Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống
1
/ 82 trang
THÔNG TIN TÀI LIỆU
Thông tin cơ bản
Định dạng
Số trang
82
Dung lượng
4,08 MB
Nội dung
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ VŨ ĐÌNH TRUNG SO SÁNH PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐIỆN DI MAO QUẢN TRONG ĐỊNH LƯỢNG HbA1c TRÊN MẪU MÁU CỦA BỆNH NHÂN BỆNH HEMOGLOBIN LUẬN VĂN THẠC SĨ Cần Thơ, 2022 BỘBỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ VŨ ĐÌNH TRUNG SO SÁNH PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO VỚI ĐIỆN DI MAO QUẢN TRONG ĐỊNH LƯỢNG HbA1c TRÊN MẪU MÁU CỦA BỆNH NHÂN BỆNH HEMOGLOBIN Chuyên ngành: Kỹ thuật Xét nghiệm y học Mã số: 8720601 LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS BS LÊ THỊ HOÀNG MỸ Cần Thơ - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa công bố nơi Tác giả luận văn Vũ Đình Trung LỜI CẢM ƠN Tơi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu Trường Đại học Y Dược Cần Thơ, phòng đào tạo Sau đại học, môn Xét nghiệm-khoa Điều dưỡng Kỹ thuật y học; Ban Giám đốc bệnh viện, ban lãnh đạo Khoa, quý đồng nghiệp bệnh viện Trường Đại học Y Dược Cần Thơ bệnh viện Huyết học-Truyền máu Cần Thơ giúp đỡ, tạo điều kiện, hướng dẫn trình thu thập số liệu, thực hồn thành nghiên cứu Đặc biệt với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin tỏ lịng tri ân tới Ts Bs Lê Thị Hoàng Mỹ -Trưởng môn Huyết học Truyền máu Trường Đại học Y Dược Cần Thơ dành hết tâm sức hướng dẫn, truyền đạt cho kiến thức, phương pháp nghiên cứu khoa học vô quý giá; động viên tạo điều kiện tốt cho suốt q trình thực luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến gia đình, q đồng nghiệp bệnh viện Y Dược cổ truyền Kiên Giang bạn bè ln dành cho tơi tình cảm quý mến, lời động viên, chia sẻ, giúp có thêm động lực để hồn thành luận văn Tuy có nhiều cố gắng, luận văn khơng tránh khỏi thiếu sót Kính mong Hội đồng khoa học, chuyên gia đồng nghiệp tiếp tục có ý kiến đóng góp, giúp đỡ để luận văn hoàn thiện Xin chân thành cảm ơn! Tác giả luận văn Vũ Đình Trung MỤC LỤC Trang Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Danh mục biểu đồ MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Bệnh hemoglobin 1.2 Phương pháp định lượng HbA1c 1.3 Một số yếu tố liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c 14 1.4 Tình hình nghiên cứu so sánh phương pháp định lượng HbA1c 16 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.2 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3 Đạo đức nghiên cứu 28 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 29 3.1 Đặc điểm chung mẫu nghiên cứu 29 3.2 So sánh độ chênh độ tương thích kết định lượng HbA1c 34 3.3 Một số yếu tố liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c 39 Chương BÀN LUẬN 44 4.1 Đặc điểm chung mẫu nghiên cứu 44 4.2 So sánh độ chênh độ tương thích kết định lượng HbA1c 48 4.3 Một số yếu tố liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c 55 KẾT LUẬN 59 KIẾN NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT STT Ký hiệu ADA CE CLIA EDTA Tiếng Anh American Diabetes Association Tiếng Việt Hội đái tháo đường Hoa Kỳ Capillary Electrophoresis Điện di mao quản Clinical Laboratory Chương trình sửa đổi cải Improvement tiến phòng xét nghiệm Hoa Amendments Kỳ Ethylene Diamine Tetraacetic Acid Tỷ lệ thể tích hồng cầu HCT Hematocrit thể tích máu tồn phần HGB HPLC Hemoglobin High Performance Liquid Chromatography International Federation IFCC of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine 10 MCV NGSP Huyết sắc tố Sắc ký lỏng hiệu cao Liên đồn Hố học Xét nghiệm lâm sàng Quốc tế Mean Corpuscular Thể tích trung bình hồng Volume cầu National Chương trình Quốc gia Glycohemoglobin chuẩn hóa Standardization Program Glycohemoglobin 11 RBC Red Blood Cell Hồng cầu 12 Thal Thalassemia Bệnh thalassemia 13 WHO World Health Organization Tổ chức y tế giới DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Phân mức đái tháo đường theo kết xét nghiệm Bảng 3.1 Tuổi trung vị mẫu nghiên cứu 29 Bảng 3.2 Tỷ lệ mẫu nghiên cứu theo địa dư 30 Bảng 3.3 Trung bình số lượng hồng cầu mẫu nghiên cứu 31 Bảng 3.4 Trung bình lượng huyết sắc tố mẫu nghiên cứu 32 Bảng 3.5 Thể tích trung bình hồng cầu mẫu nghiên cứu 32 Bảng 3.6 Trung bình huyết sắc tố hồng cầu mẫu nghiên cứu 32 Bảng 3.7 Tỷ lệ mẫu nghiên cứu theo lượng huyết sắc tố 33 Bảng 3.8 Độ chênh kết định lượng HbA1c theo lượng huyết sắc tố 34 Bảng 3.9 Độ chênh kết HbA1c theo nhóm tuổi 35 Bảng 3.10 Độ chênh kết HbA1c toàn nghiên cứu 35 Bảng 3.11 Độ chênh kết HbA1c nhóm bệnh HbH 35 Bảng 3.12 Độ chênh kết định lượng HbA1c nhóm HbE 36 Bảng 3.13 Độ chênh kết định lượng HbA1c nhóm β-thalassemia 36 Bảng 3.14 Độ tương thích kết HbA1c hai phương pháp 36 Bảng 3.15 Giới tính liên quan đến độ chênh kết HbA1c 39 Bảng 3.16 Nhóm tuổi liên quan đến độ chênh kết HbA1c 39 Bảng 3.17 Địa dư liên quan đến độ chênh kết HbA1c 39 Bảng 3.18 Số lượng hồng cầu liên quan đến độ chênh kết HbA1c 40 Bảng 3.19 Hematocrit liên quan đến độ chênh kết HbA1c 40 Bảng 3.20 Thể tích hồng cầu liên quan đến độ chênh kết HbA1c 41 Bảng 3.21 Huyết sắc tố hồng cầu liên quan đến độ chênh HbA1c 41 Bảng 3.22 Nồng độ hemoglobin liên quan đến độ chênh HbA1c 42 Bảng 3.23 Bệnh HbE liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c 42 Bảng 3.24 Bệnh HbH liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c 43 Bảng 3.25 Bệnh β-thalassemia liên quan đến độ chênh kết HbA1c 43 Bảng 3.26 Bệnh hemoglobin liên quan đến độ chênh kết HbA1c 43 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Sự đường hóa hemoglobin Hình 1.2 Nguyên lý định lượng HbA1c phương pháp enzyme Hình 1.3 Cơ chế phản ứng miễn dịch độ đục định lượng HbA1c 10 Hình 1.4 Nguyên lý sắc ký lực Boronat định lượng HbA1c 11 Hình 1.5 Nguyên lý ion exchange HPLC định lượng HbA1c 13 Hình 1.6 Nguyên lý điện di mao quản định lượng HbA1c 14 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Trang Biểu đồ 3.1 Tỷ lệ giới tính mẫu nghiên cứu 29 Biểu đồ 3.2 Số lượng mẫu nghiên cứu theo nhóm tuổi 30 Biểu đồ 3.3 Số lượng mẫu nghiên cứu theo nơi cư trú 31 Biểu đồ 3.4 Số lượng mẫu nghiên cứu theo bất thường hemoglobin 33 Biểu đồ 3.5 Tỷ lệ mẫu nghiên cứu theo nhóm bệnh hemoglobin 34 Biểu đồ 3.6 Biểu đồ Bland-Altman toàn nghiên cứu 37 Biểu đồ 3.7 Biểu đồ Bland-Altman nhóm HbH 37 Biểu đồ 3.8 Biểu đồ Bland-Altman nhóm HbE 38 Biểu đồ 3.9 Biểu đồ Bland-Altman nhóm β-thalassemia 38 MỞ ĐẦU Bệnh hemoglobin gồm thalassemia, biến thể hemoglobin thể bệnh phối hợp hai loại Bệnh gây đột biến gen có vai trị kiểm sốt q trình tổng hợp chuỗi globin hồng cầu, dẫn đến rối loạn cấu trúc thiếu hụt chuỗi globin Trên giới, tỷ lệ mang gen khoảng 7% Hàng năm, có khoảng 300.000-400.000 trẻ thalassemia thể nặng sinh ra, khoảng 50.000-100.000 trẻ mắc bệnh tử vong [44] Mặc dù phát khắp nơi, bệnh lý hemoglobin mang tính chất dân tộc địa dư cách rõ rệt Đông Nam châu Á “vùng dịch tễ” thalassemia bệnh lý hemoglobin với thể phổ biến α-thal, β-thal, HbE Hb Constant Spring (HbCS) [21] Bên cạnh đó, tỷ lệ mang gen thalassemia bệnh lý hemoglobin cộng đồng dân tộc Khmer đồng sông Cửu Long cao: 39,4% [9] HbA1c hình thành dựa vào kết hợp glucose hemoglobin, nên có bất thường hemoglobin ảnh hưởng tới đường hóa Một số bất thường liên quan đến nồng độ HbA1c ghi nhận bệnh thalassemia, bệnh hồng cầu hình liềm, biến thể khác hemoglobin [30] Do đó, phương pháp, thiết bị xét nghiệm khơng phát bất thường hemoglobin đưa kết HbA1c giảm tăng giả tạo gây ảnh hưởng đến việc chẩn đoán điều trị đái tháo đường Nhiều nghiên cứu cho thấy phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao trao đổi ion điện di mao quản có độ tương thích tốt phân tích HbA1c mẫu hemoglobin bình thường [3], [29], [31], [38], [43] Tuy nhiên, chưa có nhiều nghiên cứu so sánh kết định lượng HbA1c mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin phương pháp Định lượng HbA1c phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao trao đổi ion Hội đái tháo đường Hoa Kỳ (ADA) công bố tiêu chuẩn chẩn đoán đái tháo đường- bệnh rối loạn chuyển hóa, có đặc điểm tăng 59 KẾT LUẬN Từ kết nghiên cứu so sánh độ chênh, độ tương thích số yếu tố liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c 78 mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin, đưa kết luận sau: Độ chênh độ tương thích kết phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao trao đổi ion điện di mao quản định lượng HbA1c mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin - Độ chênh phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao trao đổi ion (Humanex A1c) điện di mao quản (Capillary Octa) định lượng HbA1c mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin -0,83±1,19(%) - Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao trao đổi ion khơng tương thích với phương pháp điện di mao quản định lượng HbA1c mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin Phần trăm trung bình khác biệt hai phương pháp 17,8% Một số yếu tố liên quan đến độ chênh kết định lượng HbA1c mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin Độ chênh kết định lượng HbA1c mẫu máu bệnh nhân bệnh hemoglobin phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao trao đổi ion điện di mao quản có khác biệt liên quan đến giới tính nữ, nhóm HbE dị hợp tử HbE kết hợp β-thalassemia, nhóm HbH kết hợp Hb Bart’s nhóm tăng phối hợp HbA2+HbF (p