Nghiên cứu thành phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L.) sweet) cây hồng bì (Clausena lansium ( Lour.) skeels) cây trám trắng (Canarium album (Lour.) raeusch) và cây trám đen (Canarium nirgum (Lour.) engl.) ở Việt Nam

Nghiên cứu thành phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L.) sweet) cây hồng bì (Clausena lansium ( Lour.) skeels) cây trám trắng (Canarium album (Lour.) raeusch) và cây trám đen (Canarium nirgum (Lour.) engl.) ở Việt Nam

Bộ giáo dục v đo tạo Trờng Đại học vinh Trần Đình Thắng Nghiên cứu thnh phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet) cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels) cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) v cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) ở Việt Nam chuyên ngành : hoá hữu cơ Mã số: 62.44.2701 Tóm tắt Luận án tiến sĩ hoá học Vinh - 2007 Công trình này đợc hoàn thành tại Trờng Đại học Vinh, Viện Hoá học- Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, khoa Hoá-Trờng Đại học Cheng Kung, Đài Loan, Phòng Thí nghiệm trọng điểm về Hoá thực vật- Viện Thực vật Kunming-Viện Hàn lâm Khoa học Trung Quốc. Ngời hớng dẫn khoa học: GS. TSKH Nguyễn Xuân Dũng PGS. TS Hoàng Văn Lựu Phản biện 1: GS. TS Nguyễn Hữu Đĩnh Phản biện 2: PGS. TS Văn Ngọc Hớng Phản biện 3: GS. TS Nguyễn Gia Chấn Luận án sẽ đợc bảo vệ trớc Hội đồng chấm luận án cấp nhà nớc họp tại Trờng Đại học Vinh, vào hồi 8 giờ 00 ngày 01 tháng 03 năm 2008. Có thể tìm hiểu luận án tại: - Th viện Quốc gia - Th viện Trờng Đại học Vinh. Danh mục công trình 1. Tran Dinh Thang, Hoang Van Luu, Nguyen Xuan Dung (2003), Phenolic compounds from the leaves of Canarium album growing in Nghean province, Paper presented at ASOMPS XI, 27-31/October/2003. Kunming, China. 2. Tran Dinh Thang, Le Van Thanh, Hoang Van Luu, Nguyen Xuan Dung, and Ngo Xuan Luong (2004), Chemical composition of the volatile fraction of Canarium album (Lour.) Raeusch. leaves from Vietnam, Journal of Essential oil and Bearing Plants, 7(2), pp. 125-128. 3. Tran Dinh Thang, Hoang Van Luu, and Nguyen Xuan Dung (2004), Chemical composition of the leaf oil of Canarium bengalense Roxb. from Vietnam, Journal of Essential oil and Bearing Plants, 7(1), pp. 43-48. 4. Trần Đình Thắng, Nguyễn Xuân Dũng (2005), Những nghiên cứu gần đây của các loài thuộc chi Clausena ở Việt Nam, Hội thảo quốc gia về Sinh thái và Tài nguyên sinh vật, Hà Nội, Nhà xuất bản Nông nghiệp, tr. 643-649. 5. Trần Đình Thắng, Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Xuân Dũng (2005), Đa dạng về thành phần hoá học của một số loài thuộc chi Canarium của Việt Nam, Hội thảo quốc gia về Sinh thái và Tài nguyên sinh vật, Hà Nội, Nhà xuất bản Nông nghiệp, tr. 650-654. 6. Tran Dinh Thang (2005), Preliminary study on Clausena lansium (Lour.) Skeels from Vietnam, Paper presented at the 4 th Indochina Conference on Pharmaceutical Sciences, November 10-13, 2005, Ho Chi Minh City, Vietnam. 7. Tran Dinh Thang (2006), Some results of the study on Vietnam Essential Oils by Capillary GC and GC/MS, Paper presented at the 5th International Symposium on Chromatography of Natural Products Lublin, Poland, 19-22 June 2006. 8. Tran Dinh Thang, Amooru G. Damu, Ping-Chung Kuo, Tian- Shung Wu, Nguyen Xuan Dung, Some results of the Study on Clausena lansium (Lour.) Skeels from Vietnam, Paper presented at the 9 th International Congress on Enthopharmacology, August 22-26, 2006, Nanning, Quangxi, China. 9. Trần Đình Thắng, Hoàng Văn Lựu, Nguyễn Xuân Dũng (2007), Thành phần hóa học của cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl., Tạp chí Dợc học, 370 (47), tr.19-23. 10. Mei-Lin Yang, Ping-Chung Kuo, Pei-Lin Wu, Tran Dinh Thang, Nguyen Xuan Dung, Tian-Shung Wu (2007), Constituents from Abutilon indicum, Journal of Asian Natural Products Research (accepted). 11. Tran Dinh Thang, Amooru G. Damu, Nguyen Xuan Dung and Tian-Shung Wu (2007), Cytotoxicity-Assay Guided Investigation of the Roots of Clausena lansium (in preparation) 1 I. Giới thiệu luận án 1. ý nghĩa của luận án Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đang đóng một vai trò hết sức quan trọng trong đời sống con ngời. Chúng đợc dùng để sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, nguyên liệu cho công nghiệp thực phẩm, hơng liệu và mỹ phẩm Ngày nay, thảo dợc vẫn đóng một vai trò vô cùng quan trọng trong việc sản xuất dợc phẩm nh là nguồn nguyên liệu trực tiếp, gián tiếp hoặc cung cấp những chất dẫn đờng cho việc tìm kiếm các biệt dợc mới. Các số liệu cho thấy rằng, khoảng 60% các loại thuốc đang đợc lu hành hiện nay hoặc đang trong giai đoạn thử nghiệm lâm sàng cuối cùng có nguồn gốc từ các hợp chất thiên nhiên. Trớc sự phát triển vợt bậc của ngành sinh học phân tử, ngày nay các nhà khoa học trên thế giới lại tập trung nghiên cứu các hợp chất thiên nhiên. Nhiều hoạt tính sinh học quý báu của các hợp chất quen biết từ lâu lại mới đợc phát hiện. Nhiều cây cỏ lâu nay rất phổ biến và bình thờng quanh ta lại chứa những hoạt chất có giá trị. Thảm thực vật của rừng ma nhiệt đới khu vực Đông Nam á, trong đó có Việt Nam là vùng đợc rất nhiều các nhà khoa học trong và ngoài nớc quan tâm, nghiên cứu. Abutilon là chi lớn nhất trong họ Bông (Malvaceae), có khoảng 120 loài trên thế giới, phân bố rải rác khắp các vùng nhiệt đới và ôn đới ẩm. ở Việt Nam, cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet) mọc hoang dại rải rác ở hầu hết các tỉnh, từ vùng đồng bằng ven biển đến trung du và cả vùng núi thấp. Cây cối xay là vị thuốc đợc sử dụng để chữa cảm 2 sốt, đau đầu, bí tiểu tiện, phù thũng sau khi đẻ, kiết lỵ, mắt có màng mộng, tai điếc. Các loài trong chi Clausena thuộc họ Cam quýt (Rutaceae) có nguồn gen đa dạng, phân bố rộng. Nhiều loài vẫn sinh trởng bình thờng ở trạng thái tự nhiên. Đây không chỉ là nguồn nguyên liệu chứa tinh dầu, mà còn là nguồn nguyên liệu chứa các hợp chất chứa carbazol (kiểu ancaloit) có hoạt tính sinh học cao, có triển vọng trong y dợc. Họ Trám (Burseraceae) ở Việt Nam đợc xếp vào các nhóm cây cho tinh dầu có giá trị (đặc biệt các loài thuộc chi Canarium cho loại tinh dầu quý), cho dầu béo (loài Protium serratum Engl.), cho nhựa trực tiếp (các loài của chi Canarium). Một loại cây họ Trám đợc dùng làm cây chủ để thả cánh kiến lấy nhựa động vật. Chính vì vậy chúng tôi chọn đề tài Nghiên cứu thành phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet), cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels), cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) và cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) ở Việt Nam từ đó góp phần xác định thành phần hoá học và tìm ra nguồn nguyên liệu cho ngành hoá dợc, hơng liệu, góp phần điều tra cơ bản và phân loại bằng hoá học chi Abutilon, chi Clausena và chi Canarium. 2. Đối tợng nghiên cứu và nhiệm vụ của luận án Đối tợng nghiên cứu của luận án là một số loài cây Việt Nam có giá trị, có những ứng dụng và triển vọng cung cấp tinh dầu và hợp chất có hoạt tính sinh học phong phú, hấp dẫn. Cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet) thuộc họ Bông (Malvaceae). 3 Cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels) thuộc họ Cam quýt (Rutaceae) Cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) Cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) thuộc họ Trám (Burseraceae). Nhiệm vụ của luận án bao gồm: - Chng cất lôi cuốn hơi nớc hoặc chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu đợc hỗn hợp các hợp chất từ các bộ phận khác nhau của cây cối xay, cây hồng bì, trám trắng và trám đen. - Xác định thành phần hoá học của tinh dầu từ cây hồng bì, trám trắng và trám đen. - Phân lập và xác định cấu trúc một số hợp chất từ cây cối xay, cây hồng bì, trám trắng và trám đen. 3. Những đóng góp mới của luận án 1. Lần đầu tiên từ dịch chiết của phần trên mặt đất cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet) ở Bắc Kạn chúng tôi đã phân lập và xác định đợc cấu trúc hoá học của 28 hợp chất thuộc các lớp chất: Ancaloit: 1-metoxycacbonyl--cacbolin, lycoperodin -1, metyl indol-3-cacboxylat. Amit: aurantiamit axetat và N-feruloyltyrosin. Cumarin: scoparon, scopoletin, 3,7-dihydroxycumarin. Benzenoit: vanillin, metyl cumarat, 4-hydroxyacetophenon, p- hydroxy benzandehyt, metylparaben, syringaldehyt, axit trans-p- cumaric, axit p-hydroxybenzoic, axit vanillic và axit benzoic. Ionon: 3-hydroxy--damascon và 3-hydroxy--ionol. Nucleosit: adenosin, riboflavin, thymin và adenin. 4 Steroit: -sitosterol và stigmasterol. Một diphenyl ete mới đợc đặt tên abutilin A. Hợp chất (R)-N-1'-(1'-metoxycacbonyl-2'-phenyletyl)-4- hydroxybenzamit lần đầu tiên tìm thấy trong tự nhiên. 2. Đã xác định đợc thành phần chính của tinh dầu lá cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels) ở Nghệ An là -phellandren (15,85%) và -santalol (32,64%), các hợp chất khác có hàm lợng nhỏ chiếm u thế là -sesquiphellandren (4,05%), spathulenol (4,99%), đồng phân của zingiberen (4,14%) và -sinensal (5,16%), trong khi đó thành phần chính của tinh dầu loài này ở Thanh Hoá là -caryophyllen (51,68%) và (E)--bisabolen (9,85%), các hợp chất khác có hàm lợng nhỏ chiếm u thế là -humulen (6,10%) và -santalol (5,07%). 3. Lần đầu tiên từ dịch chiết của rễ cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeel) ở Nghệ An chúng tôi đã phân lập và xác định đợc cấu trúc hoá học của 16 hợp chất thuộc các lớp chất: Cacbazol ancaloit: Cacbazol-3-metyl cacboxylat, 3-formyl cacbazol, murrayanin, 3-formyl-6-metoxy cacboxylat, glyzolidal, clausin I, O- demetylmurrayanin. Cumarin: Xanthotoxol, xanthotoxin, osthenol, imperatorin, 8- geranyloxypsoralen, wampetin. Amit: N-p-cumaroyltyramin. Ancaloit quinolon: -Fagarin, 4-metoxy-N-metyl-2-quinolon. 4. Lần đầu tiên thành phần hóa học của tinh dầu lá cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) đã đợc nghiên cứu. Tinh dầu này đợc đặc trng bởi hàm lợng lớn của -myrcen (23,70%) và - caryophyllen (15,00%). 5 5. Lần đầu tiên đã nghiên cứu dịch chiết của lá cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) ở Việt Nam, phân lập và xác định đợc cấu trúc hoá học của 3 hợp chất bao gồm: hyperin, brevifolin, axit ellgalic. 6. Lần đầu tiên đã nghiên cứu thành phần hoá học của tinh dầu lá cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.). Thành phần hoá học chính là -pinen (14,25%), -, -phellandren (31,36%, 20,94%) và germacren B (13,93%). 7. Lần đầu tiên đã nghiên cứu dịch chiết của cành cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) Nghệ An, đã phân lập và xác định đợc cấu trúc hoá học của 5 hợp chất bao gồm: genkwanin, 3,4,5- trimetoxyphenyl-O--D-glucopyranozit, -amyrin, -sitosterol, - sitosterol-3--D-glucopyranozit. 4. Bố cục của luận án Luận án bao gồm 134 trang với 31 bảng số liệu, 10 hình và 4 sơ đồ với 105 tài liệu tham khảo. Kết cấu của luận án gồm: mở đầu (3 trang), tổng quan (20 trang), phơng pháp nghiên cứu (1 trang), thực nghiệm (25 trang), kết quả và thảo luận (70 trang), kết luận (2 trang), danh mục công trình công bố (2 trang), tài liệu tham khảo (10 trang). Ngoài ra còn có phần phụ lục gồm 40 phổ của một số hợp chất chọn lọc. II. Nội dung luận án Mở đầu Phần đặt vấn đề đã đề cập đến ý nghĩa khoa học, tính thực tiễn, đối tợng và nhiệm vụ nghiên cứu của luận án. 6 Chơng 1: Tổng quan Phần này tổng hợp các tài liệu quốc tế và trong nớc về các loài cây đợc nghiên cứu trong luận án: thực vật học, thành phần hoá học, hoạt tính sinh học và ứng dụng của chúng. Chơng 2: Phơng pháp nghiên cứu Phơng pháp lấy mẫu Mẫu tơi sau khi lấy về đợc rửa sạch, để nơi thoáng mát hoặc sấy khô ở 40 0 C. Việc xử lý tiếp các mẫu bằng phơng pháp chng cất lôi cuốn hơi nớc hoặc chiết chọn lọc với các dung môi thích hợp để thu đợc hỗn hợp các hợp chất dùng cho nghiên cứu đợc nêu ở phần thực nghiệm. Phơng pháp phân tích, tách các hỗn hợp và phân lập các chất Đã sử dụng các phơng pháp sắc ký cột (CC), sắc ký cột nhanh (FC), sắc ký lớp mỏng (TLC), sắc ký lỏng cao áp (HPLC), sắc ký khí- Detetor FID (GC-FID), sắc ký khí-khối phổ (GC-MS). Phơng pháp khảo sát cấu trúc các hợp chất Cấu trúc các hợp chất đợc xác định bằng sự kết hợp các phơng pháp phổ: phổ tử ngoại (UV), phổ hồng ngoại (FT-IR), phổ khối lợng va chạm elecron (EI-MS), phổ khối lợng phân giải cao (HR-FAB-MS), phơng pháp phổ cộng hởng từ hạt nhân một chiều (1D-NMR): 1 H- NMR, 13 C-NMR, DEPT và phổ cộng hởng từ hạt nhân hai chiều (2D- NMR): 1 H- 1 H COSY, HSQC, HMBC, NOESY. Chơng 3: Thực nghiệm Chơng này nêu cụ thể các phơng pháp tách tinh dầu, phân tích tinh dầu, tách các hợp chất, các hằng số vật lý và dữ kiện phổ các hợp chất đợc phân lập. [...]... H (1 04) -Sitosterol-O--D-glucopyranosit OCH3 OCH3 H3CO OH CH3O OH H O HO OH O H HO H O O OH H H (1 05) Genkwanin (1 06) 3,4,5-Trimetoxyphenyl-O--D-glucopyranozit Kết luận Đã tiến hành nghiên cứu thành phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet), cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels) , cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch), cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) ở Việt. .. 4-metoxy-N-metyl-2-quinolon 4 Thành phần hóa học của tinh dầu lá cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) đã đợc nghiên cứu Tinh dầu này đợc đặc trng bởi hàm lợng lớn của -myrcen (2 3,7%) và -caryophyllen (1 5,0%) 5 Từ các dịch chiết của lá cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) đã phân lập và xác định đợc cấu trúc hoá học của 3 hợp chất bao gồm: hyperin, brevifolin, axit ellagic 6 Thành phần chính của... Xác định thành phần hoá học của tinh dầu lá trám trắng Thành phần hóa học của tinh dầu lá trám trắng đợc trình bày ở bảng 21 Hơn 50 hợp chất đợc xác định trong tinh dầu lá trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) của Việt Nam Tinh dầu này đợc đặc trng bởi hàm lợng lớn của -myrcen (2 3,7%) và -caryophyllen (1 5,0%) Các hợp chất có giá trị về mùi thơm với hàm lợng cao hơn 0,1% đã đợc xác định là (Z)-3-hexenyl...7 Chơng 4: Thảo luận v kết quả 4.1 Cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet) 4.1.1 Nguyên liệu thực vật Phần trên mặt đất cây cối xay (Abutilon indicum (L.) Sweet) đợc thu hái tháng 4 năm 2004 ở Bắc Kạn 4.1.2 Phân lập một số hợp chất và xác định cấu trúc một số hợp chất từ cành cây cối xay Mẫu phần trên mặt đất (1 0kg) đợc cắt nhỏ, phơi, sấy khô ở 400C sau đó đem nghiền nhỏ, chiết hồi lu với... N (9 1) Thymin 7 8 9 N H (9 2) Adenin 4.2 Cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels.) 4.2.1 Nguyên liệu thực vật Lá cây hồng bì (Clausena lansium (Lour.) Skeels.) đợc thu hái tháng 12 năm 2004 ở Nghệ An và Thanh Hóa Chng cất lôi cuốn hơi nớc lá cây hồng bì thu đợc tinh dầu với hiệu suất 0,42-44% so với lợng nguyên liệu tơi Tinh dầu này có xanh da trời nhạt, có mùi rất thơm 4.2.2 Xác định thành phần. .. Hợp chất amit HO H N O OH (9 9) N-p-cumaroyltyramin Hợp chất alkaloit quinolon OCH3 N OCH3 O N OCH3 (1 00) -Fagarin O CH3 (5 8) 4-Metoxy-N-metyl-2-quinolon 4.3 Cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) 4.3.1 Nguyên liệu thực vật Lá cây trám trắng (Canarium album (Lour.) Raeusch) đợc thu hái tháng 5 năm 2002 ở Thanh Chơng, Nghệ An Chng cất lôi cuốn hơi nớc lá cây trám trắng với hiệu suất 0,1% so... thành phần hoá học của tinh dầu lá cây hồng bì Hơn 70 hợp chất trong tinh dầu cây hồng bì (C lansium) ở Việt Nam đợc tách ra bằng GC, 50 hợp chất đợc xác định bằng GC/MS, chiếm 98,2 % hàm lợng tinh dầu Thành phần chính của tinh dầu cây hồng bì (C lansium) ở Nghệ An là -phellandren (1 5,9%) và -santalol (3 2,6%), các hợp chất khác có hàm lợng nhỏ chiếm u thế là -secquiphellandren (4 ,1%), spathulenol (5 ,0%),... môi CH3OH thu đợc hợp chất 103 (axit ellagic) O OH O O HO OH HO O --gal HO OH (1 01) Brevifolin OH O (1 02) Hyperin 20 O O HO OH HO O OH O (1 03) Axit ellagic 4.4 Cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) 4.4.1 Nguyên liệu thực vật Lá cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) đợc thu hái tháng 3 năm 2004 ở Thanh Chơng, Nghệ An Chng cất lôi cuốn hơi nớc lá cây trám đen thu đợc tinh dầu với hiệu suất... của zingiberen (4 ,1%) và -sinensal (5 ,2%), trong khi đó thành phần chính của tinh dầu loài này ở Thanh Hoá là -caryophylen (5 1,7%) và (E)--bisabolen (9 ,9%), các hợp chất khác có hàm lợng nhỏ chiếm u thế là -humulen (6 ,1%) và -santalol (5 ,1%) 16 4.2.3.1 Chiết tách Mẫu rễ hồng bì (C lansium) đợc thu hái ở Nghệ An vào tháng 3/2004 3500g mẫu rễ khô (sấy ở 40OC) và xay nhỏ đợc chiết với CH3OH ở nhiệt độ phòng... bao gồm: hyperin, brevifolin, axit ellagic 6 Thành phần chính của tinh dầu lá cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) là -pinen (1 4,25%), -, -phellandren (3 1,36%, 20,94%) và germacren B (1 3,93%) 7 Từ các dịch chiết của cành cây trám đen (Canarium nigrum (Lour.) Engl.) Nghệ An đã phân lập và xác định đợc cấu trúc hoá học của 5 hợp chất bao gồm: genkwanin, 3,4,5-trimetoxyphenyl-O--Dglucopyranozit, . tài Nghiên cứu thành phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L. ) Sweet), cây hồng bì (Clausena lansium (Lour .) Skeels), cây trám trắng (Canarium album (Lour .) Raeusch) và cây trám đen (Canarium. học vinh Trần Đình Thắng Nghiên cứu thnh phần hoá học cây cối xay (Abutilon indicum (L. ) Sweet) cây hồng bì (Clausena lansium (Lour .) Skeels) cây trám trắng (Canarium album (Lour .). (Lour .) Skeels) thuộc họ Cam quýt (Rutaceae) Cây trám trắng (Canarium album (Lour .) Raeusch) Cây trám đen (Canarium nigrum (Lour .) Engl .) thuộc họ Trám (Burseraceae). Nhiệm vụ của luận án bao