Tạp chí Khoa học Công nghệ và Thực phẩm 21 (2) (2021) 89 99 89 KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY VI KHUẨN Oceanobacillus sp ĐẾN VIỆC TẠO TỦA CALCITE VÀ KHẢ NĂNG KẾT DÍNH BÊ TÔNG Phạm An[.]
Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Thực phẩm 21 (2) (2021) 89-99 KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY VI KHUẨN Oceanobacillus sp ĐẾN VIỆC TẠO TỦA CALCITE VÀ KHẢ NĂNG KẾT DÍNH BÊ TƠNG Phạm Anh Vũ1,2*, Vũ Thị Tuyết Nhung1,2, Nguyễn Hoàng Dũng1, Trần Trung Kiên1, Lê Quỳnh Loan1, Huỳnh Thị Điệp1, Trần Thị Mỹ Ngọc1, Lê Tấn Hưng3 Viện Sinh học Nhiệt đới - Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm KH&CN Việt Nam Công ty TNHH Sinh học Phương Nam *Email: vupham12081995@gmail.com Ngày nhận bài: 15/7/2020; Ngày chấp nhận đăng: 18/3/2021 TÓM TẮT Nghiên cứu tiến hành để khảo sát đơn yếu tố điều kiện môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến sinh trưởng vi khuẩn Oceanobacillus sp trình tạo tủa calcite khảo sát khả tự làm liền vết nứt bê tông bổ sung dịch vi khuẩn Oceanobacillus sp Khả tạo tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp đánh giá thông qua việc định lượng tủa calcite môi trường urea thay đổi yếu tố riêng rẽ nguồn Ca2+ khác nồng độ CaCl2 Kết khảo sát đơn yếu tố môi trường urea cho thấy nguồn calcium chloride tạo sản lượng tủa cao nhất, nồng độ CaCl2 50 g/L cho kết tủa CaCO3 tối ưu với sản lượng đạt 52,05 mg/mL Bên cạnh đó, bê tơng có bổ sung dịch vi khuẩn Oceanobacillus sp với mật độ 1010 CFU/mL có khả tự liền vết nứt sau 10 ngày ngâm nước Kết nghiên cứu cho thấy vi khuẩn Oceanobacillus sp có tiềm ứng dụng việc kết dính bê tơng thơng qua hình thành tủa calcite, đặc biệt lĩnh vực xây dựng để sản xuất bê tông sinh học Từ khóa: Vi khuẩn Oceanobacillus sp., tủa calcite, bê tơng tự liền, bê tông sinh học GIỚI THIỆU Ngày có nhiều cơng trình xây dựng bê tơng Do đó, bê tơng vật liệu khơng thể thiếu giới Theo thời gian sử dụng, bê tông xuất vết nứt lỗ nhỏ bề mặt Nguyên nhân gây tượng chủ yếu tác động từ điều kiện tự nhiên, kết cấu bê tông thiếu khả chịu lực sụt lún móng Tác nhân tự nhiên nước mưa tác nhân ăn mòn khác thấm dần vào kẽ nứt, làm rỉ sét lõi thép bên phá hủy toàn khối cấu trúc Việc sửa chữa cơng trình bê tơng địi hỏi chi phí cao tốn nhiều cơng lao động Từ đó, nhà khoa học nghĩ đến việc nghiên cứu loại bê tông tự liền nhờ khả tạo calcite vi sinh vật loại xi măng sinh học Trong tự nhiên, vi khuẩn tạo kết tủa calcite nhiều chế khác bao gồm: quang hợp, thủy phân urea, khử sulfate, oxy hóa kỵ khí sulfide, oxy hóa methane, đường tạo biofilm hợp chất polymer ngoại bào Nhiều nghiên cứu tập trung vào đường thủy phân urea đại diện vi khuẩn Sprorosarcina pasteurii (thường gọi Bacillus pasteurii) Chủng vi khuẩn phân lập đất, chúng có đặc điểm sản 89 Phạm Anh Vũ, Vũ Thị Tuyết Nhung, Nguyễn Hoàng Dũng, Trần Trung Kiên, Lê Quỳnh Loan… sinh lượng enzyme urease cao, không gây bệnh, sản sinh bào tử, đặc biệt có khả tạo kết tủa calcite [1, 2] Ngoài ra, số nghiên cứu giới phân lập chủng vi khuẩn tạo calcite như: L spharicus CH5, K flava CR1, B megaterium SS3, B thuringiensis, Halomonas sp SR4, Helicobacter pylori, Proteus vulgaris, Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Đặc điểm chung chủng vi khuẩn khả sản xuất enzyme urease [3, 4] Chủng vi khuẩn Oceanobacillus profundus phân lập từ lõi trầm tích vùng biển phía Đơng Hàn Quốc [5] Tuy nhiên, chủng chưa nghiên cứu sâu khả tạo tủa calcite khả kết dính bê tông Gần đây, vi khuẩn Oceanobacillus sp phân lập từ vùng núi đá vơi tỉnh Bình Phước, qua khảo sát sơ ban đầu vi khuẩn đặc biệt có khả sinh bào tử nên chúng tồn mơi trường tự nhiên thời gian dài có khả tạo tủa calcite (CaCO3) cao (kết không báo cáo) Trên giới có nhiều cơng trình nghiên cứu khả tạo kết tủa calcite từ chủng vi sinh vật ứng dụng tiềm chúng Một nhóm nghiên cứu sử dụng chủng vi khuẩn Bacillus subtilis ứng dụng vào việc cải thiện cường độ nén bê tông Kết cho thấy mẫu bê tông bổ sung vi khuẩn có cường độ nén cao xấp xỉ 30% so với mẫu đối chứng [6] Năm 2015, nhóm nghiên cứu thực phân lập vi khuẩn kết tủa calcite kiểm tra phù hợp vi khuẩn để sử dụng bê tông nhằm cải thiện cường độ nén bê tông [7] Một nhóm nghiên cứu gây đột biến thành cơng dịng S pasteurii cách chiếu tia cực tím Chủng đột biến hướng đến mục đích tạo nhiều urease để sản xuất calcite tối đa phát triển pH cao [8] Nghiên cứu khác cho thấy việc sử dụng Bacillus flexus làm tăng 18% độ cứng vữa xi măng [9] Tuy nhiên, nước ta nghiên cứu vi khuẩn tạo tủa calcite chưa thực nhiều Các nghiên cứu công bố chủ yếu tập trung vào việc nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn tạo khoáng để cải thiện vết nứt vật liệu bê tơng Một nhóm nghiên cứu ứng dụng chủng vi khuẩn Bacillus subtilis HU58 đến khả tự liền vết nứt mẫu bê tông nhờ khống hóa vi khuẩn [10], chủng vi khuẩn có nguồn gốc từ nước ngồi Cho đến nay, chưa có nghiên cứu nước tiến hành việc ứng dụng vi khuẩn địa Oceanobacillus sp đến việc tạo tủa calcite kết dính bê tơng Chính vậy, chúng tơi thực nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Oceanobacillus sp đến việc tạo tủa calcite khả kết dính bê tơng để làm tảng cho việc tạo xi măng sinh học phục vụ nhu cầu thực tiễn VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Chủng vi khuẩn môi trường nuôi cấy Vi khuẩn Oceanobacillus sp cung cấp từ Phòng Vi sinh ứng dụng, Viện Sinh học Nhiệt đới - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Vi khuẩn nuôi cấy môi trường urea với thành phần gồm: CaCl2: 50 g/L, urea: 20 g/L, cao nấm men: 20 g/L (Merck - Đức), pH 6,8 2.2 Khảo sát khả tạo tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp điều kiện môi trường khác Vi khuẩn tăng sinh môi trường urea để làm mơi trường cho thí nghiệm khảo sát đơn yếu tố điều kiện môi trường nuôi cấy ảnh hưởng đến sinh trưởng vi khuẩn q trình tạo tủa calcite Các yếu tố mơi trường khảo sát bao gồm: nguồn Ca2+ nồng độ CaCl2 lựa chọn điều kiện nhiệt độ 35 °C, pH 6,8 Thành phần môi trường (g/L) khảo sát nguồn Ca2+ gồm: calcium chloride: 50, calcium acetate: 50, calcium lactate: 50, urea: 20, cao nấm men: 20 Thành phần môi trường (g/L) khảo sát nồng độ CaCl2 90 Khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Oceanobacillus sp … gồm: urea: 20, cao nấm men: 20 CaCl2 từ 20 đến 60 Các nghiệm thức lặp lại lần, sau định lượng kết tủa calcite 2.3 Định lượng kết tủa calcite Vi khuẩn Oceanobacillus sp tăng sinh môi trường urea điều kiện lắc 200 vòng/phút 24 nhiệt độ 35 °C đến đạt mật độ 10 CFU/mL Dịch ni cấy vi khuẩn (1 mL) cho vào bình chứa 50 mL môi trường nghiệm thức khác ni nhiệt độ phịng ngày Dịch vi khuẩn nuôi cấy sau ngày ly tâm lạnh °C 13000 vòng/phút 10 phút Phần kết tủa calcite sinh khối vi khuẩn thu nhận hòa tan trở lại 50 mL dung dịch đệm TE (10 mM Tris, mM EDTA, pH 8,5), sử dụng phương pháp siêu âm máy VCX500 sonicator (Sonics and Materials - Mỹ) để phá vỡ màng tế bào Tiếp đến lysozyme bổ sung vào dung dịch huyền phù tế bào đến nồng độ cuối đạt mg/mL ủ 37 °C tế bào phân giải hoàn toàn Dung dịch mảnh vỡ tế bào loại bỏ hoàn toàn phương pháp ly tâm Phần tủa calcite cịn lại rửa với nước cất vơ trùng, sau lọc sấy khơ 45 °C đến trọng lượng không đổi Khối lượng kết tủa cân cân phân tích số (Mettler Toledo Liên doanh Mỹ - Thụy Sỹ) ghi nhận kết 2.4 Khảo sát khả kết dính bê tơng chủng vi khuẩn Oceanobacillus sp 2.4.1 Chuẩn bị mẫu bê tông sinh học Các nguyên liệu chế tạo vữa bê tông lựa chọn đáp ứng theo yêu cầu tiêu chuẩn Việt Nam [10] Các thành phần vữa bê tông bao gồm: xi măng Vicem Hà Tiên, cát xây dựng với kích thước hạt < mm, diatomite Celatom (VMC Group Sài Gịn), nước sinh hoạt phịng thí nghiệm Vi khuẩn Oceanobacillus sp nuôi cấy môi trường urea điều kiện lắc 24 nhiệt độ 35 °C đến đạt mật độ 1010 CFU/mL tiến hành đổ mẫu bê tơng Thí nghiệm kết dính bê tơng tiến hành với nghiệm thức (nghiệm thức nghiệm thức 2) mẫu đối chứng không bổ sung dịch vi khuẩn Nghiệm thức bố trí sau: đổ mẫu vữa bê tơng kích thước 20 × × cm bao gồm 450 g cát, 150 g xi măng, 150 mL dịch vi khuẩn Oceanobacillus sp (3 : : 1) Nghiệm thức tiến hành đổ mẫu vữa bê tơng kích thước 20 × × cm thành phần nguyên liệu tỷ lệ phối trộn có thay đổi Thành phần nguyên liệu nghiệm thức bao gồm 450 g cát, 75 g xi măng, 75 mL dịch vi khuẩn, 75 g diatomite Mẫu đối chứng thực cách đổ mẫu vữa bê tơng kích thước 20 × × cm nguyên liệu bao gồm: 450 g cát, 150 g xi măng, 150 mL nước sinh hoạt phịng thí nghiệm Thanh bê tơng cứng sau 24 tạo vết đứt gãy nhân tạo vị trí thanh, cố định bê tơng dây thun ngâm nước sinh hoạt Thanh bê tông ngâm nước sau 10 ngày, 20 ngày 30 ngày lấy để quan sát diện kết tủa calcite bề mặt, bên vết đứt gãy kiểm tra kết dính mảnh bê tông cách tháo dây cố định, sau ghi nhận lại kết tự liền mẫu bê tông Tiếp theo mẫu kết tủa khoáng vi khuẩn Oceanobacillus sp tạo bề mặt vết đứt gãy bê tông sinh học thu nhận để phân tích thành phần khống CaCO3 số nguyên tố: K, Na, Mg, Al, Si Fe phương pháp Scanning Electron Microscope (SEM) kết hợp phương pháp Energy-dispersive X-ray spectroscopy (EDS) (Kính hiển vi điện tử quét kết hợp phổ phân tích tán xạ lượng tia X) Tinh thể khoáng tạo thành xác định dạng aragonite, vaterite dạng calcite phương pháp X-Ray diffraction (XRD) (Phổ phân tích nhiễu xạ bột tia X) Một mẫu tinh thể calcite (CaCO3) tinh khiết (Merck - Đức) phân tích thành phần hóa học dạng tinh thể để làm mẫu đối chứng 91 Phạm Anh Vũ, Vũ Thị Tuyết Nhung, Nguyễn Hoàng Dũng, Trần Trung Kiên, Lê Quỳnh Loan… 2.4.2 Định lượng mật độ vi khuẩn Oceanobacillus sp phương pháp pha loãng tới hạn (MPN) Sử dụng mẫu bê tông sinh học nghiệm thức nghiệm thức thực nội dung 2.4.1 để định lượng mật độ vi khuẩn, mẫu ngâm nước sinh hoạt thời gian 35 ngày Tiếp theo, tuần mẫu bê tông lấy để định lượng mật độ vi khuẩn phương pháp MPN hệ thống 15 ống Quy trình định lượng mật độ vi khuẩn Oceanobacillus sp thực sau: Các ống nghiệm chuẩn bị với môi trường gồm: mL nước cất mL môi trường urea Các mẫu bê tông nghiền nhỏ cân 10 g mẫu cho vào 90 mL nước cất định mức đến 100 mL, vortex mẫu pha loãng thành dãy nồng độ 10-2, 10-3, 10-4 Dịch pha loãng nồng độ (1 mL) cho vào ống nghiệm chứa mL môi trường urea, đem ủ 35 °C ngày Số lượng ống nghiệm có khả tạo tủa calcite bề mặt mơi trường, thành ống nghiệm, đáy ống nghiệm ghi nhận tra bảng MPN để xác định mật độ tế bào tương ứng 2.5 Xử lý số liệu Các thí nghiệm lặp lại lần Số liệu ghi nhận, xử lý phần mềm Microsoft Excel 2010 biểu thị giá trị trung bình Các phương pháp thống kê, phân tích phương sai ANOVA thực phần mềm Minitab 16 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát khả tạo tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp điều kiện môi trường khác 3.1.1 Ảnh hưởng nguồn Ca2+ lên khả tạo tủa calcite Bên cạnh yếu tố dinh dưỡng nguồn ion Ca2+ thành phần thiếu việc tạo tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp Các nguồn Ca2+ ảnh hưởng rõ rệt đến khối lượng tủa calcite tạo thành trình bày Hình Khối lượng tủa calcite (mg/mL) 60 52,37a 50 30,20b 40 22,80c 30 20 10 Calcium chloride Calcium acetate Calcium lactate Nguồn calcium Các ký tự abc Hình Ảnh hưởng nguồn Ca2+ lên khả tạo tủa calcite giá trị trung bình cột, thể khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Theo kết Hình nguồn calcium khảo sát tạo tủa calcite vi khuẩn Ocenobacillus sp Kết tủa calcite thu nhận lại cân cân phân tích số Trong đó, khối lượng kết tủa calcite từ nguồn calcium chloride (CaCl2) đạt cao 92 Khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Oceanobacillus sp … 52,37 mg/mL, tiếp đến khối lượng kết tủa từ nguồn calcium acetate đạt 30,20 mg/mL, cuối khối lượng tủa từ nguồn calcium lactate thấp đạt 22,80 mg/mL Theo quan sát trình thu kết tủa nguồn calcium chloride bám dính vào thành bình chặt nguồn calcium acetate nguồn calcium lactate So sánh với nghiên cứu trước sử dụng vi khuẩn Bacillus sp CR2 để khảo sát khả tạo tủa calcite nguồn calcium khác Kết cho thấy nguồn calcium có ảnh hưởng đến việc tạo tủa calcite Trong nguồn calcium chloride thích hợp để tạo kết tủa calcite đạt 2,32 mg (trọng lượng khô calcite/khối lượng khơ tế bào) [11] Do đó, nguồn calcium yếu tố quan trọng kết tủa CaCO3 3.1.2 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ CaCl2 lên khả tạo tủa calcite Ion Ca2+ nguyên tố quan trọng thành phần tủa calcite Do đó, nồng độ ion Ca2+ có ảnh hưởng lớn đến tạo tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp Kết ảnh hưởng nồng độ CaCl2 lên khả tạo tủa calcite trình bày Hình Sản lượng tủa calcite (mg/mL) 60 45,10b 50 35,96d 40 30 46,48b 52,05a 38,98c 34,84e 33,19e 31,61ef 26,69f 20 10 20 25 30 35 40 45 50 Nồng độ calcium chloride (g/L) 55 60 Hình Ảnh hưởng nồng độ CaCl2 lên khả tạo tủa calcite Các ký tự abcdef giá trị trung bình cột, thể khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Ảnh hưởng nồng độ CaCl2 lên khả tạo tủa calcite thực nồng độ từ 20 g/L tới 60 g/L Kết Hình cho thấy vi khuẩn tạo kết tủa calcite tất nồng độ, nồng độ CaCl2 tăng từ 20 g/L tới 60 g/L khối lượng tủa tăng theo, nồng độ CaCl2 50 g/L cho lượng kết tủa đạt ngưỡng cao 52,05 mg/mL Sau đạt tới ngưỡng tủa cao với nồng độ CaCl2 50 g/L tăng nồng độ CaCl2 thêm khối lượng tủa giảm dần, với nồng độ CaCl2 tăng từ 55 g/L đến 60 g/L khối lượng tủa calcite lại giảm từ 34,84 mg/mL xuống 33,19 mg/mL Kết thí nghiệm phù hợp với nghiên cứu trước nồng độ CaCl tăng từ 25 mM lên 250 mM tăng khả tạo tủa calcite [12], nồng độ CaCl2 tăng mức gây độc cho vi khuẩn vi khuẩn cần lượng CaCl2 định [13] 3.2 Khảo sát khả kết dính bê tông định lượng mật độ vi khuẩn bê tơng 3.2.1 Khảo sát khả kết dính bê tơng vi khuẩn Khả kết dính bê tơng thực dựa tạo kết tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp Kết khảo sát khả kết dính bê tơng trình bày Bảng 93 Phạm Anh Vũ, Vũ Thị Tuyết Nhung, Nguyễn Hoàng Dũng, Trần Trung Kiên, Lê Quỳnh Loan… Bảng Kết tỷ lệ % bê tông tự liền sau ngâm nước Tỷ lệ % bê tông tự liền sau ngâm nước Mẫu bê tông Ngày 10 Ngày 20 Ngày 30 Đối chứng 0 Nghiệm thức 52 72 80 Nghiệm thức 28 48 64 A B C Hình Thanh bê tơng sau 30 ngày ngâm nước: (A) Thanh đối chứng, (B) Thanh bê tông nghiệm thức 1, (C) Thanh bê tông nghiệm thức Kết Bảng Hình cho thấy bổ sung dịch vi khuẩn Oceanobacillus sp vào bê tơng bê tơng có khả liền lại sau cố định ngâm nước sinh hoạt Qua q trình thí nghiệm khảo sát khả kết dính bê tơng chủng vi khuẩn Oceanobacillus sp tỷ lệ % bê tơng tự liền nghiệm thức cao nghiệm thức Trong 10 ngày đầu khảo sát tỷ lệ % bê tông tự liền nghiệm thức đạt 52%, nghiệm thức đạt 28% Sang đến 20 ngày 30 ngày tỷ lệ % bê tông tự liền nghiệm thức tăng lên, đến ngày thứ 30 tỉ lệ % bê tông tự liền nghiệm thức đạt 80% nghiệm thức đạt 64% Thanh bê tông bổ sung dịch vi khuẩn Oceanobacillus sp giúp mẫu bê tông có khả tự liền vết nứt sau 10 ngày Trong đó, mẫu bê tơng có sử dụng vi khuẩn phối trộn với diatomite cho khả làm liền vết nứt chậm so với mẫu bổ sung dung dịch vi khuẩn Bởi diatomite chất trơ dùng để giữ vi khuẩn tạo tủa calcite khả tiếp xúc với mơi trường ngồi khơng thuận lợi vi khuẩn tự So sánh với kết nghiên cứu trước đây, sử dụng diatomite cố định vi khuẩn Bacillus subtilis HU58 cho bê tông tự liền vết nứt vết nứt tự liền từ đến 28 ngày, nghiên cứu sử dụng dịch vi khuẩn tươi dịch vi khuẩn phối trộn với diatomite vết nứt tự liền từ 10 đến 30 ngày khảo sát [10] 3.2.2 Định lượng mật độ vi khuẩn Oceanobacillus sp mẫu vữa bê tông Mật độ vi khuẩn Oceanobacillus sp mẫu vữa bê tông định lượng phương pháp MPN với độ pha loãng mẫu khác nhằm đánh giá số lượng vi sinh vật diện thể tích mẫu Kết tượng phản ứng tạo tủa calcite vi khuẩn 94 Khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Oceanobacillus sp … Oceanobacillus sp tạo thành ống nghiệm đáy ống nghiệm thể Hình số ống nghiệm dương tính trình bày Bảng A C B Hình Ống nghiệm dương tính với vi khuẩn Oceanobacillus sp (A) kết tủa calcite thành ống nghiệm, (B) kết tủa calcite đáy ống nghiệm, (C) ống nghiệm đối chứng Bảng Kết định lượng mật độ vi khuẩn Oceanobacilllus sp nghiệm thức nghiệm thức Thời gian cấy (ngày) MPN nghiệm thức (MPN/100 mL) MPN nghiệm thức (MPN/100 mL) 9,2 ± 0,8 33,6 ± 1,1 14 7,4 ± 1,1 25,8 ± 0,8 21 9,6 ± 0,5 ± 1,6 28 9,6 ± 1,1 6,8 ± 0,8 35 6,8 ± 0,8 ± 0,7 Kết thí nghiệm Hình Bảng cho thấy vi khuẩn Oceanobacillus sp có khả phát triển bê tông Điều cho thấy, tiềm ứng dụng Oceanobacillus sp công nghiệp vật liệu xây dựng để sản xuất xi măng sinh học gia cố đất cát q trình khống hóa sinh học Nhìn chung, diatomite có khả giữ vi khuẩn Oceanobacillus sp tồn bê tông lâu Kết nghiên cứu phù hợp với nghiên cứu trước cho thấy diatomite bảo vệ vi khuẩn khỏi mơi trường khắc nghiệt bên ngồi thời gian dài từ phát huy khả tạo khoáng sinh học, giúp gia tăng cường độ chịu nén tạo hiệu ứng tự liền vết nứt [10] Tuy nhiên, theo kết thí nghiệm với vi khuẩn Oceanobacillus sp diatomite cho thấy khơng có hiệu cao việc bảo quản vi khuẩn thí nghiệm đánh giá khả làm liền vết nứt (Bảng 2) 3.3 Thành phần khoáng vi khuẩn Oceanobacillus sp tạo thành Theo ghi nhận thực thí nghiệm, bê tơng sinh học bổ sung vi khuẩn Oceanobacillus sp có khác biệt với bê tơng đối chứng (Hình 5) 95 ... 3.2 Khảo sát khả kết dính bê tơng định lượng mật độ vi khuẩn bê tông 3.2.1 Khảo sát khả kết dính bê tơng vi khuẩn Khả kết dính bê tơng thực dựa tạo kết tủa calcite vi khuẩn Oceanobacillus sp Kết. .. dụng vi khuẩn địa Oceanobacillus sp đến vi? ??c tạo tủa calcite kết dính bê tơng Chính vậy, chúng tơi thực nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Oceanobacillus sp đến vi? ??c tạo. .. tượng phản ứng tạo tủa calcite vi khuẩn 94 Khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi cấy vi khuẩn Oceanobacillus sp … Oceanobacillus sp tạo thành ống nghiệm đáy ống nghiệm thể Hình số ống nghiệm dương