ĐẶT VẤN ĐỀ Lêi c¶m ¬n Víi lßng kÝnh träng vµ biÕt ¬n s©u s¾c, t«i xin göi lêi c¶m ¬n ch©n thµnh tíi PGS TS Ph¹m Ngäc Bïng Th s Vâ Quèc ¸nh Lµ nh÷ng ngêi thÇy ® tËn t×nh híng dÉn vµ gióp ®ì t«i hoµn th[.]
Lời cảm ơn Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới: PGS.TS Phạm Ngọc Bùng Th.s Võ Quốc ánh Là ngời thầy đà tận tình hớng dẫn giúp đỡ hoàn thành luận văn Chính quan tâm bảo thầy nguồn động viên lớn trình làm thực nghiệm Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn tới: Ban Giám hiệu, phòng Đào tạo sau đại học thầy cô giáo trờng Đại học Dợc Hà Nội đà dìu dắt năm học vừa qua Các thầy giáo, cô giáo, anh chị kỹ thuật viên môn Vật lý- Hóa lý, môn Bào chế, môn Dợc lý, môn Dợc lâm sàng phòng thí nghiệm trung tâm đà tạo điều kiện giúp đỡ suốt trình học tập hoàn thành luận văn Cuối xin cảm ơn gia đình, ngời thân bạn bè đà ủng hộ quan tâm để có đợc kết nh ngày hôm Hà Nội, ngày 28 tháng 12 năm 2009 Thái Minh Dũng mục lục Lời cảm ơn Chữ viết tắt ĐặT VấN Đề Ch¬ng I Tæng quan .3 1.1 Độ tan yếu tố ảnh hởng đến độ hoà tan dợc chất .3 1.2 Biện pháp làm tăng độ hoà tan dợc chất tan 1.2.1.Thay đổi kích thớc tiểu phân dạng thù hình cđa dỵc chÊt 1.2.2 Chế tạo hệ phân tán rắn 1.2.3 Dùng chất diện hoạt 1.2.4 C¸c biƯn ph¸p kh¸c: 1.3 Tổng quan bệnh tăng lipid máu 1.3.1 Một số nguyên nhân gây tăng lipid máu[2] 1.3.2 Hậu 1.3.3 Ph¬ng pháp điều trị chứng tăng lipid máu 1.4 Fenofibrat .8 1.4.1 Công thức hoá học[41] .8 1.4.2 TÝnh chÊt 1.4.3 Độ ổn định 1.4.4 Dợc lý chÕ t¸c dơng 1.4.5 Dợc động học 1.4.6 Chống định, Chỉ định, chế phẩm liỊu dïng 1.5 Mét sè nghiªn cøu vỊ fenofibrat 10 1.5.1 Các đặc tính fenofibrat 10 1.5.2 Các nghiên cứu tăng độ hòa tan sinh khả dụng fenofibrat 12 1.5.2 Các phơng pháp định lợng FB huyết tơng 15 1.6 Phơng pháp đánh giá sinh khả dơng in vivo cđa thc .16 1.6.1 Sinh kh¶ dơng yếu tố ảnh hởng 16 1.6.2 Phơng pháp đánh giá sinh khả dụng in vivo thuốc 17 Chơng Đối tợng phơng pháp nghiên cứu 20 2.1 Đối tợng nguyên vật liệu .20 2.1.1 Nguyên liệu tá dỵc 20 2.1.2 ThiÕt bị nghiên cứu 20 2.1.3 §éng vËt thÝ nghiƯm .21 2.2 Phơng pháp nghiên cứu 21 2.2.1 Phơng pháp bào chế vi hạt fenofibrat .21 2.2.2 Phơng pháp xác định kích thớc tiểu phân .22 2.2.3 Phơng pháp thử độ hoà tan .22 2.2.4 Phơng pháp thử ®é tan 23 2.2.5 Ph¬ng pháp phân tích ảnh hởng biến độc lập vào biến phụ thuộc lựa chọn công thức tối u 24 2.2.6 Phơng pháp đánh giá độ ổn định mẫu .25 2.2.7 Phơng pháp bào chế viên nang chứa 200mg vi hạt FB 25 2.2.8 Thẩm định phơng pháp định lợng FA huyết tơng 25 2.2.9 Phơng pháp đánh giá sinh khả dơng cđa FA theo ®êng ng 27 Ch¬ng KÕt thực nghiệm nhận xét 29 3.1 Thư nghiƯm in vitro .29 3.1.1 Xây dựng đờng chuẩn 29 3.1.2 Kết thử độ tan 30 3.1.3 Lùa chän chÊt mang 30 3.1.4 Lùa chän chÊt nhị ho¸ .31 3.1.5 Lùa chän biÕn ®éc lËp – biÕn phơ thc 32 3.1.6 Lựa chọn công thức bào chế vi hạt FB 34 3.1.7 So sánh mô hình hoà tan với mẫu đối chiếu 40 3.1.8 Đánh giá độ ổn định 43 3.2 Xây dựng thẩm định phơng pháp định lợng FA huyết tơng 45 3.2.1 Điều kiện chạy sắc ký 45 3.2.2 Thẩm định phơng pháp phân tích acid fenofibric huyết t¬ng 46 3.3 Đánh giá so sánh sinh khả dụng nang bào chế nang thuốc đối chiếu chó thÝ nghiƯm 50 3.4 Bµn ln .54 3.4.1 VỊ ¶nh hëng kích thớc tiểu phân đến độ hoà tan 54 3.4.2 Về phơng pháp tạo vi hạt đông tụ từ nhũ tơng 55 3.4.3 Về ảnh hởng nồng độ NaLS môi trờng hoà tan đến phép thử độ hòa tan .55 3.4.4 Về kết đánh giá sinh khả dụng in vivo 56 Ch¬ng KÕt luËn 57 Tµi liƯu tham kh¶o .58 Phơ lơc 62 Chữ viết tắt FB Fenofibrate FA Acid fenofibric SP Hỗn hợp NaLS PEG tỷ lệ 1: AUC(Area Under the Curve)DiƯn tÝch díi ®êng cong Cmax Nång ®é ®Ønh Tmax Thời gian đạt nồng độ đỉnh t1/2 thời gian bán thải PEG Polyethylen glycol PVP Polyvinyl pyrolidone SKD Sinh kh¶ dơng LDL (Low Density Lipoprotein) Lipoprotein tû träng thÊp HDL (Hight Density Lipoprotein) Lipoprotein tû träng cao VLDL (Very Low Density Lipoprotein tû träng rÊt thÊp Lipoprotein) HPLC (Hight Potency Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao Chromatoraphy) NaLS Natri lauryl sulfat LM 200 Lipanthyl 200 M NBC Nang bào chế chứa 200 mg vihạt fenofibrate danh mục sơ đồ, bảng biểu Hình 3.1.1 Đồ thị biểu diễn đờng chuẩn fenofibrat 29 Hình 3.1.2 Đồ thị hoà tan FB từ mẫu thử nghiệm 33 Hình3.1.3 Các đờng đồng mức Y1, Y2 X3 =12 38 Hình3.1.4 Các đờng đòng mức Y3 X3 =12 Y2 X1 = 10 38 Hình3.1.5 Độ hòa tan FB từ mẫu môi trờng NaLS 1,5% .41 Hình 3.1.6 Độ hòa tan FB từ mẫu môi trờng NaLS 1% .42 Hình 3.1.7 Đồ thị hòa tan FB mẫu môi trờng NaLS 1% 45 Hình 3.2.1 Sắc ký đồ FA 47 Hinh 3.2.2 Đồ thị biểu diễn độ tuyến tính nồng độ diện tích píc 48 Hình 3.3.1 Đồ thị so sánh biến thiên nồng độ trung bình FA huyết tơng chó viên NBC viên LM 200 theo thời gian 52 Bảng 3.1.1 Liên quan độ hấp thụ (D) nồng độ fenofibrat(C) 29 Bảng 3.1.2 §é tan cña FB 37 Bảng 3.1.3 Trạng thái tập hợp hệ nóng chảy FB tá dợc 31 Bảng 3.1.4 Bảng kích thớc tiểu phân thay đổi chất nhũ hoá .39 Bảng 3.1.5 Bảng công thức xác định yếu tố ảnh hởng .41 Bảng 3.1.6 Kết khảo sát độ hoà tan (%) củaFB từ mẫu 41 Bảng 3.1.7 Các mức khoảng biến thiên biến độc lập 43 Bảng 3.1.8 Các công thức thực nghiệm đợc xây dựng theo mô hình44 Bảng 3.1.9 Giá trị biến đầu tơng ứng 45 Bảng 3.1.10 Bảng hệ số phơng trình hồi quy 47 Bảng 3.1.11 Các điều kiện toán tèi u 49 B¶ng 3.1.12 Độ hoà tan (%) FB từ mẫu m«i trêng NaLS 1,5% 51 Bảng 3.1.13 Độ hoà tan (%) FB từ mẫu môi trờng NaLS 1% 53 Bảng 3.1.14 Hàm lợng (%) FB từ mẫu thử độ ổn định 43 Bảng 3.1.15 Độ hoà tan (%) FB từ mẫu môi trêng NaLS 1,5% 55 Bảng 3.1.16 Độ hòa tan FB từ mẫu môi trờng NaLS 1% 56 Bảng 3.2.1 Nồng độ FA tơng ứng với c¸c diƯn tÝch pÝc 60 Bảng 3.2.2 Độ lặp lại phơng pháp định lợng 62 Bảng 3.2.3 Độ phơng pháp định lợng 62 Bảng 3.2.4 Hiệu suất chiết FA từ huyết tơng 63 Bảng 3.3.1 Nồng độ FA huyết tơng cá thể uống NBC LM 200 66 Bảng 3.3.2 Giá trị AUC0-24, AUC0-, Cmax, Tmax, t1/2 hÊp thu FA tõ c¸c c¸ thĨ 68 B¶ng 3.3.3 Kho¶ng tin cËy ë møc 90% tỷ lệ thông số dợc động học 69 ĐặT VấN Đề Tăng lipid máu bệnh rối loạn chuyển hoá, nguyên nhân gây biến chứng nghiêm trọng nh: Xơ vữa động mạch, đái tháo đờng, gan nhiễm mỡ Nguyên nhân gây tăng lipid máu có liên quan đến chế độ ăn, thói quen sinh hoạt, luyện tập, có xu hớng ngày tăng xà hội phát triển Fenofibrat dẫn chất thuộc nhóm acid fibric, đợc đa vào sử dụng năm 1990 đợc FDA chấp nhận dùng cho điều trị chứng tăng lipid máu vào năm 1998 Fenofibrat có nhiều u điểm vợt trội so với dẫn chất nhóm, tần suất cờng độ tác dụng phụ thấp, phối hợp với thuốc thuộc nhóm statin điều trị chứng tăng lipid[13], [39], [7] Hiện fenofibrate thuốc hạ lipid máu đợc kê đơn nhiều Tuy nhiên sinh khả dụng fenofibrat thờng thấp không ổn định độ hoà tan Những tác dụng phụ hay gặp Fenofibrate không nghiêm trọng nhng gây khó chịu cho bệnh nhân với tần suất tơng đối cao, lên tới 5,5% Đây nguyên nhân chủ yếu phải ngừng thuốc bệnh nhân Việc giảm liều dùng thuốc làm giảm biến động sinh khả dụng nồng độ thuốc máu, nhờ giảm đợc tác dụng không mong muốn thuốc Trên giới, nhiều tác giả đà công bố kết nghiên cứu giải pháp bào chế làm tăng độ hòa tan dợc chất ... trình nghiên cứu kỹ thuật bào chế sinh khả dụng fenofibrat đợc công bố Vì thực đề tài Nghiên cứu bào chế đánh giá sinh khả dụng nang fenofibrat với hai mục tiêu sau: -Lựa chọn đợc biện pháp tăng khả. .. fenofibrat nhằm mục đích tăng sinh khả dụng giảm tác dụng phụ thuốc Kết nghiên cứu sinh khả dụng fenofibrate dạng bào chế khác cho thấy độ hòa tan có ảnh hởng định đến sinh khả dụng liều dùng thuốc Khi... fenofibrat, từ bào chế đợc nang fenofibrat 200mg có độ hòa tan tơng đơng nang Lipanthyl 200M Pháp -Đánh giá so sánh đợc sinh khả dụng in vivo nang bào chế đợc thuốc đối chiếu nang Lipanthyl 200M