Nghiên cứu đặc điểm tinh dịch đồ và sự phân mảnh dna tinh trùng bằng ứng dụng quy trình xét nghiệm phân tán nhiễm sắc chất ở bệnh nhân nam đến khám hiếm muộn tại bệnh viện đa khoa trung ương

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ BÙI NGỌC TRÂM NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM TINH DỊCH ĐỒ VÀ SỰ PHÂN MẢNH DNA TINH TRÙNG BẰNG ỨNG DỤNG QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM PHÂN TÁN NHIỄM SẮC CHẤT Ở BỆNH NHÂN NAM ĐẾN KHÁM HIẾM MUỘN TẠI BỆNH VIỆN ĐA KHOA TRUNG ƯƠNG CẦN THƠ NĂM 2021-2022 LUẬN VĂN THẠC SĨ Cần Thơ, 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ BỘ Y TẾ BÙI NGỌC TRÂM NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM TINH DỊCH ĐỒ VÀ SỰ PHÂN MẢNH DNA TINH TRÙNG BẰNG ỨNG DỤNG QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM PHÂN TÁN NHIỄM SẮC CHẤT Ở BỆNH NHÂN NAM ĐẾN KHÁM HIẾM MUỘN TẠI BỆNH VIỆN ĐA KHOA TRUNG ƯƠNG CẦN THƠ NĂM 2021-2022 Chuyên ngành: Kỹ Thuật Xét Nghiệm Y Học Mã số: 8.72.06.01 LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC Người hướng dẫn khoa học: TS CAO THỊ TÀI NGUYÊN Cần Thơ – Năm 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa công bố nơi Tác giả Bùi Ngọc Trâm LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin chân thành cảm ơn bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Cao Thị Tài Nguyên, người tận tình hướng dẫn, động viên, trực tiếp bảo tận tình ln có phản hồi tỉ mỉ thời gian nhanh giúp suốt thời gian qua để hồn thành luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu nhà trường, Phòng Sau đại học Trường Đại học Y Dược Cần Thơ tạo điều kiện thuận lợi suốt trình học tập trường Tôi xin gửi lời cảm ơn đến anh chị kỹ thuật viên Khoa Xét nghiệm Bệnh viện Đa khoa Trung Ương Cần Thơ giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi để tơi thu thập mẫu, thông tin bệnh nhân thực đề tài Lời cuối cùng, xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình bạn bè ln hỗ trợ, khích lệ chỗ dựa vững cho thời gian thực luận văn Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả Bùi Ngọc Trâm MỤC LỤC Trang Lời cam đoan Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình, đồ thị MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Quá trình sinh tinh tình hình vô sinh nam 1.2 Xét nghiệm tinh dịch đồ chẩn đốn vơ sinh nam giới 1.3 Sự phân mảnh DNA tinh trùng 1.4 Các phương pháp xác định mức độ phân mảnh DNA tinh trùng 16 1.5 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam 19 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Đối tượng nghiên cứu 22 2.2 Phương pháp nghiên cứu 22 2.3 Đạo đức nghiên cứu y học 35 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 36 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 36 3.1.1 Đặc điểm nhóm tuổi đối tượng nghiên cứu 36 3.2 Đặc điểm tinh dịch đồ 38 3.3 Phân mảnh DNA tinh trùng 43 3.4 Mối tương quan số số tinh dịch đồ với phân mảnh DNA tinh trùng 49 Chương BÀN LUẬN 53 4.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 53 4.2 Đặc điểm tinh dịch đồ 55 4.3 Phân mảnh DNA tinh trùng 62 4.4 Mối tương quan số số tinh dịch đồ với phân mảnh DNA tinh trùng 66 KẾT LUẬN 70 KIẾN NGHỊ 72 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT TÊN VIẾT TÊN TIẾNG ANH TÊN TIẾNG VIỆT TẮT AOT Acridine Orange test Phương pháp sử dụng chất nhuộm Cam Acridin AZF Azoospermia factor Yếu tố khơng có tinh trùng DFI DNA fragmentation index Chỉ số phân mảnh DNA DNA Deoxyribonucleic acid Axit deoxyribonucleic DTT Dithiothreitol IM Immotile Không di động NP Non-Progressive motility Di động không tiến tới PR Progressive motility Di động tiến tới PBS Phosphate-buffered saline Dung dịch muối đệm phosphat ROS Reactive Oxygen Species Gốc oxy hóa tự hoạt động có nguồn gốc từ oxy SCD Sperm Chromatin Dispersion Sự phân tán nhiễm sắc chất tinh trùng SCSA Sperm Chromatin Structure Assay Phương pháp khảo sát cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng TB Toluidine blue Phương pháp nhuộm Xanh Toluidin TUNEL Terminal deoxynucleotidyl Phương pháp đánh dấu phân transferase mediated deoxyuridine mảnh DNA thông qua WHO triphosphate nick end labeling deoxyuridine triphosphate World Health Organization Tổ chức Y tế giới DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1 Giá trị bình thường tinh dịch đồ (WHO, 2010) Bảng 3.1 Đặc điểm nhóm tuổi đối tượng nghiên cứu 36 Bảng 3.2 Đặc điểm nghề nghiệp đối tượng nghiên cứu 36 Bảng 3.3 Đặc điểm phân bố đối tượng nghiên cứu theo nơi sống 37 Bảng 3.4 Đặc điểm thời gian ly giải tinh dịch 38 Bảng 3.5 Đặc điểm độ pH tinh dịch 38 Bảng 3.6 Đặc điểm thể tích tinh dịch 39 Bảng 3.7 Đặc điểm tế bào lạ tinh dịch 39 Bảng 3.8 Đặc điểm mật độ tinh trùng 40 Bảng 3.9 Đặc điểm tổng số tinh trùng 40 Bảng 3.10 Đặc điểm độ di động tiến tới tinh trùng (PR) 40 Bảng 3.11 Đặc điểm độ di động tinh trùng (PR+NP) 41 Bảng 3.12 Đặc điểm tỷ lệ sống tinh trùng 41 Bảng 3.13 Đặc điểm hình dạng tinh trùng 42 Bảng 3.14 Tỷ lệ dạng bất thường tinh trùng 42 Bảng 3.15 Phân bố tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng theo tuổi 44 Bảng 3.16 Phân bố tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng theo nơi sống 44 Bảng 3.17 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng số pH 45 Bảng 3.18 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng thể tích tinh dịch 45 Bảng 3.19 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng mật độ tinh trùng 46 Bảng 3.20 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng tổng số tinh trùng 46 Bảng 3.21 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng độ di động tiến tới tinh trùng 47 Bảng 3.22 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng độ di động tinh trùng 48 Bảng 3.23 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng tỷ lệ sống tinh trùng 48 Bảng 3.24 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng hình dạng tinh trùng 49 Bảng 3.25 Mối tương quan số tinh dịch với phân mảnh DNA tinh trùng 49 Bảng 3.26 Mối tương quan số tinh trùng với phân mảnh DNA tinh trùng 50 Bảng 4.1 Tỷ lệ dạng bất thường tinh trùng qua nghiên cứu 60 Bảng 4.2 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng qua nghiên cứu 63 DANH MỤC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Trang Hình 1.1 Cấu trúc tinh trùng trưởng thành Hình 1.2 Các chế gây phân mảnh DNA tinh trùng 10 Hình 1.3 Sự xếp Protamin Histon DNA tinh trùng 11 Hình 1.4 Cấu trúc nhiễm sắc chất tinh trùng 12 Hình 2.1 Hình ảnh tinh trùng có quầng sáng khơng có quầng sáng 27 Hình 2.2 Hình ảnh buồng đếm Neubauer 30 Hình 2.3 Tinh trùng có hình dạng bình thường 31 Hình 3.1 Phân mảnh DNA tinh trùng ứng dụng quy trình xét nghiệm phân tán nhiễm sắc chất theo phương pháp SCD vật kính 40X 43 Biểu đồ 3.1 Đặc điểm trình độ học vấn đối tượng nghiên cứu 37 Biểu đồ 3.2 Tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng chung 43 Biểu đồ 3.3 Mối tương quan độ di động tiến tới với phân mảnh DNA tinh trùng 51 Biểu đồ 3.4 Mối tương quan độ di động (PR+NP) với phân mảnh DNA tinh trùng 51 Biểu đồ 3.5 Mối tương quan tỷ lệ sống với phân mảnh DNA tinh trùng 52 Biểu đồ 3.6 Mối tương quan hình dạng bình thường với phân mảnh DNA tinh trùng 52 ... hành đề tài ? ?Nghiên cứu đặc điểm tinh dịch đồ phân mảnh DNA tinh trùng ứng dụng quy trình xét nghiệm phân tán nhiễm sắc chất bệnh nhân nam đến khám muộn Bệnh viện Đa khoa Trung Ương Cần Thơ năm... đặc điểm tinh dịch đồ bệnh nhân nam đến khám muộn Bệnh viện Đa khoa Trung Ương Cần Thơ năm 2021-2022 Xác định tỷ lệ phân mảnh DNA tinh trùng ứng dụng quy trình xét nghiệm phân tán nhiễm sắc chất. .. DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ BỘ Y TẾ BÙI NGỌC TRÂM NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM TINH DỊCH ĐỒ VÀ SỰ PHÂN MẢNH DNA TINH TRÙNG BẰNG ỨNG DỤNG QUY TRÌNH XÉT NGHIỆM PHÂN TÁN NHIỄM SẮC CHẤT Ở BỆNH