Chuyển gene là đưa 1 đoạn DNA ngoại lai vào genome của một cơ thể đa bào, sau đó đoạn DNA ngoại lai này sẽ có mặt ở hầu hết các tế bào và được truyền lại cho thế hệ sau. Chuyển gene ở Thực vật là quá trình chuyển một hoặc một số DNA ngoại lai vào trong tế bào thực vật nhằm tạo ra tính trạng mới mà trước đó loại thực vật đó không có theo mong muốn của con người.
Đề tài: CÔNG NGHỆ CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT Giảng viên hướng dẫn: PGS.TS Trần Quốc Dung Học viên thực hiện: Võ Thị Quốc Quyên I KHÁI NIỆM CHUNG II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT III CÁC HƯỚNG NGHIÊN CỨU IV MỘT SỐ THÀNH TỰU I KHÁI NIỆM CHUNG Chuyển gene Chuyển gene đưa đoạn DNA ngoại lai vào genome thể đa bào, sau đoạn DNA ngoại lai có mặt hầu hết tế bào truyền lại cho hệ sau Chuyển gene Thực vật Chuyển gene Thực vật trình chuyển DNA ngoại lai vào tế bào thực vật nhằm tạo tính trạng mà trước loại thực vật khơng có theo mong muốn người Thực vật chuyển gene Là thực vật mà thể chúng có gen ngoại lai chèn vào DNA genome Gene ngoại lai phải truyền lại cho tất tế bào, kể tế bào sinh dục II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT • Các bước q trình chuyển gene: - Xác định gene liên quan đến tính trạng quan tâm - Phân lập gene (PCR sàng lọc từ thư viện cDNA từ thư viện genomic DNA) - Gắn gene vào vector biểu để biến nạp - Biến nạp vào E.Coli - Tách chiết DNA plasmid - Biến nạp vào mô tế bào thực vật phương pháp khác - Chọn lọc thể biến nạp môi trường chọn lọc - Tái sinh biến nạp - Phân tích để xác nhận cá thể chuyển gene (PCR Southern blot) đánh giá mức độ biểu chúng (Northern blot, Western blot, ELISA thử nghiệm in vivo khác…) II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT Chuyển gene gián tiếp Nhờ Agrobcacterium tumefaciens Nhờ vector virus Bằng vi đạn Kĩ thuật chuyển gene thực vật Bằng kĩ thuật xung điện PP vi tiêm Chuyển gene trực tiếp Bằng kĩ thuật siêu âm Chuyển trực tiếp vào protoplast II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT 1.Chuyển gene gián tiếp a.Nhờ Agrobacterium tumefaciens Agrobacterium có khả lây nhiễm thực vật cách chuyển đoạn DNA (T-DNA) vào tế bào chủ Khi DNA vi khuẩn hợp với NST thực vật, cơng vào hệ thống tổ chức tế bào cách có hiệu sử dụng để đảm bảo cho sinh sơi quần thể vi khuẩn Kết gây bệnh khối u hình chóp bệnh rễ tơ nhiều lồi cảnh ăn Hình Vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT * Nguyên lý: II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT Để khai thác sử dụng A.tumefaciens vector chuyển gene nhà khoa học loại bỏ gene gây khối u gene mã hóa opine vùng T-DNA thay vào gene thị gene ngoại lai mong muốn, trì vùng bờ phải trái T-DNA gene vir Gene ngoại lai chuyển vào tế bào hợp với NST genome II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT •Ưu điểm - Gene bi đào thải - Số lượng bảo Do tránh tượng ức chế lẫn - Tồn bền vững thể thực vật •Nhược điểm - Có phổ cơng giới hạn - Ít có khả gây khối u cho Lá mầm (do nhóm tiến hóa tích lũy nhiều chế kháng bệnh, tế bào bị thương có xu hướng hóa gỗ không phân chia mạnh để tái tạo Hai mầm) ... sau Chuyển gene Thực vật Chuyển gene Thực vật trình chuyển DNA ngoại lai vào tế bào thực vật nhằm tạo tính trạng mà trước loại thực vật khơng có theo mong muốn người Thực vật chuyển gene Là thực. .. SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT * Nguyên lý: II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT Để khai thác sử dụng A.tumefaciens vector chuyển gene nhà khoa... THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT Chuyển gene trực tiếp a Chuyển gene vi đạn Hình Các thiết bị chuyển gene vi đạn Súng bắn gene (trái) Hệ thống dội bom (phải) II MỘT SỐ KĨ THUẬT CHUYỂN GENE Ở THỰC VẬT