5 pu kn kt

PHẢN ỨNG Kháng nguyên – Kháng thể PGS TS Cao Minh Nga BM Vi sinh - Khoa Y - ÑH Y Dược TP HCM KHÁI NIỆM  ĐN: Là phương pháp miễn dịch học (MDH)  Mục đích: Xác định / - chuẩn độ KN - định lượng hiệu giá KT - đo lường phức hợp KN-KT - đo lường nhân tố  tham gia / hệ thống MD VD: kiểm tra hoạt tính bổ thể Nguyên lý phản ứng KNKT  Tính đặc hiệu a b a b Kháng nguyên A c c • Điểm định KN (epitope): phần phân tử KN có khả liên kết đặc hiệu vào phần liên kết với KN phân tử KT Kháng nguyên Tương tác KN - KT Hiện tượng vùng PHÂN LOẠI A PƯ dựa tạo thành “hạt”: PƯ kết tủa (precipitation reaction): KN hòa tan PƯ ngưng kết (agglutination reaction): KN hữu hình B PƯ dựa hoạt động sinh học KT: PƯ kết hợp bổ thể (complement binding reaction) PƯ trung hòa (neutralization reaction) C PƯ MD đánh dấu: PƯ MD huyønh quang (immunofluorescence reaction) PƯ MD men (enzyme linked immunosorbent assay – ELISA) PƯ MD phoùng xạ (radio immmuno assay - RIA) Thử nghiệm xác định Westein Blot (dấu thấm MD) Các phản ứng MD có độ nhạy khác Loại phản ứng MD Ngưỡng phát (g/ml) Kết tủa / môi trường lỏng Kết tủa / thạch: - khuếch tán đơn (Mancini)         - khuếch tán kép (Ouchterlony)          - MD điện di (Immuno electrophoresis ) 20   10 50 Ngưng kết: - trực tiếp        - gián tiếp - NK vi khuẩn 0,5 0,001 0,001 Cố định bổ thể (CF) 0,1 Miễn dịch huỳnh quang (IF) 0,1 Định lượng MD phóng xạ (RIA) 0,0001 Định lượng MD enzym (EIA) 0,0001 ... Xác định / - chuẩn độ KN - định lượng hiệu giá KT - đo lường phức hợp KN- KT - đo lường nhân tố  tham gia / hệ thống MD VD: kiểm tra hoạt tính bổ thể Nguyên lý phản ứng KNKT  Tính đặc hiệu a... a b Kháng nguyên A c c • Điểm định KN (epitope): phần phân tử KN có khả liên kết đặc hiệu vào phần liên kết với KN phân tử KT Kháng nguyên Tương tác KN - KT Hiện tượng vùng PHÂN LOẠI A PƯ dựa... xảy vị trí IgG gắn vào KN - B: xảy IgG trở thành cầu nối KN - C: dễ xảy KT loại IgM Tạo mạng Phản ứng NK hồng cầu gián tiếp (thụ động) * NK hồng cầu thụ động KN hapten KT / mẫu gắn giá khoác