Nghiên cứu biểu hiện dấu ấn gata3 và sox10 trong các phân nhóm phân tử của carcinôm tuyến vú xâm nhập

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH -oOo - PHẠM THỊ NHƯ DIỄM NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN DẤU ẤN GATA3 VÀ SOX10 TRONG CÁC PHÂN NHÓM PHÂN TỬ CỦA CARCINÔM TUYẾN VÚ XÂM NHẬP ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN BÁC SĨ NỘI TRÚ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – NĂM 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH -oOo - PHẠM THỊ NHƯ DIỄM NGHIÊN CỨU BIỂU HIỆN DẤU ẤN GATA3 VÀ SOX10 TRONG CÁC PHÂN NHÓM PHÂN TỬ CỦA CARCINÔM TUYẾN VÚ XÂM NHẬP CHUYÊN NGÀNH: GIẢI PHẪU BỆNH MÃ SỐ: 8720101 ĐỀ CƯƠNG LUẬN VĂN BÁC SĨ NỘI TRÚ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH – NĂM 2022 iii MỤC LỤC MỤC LỤC iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT v DANH MỤC ĐỐI CHIẾU ANH VIỆT vi DANH MỤC BẢNG vii DAN MỤC BIỂU ĐỒ viii DANH MỤC HÌNH ix ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Dịch tễ học 1.2 Phân loại ung thư vú 1.2.1 Phân loại mô bệnh học 1.2.2 Phân loại phân tử 1.3 Đặc điểm biểu dấu ấn HMMD .9 1.3.1 Đặc điểm thụ thể nội tiết Estrogen (ER) Progesteron (PR) 1.3.2 Đặc điểm thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì người Her2 11 1.3.3 Đặc điểm số phân bào Ki-67 13 1.3.4 Đặc điểm GATA3 14 1.3.5 Đặc điểm SOX10 14 1.4 Phân độ mô học ung thư vú xâm nhập Error! Bookmark not defined 1.5 Chẩn đoán giai đoạn ung thư vú 16 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Thiết kế nghiên cứu 19 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 19 2.3 Đối tượng nghiên cứu .19 2.4 Cỡ mẫu nghiên cứu 19 2.5 Xác định biến số nghiên cứu 20 2.5.1 Các biến số đặc điểm lâm sàng mẫu nghiên cứu 20 2.5.2 Các biến số đặc điểm mô bệnh học mẫu nghiên cứu 20 2.5.3 Các biến số đặc điểm hóa mơ miễn dịch mẫu nghiên cứu 21 iv 2.6 Quy trình nghiên cứu 23 2.6.1 Thu thập liệu 23 2.6.2 Chọn block & làm TMA 23 2.6.3 Nhuộm hóa mơ miễn dịch 23 2.6.4 Khảo sát tiêu nhuộm H&E hố mơ miễn dịch trường hợp 24 2.6.5 Điền thông tin thu thập vào phiếu thu thập liệu 25 2.6.6 Mã hóa xử lý số liệu .25 2.7 Phương pháp phân tích liệu 25 2.8 Đạo đức nghiên cứu 26 CHƯƠNG 3: DỰ KIẾN KẾT QUẢ 27 CHƯƠNG 4: KẾ HOẠCH THỰC HIỆN .28 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT TÊN VIẾT TẮT TÊN ĐẦY ĐỦ BN Bệnh nhân GPB Giải Phẫu Bệnh TB Tế bào TNBC Ung thư vú tam âm UTBM Ung thư biểu mô NST Không phải dạng đặc biệt UTV Ung thư tuyến vú HMMD Hóa mơ miễn dịch ER Estrogen receptor PR Progesteron receptor HER2 Human epidermal growth factor receptor ASCO American Society of Clinical Oncology CAP College of American Pathologists vi DANH MỤC ĐỐI CHIẾU ANH VIỆT TÊN TIẾNG ANH Triple negative cancer TÊN TIẾNG VIỆT breast Ung thư vú tam âm No special type Không phải dạng đặc biệt Pathology Giải Phẫu Bệnh Estrogen receptor Thụ thể estrogen Progesterone receptor Thụ thể progesteron Human epidermal growth Thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì người factor receptor Sry-related HMG box10 SOX10 GATA-binding protein-3 GATA3 American Society Clinical Oncology College of Pathologists of Hiệp hội ung thư lâm sàng Hoa Kỳ American Trường đại học Bệnh học Hoa Kỳ vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Hệ thống phân độ Nottingham .7 Bảng 1.2 Xếp loại giai đoạn theo AJCC tái lần thứ 17 Bảng 2.1 Bảng kháng thể dùng nghiên cứu 24 Bảng 2.2 Bảng biểu dấu ấn nghiên cứu .24 Bảng 4.1 Thời gian biểu hoạt động (sơ đồ Gantt) viii DAN MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 1.1 Biểu đồ số ca mắc bệnh ung thư toàn dân số Việt Nam năm 2020 theo Globocan Biểu đồ 1.2 Biểu đồ số ca mắc bệnh ung thư phụ nữ Việt Nam năm 2020 theo Globocan ix DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Phân bố tỉ lệ mắc ung thư vú Globocan 2020 Hình 1.2 Biểu thụ thể nội tiết (ER PR) HMMD : A Dương tính mạnh, đồng B Dương tính yếu, khu trú C Âm tính 10 Hình 1.3 Hệ thống điểm Allred đánh giá biểu thụ thể nội tiết ER PR 11 Hình 1.4 Biểu HER2 HMMD ung thư biểu mô tuyến vú: A HER2 âm tính (0) B HER2 âm tính (1+) C HER2 dương tính (2+) D HER2 dương tính (3+) .12 Hình 1.5 Biểu SOX10 mơ vú bình thường : (i) Thành phần đáy, (ii) Thành phần ống 15 Hình 1.6 Biểu SOX10 UTV: âm tính, khơng đồng nhất, dương tính 16 ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư vú loại ung thư thường gặp phụ nữ toàn giới Những năm gần đây, số lượng phụ nữ mắc ung thư vú di ngày tăng, đặc biệt nữ trẻ, có đến 1% có biểu ung thư di mà khơng biết vị trí ngun phát 1,2 Thậm chí bệnh nhân biết ung thư vú trước đó, việc đánh giá nguyên phát khối u nghi ngờ di yêu cầu khảo sát đa quan, bệnh nhân có tiền sử ung thư vú yếu tố nguy để phát triển ung thư khác3 Phương pháp nhuộm hóa mơ miễn dịch áp dụng rộng rãi để xác định thụ thể estrogen (ER), thụ thể progesterone (PR), Ki67, thụ thể yếu tố tăng trường biểu bì (HER2) Dựa vào biểu ER, PR, HER2 Ki67, ung thư vú chia làm nhóm phân tử: lịng ống A, lịng ống B, HER2 biểu mức, tam âm (TNBC) Nhóm TNBC chiếm khoảng 10-20% tồn ung thư vú 4,5 Bởi ER, PR HER2 khơng biểu nhóm TNBC, dấu ấn giúp xác định nguồn gốc từ tuyến vú trường hợp Các dấu ấn thường dùng để xác định nguồn gốc từ vú mamaglobin GCDFP15 có độ nhạy độ đặc hiệu hạn chế, GATA3 SOX10 bác sĩ GPB ưa thích việc xác định nguồn gốc từ vú khối u di căn6-15 Dấu ấn GATA3 đóng vai trị quan trọng phát triển biệt hóa hướng biểu mơ lịng ống Có nhiều chứng ủng hộ dấu ấn GATA3 phương tiện tiềm để xác định ung thư vú nguyên phát di 9,16-18 Ở nghiên cứu gần đây, GATA3 xác định biểu >90% ung thư vú sử dụng dấu ấn mơ tuyến vú dựa vào độ nhạy nó, đặc biệt trường hợp ER dương tính14 Tuy nhiên, GATA3 biểu hạn chế trường hợp ER âm tính, đặc biệt ung thư vú tam âm (TNBC), báo cáo 42-87% trường hợp, dấu ấn GATA3 có độ đặc hiệu khơng cao dấu ấn biểu nhiều quan khác nhau, bao gồm tuyến nước bọt, phần phụ da, tụy, gan, nội mạc tử cung, đường niệu14 Ngược lại với GATA3, SOX10 cho thấy có độ nhạy cao TNBC, chiếm 37,6-66% trường hợp, đồng thời biểu quan khác thể8,10,12,15,18,19 Nhóm 10 liên quan đến protein SRY (SOX10) 23 - Khơng đồng : dương tính yếu/ trung bình nhân ≥50% tế bào u - Dương tính : dương tính mạnh nhân ≥50% tế bào u 2.6 Quy trình nghiên cứu 2.6.1 Thu thập liệu - Thu thập liệu từ bệnh án sẵn có Bệnh viện Ung Bướu TP.HCM ca bệnh carcinôm tuyến vú xâm nhập - Thu thập lam H&E, lam HMMD (ER, PR, HER2, Ki67 ± GATA3, SOX10), chọn block mô 2.6.2 Chọn block & làm TMA - Chọn block mô vùi sáp thỏa tiêu chuẩn mẫu mô xử lý cách, mô u nhiều, hoại tử, xuất huyết, xơ hóa - Sắp xếp dãy mô nhỏ (Tissue microarray - TMA): Dựa tiêu H&E, vùng đại diện mô u chọn, vị trí tương ứng với vùng chọn khối nến chứa u đánh dấu Sử dụng mũi đục đường kính mm để lấy lõi mơ vị trí thả vào khn dãy mơ nhỏ TMA 5x3 Vị trí lõi mã hóa liên kết với liệu lâm sàng khác Mỗi khối TMA cắt tiêu nhuộm H&E để xác nhận lại vị trí mơ u phù hợp 2.6.3 Nhuộm hóa mơ miễn dịch - Nhuộm thêm GATA3 SOX10 chưa nhuộm 24 - HMMD nhuộm Bệnh viện Uung Bướu TP.HCM Các dấu ấn ER, PR, HER2, Ki67, GATA3 SOX10 nhuộm máy nhuộm tự động Dako, với thông tin thể Bảng 2.1 Bảng 2.1 Bảng kháng thể dùng nghiên cứu Kháng nguyên Kháng thể Loại Dịng Mơ chứng ER Ventana Đơn dịng SP1 Mơ vú PR Ventana Đơn dịng 4B5 Mơ vú HER2 Ventana Đơn dịng 1E2 Mơ vú Ki67 Ventana Đơn dịng MIB-1 Mơ hạch GATA3 NordiQC Đơn dịng L50-823 Mơ thận SOX10 Ventana Đơn dịng SP267 Melanơm 2.6.4 Khảo sát tiêu nhuộm H&E hố mơ miễn dịch trường hợp Đọc lam H&E lam HMMD bác sĩ giải phẫu bệnh độc lập Biểu dương tính thể hệ Bảng 2.2 Bảng 2.2 Bảng biểu dấu ấn nghiên cứu Dấu ấn ER PR Gía trị ngưỡng Vị trí biểu Theo hệ thống điểm Nhân TB Allred 38 Nhân TB HER2 Theo ASCO/CAP 2018 41 Màng TB Ki67 % biểu Nhân TB 25 GATA3 ≥ 1% Nhân TB SOX10 ≥ 50% Nhân TB 2.6.5 Điền thông tin thu thập vào phiếu thu thập liệu (xem phần Phụ lục) 2.6.6 Mã hóa xử lý số liệu 2.7 Quy trình nghiên cứu Chọn đối tượng nghiên cứu thỏa tiêu chuẩn chọn mẫu Thu thập thông tin đối tượng nghiên cứu Đọc tiêu HE, tiêu HMMD gồm ER, PR, HER2, Ki67 phân nhóm phân tử carcinôm tuyến vú xâm nhập Nhuộm GATA3 SOX10 cho trường hợp chưa nhuộm Đánh giá kết HMMD GATA3 SOX10 Thu thập kết Thống kê xử lí số liệu 2.8 Phương pháp phân tích liệu Dữ liệu xử lý tính tốn phần mềm R, phiên 4.2.1 cho hệ điều hành Window Lựa chọn kiếm định phù hợp 26 Giá trị p