ề cương thi trắc nghiệm sinh sản 1 1 FSH được tiết ra từ tuyến nội tiết nào? Thùy trước tuyến yên 2 GnRH được tiết ra từ đâu? Vùng dưới đồi 3 LH được tiết ra từ đâu? Thùy trước tuyến yên 4 FSH.ề cương thi trắc nghiệm sinh sản 1 1 FSH được tiết ra từ tuyến nội tiết nào? Thùy trước tuyến yên 2 GnRH được tiết ra từ đâu? Vùng dưới đồi 3 LH được tiết ra từ đâu? Thùy trước tuyến yên 4 FSH.
PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 ĐỀ CƯƠNG ÔN THI HẾT HỌC PHẦN MÔN: Sinh sản gia súc 1 Cơ chế sinh lý điều tiết trình sinh sản gia súc? - Sinh sản hữu tính chịu tác động thần kinh, thể dịch, dinh dưỡng, môi trường Con người tác động vào khâu để điều khiển sinh sản Tín hiệu ngoại cảnh ( màu sắc, tiếng kêu, mùi vị) Cơ quan cảm thụ ( mắt, mũi, tai ) Bán cầu đại não( chọn lựa) Vùng đồi Thùy trước tuyến yên Thần kinh thực vật Thể dịch Cơ quan sinh dục Phản xạ sinh dục Hưng phấn cao độ Kết sinh dục Thần kinh động vật PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Các kiểu hình thần kinh gia súc? Ý nghĩa sinh sản? a Khái niệm - Kiểu hình thần kinh tổng hợp đặc điểm trình hưng phấn, ức chế mà động vật thừa kế thu trình sống - Đặc trưng kiểu hình thần kinh gắn liền tốc độ thành lập, cường độ tính ổn định phản xạ phản xạ có điều kiện, tính khẩn trương ức chế ngồi ức chế tốc độ trình lan tỏa tập trung b Các kiểu hình thần kinh Trên sở đặc tính Pavlov chia bốn kiểu hình hoạt động thần kinh cấp cao gồm - Kiểu hình mạnh, khơng cân bằng, thiếu kiềm chế Gia súc mang kiểu hình có hưng phấn, định hướng mạnh, nhanh Nhanh thành lập phản xạ có điều kiện phản xạ có điều kiện trì lâu dài, phản xạ ức chế khó thành lập - Kiểu hình thần kinh mạnh, cân bằng, linh hoạt Dễ lập phản xạ có điều kiện, trì lâu, dài Sự chuyển đổi hưng phấn, ức chế thực cách dễ dàng Phản ứng với tác động mơi trường cách bình tĩnh, linh hoạt - Kiểu hình thần kinh mạnh, cân bằng, ì Khó thành lập phản xạ có điều kiện thành lập trì lâu dài Quá trình chuyển đổi hưng phấn, ức chế thực cách chậm chạp - Kiểu hình thần kinh yếu, trình hưng phấn, ức chế thể yếu Khó thành lập phản xạ có điều kiện Phản ứng định hướng xuất chậm, tương đối khó c Ý nghĩa sinh sản - Trong chăn nuôi Chọn gia súc sinh sản có thần kinh mạnh, khơng cân bằng, thiếu kiềm chế gia súc có thần kinh mạnh, cân bằng, linh hoạt PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Chọn gia súc lấy thịt : chọn gia súc có thần kinh mạnh, cân bằng, ì chọn gia súc có thần kinh yếu, trình hưng phấn, ức chế yếu Chu kỳ sinh dục gia súc? Nêu đặc điểm chu kỳ sinh dục trâu, bò, dê, cừu , ngựa lợn? a Chu kì sinh dục gia súc - Là trình sinh lý phức tạp sau toàn thể phát triển hồn hảo, quan sinh dục khơng có bào thai, trình bệnh lý bên buồng trứng có q trình nõa bao thành thục Trứng chin thải trứng đồng thời quan sinh dục có biến đổi biến đổi lặp lặp lại gọi chu kì sinh dục b Đặc điểm chu kì sinh dục trâu, bò, dê, cừu, ngựa lợn Trâu - Trâu tương tự bò, động dục ẩn Bò - CKSD 19-24 ngày, xuất sau đẻ 21-28 ngày thường gặp thưc tế tháng Thời gian động dục cao độ 3-36h thường 15-20h Thời gian rụng trứng 15-16h sau động dục Dê, cừu - Dê CKSD 16-17 ngày, Cừu CKSD 18-21 ngày, thời gian xuất chu kì sinh dục sau đẻ trứng 15-30 ngày, thời gian động dục cao độ 2-48h, trung bình 24-36h, thời gian rụng trứng ngày sau bắt đầu động dục Lợn - CKSD 21 ngày, thời gian động dục lại lợn liên quan thời gian sau cho bú thường sau cai sữa 3-5 ngày, thời gian động dục cao độ 24-72h , thời gian rụng trứng thường ngày thứ kể từ bắt đầu động dục Ngựa - CKSD 20-21 ngày, thời gian động dục cao độ 2-10 ngày thường 4-10 ngày Thời gian rụng chứng 1-2h PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Giải phẫu quan sinh dục gia súc đực? a Dịch hoàn (Testis) Dịch hồn (hay cịn gọi tinh hồn) tuyến, vừa tuyến ngoại tiết tức sinh tinh trùng, vừa có chức nội tiết hay sinh hormone – testosterone, có tác dụng làm phát triển đặc điểm giới tính Cấu tạo: - Dịch hồn bao bọc bên lớp sợi bền gọi giáp mạc riêng, phúc mạc kéo dài đến hình thành Phía lớp giáp mạc riêng tổ chức liên kết hình màng mỏng gọi màng trắng, lớp màng trắng sâu vào chia dịch hoàn thành nhiều múi Mỗi múi lại chứa ống sinh tinh uốn khúc, tinh trùng hình thành bên ống sinh tinh Tất ống sinh tinh vào vách dịch hoàn tạo thành ống tinh thẳng, đồng thời ống tinh thẳng đan chéo với tạo thành mạng tinh b Phụ dịch hồn (Epididymis) Phụ dịch hồn hay cịn gọi mào tinh – kho để dự trữ tinh trùng Phụ dịch hoàn mạng tinh chạy khoảng 12 - 15 ống tinh Mỗi ống nằm ngăn quan gắn vào cực bờ sau tinh hoàn gọi mào tinh Mỗi ống tinh mào tinh ống uốn khúc Tất ống đổ vào ống xuất chung, uốn khúc gọi ống mào tinh (ductus epididymidis) Ống hướng từ chõm xuống mào tinh khỏi quan thành ống - ống dẫn tinh (ductus deferens) Trong phụ dịch hồn có pH 6,2 – 6,8, đồng thời nhiệt độ thấp thân nhiệt Chính điều kiện làm cho tinh trùng hoạt động sống lâu phụ dịch hồn Tinh trùng có khả sống phụ dịch hoàn từ – tháng PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 c Các tuyến sinh dục phụ Tuyến củ hành (tuyến Cowper) - Tuyến củ hành to táo, nằm đoạn cuối phần niệu đạo xoang chậu, vòng cung ngồi Cấu tạo có củ hổng co bóp tuyến Thân tuyến to nhỏ khơng giống Chó khơng có tuyến - Tuyến củ hành tiết thứ dịch suốt, có mùi đặc biệt có mơi trường pH trung tính Tác dụng chủ yếu dịch làm trơn niệu đạo, rửa niệu đạo trước phóng tinh Tuyến tiền liệt - Tất động vật đực có tuyến tiền liệt, nằm chỗ khởi đầu niệu đạo phần cuối ống dẫn tinh Ở số động vật tuyến không phát triển mà tuyến mỏng rải rác thành niệu đạo bị, lợn Nhưng chó ngựa tuyến lại phát triển Tuyến tiền liệt có nhiều lỗ đổ vào niệu đạo, dịch tiết tuyến khơng suốt, có tính kiềm, có tác dụng trung hòa độ axit lòng niệu đạo axit H2CO3 tinh trùng sinh Thể tích tuyến thay đổi theo tuổi, gia súc non tuyến nhỏ, gia súc trưởng thành to sau teo gia súc già Tuyến tinh nang (nang tuyến) - Nang tuyến túi rỗng nơi dự trữ tinh trùng, nhiên số lồi lợn, bị nang tuyến khơng hình túi chó không phát triển Nang tuyến tiết chất keo màu trắng vàng, qua ống phóng tinh đổ vào đường niệu sinh dục Chất keo gặp chất tiết tuyến tiền liệt tiết ngưng đặc lại để đậy nút cổ tử cung sau giao phối không cho tinh dịch chảy ngược Ngoài chất tiết cung cấp dinh dưỡng tăng cường hoạt lực tinh trùng chất tiết có chứa nhiều glucose acid béo - Nang tuyến hai tuyến hình trứng, màu vàng nhạt, mặt ngồi nhiều u, nằm xoang chậu, bọng đái ống dẫn tinh PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Hình thái, cấu tạo, giải phẫu tinh trùng gia súc? a Đặc điểm hình thái chung - Dạng nịng nọc - Đầu bầu dục, nhìn thẳng hình trứng phần to phía Phù hợp cho việc tiến thẳng tinh trùng Tinh trùng loài có hình thái ổn định, đặc trưng cho lồi b Đặc điểm cấu tạo, giải phẫu tế bào tinh trùng - Thành phần hóa học : 75% thể tinh trùng nước 25% VCK( 85% Protein; 13,2% Lipit 1,8% khống) - Ngồi màng Lipoprotein( màng bán thấm) dày 80-120 Atrong Chức màng : định hình trao đổi chất tế bào tinh trùng tế bào tinh trùng gồm đầu, thân, - Đầu gồm có hệ thống Arosom + nhân Acrosom chứa men hyaluronidaza phá vỡ màng phóng xạ tế bào trứng, men khơng có tính đặc trưng cho lồi Sự ngun vẹn hệ thống Acrosom định trình thụ tinh Nhân chiếm gần hết phần đầu 76,7% 80,3% Nhân có chất Nucleoprotein ( Histidin, Acidnucleic, nối) Nối vs = NH2 cầu nối dễ đứt thay đổi nhiệt độ, atm, rung động, sóc lắc Cầu đứt tinh trùng chết Trong khâu kiểm tra , xử lý tinh dịch phải ý Là sở kiểm tra sức kháng tế bào tinh trùng - Phần cổ - thân Chủ yếu chứa NSC tinh trùng Ngồi cịn chứa ti thể, tế bào sắc tố Dự trữ ATP, Lipoid chống lạnh (plasmalogen) Tiếp nối với phần đầu cách lỏng lẻo dễ đứt chịu tác động rung động sóc lắc PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 - Phần đuôi gồm phần : giữa, chính, phụ Đoạn tiếp giáp với cổ thân Cấu trúc sợi trục, xếp theo vòng tròn đồng tâm có sợi trục trung tâm, phía cuối xếp thưa cuối tơ đuôi ( đuôi phụ) Chức : giúp tinh trùng vận động tiến thẳng, sống đường sinh dục gia súc Sự nguyên vẹn đuôi định khả thụ thai tế bào tinh trùng kì hình khơng có khả thụ thai Q trình trao đổi chất tinh trùng? - Hai trình trao đổi chất tinh trùng: Quá trình đường phân (Fructolis): diễn điều kiện yếm khí (Anaerobios) Q trình hơ hấp (hay QT oxy hóa): diễn có mặt oxy (ưa khí – Aerobios) a Quá trình đường phân - Là trình tinh trùng sử dụng đường Fructozo điều kiện ko có Oxi C6H12O6 2C3H4O3( acid lactic) + Q1( 60 Kcal) b Q trình hơ hấp - Là q trình tinh trùng sử dụng đường Fructozo điều kiện có Oxy C6H12O6 +6O2 6CO2 + 6H2O + Q2 ( 670 Kcal) Q1, Q2 dự trữ dạng ATP cổ, thân tế bào tinh trùng, không sử dụng trực tiếp Khi cần sử dụng cần cắt mạch cao Q1 + Q2 ATP ATP ADP + Q3 ADP AMP + Q4 PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Nhờ protein Spartein đuôi : Q3, Q4 chuyển sợi đuôi co rút tinh trùng có khả vận động Các đặc tính tinh trùng? a Đặc điểm vận động - Tinh trùng tế bào thể có khả vận động ngồi thể sống Sự vận động nhờ cổ, thân, địi hỏi có lượng - Các phương thức vận động : tiến thẳng, xoay vòng, lắc lư Tiến thẳng : vecto chuyển động khơng thay đổi Xoay vịng : vecto chuyển động thay đổi Lắc lư : khơng có vecto chuyển động - Tinh trùng có khả tiến thẳng có khả thụ tinh Chỉ tiêu đánh giá hoạt lực tinh trùng =0,7 b Đặc tính lội ngược dịng - Nhờ đuôi tinh trùng cong chữ S với dịch đường sinh dục tiết chạy xuôi tác động vào điểm đầu, cổ, đuôi tinh trùng Giúp tế bào tinh trùng vận động ngược dòng tiến lên đường sinh dục gặp tế bào trứng c Đặc điểm tích điện - Tinh trùng tích điện (+) trứng tích điện (-) chúng hút d Đặc tính ưa lạ - Tinh trùng có đặc tính bu xung quanh vật lạ Khi vào ống dẫn trứng, gặp tế bào trứng tinh trùng bao vây lấy tế bào trứng tìm nơi lõm tế bào trứng chui vào e Đặc điểm trí, nhường nhịn, đồn kết, dũng cảm, dám hy sinh - Các tinh trùng đau đích mà không trở lẫ bao vây tế bào trứng bọc xoang Acrosom giải phóng men Hyaluronidaza để phá vỡ màng phóng xạ, cuối có tinh trùng khỏe kết hợp với tế PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 bào trứng Còn lại tất tinh trùng lại chết tạo chất dinh dưỡng nuôi dưỡng hợp tử - Sinh đôi trứng hợp tử nhân tách - Sinh đôi khác trứng hợp tử cá thể khác Giải phẫu quan sinh dục gia súc cái? a Bộ phận sinh dục bên ngồi 1.Âm mơn (âm hộ - vulva) Nằm bên hậu mơn, phía ngồi có hai mơi, nối liền hai môi hai mép Trên hai môi âm mơn có sắc tố đen nhiều tuyến tiết gồm tuyến tiết chất nhờn trắng tuyến tiết mồ hôi Âm vật (Clitoris) Âm vật giống dương vật thu nhỏ lại, cấu tạo âm vật hổng đực Trên âm vật có nếp da tạo mu âm vật, âm vật bẻ gấp xuống Tiền đình Tiền đình giới hạn âm mơn âm đạo, nghĩa qua tiền đình vào âm đạo Trong tiền đình có màng trinh, phía trước màng trinh âm mơn, phía sau màng trinh âm đạo, màng trinh có sợi đàn hồi hai niêm mạc gấp thành nếp Sau màng trinh có lỗ niệu đạo Tiền đình có số tuyến, tuyến xếp theo hàng chéo, hướng quay âm vật b Bộ phận sinh dục bên Âm đạo (Vagina) Trước âm đạo cổ tử cung, phía sau tiền đình có màng trinh che lỗ âm đạo Âm đạo ống tròn để chứa quan sinh dục đực (dương vật) giao phối, đồng thời phận cho thai ngồi q trình sinh đẻ - Cấu tạo: Gồm lớp - Lớp liên kết - Lớp trơn giữa: Cơ dọc bên ngồi, vịng bên Các lớp âm đạo liên kết với cổ tử cung - Lớp niêm mạc cùng: niêm mạc âm đạo có nhiều tế bào thượng bì, niêm mạc gấp nếp dọc Chiều dài âm đạo: - Ngựa: 15 – 20 cm - Bò: 22 – 25 cm - Lợn: 10 – 12 cm - Dê – Cừu: – 10 cm Tử cung (Uterus) PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh - - - - TYD-K55 Tử cung nơi đảm bảo cho phát triển dinh dượng bào thai, đồng thời cịn làm nhiệm vụ đẩy thai ngồi trình sinh đẻ nhờ vào lớp trơn thành tử cung Tử cung loài động vật có vú gồm số loại sau: Tử cung kép (Uterus duplex): gồm hai sưng tử cung trái phải, bên có cổ tử cung Hai cổ tử cung thơng với âm đạo Ví dụ: Tử cung voi Tử cung phân nhánh (Uterus bipartitus): Tử cung phân làm hai nhánh, có cổ tử cung thơng với âm đạo Ví dụ: Lồi gậm nhấm, Lợn, Lồi ăn thịt Tử cung hai sừng (Uterus bicorius): tử cung có thân hai sừng, cổ tử cung Ví dụ: Bị, ngựa, chó Tử cung đơn (Uterus simple): Tử cung không phân biệt sừng tử cung, thân tử cung, trơng giống lê Ví dụ: Linh trưởng người Cấu tạo: Gồm lớp Lớp lớp màng liên kết sợi mỏng Giữa lớp trơn: Đây lớp dày khỏe thể, có cấu tạo phức tạp Bên khung liên kết với nhiều sợi đàn hồi có nhiều mạch máu, đặc biệt tĩnh mạch lớn Ngồi ra, bó sợi trơn đan vào theo hướng làm cho tử cung vừa dày, vừa Bên lớp niêm mạc (endometrium) màu hồng, phủ lên tầng tế bào biểu mơ hình trụ xen với tuyến tiết chất nhầy, nhiều tế bào biểu mô lại kéo dài thành lơng nhung Khi lơng rung động gạt chất nhày tiết phía cổ tử cung Tử cung gia súc gồm phần: Cổ tử cung: thông với âm đạo Thân tử cung Sừng tử cung: thông với ống dẫn trứng Vị trí tử cung nằm xoang chậu, trực tràng, bàng quang Tử cung nằm ổn định chỗ nhờ: - Sự bám âm đạo vào cổ tử cung - Dây chằng – dây chằng nếp phúc mạc tạo thành: + Dây chằng rộng: nếp phúc mạc trùm lên tử cung mặt trên, mặt kéo dài đến hai thành chậu hông Dây chằng rộng hai phúc mạc, nên quan trọng có nhiều mạch quản, dây thần kinh + Dây chằng tròn: Là dây chằng nhỏ từ sừng tử cung đến vùng bẹn, có nhiều mạch quản trơn Buồng trứng (Ovarium) Là tuyến sinh dục cái, gồm đôi treo cạnh trước dây chằng rộng nằm xoang chậu Chức buồng trứng: nuôi dưỡng trứng cho trứng chín tiết hormone sinh dục Cấu tạo: Bên lớp màng liên kết sợi Bên chia làm hai miền: miền vỏ miền tủy + Miền tủy: mạch máu nhiều tổ chức mô xốp dày + Miền vỏ: có tác dụng sinh dục xảy q trình trứng chín rụng PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 c Môi trường pha chế - bảo tồn tinh dịch nhiệt độ phịng thí nghiệm (20 20C) Trước đây, để giữ tinh trùng sống nhiệt độ 20 20C người ta ứng dụng môi trường IVT cho tinh dịch bị, lợn Cơng thức mơi trường IVT cho tinh dịch bò: + Dung dịch A: Nước cất 100 ml Natri xitrat 2g Natri bicarbonat 0,21 g KCl 0,042 g Glucose 0,3 g Sulfanilamid 0,3 g + Dung dịch B (môi trường IVT): Dung dịch A 70 ml Lòng đỏ trứng 30 ml PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Penicillin 50.000 UI Streptomycine 50 mg + Bão hòa CO2 (cho chạy CO2 30 phút) Để giữ tinh dịch lợn 20 20C dùng cơng thức mơi trường LX2, LX8, T1L3 khơng cần bổ sung lịng đỏ trứng d Môi trường đông lạnh tinh dịch * Cho tinh dịch bò - MT cho sản xuất tinh viên: * MT Lactose: Nước cất lần 100ml Lactose 11,5 g Lòng đỏ trứng 20 ml Glyxerin ml Sulfanilamid 0,1-0,2g Penicillin 75.000-95.000 UI Streptomycine 75.000-95.000 UI * Môi trường Glycocol: Nước cất lần 100 ml Lactose 6g Glycocol 0, g Natri xitrat 5H2O 1,7 g Lòng đỏ trứng 20ml Glyxerin ml Tetracyclin 5.000 UI - Môi trường Glucose cho sản xuất tinh Ampul: + Dung dịch I: Nước cất lần 100 ml Glucose 3g Natri xitrat 1,4 g PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Lòng đỏ trứng 15- 20ml Tetracyclin 7.500 UI + Dung dịch II: Nước cất lần 100 ml Glucose 5g Natri xitrat 2,4 g Lòng đỏ trứng 15ml Glyxerin 18,4 ml e Cho tinh dịch lợn Có thể dùng mơi trường phối hợp sẵn IMV (Pháp) Laicifort bổ sung thêm chất chống lạnh lòng đỏ trứng gà + glyxerin kháng sinh Hoặc dùng MT Baier: Nước cất lần 66ml Lòng đỏ trứng 25ml Glyxerin 9ml Glucose 3,5 g Một số lưu ý pha loãng tinh dịch để tránh gây ảnh hưởng xấu đến sức sống tinh trùng: - Nhiệt độ môi trường phải tương đương nhiệt độ tinh dịch Có thể dùng giải pháp cân nhiệt độ chậu thủy tinh đựng nước nhiệt độ 35-360 C - phút - Khi pha loãng, phải đổ từ từ theo thành bình mơi trường vào tinh dịch theo tỷ lệ thích hợp Dùng đũa thủy tinh đảo đều, nhẹ nhàng từ vào trong, từ lên nhẹ nhàng rót tinh pha từ lọ sang lọ khác – lần - Pha xong, phải kiểm tra lại A Yêu cầu A không đổi 0,1 20 Hãy nêu phương pháp bảo tồn tinh dịch gia súc? Hiện nay, tinh dịch bảo tồn hai phương thức: PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh - Dạng lỏng - Dạng đông lạnh TYD-K55 a Bảo tồn dạng lỏng Có hai khoảng nhiệt độ bảo quản: - Nhiệt độ thấp thích hợp - Nhiệt độ phịng thí nghiệm: 20 20C Bảo tồn tinh dịch dạng lỏng nhiệt độ thấp thích hợp Nhiệt độ bảo tồn với tinh dịch lợn 6-100C, Tinh dịch bò: -14 - 200C; tinh dịch cừu -100C,… Ở nhiệt độ tinh trùng giảm nhiều trình trao đổi chất vận động, tinh trùng chưa rơi vào tình trạng “thủy tinh” hóa plasma Tuy nhiên, để chống lạnh cho tinh trùng cần bổ sung vào mơi trường chất chống lạnh lịng đỏ trứng hay glyxerin có chế độ giảm nhiệt thích hợp Bảo tồn tinh dịch dạng lỏng nhiệt độ IVT (20 20C) - Với tinh dịch lợn dùng mơi trường T1L3, T1L4 khơng cho lòng đỏ trứng - Với tinh dịch bò, lợn pha mơi trường IVT bão hịa CO2 b Đông lạnh tinh dịch Ngày nay, với kỹ thuật đơng lạnh tinh dịch kéo dài thời gian sống tinh trùng thể tới hàng chục năm mà giữ khả thụ tinh Người ta thường bảo tồn tinh dịch dạng đơng lạnh bị, dê, cừu Tinh dịch ngựa, lợn cịn hạn chế Trước bảo tồn tinh dịch qua lần pha loãng mơi trường có chứa chất chống lạnh cho tinh trùng lịng đỏ trứng glyxerin, sau tinh dịch pha loãng phân liều Tinh dịch bảo quản đơng lạnh theo hình thức: tinh viên, tinh ampul tinh cọng rạ Tuy nhiên, ngày chủ yếu sử dụng tinh đông lạnh dạng cọng rạ PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Sau tinh phân liều, đến q trình đơng lạnh máy đơng lạnh tinh dịch theo chương trình cài đặt Hiện nay, nước ta áp dụng đông lạnh tinh dịch dạng cọng rạ theo quy trình Nhật Bản Tinh dịch đưa từ 40C xuống -1650C thời gian 15 phút Rồi sau đưa cọng rạ vào nitơ lỏng nhiệt độ -1960C để bảo quản - Kiểm tra Sau đông lạnh 24h lấy ngẫu nhiên viên tinh, ampul, cọng rạ kiểm tra độ giảm hoạt lực sau đông lạnh Nếu A đạt từ 0,3 – 0,6 tinh bảo tồn lâu dài 21 Các phương pháp xác định thời điểm dẫn tinh thích hợp gia súc? a Phương pháp xác định thời điểm dẫn tinh - Có nhiều phương pháp Phương pháp lâm sàng Phương pháp sinh vật Phương pháp thời gian Phương pháp sờ khám buồng trứng qua trực tràng Phương pháp dùng máy ostrogen metter Phương pháp kết tinh cành dương sỉ niêm dịch cổ tử cung Phương pháp nhiệt độ Phương pháp lâm sàng - Dựa vào biểu lâm sàng cục quan dinh dục toàn thân - Toàn thân : thời gian đầu vật tăng cường hoạt động sau giảm dần giai đoạn mê - Cục : giai đoạn mê ì, quan sinh dục giảm xung huyết, lượng dịch tiết giảm tăng độ dính, ban đầu âm hộ xung huyết, tăng sinh, tiết nhiều dịch Phương pháp sinh vật - Dùng đực thí tình phát động dục Phương pháp thời gian - Trên sở kinh nghiệm lâu năm thời gian thích hợp phối VD : + lợn nội : cuối ngày thứ đầu ngày thứ PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 + lợn ngoại : cuối ngày thứ đầu ngày thứ + bò : cuối ngày thứ đầu ngày thứ + chó : ngày thứ 11-12 Phương pháp sờ khám buồng trứng qua trực tràng Phương pháp dùng để phát nang trứng chín rõ bề mặt buồng trứng thời gian dẫn tinh Chỉ áp dụng với đại gia súc Kĩ thuật ko cao vỡ nang trứng chu kì gia súc Phương pháp dùng máy oestrogen metter Đo độ dẫn điện niêm mạc cuối âm đạo Khi niêm mạc cuối âm đạo có độ dẫn điện cao nhất, điện trở thống dùng ơm để xác định thời gian dẫn tín hiệu qua Phương pháp kết tinh cành dương sỉ niêm dịch cổ tử cung - Khi chịu đực đo nồng độ Na+, K+ tăng cao chúng làm kết tinh protein niêm dịch cổ tử cung dùng kính hiển vi để quan sát kết tinh theo cành dương sỉ niêm dịch cổ tử cung Phương pháp đo nhiệt độ - Lúc rụng trứng thân nhiệt tăng cao 0,3- 0,5 độ Để xác định xác thời gian dẫn tinh cần kết hợp nhiều phương pháp 22 Liều phối số lượng tinh trùng liều phối? a Liều phối - Yêu cầu kỹ thuật liều phối cho vừa phải chứa đựng đủ số lượng tinh trùng cần thiết để thụ thai tốt cho cái, vừa phải có tác dụng kích thích nhu động tử cung Lợn: - Theo Polge, dung lượng tinh có quan hệ chặt chẽ tới tỷ lệ thụ thai - Theo Milovanov dung lượng tinh phải tăng theo khối lượng theo ơng lượng thích hợp 1ml/kgP Tuy nhiên, giới áp dụng PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 lượng tinh 0,4-0,6 ml/kgP Ở Việt Nam, dung lượng cho lợn nội 30ml; lợn lai 60ml; lợn ngoại 100 ml/liều Trâu, bò: - Theo Olds, dung lượng liều tinh không quan hệ chặt chẽ với tỷ lệ thụ thai - Hiện nay, hay sử dụng liều phối cho bò 0,25ml (tinh cọng rạ) b Số lượng tinh trùng liều phối - Theo Milovanov quan hệ tỷ lệ thụ thai số lượng tinh trùng liều phối tỷ lệ thuận - Hiện nay, lượng tinh trùng liều cho Lợn nội 0,5-1 tỷ; Lợn lai 1-1,5 tỷ; Lợn ngoại 2-3 tỷ Cho bò: 15 – 20 triệu tinh trùng/liều 23 Phương pháp dẫn tinh cho trâu, bò lợn? a Ý nghĩa - Là khâu cuối công tác thụ tinh nhân tạo, định tới hiệu trình thụ tinh nhân tạo Việc nâng cao kĩ thuật thụ tinh vừa mục đích vừa động lực thụ tinh nhân tạo - Dẫn tinh trình người dùng dụng cụ chuyên dụng thích hợp để đưa tinh dịch vào đường sinh dục động dục điều kiện thích hợp b Các bước dẫn tinh - B1 : xác định thời điểm dẫn tinh - B2 : chuẩn bị dụng cụ gia súc - B3 : dẫn tinh - B4 : vệ sinh, ghi chép sổ sách Dẫn tinh cho trâu, bò 1.1 Động dục *Chu kỳ sinh dục trâu bị trung bình 21 ngày, biến động 18- 26 ngày *Thời gian động dục: 18-36 giờ, biến động 12 – 48 * Xác định thời điểm phối thích hợp: PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 - Phương pháp lâm sàng sinh vật: Con vật chịu đực, lúc niêm dịch đặc hơn, dính, kéo dài 20cm mà không đứt - Thời gian: Cuối ngày thứ nhất, đầu ngày thứ hai - Có thể áp dụng quy luật sáng- chiều Nghĩa sáng quan sát thấy động dục, chiều phối Chiều quan sát - động dục sáng hơm sau phối nên phối lần: sáng + chiều Phương pháp dẫn tinh - Hiện nay, Việt Nam toàn giới chủ yếu sử dụng phương pháp cố định cổ tử cung qua trực tràng - Phương pháp đạt tỷ lệ thụ thai cao đưa tinh dịch trực tiếp vào thân tử cung - Có thể sử dụng dụng cụ bơm tinh: Ống bơm tinh nhựa súng bắn tinh inox Ống bơm tinh nhựa sử dụng cho tinh lỏng, tinh viên (sau giải đông 1ml nước sinh lý), tinh ampul (đã giải đơng) Cịn súng bắn tinh inox dùng cho tinh cọng rạ - Ngồi cịn dùng găng tay sản khoa nhựa PE *Phương pháp dẫn tinh cố định cổ tử cung qua trực tràng: - Chuẩn bị: + Cố định vào giá cố định, moi phân trực tràng ra, xem xét thêm niêm dịch, niêm mạc âm đạo, cổ tử cung, vệ sinh + Giải đơng tinh dịch: • Với tinh viên: Bẻ ống nước muối sinh lý, mở lắp bình tinh, nâng cóng đựng tinh lên ngang miệng bình, gắp viên tinh thả vào ống nước muối sinh lý, hạ cóng tinh, đậy bình tinh lại Trộn viên tinh tan cách dùng ống bơm tinh đảo nhẹ Hút tinh vào ống bơm, ngậm ống bơm tinh ngang mồm, đeo găng tay PE vào • Với tinh cọng rạ: Dùng cốc, bình giải đơng, pha nước ấm có t0 = 37-380C, gắp cọng tinh thả chìm vào cốc, bình giải đơng 30 giây Sau đó, lấy lau PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 khô, cắt đầu hàn, nạp súng bắn tinh Lắp ống gen vào súng bắn tinh Yêu cầu phải lắp kín để tinh dịch không bị chảy vỏ súng bắn tinh • Với tinh ampul: Dùng bình, cốc đựng nước lạnh 5-100C giải đông tinh ampul, lau khô Năng nhiệt độ lên lòng bàn tay nước ấm 35-370C Nạp tinh ống bơm tinh • Dẫn tinh: - Tay trái đeo găng cho vào trực tràng, nắm lấy cổ tử cung vị trí bình thường cố định Tay phải cầm súng bắn tinh đưa qua mép âm mơn vào âm đạo chếch lên phía góc 450, qua 10-15 cm nâng súng bắn tinh ngang với xương sống Tiếp tục đưa sâu súng bắn tinh chạm vào cổ tử cung Dùng ngón tay bàn tay trái hướng cho đầu dẫn tinh súng bắn tinh vào lỗ cổ tử cung Bàn tay trái nắm cổ tử cung lắc nhẹ nhàng, lựa để đưa cổ tử cung vào dẫn tinh quản súng bắn tinh Lưu ý dùng bàn tay trái nắm lấy cổ tử cung khéo léo lắc, lựa để “cắm cổ tử cung” vào dẫn tinh quản súng bắn tinh mà không làm ngược lại - Ở nấc cuối (nấc 3, nấc 4) cần làm khéo léo, nhẹ nhàng - Khi đầu dẫn tinh quản súng bắn tinh qua hết nấc ta thấy hẫng hụt, trúng đích Dùng ngón tay để xác định vị trí đầu dẫn tinh quản hay súng bắn tinh thân tử cung Bơm tinh vào vị trí khoảng 2/3 thân tử cung phía trên, không nên bơm sâu vào thân tử cung, không nên đưa thẳng vào sừng tử cung Như tinh phân phối khơng bị tống (do phản ứng) dễ gây viêm, chí có nguy gây thủng tử cung - Bơm tinh xong, rút dẫn tinh quản (súng bắn tinh) ra, xoa nhẹ thân tử cung rút tay trái Chú ý ghi chép, vệ sinh dụng cụ địa điểm, theo dõi bò Dẫn tinh cho lợn 2.1 Chu kỳ động dục - Bình quân 21 ngày; dao động 18-26 ngày - Thời gian động dục: 3-4 ngày PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Xác định thời điểm dẫn tinh: - Biểu lâm sàng: Con vật mê chịu đực, niêm dịch hơn, đặc hơn, dính - Dùng đực thí tình: chịu đực - Căn thời gian: dẫn tinh vào cuối ngày thứ 2, đầu ngày thứ kể từ bắt đầu động dục 2 Dẫn tinh - Quan sát lại cái, vệ sinh chuồng, nơi dẫn tinh, Tiệt trùng dụng cụ nước sôi, tráng lại nước muối sinh lý, bôi vaselin tiêu độc vào đầu dẫn tinh quản (7-8cm) - Nâng nhiệt độ lọ tinh, trộn lọ tinh Dẫn tinh: - Nhẹ nhàng, kiên trì tiếp cận cái, kích thích vào âm hộ cái, sau kích thích mê, nhẹ nhàng đưa dẫn tinh quản vào âm hộ, đưa chếch lên xoay dọc theo chiều xương sống, đưa vào thấy khó rút chút lại đưa vào đầu dẫn tinh quản qua cổ tử cung (có cảm giác hẫng hụt) dừng lại, cố định dẫn tinh quản Nắp seringe vào đầu lại dẫn tinh quản, đổ tinh nhẹ nhàng theo thành seringe để tinh tự chảy vào, tinh khơng chảy rút nhẹ dẫn tinh quản chút - Không bơm tinh chưa qua cổ tử cung không đưa dẫn tinh quản vào sâu, thể tinh chảy nhiều Bơm tinh xong, rút dẫn tinh quản ra, bóp nhẹ lên xương sống hơng cho đóng cổ tử cung lại tránh cho tinh dịch trào - Sau dẫn tinh: Ghi chép, vệ sinh, theo dõi PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 24 Công nghệ cấy truyền hợp tử: Khái niệm, lợi ích kinh tế - kỹ thuật chủ yếu, sở khoa học nội dung chủ yếu công nghệ cấy truyền hợp tử? a Khái niệm - Là trình đem hợp tử bố, mẹ cấy chuyển cho khác giống thời điểm động dục thích hợp với dụng cụ, kĩ thuật thích hợp - Trong thực tế sản xuất thường dùng hợp tử bố, mẹ cao sản cáy đơn cấy đơi cho có suất thấp b Lợi ích kinh tế - kĩ thuật chủ yếu - Nhân nhanh đàn gia súc : VD :bò - Tạo nghiên cứu khoa học + thụ tinh ống nghiệm + xác định giới tính + cắt phơi - Nghiên cứu thú y - Trong sản xuất ứng dụng di truyền sử dụng di truyền bố, mẹ - đẩy nhanh tiến độ di truyền dàn gia súc c Cơ sở khoa học - Dựa vào đặc điểm sinh sản động vật có vú , số ngày đầu sau giai đoạn thự tinh phơi cịn trạng thái tự phần đường sinh dục gia súc mẹ chưa phát triển mối quan hệ với me thông qua thai Đây thời gian đưa phôi khỏi thể nuôi cấy invitro - Sau thời gian tự để phôi phát triển con cần phải cấy vào thể gia súc để tiếp tục phát triển - Phơi cấy mẹ khác để mang thai đẻ hộ d Các nội dung chủ yếu công nghệ cấy truyền hợp tử - Chọn cho phơi Có đặc điểm sau Đó cao sản, đẹp, có sức sống cao, sức khỏe tốt Những phối với đực cao sản, đẹp, khỏe, có tiềm di truyền đặc điểm tốt cao Chúng chon lọc kỹ càng, nuôi dưỡng, quản lý, chăm sóc, sử dụng,…thật tốt Trên sở đó, khai thác nhiều tế bào sinh dục tốt - Chọn nhận phơi Có đặc điểm sau Là phải có khả sinh sản tốt, khỏe mạnh, khơng bệnh tật, cho dù ngoại hình yếu sức sản xuất khơng cao Chúng phải có tầm vóc lớn để mang thai dễ đẻ -Chúng phải ni dưỡng chăm sóc tốt - Gây động dục cho cho PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Như để thực ba kỹ thuật gây động dục rụng trứng nhiều, động dục đồng loạt, động dục đồng pha ta dựa vào nguyên tắc khoa học sau: - Làm tồn thể vàng buồng trứng - Tăng cường phát sinh, phát triển trứng - Thúc đẩy trứng chín rụng -Tăng khả hoạt hố ống sinh dục 3.1.Sử dụng HTNC – PMGS 3.2.Sử dụng FSH (Follicle Stimulating Hormone) -FSH thường điều chế từ tuyến yên cừu lợn Do thời gian bán sinh FSH thể ngắn 2-5 (Sanderson, Lê Ngọc Chí Minh, 1997) nên sử dụng để gây rụng trứng nhiều người ta tiêm cho bò liên tục 3,5-5 ngày (thường ngày) ngày lần lần cách 12 -Giống PMSG, người ta đưa vào thể bị trước tiêm gây rụng trứng nhiều lượng Progesteron ngoại lai dạng viên cấy tai dụng cụ đặt âm đạo - Cho phối giống - Thu phôi : Phôi thu từ tử cung cho dụng cụ chuyên dùng - Kiểm tra phôi Một phôi lý tưởng có hình cầu rắn chắc, phơi bào bên có kích thước, màu sắc kết cấu Trong tế bào chất khơng có túi bọng, lỗ hổng Khoảng khơng màng suốt màng nỗn hoàng phải rõ ràng, suốt Màng suốt phải đồng nhất, khơng bị gãy vỡ khơng có mảnh vỡ tế bào - Gây động dục đồng pha cho nhận Gây động dục đồng pha kích thích cho nhận phơi động dục vào thời điểm động dục cho phôi Đồng pha nhận phơi cho phơi cịn có ý nghĩa trạng thái sinh lý sinh dục nhận phôi phù hợp với tuổi phôi Cụ thể trạng thái sinh lý tử cung phải phù hợp, tương ứng với trạng thái sinh lý hợp tử sau phôi giai đoạn Sử dụng PRID (Progesteron releasing intravaginal device) -Đây dụng cụ đặt âm đạo, cấu tạo chất dẻo silicone, dạng vòng xoắn chứa hai loại hoocmon Progesteron (1,55 g) Oestradiol benzoat (10mg) + Sau đặt thuốc (vòng xoắn) vào âm đạo hai hoocmon tiết thấm dần qua niêm mạc âm đạo vào hệ thống tuần hồn + Tác dụng tương tự thể vàng, điều hịa chu kì sinh dục bò Nếu lấy dụng cụ sau đặt vào âm đạo 12 ngày, sau 48 vật đọng dục +Tỉ lệ thụ thai qua phương pháp 55-65%, tương ứng với tỉ lệ thụ thai động dục tự nhiên qua thụ tinh nhân tạo chu kỳ đầu (60-65%) 7.3 Sử dụng CIDR (Controlled internal drug release) -CIDR dụng cụ đặt âm đạo sử dụng rộng rãi điều tiết kích thích chu kỳ động dục bị nói chung bị nhận phơi nói riêng Dụng cụ PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 làm hỗn hợp cao su silicone có dạng hình chữ T chữ Y Trong dụng cụ chứa Progesteron tự nhiên Người ta dùng riêng biệt kết hợp đặt dụng cụ với PMSG, PGF2α Cidirol ( Oestradiol Benzoat) hai loại PGF2α Cidirol để kích thích động dục cho bò 7.4 Sử dụng Syncromate-B (SMB) +SMB hỗn hợp Progesteron Oestrogen Nó bao gồm sản phẩm tổng hợp Progestin dạng viên gọi Norgestomet hàm lượng 5mg dung dịch 5mg Oestradiol valerate hỗn hợp với Nogestomet +Viên cấy da, thường cấy da tai, dung dịch tiêm đồng thời với lúc cấy Sau cấy ngày, viên cấy rút khỏi thể, bò xuất động dục sau 48-72 Kỹ thuật cấy hợp tử - Chuẩn bị: Cố định nhận vào giá cố định, vệ sinh sẽ, moi hết phân trực tràng + Kiểm tra tử cung, buồng trứng Xác định tuổi thể vàng tương đương với tuổi hợp tử + Nạp trứng vào súng - Thao tác cấy hợp tử: + Đưa súng qua cổ tử cung, khéo léo đưa đầu súng sâu vào 1/3 – 1/2 sừng tử cung có trứng rụng bơm phôi vào - Cuối : cấy hợp tử 25 Phân loại hormone sinh sản? Ý nghĩa? a Theo chất hóa học - Bản chất protein: GnRH, FSH, LH, PMSG, HCG - Bản chất steroid: Oestradiol, testosteron, progesteron,… b Phân loại theo nguồn gốc sinh - Hormone vùng đồi: GnRH - Hormone tuyến yên: FSH, LH - Hormone nang trứng: Ostrogen - Hormone thể vàng: Progesteron - Hormone thai: PMSG, HCG - Hormone dịch hồn: Testosteron 26 Những ứng dụng hormone sinh sản nhằm điều khiển hoạt động sinh sản gia súc? - Ứng dụng Hormone gây động dục sớm sau đẻ - Ứng dụng Hormone khắc phục chậm sinh - Ứng dụng Hormone gây động dục hàng loạt - Ứng dụng Hormone gây rụng nhiều trứng (siêu noãn) - Điều trị số bệnh đường sinh dục U nang buồng trứng PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 Viêm đường sinh dục Thiểu năng, teo buồng trứng Hiện tượng chậm động dục Gây rụng trứng nhiều động dục đồng loạt, đồng pha 27 Tác dụng huyết ngựa chửa (PMSG), HCG, Progesteron, PGF2α, Oestrogen sinh sản? a PMSG - Huyết ngựa chửa – PMSG (Pregant Mare Serum Gonadotropin) - Là kích tố thai ngựa chửa từ ngày thứ 60 – 150 PMSG gọi Prolan A, tác dụng sinh lý giống - Với hormone thùy trước tuyến yên, nhiên hoạt tính giống với FSH nhiều b HCG - Kích tố thai người – HCG (Human Chorionic Gonadotropin) - Là kích tố có máu người phụ nữ có chửa từ ngày - 12 đến ngày thứ 60 , gọi Prolan B, hoạt tính giống với LH tuyến yên - Ứng dụng: - Thúc đẩy trứng chín rụng, nâng cao tỷ lệ thụ tinh c Progesterol - Được sinh từ thể vàng thai - Bản chất steroid - Tác dụng: + Ức chế vùng đồi tiết GnRH, tuyến yên tiết FSH LH + Làm phát triển niêm mạc tử cung, kích thích tuyến niêm mạc tiết dịch chứa nhiều glycogen + Giảm mẫn cảm tử cung với oxytoxin, làm giảm co bóp tử cung thời gian gia súc mang thai + Tác dụng lên ống dẫn trứng: Phát triển niêm mạc ống dẫn trứng, kích thích niêm mạc ống dẫn trứng tiết dịch chứa nhiều dinh dưỡng để nuôi trứng thụ tinh thực trình phân chia di chuyển vào tử cung - Với tác dụng trên, progesteron tạo điều kiện thuận lợi cho trứng thụ tinh gắn phát triển yên ổn tử cung, mà progesteron gọi hormone dưỡng thai Thiếu progesteron dẫn tới sảy thai + Ngồi ra, progesteron cịn kích thích phát triển tuyến vú - Ngày nay, chăn ni thường sử dụng progesteron tổng hợp có tác dụng mạnh progesteron tự nhiên nhiều lần d PGF2α - Prostaglandin (PG) - Được sinh từ tuyến tiền liệt đực từ niêm mạc tử cung, âm đạo - Bản chất hóa học axit béo khơng bão hịa PHOTO MẠNH HÀO – Zalo: 0969354013; 0936381356 – Email photomanhhao@gmail.com Thạch Văn Mạnh TYD-K55 - PG có nhiều loại: A, E, F, B, I - Trong hoạt tính mạnh PGF2α - Trong thực tiễn, sử dụng chế phẩm tổng hợp - Tác dụng: + Phá vỡ màng nang trứng gây rụng trứng + Phá hủy thể vàng, nang nước buồng trứng gây động dục + Gây hưng phấn ống sinh dục, tăng nhu động tử cung, kích thích mở cổ tử cung, Do vậy, ứng dụng hormone gây đẻ nhân tạo trợ sản ca đẻ khó, rặn đẻ yếu, e - Oestrogen Là hormone nang trứng thai tiết Bản chất steroid Gồm loại: Oestradiol, Oestriol oestrone Trong oestradiol có hoạt tính mạnh Tác dụng: + Duy trì đặc điểm sinh dục thứ cấp + Gây động dục + Gây tác dụng ngược lên vùng đồi tuyến yên làm tăng tiết LH gây rụng trứng Trong thực tiễn, sử dụng chế phẩm hóa học tổng hợp stinbestron, hexestron, dietylstinbestron (DES),… DES sử dụng nhiều