Xây dựng thẩm định quy trình định lượng polysaccharid dịch chiết ĐS 21 2.2.3 Xây dựng quy trình chiết xuất dược liệu ĐS 24 2.2.4 Xây dựng quy trình điều chế cao ĐS .28 2.2.5 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao ĐS 30 2.2.6 Xây dựng cơng thức trà hịa tan ĐS 31 2.2.7 Xây dựng tiêu chuẩn sở trà hòa tan ĐS .32 CHƯƠNG KẾT QUẢ 34 3.1 KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU ĐS 34 3.2 XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG POLYSACCHARID TRONG DỊCH CHIẾT ĐS 34 3.2.1 Xây dựng quy trình định lượng polysaccharid dịch chiết ĐS 34 3.2.2 Thẩm định quy trình định lượng polysaccharid dịch chiết ĐS 35 3.3 XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT XUẤT DƯỢC LIỆU ĐS .39 3.3.1 Sơ khảo sát số yếu tố ảnh hưởng quy trình chiết xuất dược liệu ĐS 39 3.3.2 Nghiên cứu liên quan nhân tối ưu hóa quy trình chiết xuất dược liệu ĐS 43 i 3.4 XÂY DỰNG QUY TRÌNH SẤY PHUN DỊCH CHIẾT ĐS 50 3.4.1 Chuẩn bị dịch sấy phun ĐS 50 3.4.2 Khảo sát chọn tá dược độn cho dịch sấy phun ĐS 50 3.4.3 Sản xuất cao ĐS quy mô 10 kg dược liệu 54 3.5 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ CAO ĐS 56 3.5.1 Kiểm nghiệm lô cao ĐS .56 3.5.2 Đề xuất tiêu chuẩn sở cao ĐS 60 3.6 XÂY DỰNG CƠNG THỨC TRÀ HỊA TAN ĐS 61 3.6.1 Lưu tính cao ĐS 61 3.6.2 Khảo sát ảnh hưởng tá dược độn lên lưu tính cao ĐS 61 3.6.3 Quy trình sản xuất trà hịa tan ĐS quy mơ 5000 gói 71 3.7 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN CƠ SỞ TRÀ HÒA TAN ĐS 73 3.7.1 Kiểm nghiệm lơ trà hịa tan ĐS .73 3.7.2 Đề xuất tiêu chuẩn sở trà hòa tan ĐS 78 CHƯƠNG BÀN LUẬN 79 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 83 5.1 KẾT LUẬN 83 5.2 KIẾN NGHỊ .83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84 PHỤ LỤC Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-14 Phụ lục Quy trình định lượng polysaccharid trà hịa tan Đảng sâm Quy trình định lượng polysaccharid trà hịa tan Đảng sâm phương pháp UV-Vis Mẫu chuẩn: cân xác khoảng 0,4 mg chuẩn D-glucose vào bình định mức 10 ml, thêm nước cất tới vạch, lắc Mẫu thử: cân xác khoảng 300 mg trà hịa tan Đảng sâm hòa ml ethanol 28% tạo tủa ethanol 96% (tỷ lệ 1:4), ủ qua đêm nhiệt độ oC sau ly tâm với tốc độ 6000 vòng/phút 10 phút, thu tủa hòa tan hoàn toàn tủa với ml nước cất, pha loãng 1000 lần trước tiến hành định lượng polysaccharid phương pháp UV-Vis Tiến hành: 0,5 ml dịch mẫu thử mẫu chuẩn cho phản ứng với 0,5 ml dung dịch phenol 5%, cho thêm 2,5 ml H2SO4 đậm đặc để 30 phút bể điều nhiệt 30 ± oC Tiến hành đo độ hấp thu bước sóng 490 nm Hàm lượng (%) polysaccharid 1,000 g trà hịa tan Đảng sâm tính theo cơng thức: X(%)= At × a × c × × 1000 Ac × b × (1−h) × 100 Trong đó: X : hàm lượng (mg) polysaccharid 1,000 g trà hòa tan Đảng sâm Ac: độ hấp thu mẫu chuẩn At: độ hấp thu mẫu thử a: nồng độ mẫu chuẩn (mg/ml) c: hàm lượng chất chuẩn D-glucose b: khối lượng cân (mg) h: độ ẩm trà hịa tan Đảng sâm Tn thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-15 Phụ lục Quy trình định lượng lobetyolin trà hòa tan Đảng sâm Mẫu thử: cân xác khoảng 1000 mg trà hịa tan Đảng sâm vào ống nghiệm có nắp, thêm xác ml methanol 100 % lắc kỹ, siêu âm 10 phút 30 °C, lắc kỹ sau tiếp tục siêu âm thêm 10 phút 30 °C, lắc Ly tâm với tốc độ 3500 vòng/phút phút, lọc qua màng lọc 0,22 µm Điều kiện sắc ký Máy HPLC Aligent 1260 Infinity II Cột sắc ký Phenomenex Luna, 150 x 4,6 mm, μm Đầu dò UV/DAD Nhiệt độ cột 30 oC Tốc độ dòng ml/phút Thể tích bơm 10 µl Phát bước sóng 215 nm Chương trình pha động định lượng lobetyolin cao Đảng sâm: Pha động Thời gian (phút) ACN (%) H2O (%) – 10 25 75 10,1 – 15 25 75 15,1 – 20 80 20 20,1 – 30 25 75 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-16 Phụ lục Tiêu chuẩn sở trà hòa tan Đảng sâm TIÊU CHUẨN THÀNH PHẨM SỞ Y TẾ TRÀ HỊA TAN ĐẢNG SÂM CƠNG TY Bộ phận: Trang: Tiêu chuẩn: TCCS Mã số: Có hiệu lực từ: Ban hành theo định số… ngày … tháng … năm … A TIÊU CHUẨN CHẤT LƯỢNG Cảm quan: bột mịn, đồng nhất, màu vàng nâu, mùi dược liệu đặc trưng Độ ẩm: không 9% Độ đồng khối lượng: chênh lệch không q 7,5% Độ tro tồn phần: khơng q 6% Tro không tan acid: không 0,5% Giới hạn nhiễm khuẩn - Tổng số vi sinh vật hiếu khí: khơng q 107 CFU/g - Tổng số nấm men – mốc: không 105 CFU/g - Tổng số vi khuẩn gram âm dung nạp mật: không 102 CFU/ml - Escherichia coli, Staphylococcus aureus: khơng có g - Salmonella: Khơng có 10 g Giới hạn kim loại nặng: - Hàm lượng chì: khơng q 2,0 mg/kg (LOD = 0,03 mg/kg) - Hàm lượng asen: không 1,0 mg/kg (LOD = 0,01 mg/kg) - Không phát kim loại thủy ngân (LOD = 0,015 mg/kg) Dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật: khơng phát thuốc bảo vệ thực vật họ clor, phospho, carbamat (LOD = 0,02 mg/kg), họ cúc (LOD = 0,1 mg/kg) Định tính: sắc ký đồ SKLM trà hịa tan Đảng sâm có vết màu giá trị Rf với vết tương ứng với chuẩn lobetyolin 10 Định lượng: - Hàm lượng polysaccharie khơng 20% g trà hòa tan Đảng sâm - Hàm lượng lobetyolin khơng 0,015% g trà hòa tan Đảng sâm Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-17 B QUY TRÌNH PHÂN TÍCH Cảm quan: kiểm tra cảm quan (thể chất, màu sắc, mùi ), trà hòa tan Đảng sâm phải đạt yêu cầu nêu Độ ẩm: tiến hành theo DĐVN V, phụ lục 9.6, trang PL-203 Độ đồng khối lượng: tiến hành theo DĐVN V, phụ lục 9.8, trang PL-204 Độ tro toàn phần: tiến hành theo DĐVN V, phụ lục 9.8, trang PL-204 Tro không tan acid: tiến hành theo DĐVN V, phụ lục 9.7, trang PL-203 Giới hạn nhiễm khuẩn: tiến hành theo DĐVN V, phụ lục 13.6, trang PL- 300 Giới hạn kim loại nặng: - Kim loại chì: tiến hành theo OAOC (999.11) - Kim loại asen: tiến hành theo TCVN 8427:2010 - Kim loại thủy ngân: tiến hành theo OAOC (971.21) Dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật: tiến hành theo DĐVN V, phụ lục 12.17, trang PL-280 Định tính Thực theo phương pháp định tính sắc khí lớp mỏng - Bản mỏng: silica gel GF254 – Merck - Dung môi khai triển: CH3Cl – MeOH – H2O (65:35:10, lớp dưới) - Dung dịch thử: cân g trà hòa tan Đảng sâm, thêm ml nước cất, siêu âm 10 phút, thêm ml ethyl acetate (TT), ly tâm với tốc độ 3500 vòng/phút phút Gạn lấy dịch chiết lớp cô cách thủy đến cắn, hòa vào 0,2 ml methanol (TT) làm dung dịch thử - Dung dịch đối chiếu: hòa tan mg chuẩn lobetyolin methanol 100 % bình định mức 10 ml để dung dịch có nồng độ 0,1 mg/ml Tiến hành: chấm riêng biệt lên mỏng 10 µl dung dịch thử dung dịch đối chiếu Phát hiện: quan sát đèn UV 254 nm phun dung dịch H2SO4 10%/EtOH, sấy mỏng 105 oC đến phát màu, quan sát ánh sáng thường Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-18 Yêu cầu: sắc ký đồ dung dịch thử phải có hai vết màu giá trị Rf với hai vết chuẩn sắc ký đồ dung dịch đối chiếu 10 Định lượng - Định lượng polysacharide Mẫu chuẩn: cân xác khoảng 0,4 mg chuẩn D-glucose vào bình định mức 10 ml, thêm nước cất tới vạch, lắc Mẫu thử: cân xác khoảng 300 mg trà hịa tan Đảng sâm hòa ml ethanol 28% tạo tủa ethanol 96 % (tỷ lệ 1:4), ủ qua đêm nhiệt độ 4oC sau ly tâm với tốc độ 6000 vòng/phút 10 phút, thu tủa hòa tan tủa với ml nước cất, pha loãng 1000 lần trước tiến hành định lượng polysaccharid phương pháp UV-Vis Tiến hành: 0,5 ml dịch mẫu thử mẫu chuẩn cho phản ứng với 0,5 ml dung dịch phenol 5%, cho thêm 2,5 ml H2SO4 đậm đặc để 30 phút bể điều nhiệt 30 ± 1oC Tiến hành đo độ hấp thu bước sóng 490 nm Hàm lượng (%) polysaccharid 1,000 g trà hòa tan Đảng sâm tính theo cơng thức: X(%)= At x a x c x x 1000 Ac x b x (1−h) Trong đó: X : hàm lượng (mg) polysaccharid 1,000 g trà hòa tan Đảng sâm Ac: độ hấp thu mẫu chuẩn At: độ hấp thu mẫu thử a: nồng độ mẫu chuẩn (mg/ml) c: hàm lượng chất chuẩn D-Glucose b: khối lượng cân (mg) h: độ ẩm trà hòa tan Đảng sâm - Định lượng lobetyolin Mẫu chuẩn: cân chuẩn lobetyolin bình định mức, hòa tan methanol 100% (TT) để thu dung dịch có nồng độ xác khoảng 125 µg/ml, lọc qua màng lọc 0,22 µm Mẫu thử: cân xác khoảng 1000 mg trà hòa tan Đảng sâm vào ống nghiệm có nắp, thêm xác ml methanol 100 % (TT) lắc kỹ, siêu âm 10 phút 30 °C, Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PL-19 lắc kỹ sau tiếp tục siêu âm thêm 10 phút 30 °C, lắc Ly tâm với tốc độ 3500 vòng/phút phút, lọc qua màng lọc 0,22 µm Hàm lượng (mg) lobetyolin 1,000 g trà hòa tan Đảng sâm xác định theo cơng thức: Y (%) = St × a × c × × 100 Sc × b (1 − h) Trong đó: Y : hàm lượng (mg) lobetyolin 1,000 g trà hòa tan Đảng sâm Sc: diện tính đỉnh mẫu chuẩn St: diện tích đỉnh mẫu thử a: nồng độ mẫu chuẩn lobetyolin (mg/ml) c: hàm lượng chất chuẩn lobetyolin b: khối lượng cân (mg) h: độ ẩm cao C ĐÓNG GÓI – GHI NHÃN – BẢO QUẢN Đóng gói: đóng gói 2g bao bì kín Ghi nhãn: nhãn rõ ràng, qui chế Bảo quản: nơi khơ ráo, thống mát, tránh ánh nắng ., ngày tháng năm ` Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn