Bước đầu nghiên cứu ảnh hưởng của một số yếu tố đến quá trình ra rễ của 2 dòng bạch đàn pn108 và pn116 bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào và điều kiện huấn luyện cây con ngoài môi trường tự nhiên 1

Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 LỜI CẢM ƠN Trước hết xin trân thành cảm ơn ThS Phạm Đức Huy – Viện nghiên cứu nguyên liệu giấy Người tận tình bảo, hướng dẫn mặt q trình nghiên cứu để tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn tới cán bộ, kỹ sư Viện Nghiên Cứu Cây Nguyên Liệu Giấy tạo điều kiện tốt cho chúng tơi q trình nghiên cứu thực nghiệm Qua đõy tụi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy cơ, cán Khoa Công Nghệ Sinh Học - Viện Đại Học Mở Hà Nội tận tình bảo, tạo điều kiện thuận lợi cho học tập suốt năm học vừa qua, trình thực khóa luận tốt nghiệp Xin cảm ơn nhiệt tình giúp đỡ, trao đổi động viên bạn thực tập phịng nghiên cứu ni cấy mô, Viện nghiên cứu nguyên liệu giấy – Phù Ninh – Phú Thọ Một lần xin chân thành cảm ơn ! Hà Nội, ngày 20 tháng năm 2012 Sinh viên Phạm Thế Phúc MỤC LỤC Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC CÁC Kí HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Giới thiệu chung bạch đàn: 1.2 Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật nhân giống trồng 1.2.1 Khái niệm chung7 1.2.2 Cơ sở lý thuyết công nghệ nuôi cấy mô, tế bào thực vật 1.3 Các nhân tố ảnh hưởng tới trình nhân giống nuôi cấy mô tế bào 10 1.3.1 Mơi trường ni cấy: 10 1.3.2 Các chất điều hịa sinh trưởng: 1.3.3 Môi trường vật lý 13 1.3.4 Vật liệu nuôi cấy 14 1.3.5 Điều kiện vô trùng 14 12 1.4 Mục đích giai đoạn q trình nhân giống invitro 15 1.4.1 Mục đích: 15 1.4.2 Các giai đoạn q trình nhân giống in vitro 16 1.4.2.1 Giai đoạn chuẩn bị 16 1.4.2.2 Giai đoạn cấy khởi động 16 1.4.2.3 Giai đoạn nhân nhanh 16 1.4.2.4 Tạo hoàn chỉnh (ra rễ) 17 1.4.2.5 Đưa môi trường tự nhiên 17 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khố luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 1.5 Tình hình nghiên cứu thành tựu nhân giống invitro bạch đàn cõy thõn gỗ giới Việt Nam 1.5.1 Trên giới 18 18 1.5.2 Nhân giống bạch đàn gỗ phương pháp nuôi cấy mô Việt Nam 20 CHƯƠNG 2:MỤC TIấU, ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2.1 Mục tiêu nghiên cứu 23 2.2 Đối tượng nghiên cứu 23 2.2.1 Một số đặc điểm dịng PN108 23 2.2.2 Một số đặc điểm dịng PN47 23 2.2.3 Vật liệu nuôi cấy24 2.3 Nội dung nghiên cứu24 2.4 Phương pháp nghiên cứu 24 2.4.1 Thí nghiệm 1: Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng IBA (Indol Butyric Acid) lên trình tạo rễ 26 2.4.2 Thí nghiệm 2: Nghiên cứu ảnh hưởng tổng hợp chất điều hòa sinh trưởng IBA (Indol Butyric Acid) ABT1 lên trình tạo rễ dịng bạch đàn 26 2.4.3 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao vườn ươm 27 2.4.4 Địa điểm, điều kiện bố trí thí nghiệm 29 2.4.5 Thời gian thực tập 29 2.4.6 Bố trí thí nghiệm 29 2.4.7 Phương pháp thống kê xử lí số liệu 29 CHƯƠNG 3:KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bỡnh/cõy chiều dài rễ 32 3.2 Ảnh hưởng phối hợp IBA + ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 trung bỡnh/cõy chiều dài rễ 38 3.3 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao giai đoạn vườn ươm dòng PN108 PN116 45 3.4 So sánh kết nghiên cứu dòng bạch đàn PN108 PN116 với dũng nghiên cứu 3.5 Thảo luận chung 48 49 CHƯƠNG 4:KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 51 4.1 Kết luận 51 4.2 Tồn 51 4.3 Kiến nghị 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 PHỤ LỤC Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ rễ ống nghiệm 26 Bảng 2.2: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến tỷ lệ rễ ống nghiệm 27 Bảng 3.1: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bình chiều dài rễ dịng PN108 PN116 33 Bảng 3.2: Ảnh hưởng IBA+ ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ, số rễ trung bình chiều dài rễ dịng PN108 PN116 Bảng 3.3: 39 Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao giai đoạn vườn ươm dòng PN108 PN116 Bảng 3.4: 45 Các tiêu so sánh dịng 48 Khoa Cơng Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1a: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN108 33 Biểu đồ 3.1b: Ảnh hưởng IBA đến số rễ trung bình dịng PN108 34 Biểu đồ 3.1c: Ảnh hưởng IBA đến chiều dài trung bình rễ dịng PN108 34 Biểu đồ 3.1d: Ảnh hưởng IBA đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN116 36 Biểu đồ 3.1e: Ảnh hưởng IBA đến số rễ trung bình dịng PN116 36 Biểu đồ 3.1f: Ảnh hưởng IBA đến chiều dài trung bình rễ dòng PN116 37 Biểu đồ 3.2a: Ảnh hưởng IBA+ ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN108 Biểu đồ3.2b: 39 Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến số rễ trung bình dịng PN108 40 Biểu đồ 3.2c: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến chiều dài trung bình rễ dòng PN108 40 Biểu đồ 3.2d: Ảnh hưởng IBA+ ABT1 đến tỷ lệ chồi rễ dòng PN108 42 Biểu đồ 3.2e: Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến số rễ trung bình dịng PN116 Biểu đồ 3.2f: 42 Ảnh hưởng IBA+ABT1 đến chiều dài trung bình dịng PN116 43 Biểu đồ 3.3a: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống giai đoạn vườn ươm dòng PN108 PN116 46 Biểu đồ 3.3b: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến chiều cao giai đoạn vườn ươm dịng PN108 PN116 46 Khoa Cơng Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC HÌNH ẢNH Ảnh 1: Chồi rễ mơi trường có bổ sung ABT sau tuần nuôi cấy Ảnh 2: 44 Cây vườn ươm dòng PN108, PN116 PN14 48 Ảnh 3: Q trình ni cấy môi trường tạo rễ chuyển vườn ươm 50 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 DANH MỤC CÁC Kí HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT MS : Murashige Skoog (1962) ABT1 : Chất kích thích rễ Trung Quốc IBA : 3-Indol butyric acid TLRR : Tỷ lệ rễ Lrễ : Chiều dài trung bình rễ TLS : Tỷ lệ sống TB : Trung bình Cs : Cộng Khoa Cơng Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 ĐẶT VẤN ĐỀ Trong năm gần đây, kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật không ngừng phát triển thu thành tựu đáng kể Kỹ thuật đời mở hướng nghiên cứu thực vật nhanh chóng có vị trí quan trọng lĩnh vực công nghệ sinh học sản xuất cải thiện giống trồng ưu điểm bật phương pháp nhân nhanh đồng di truyền số lượng lớn cá thể thời gian ngắn, trẻ hố gần từ hạt [10] Cơng nghệ ni cấy mơ mắt xích khơng thể thiếu ngành công nghiệp trồng rừng suất cao vỡ nú phương tiện đắc lực giúp người mang lại hiệu ngày cao kinh doanh rừng trồng Cây giống mơ sản xuất có quy mơ , cho suất cao, chất lượng tốt giữ đặc tính di truyền quý giống gốc Hiện nay, trồng rừng sản xuất đòi hỏi phải mang lại hiệu kinh tế cho người làm nghề rừng, rừng trồng phải có chất lượng tốt, suất cao Một nhân tố định đến suất chất lượng rừng trồng, giống Khơng có giống với chất lượng di truyền cải thiện theo mục tiêu kinh tế khơng thể đưa suất rừng lên cao Loài cho trồng rừng sản xuất chủ yếu Bạch đàn với nhiều dũng cú nguồn gốc khác Để phục vụ cho mục đích kinh tế trồng rừng, nhiều giống cải thiện, có suất, chất lượng cao Việt Nam Cỏc dũng Bạch đàn chọn lọc đường tự nhiên (PN14, PN3d, PN21, PN24 ); Cỏc dũng bạch đàn lai nhân tạo (UC80, UE27, UE24, UE23… ) Theo đánh giá chuyên gia, so với bạch đàn trồng giống hạt giống bạch đàn sản xuất từ phương pháp nuôi cấy mơ có nhiều ưu điểm như: tốc độ tăng trưởng, phát triển nhanh hơn; tỷ lệ đồng cho suất gỗ cao, chu kỳ trồng rừng kinh doanh ngắn Trong trồng gieo từ hạt phải qua -10 năm khai thác rừng, rừng trồng từ ni cấy mô cần 5-6 năm thu hồi vốn; Nhờ đó, Khoa Cơng Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 việc trồng rừng bạch đàn cõy mụ tiết kiệm kinh phí thời gian chăm sóc rừng Xuất phát từ đặc điểm nêu trên, để tạo số lượng lớn chất lượng cao phục vụ trồng rừng khảo nghiệm trồng rừng kinh tế Về lâu dài nâng cao suất, chất lượng rừng phát triển nguồn gen quý chọn lọc thử nghiệm nhân giống Bạch đàn tiến tới hồn thiện cơng nghệ nhân giống phương pháp nuôi cấy mô tế bào cần thiết Theo định 1686QD/BNN-KHCN 1773QD/BNN-KHCN nông nghiệp phát triển nông thôn đánh giá cơng nhận hai dịng bạch đàn urophylla PN108 PN116 ( tên đầy đủ “Dũng bạch đàn Phù Ninh số 108” “Dũng bạch đàn Phù Ninh số 116”) đạt tiêu chuẩn Quốc gia giống tiến kỹ thuật Hiện nay, nhu cầu giống hai dòng nhằm phục vụ trồng rừng khảo nghiệm sản xuất lớn Thêm vào đó, việc nhân giống kỹ thuật ni invitro dịng chưa nghiờn cứu.vỡ vậy,vấn đề cấp thiết đặt cho nhà nghiên cứu phải tìm quy trình nhân giống tối ưu cho dũng trờn mơi trường điều kiện ni cấy thích hợp đóng vai trị quan trọng Trong giai đoạn nuôi cấy mụ thỡ giai đoạn rễ giai đoạn quan trọng vỡ nú ảnh hưởng đến chất lượng đem trồng ngồi mơi trường Từ phải nghiên cứu chọn đạt u cầu rễ cho ngồi mơi trường tự nhiên Để đạt điều này, đưa đề tài “Bước đầu nghiờn cứu ảnh hưởng số yếu tố đến trình rễ dịng bạch đàn PN108 PN116 phương pháp ni cấy mô tế bào điều kiện huấn luyện ngồi mơi trường tự nhiên” Viện nghiên cứu nguyên liệu giấy đơn vị đầu ni cấy mơ tế bào lồi lâm nghiệp, nhiều lồi cõy ni cấy quy mơ cơng nghiệp, đội ngũ cán có nhiều kinh nghiệm, sở vật chất tương đối đầy đủ Đây yếu tố quan trọng để đề tài đạt tốt mục tiêu đề Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ảnh 3: Q trình ni cấy mơi trường tạo rễ chuyển vườn ươm Khoa Công Nghệ Sinh Học 50 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 CHƯƠNG KẾT LUẬN, TỒN TẠI VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Qua nghiên cứu q trình rễ invitro dịng bạch đàn PN108 PN116 đề tài nhận thấy q trình sinh trưởng phát triển mẫu ni cấy chịu ảnh hưởng mạnh mẽ chất điều hịa sinh trưởng thuộc nhóm Auxin Thành phần nồng độ ảnh hưởng mạnh rõ đến hiệu tạo hoàn chỉnh Đồng thời, thời gian huấn luyện ảnh hưởng đến q trình đưa ngồi mơi trường tự nhiên Từ kết nghiên cứu thu được, rút số kết luận sau: Mơi trường tốt tạo hồn chỉnh dòng là: MS/2 + 15 g/l sucrose + g/l agar + 2.0 mg/l IBA + 0.5 mg/l ABT Dòng PN108 TLRR đạt 82,2 %, số rễ trung bình 2,85 rễ/cõy, chiều dài trung bình rễ 1,29 cm Dịng PN116 TLRR đạt 81,7 %, số rễ trung bình 2,59 rễ/cõy, chiều dài trung bình rễ 1,16cm Cây trước đưa vườn ươm cần huấn luyện từ – 16 ngày Tỷ lệ sống cao cho dòng PN108 93,3%, dòng PN116 92,2% 4.2 Tồn Do điều kiện thời gian có hạn kinh nghiệm kỹ thuật phịng thí nghiệm kỹ viết báo cáo khoa học thân nên đề tài khơng tránh khỏi thiếu sót cịn hạn chế như: - Hai dòng bạch đàn PN116 PN108 q trình nghiên cứu hồn thiện kỹ thuật nhân giống vơ tính phương pháp ni cấy mô tế bào - Mới thực nghiệm số công thức ảnh hưởng IBA ABT1 thang nồng độ rộng mà chưa tìm nồng độ tối ưu cho trình tạo rễ invitro - Chưa có bình luận sâu kết thực nghiệm đề tài đạt so với kết nghiên cứu ngồi nước Khoa Cơng Nghệ Sinh Học 51 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 4.3 Kiến nghị Để nâng cao tỷ lệ rễ rễ invitro tỷ lệ sống mầm mơ hai dịng bạch đàn PN116 PN108 cấy vườn ươm Đồng thời hạ giá thành đủ tiêu chuẩn xuất vườn cần có nghiên cứu chi tiết hơn, cụ thể cho hai dòng bạch đàn Khoa Công Nghệ Sinh Học 52 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Andrew I, 1991 Thiết kế đơn giản cho thí nghiệm lâm nghiệp Bản tin Viện nghiên cứu lâm nghiệp số 71, 39 trang Lê Văn Chi, 1992 Cách sử dụng chất điều hoà sinh trưởng vi lượng hiệu cao Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật, trang – 23 Lê Đình Khả (1999), Nghiên cứu sử dụng giống lai tự nhiên Keo tai tượng Keo tràm Việt Nam, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội, tr 170-172 Lê Đình Khả Nguyễn Việt Cường, (2001) Ưu lai sinh trưởng tính chống chịu số tổ hợp lai khác loài Bạch đàn, Nhà xuất Nơng nghiệp, Hà Nội, tr 41- 43 Mai Đình Hồng, 1999 Ứng dụng công nghệ sinh học để sản xuất nguyên liệu giấy chất lượng cao Thông tin khoa học công nghệ môi trường tỉnh Phú Thọ tháng 9, trang 46 – 48 Đoàn Thị Mai, Trần Hồ Quang, Ngô Thị Minh Duyên, 1998 Kỹ thuật nhân giống keo lai nuôi cấy mô phân sinh Tạp chí lâm nghiệp số 7, trang 35-36 Trần Văn Minh, 1994 Nuôi cấy mô tế bào thực vật Phân viện cơng nghệ sinh học thành phố Hồ Chí Minh, 124 trang Trần Văn Minh cộng sự, 1998 Nhân giống trầm qua nuôi cấy đỉnh sinh trưởng Tạp chí lâm nghiệp số 11, trang 44 – 45 Đoàn Thanh Nga, 2003 Báo cáo hoàn thiện cơng nghệ nhân giống số dịng bạch đàn Trung tâm nghiên cứu nguyên liệu giấy, 35 trang 10 Trần Thị Ngân, 2000 Nghiên cứu phản ứng cỏc dũng lan gấm (Anoectochilus formosalus) môi trường nuôi cấy in vitro Luận án thạc sĩ khoa học sinh học, Trường đại học sư phạm Hà Nội, 63 trang Khoa Công Nghệ Sinh Học 53 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 11.Vũ Ngọc Phượng cộng sự, 2002 Nhân giống in vitro tre tàu (Sinocalamus latiflorus) tre mạnh tơng (Dendrocalamus asper) Tạp chí sinh học số 6, trang 59 – 64 12 Nguyễn Quang Thạch, (2000), Giáo trình sinh lý thực vật, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 13 Nguyễn Quang Thạch cộng sự, 2004 Nhân nhanh in vitro dũng lỳa bất dục đực PEI ải 64S Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nơng thơn số 6, trang 836 – 838 14 Nguyễn Đức Thành, 2001 Nuôi cấy mô tế bào thực vật – Nghiên cứu ứng dụng Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật, Hà Nội, 125 trang 15 Đoàn Thị Ái Thuyền cộng sự, 2001 Nhân giống vơ tính cõy hụng – Paulowvina fortunei (seem) Hemsi phương pháp nuôi cấy mơ Tạp chí sinh học số 9, trang 46 – 50 16.Nguyễn Văn Uyển, 1993 Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác giống trồng Nhà xuất Nông nghiệp, trang – 40 17 Vũ Văn Vụ, 1994 Sinh lý học thực vật Nhà xuất Khoa học – Kỹ thuật, Ha Nội, trang 182 – 237 18 Dự án giống lâm nghiệp Việt Nam, 2001 Hội thảo quốc gia loài ưu tiên cho trồng rừng Công ty giống lâm nghiệp trung ương, báo cáo số 1, trang 42 – 43 19.Dương Mộng Hùng (1993), Chọn trội nhân giống nuôi cấy mơ tế bào cho hai lồi Bạch đàn E camaldulensis E urophylla, Báo cáo đề tài, trường Đại học Lõm nghiệp, Hà Tây 20 Nguyễn Ngọc Tân cộng (1995), “Nhõn giống Keo lai nuôi cấy mô phân sinh”, Kết nghiên cứu khoa học công nghệ giai đoạn 1990- 1995, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 21 Đoàn Thị Mai cộng (2000), “Kết bước đầu nhân giống Bạch đàn lai phương pháp ni cấy mơ phân sinh”, Tạp chí Lâm nghiệp, (số10/2000), tr 46-47 Khoa Công Nghệ Sinh Học 54 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 II Tài liệu tiếng nước 22 Bhat K M and Hwanok Ma (2004), Teak growers unite, in ITTO tropical forest update, pp 3-4 23.Darus H Ahmad, 1994 Multiplication of Acacia mangium by stem cutting and tissue culture techniques Advances in tropical acacia research, p 32-34 24.Handley L, 1997 commercialization of plant tissue culture in vitro India plant cell Tissue and organ culture, Westvaco Corp, USA., p 65 – 73 25.Murashige T and Skoog F, 1962 A resied medium for rapid growth and bioassays wirh tobacco tissue cultures Physiol Plant., 15, p 473-495 26.Semsuntud N and Nitiwattanachai W, 1992 Tissue culture of Acacia auriculiformis Advances in tropical acacia research, p 39 - 41 Khoa Công Nghệ Sinh Học 55 Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 PHỤ LỤC Phụ lục 2.1 Thành phần môi trường MS Đa lượng CaCl2 332.02 KH2PO4 mg/l 2.99 mM 170.00 1.25 mM KNO3 1900.00 18.79 mM MgSO4 180.54 1.50 mM NH4NO3 1650.00 20.61 mM 0.11 M Vi lượng CoCl2.6H2O 0.025 mg/l CuSO4 0.025 0.10 M FeNaEDTA 36.700 0.10 mM H3BO3 6.200 0.10 mM KI 0.830 5.00 M MnSO4 H2O 16.900 0.10 mM Na2MoO4.2 H2O 0.250 1.03 M ZnSO4.7 H2O 8.600 29.91 M Vitamin Glycine 2.00 mg/l 26.64 M Myo-Inositol 100.00 0.564 mM Nicotinic acid 0.50 4.06 M Pyridoxine HCl (vitamin B6) 0.50 2.43 M Thiamine HCl (vitamin B1) 0.10 0.30 M Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Phụ lục 3.1 Ảnh hưởng IBA đến hiệu rễ, số rễ trung bình chiều dài trung bình a Dịng PN108 Test of Homogeneity of Variances Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 2.509 2.955 df1 df2 4 Sig .109 075 10 10 ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Sum of Squares 6211.424 34.233 6245.657 2.671 244 2.915 Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total df 10 14 10 14 Mean Square 1552.856 3.423 F 453.609 Sig .000 668 024 27.354 000 Ty le re (%) Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig N 3 3 14.433 Subset for alpha = 05 45.000 53.300 59.433 1.000 1.000 1.000 1.000 76.100 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 So re TB (re/cay) Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 1.0 3.0 2.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 1.400 1.560 2.040 2.073 2.593 238 799 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Chieu dai re (cm) Duncan a,b Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 2.0 1.0 Sig N 5244 41 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 6733 7778 1.000 7778 8700 077 119 1.1578 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 72.638 b The group sizes are unequal The harmonic mean of the group sizes is used Type I error levels are not guaranteed b Dòng PN116 Test of Homogeneity of Variances Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 1.329 1.438 df1 df2 4 10 10 Sig .325 291 ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 6323.697 286.120 6609.817 2.419 173 2.591 df 10 14 10 14 Mean Square 1580.924 28.612 F 55.254 Sig .000 605 017 34.976 000 Ty le re (%) Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 1.0 2.0 Sig N 3 3 13.900 Subset for alpha = 05 42.233 51.667 1.000 056 51.667 61.133 055 75.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 So re TB (re/cay) Duncan a Nong IBA (mg/l) 4.0 1.0 3.0 2.0 Sig Subset for alpha = 05 1.280 1.807 1.833 2.027 2.527 1.000 078 1.000 N 3 3 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Chieu dai re (cm) Duncan a,b Nong IBA (mg/l) 4.0 3.0 2.0 1.0 Sig N 37 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 4811 6578 7111 8600 1.000 294 1.000 1.0878 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 69.958 b The group sizes are unequal The harmonic mean of the group sizes is used Type I error levels are not guaranteed Phụ lục 3.2 Ảnh hưởng IBA+ABT đến hiệu rễ, số rễ trung bình chiều dài trung bình a Dịng PN108 Test of Homogeneity of Variances Ty le re (%) So re TB (re/cay) Levene Statistic 988 4.059 df1 df2 4 10 10 Sig .457 033 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Multiple Comparisons Dependent Variable: So re TB (re/cay) Tamhane (I) Nong ABT (mg/l) 1.0 1.5 2.0 Mean Difference (I-J) Std Error -.200 1579 -.043 1107 430 1222 593 1073 200 1579 157 1229 630 1334 793 1199 043 1107 -.157 1229 473 0715 637* 0411 -.430 1222 -.630 1334 -.473 0715 163 0662 -.593 1073 -.793 1199 -.637* 0411 -.163 0662 (J) Nong ABT (mg/l) 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.5 2.0 1.0 2.0 1.0 1.5 Sig .960 1.000 294 230 960 977 161 171 1.000 977 060 003 294 161 060 681 230 171 003 681 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -1.088 688 -1.132 1.045 -.394 1.254 -.683 1.870 -.688 1.088 -1.125 1.439 -.341 1.601 -.677 2.263 -1.045 1.132 -1.439 1.125 -.029 976 369 904 -1.254 394 -1.601 341 -.976 029 -.468 794 -1.870 683 -2.263 677 -.904 -.369 -.794 468 * The mean difference is significant at the 05 level ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 2886.017 74.047 2960.064 1.096 087 1.184 df 10 14 10 14 Mean Square 721.504 7.405 F 97.439 Sig .000 274 009 31.359 000 So re TB (re/cay) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 2.020 2.497 2.543 2.603 2.850 1.000 212 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ty le re (%) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 42.200 3 3 Subset for alpha = 05 59.433 66.667 75.567 1.000 1.000 1.000 1.000 82.233 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Chieu dai re (cm) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 6711 7789 90 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 9100 1.0878 059 1.000 1.000 1.2889 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 90.000 b Dòng PN116 ANOVA Ty le re (%) So re TB (re/cay) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 2633.151 119.267 2752.417 1.371 183 1.555 df 10 14 10 14 Mean Square 658.288 11.927 F 55.195 Sig .000 343 018 18.722 000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ty le re (%) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 3 3 45.000 Subset for alpha = 05 55.000 65.567 75.000 1.000 1.000 1.000 1.000 81.700 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 So re TB (re/cay) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig Subset for alpha = 05 1.807 1.970 2.400 2.443 2.600 170 114 N 3 3 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Chieu dai re (cm) Duncan a Nong ABT (mg/l) 2.0 1.5 1.0 Sig N 90 90 90 90 90 Subset for alpha = 05 6656 6933 8800 1.0611 1.1644 635 1.000 078 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 90.000 Phụ lục 3.3: Ảnh hưởng thời gian huấn luyện đến tỷ lệ sống chiều cao trung bình a Dòng PN108 Test of Homogeneity of Variances Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Levene Statistic 1.595 794 df1 df2 4 10 10 Sig .250 556 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 ANOVA Ty le song (%) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Chieu cao trung binh (cm) Sum of Squares 4664.667 238.667 4903.333 137 180 317 df 10 14 10 14 Mean Square 1166.167 23.867 F 48.862 Sig .000 034 018 1.907 186 Ty le song (%) Duncan a Thoi gian huan luyen (ngay) 16 12 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 45.667 75.667 86.667 92.000 93.333 1.000 1.000 141 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 b Dòng PN116 Test of Homogeneity of Variances Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Levene Statistic 2.000 2.000 df1 df2 4 10 10 Sig .171 171 ANOVA Ty le song (%) Chieu cao trung binh (cm) Between Groups Within Groups Total Between Groups Within Groups Total Sum of Squares 4971.600 121.333 5092.933 104 193 297 df 10 14 10 14 Mean Square 1242.900 12.133 F 102.437 Sig .000 026 019 1.345 320 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội Khoá luận tốt nghiệp SV Phạm Thế Phúc_0801 Ty le cay song (%) Duncan a Thoi gian huan luyen (ngay) Khong huan luyen 16 ngay 12 Sig N 3 3 Subset for alpha = 05 44.333 72.333 88.000 92.000 92.000 1.000 1.000 209 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3.000 Khoa Công Nghệ Sinh Học Viện Đại học Mở Hà Nội ... DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 2. 1 Mục tiêu nghiên cứu 23 2. 2 Đối tượng nghiên cứu 23 2. 2 .1 Một số đặc điểm dịng PN108 23 2. 2 .2 Một số đặc điểm dịng PN47 23 2. 2.3 Vật liệu nuôi cấy2 4 2. 3 Nội... nghiờn cứu ảnh hưởng số yếu tố đến trình rễ dịng bạch đàn PN108 PN 116 phương pháp ni cấy mô tế bào điều kiện huấn luyện ngồi mơi trường tự nhiên? ?? Viện nghiên cứu nguyên liệu giấy đơn vị đầu ni cấy. .. chồi rễ, số rễ trung bình chiều dài rễ dòng PN108 PN 116 Nồng độ ABT1 (mg/l) Dòng PN108 Số chồi cấy 0,0 0,5 1, 0 1, 5 2, 0 18 0 18 0 18 0 18 0 18 0 Dòng PN 116 Tỷ lệ chồi rễ (%) Số rễ trung bình (rễ/ cõy)