Bài viết Phân lập nấm mối (Termitomyces microcarpus) và mối quan hệ di truyền trình bày việc phân lập nấm mối (Termitomyces microcarpus) nhằm cung cấp giống phục vụ cho công tác nghiên cứu cũng như bảo vệ nguồn gen quý hiếm của loài nấm này.
ạng, màu sắc, kích thước mũ nấm, cuống nấm, thân nấm, kích thước bào tử,… Tibuhwa (2012b) [12], Karun & Sridhar (2013) [13], ngồi cịn dựa sở kết giải trình tự DNA KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Kết phân lập định danh nấm mối (Termitomyces microcarpus) Tên địa phương: Nấm Mối mũ nhỏ, nấm Tua dua (Trịnh Tam Kiệt, 2011) [14], nấm Mối tí hon Đặc điểm: Quả thể có cuống mảnh, mũ nấm mới đầu hình chng, sau nở thành hình nón dẹp, mép bị nứt Mép mũ thẳng chia thùy khác nấm, không tuân theo quy luật Mũ nấm màu trắng nhạt, đỉnh màu đậm các phần khác nấm Đường kính mũ nấm từ 0,4 - 1,9 cm, phiến nấm xếp xít, dày, nứt nhìn mép có dạng cưa khơng đều nhau, bào tử hình bầu dục Nấm mối T microcarpus mọc thành đám tổ mối (Hình 1) Phân bố: Việt Nam [14], Thái Lan [15], Ấn Độ [16], Pháp [16], Trung Quốc [17] Hình Nấm mối T microcarpus Theo dõi phát triển mô nấm Mối (T microcarpus) mơi trường phân lập cho thấy hình thái khuẩn lạc gồ ghề, sáng, gấp nếp, dày có màu trắng đục Sau cấy chuyền 20 ngày, khuẩn lạc lan rộng khắp bề mặt thạch, gồ ghề có vàng đậm Bào tử có dạng bầu dục, (Hình 2) Sản phẩm PCR thu có chất lượng tốt với băng rõ gel điện di Băng nằm vị trí khoảng 700 đến 800 bp Kết sau giải trình tự mẫu nấm mối phân lập so sánh với trình tự từ Ngân hàng gen NCBI, cho thấy trình tự 721 bp mẫu nấm mối với Termitomyces microcarpus Jannual cs cơng bố năm 2020 có mức tương đồng 99,69 % khơng có đột biến đoạn hay thêm đoạn xảy Sau có kết giải trình tự DNA, kết hợp với các đặc điểm về hình thái kết luận lồi nấm Mối phân lập Termitomyces microcarpus (có mã truy cập Ngân hàng gen NCBI là: MT672480) 236 Phân lập nấm Mối (Terminomyces microcarpus) mối quan hệ di truyền Hình Hình thái khuẩn lạc nấm Mối T microcarpus a Phân lập 15 ngày; b Sau cấy chuyền 20 ngày); c Hình dạng bào tử nấm mối 3.2 Mối quan hệ di truyền chủng nấm mối Bình Dương Một số thể cũng tổ mối (vườn cấy nấm) Bình Dương thu thập để phân lập giải trình tự DNA Kết giải trình tự đưa lên Ngân hàng gen NCBI (Bảng 1) Bảng Các chủng nấm Mối phân lập Bình Dương Toạ độ thu mẫu GenBank T microcarpus Xã An Linh, huyện Phú Giáo 11033’16,93; 106071’13,28 MT672480 T clypeatus Xã An Linh, huyện Phú Giáo 11027’57,5; 106043’42,2 KU569480 T clypeatus Xã Định Hiệp, huyện Dầu Tiếng 11020’16,07; 106028’21,81 MF163152 Termitomyces sp.1 (BD4) Xã Định Hiệp, huyện Dầu Tiếng 11019’15,08; 106027’20,76 MF163149 Vườn cao su An Thái, huyện Phú Giáo 11026’25,9; 106047’47,8 MF163445 Termitomyces sp.2 (BD3) Vườn cao su - Phước Sang, huyện Phú Giáo 11021’59,8, 106046’7,6 MF163446 Termitomyces sp.3 (BD6) STT Chủng nấm Mối Địa điểm thu mẫu Chỉ số bootstrap nhóm gồm MF163152 KU569480 100 %, nghĩa có 1.000 lần MF163152 KU569480 đứng chung nhóm Phân tích dựa sở liệu NCBI cho thấy chủng MF163152 (938 bp) KU569480 (980 bp) có tỷ lệ tương đồng 99 % có độ phủ 100 %, chủng lồi Termitomyces clypeatus (Hình 3) 237 Nguyễn Thị Ngọc Nhi & Trần Nhân Dũng Termitomyces microcarpus có mối quan hệ di truyền gần với giống phân lập BD3, BD4 BD6 Nhóm cũng nhánh với T clypeatus với số bootstrap 100 % Khi sử dụng thêm trình tự DNA lồi nấm mối khác từ liệu NCBI để vẽ phát sinh loài, cho thấy MF163445 MF163446 có số bootstrap nhóm cao hình thái khuẩn lạc lại có nhiều điểm khác nên chưa đủ liệu để khẳng định loài Các chủng cịn lại lồi nấm mối khác 98 86 KY809208-T clypeatus KY809218-T eurrhizus 27 KY809216-T titanicus KY809181-T schimperi 30 27 KY809207-T clypeatus KY809195-T medius 99 27 KY809217-T robustus AF357092-T microcarpus 99 AF357091-T heimii KY809182-T mammiformis 100 KU569480-T clypeatus MF163152.1 T.clypeatus MT672480-T microcarpus 100 MF163445-BD3 94 MF163149-BD4 98 76 MF163446-BD6 Hình Cây phát sinh lồi phân tích bằng phương pháp Maximum Likehood Mega X dựa vào trình tự chủng nấm mối (chỉ số bootstrap lặp lại 1000 lần) KẾT LUẬN Gần đây, thời tiết không thuận lợi với tình trạng nhiễm mơi trường hoạt động sản xuất nông nghiệp nên nấm Mối mọc giảm nhiều Nếu khơng có biện pháp kịp thời có lẽ ngày không xa không còn hội để nhìn thấy thưởng thức nấm Mối Chính vậy, việc phân lập thành cơng giống nấm Mối (T microcarpus) góp phần vào việc chủ động nguồn cung cấp giống nấm Mối điều kiện nguồn giống từ tự nhiên ngày khan Nó tạo động lực niềm hy vọng cho nhà nghiêm cứu thật thụ với mong muốn tạo sản phẩm từ loài nấm 238 Phân lập nấm Mối (Terminomyces microcarpus) mối quan hệ di truyền TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Pegler, D N., & Piearce, G D (1980) The edible mushrooms of Zambia Kew bulletin, 475-491 [2] Nakalembe, I., Kabasa, J D & Olila, D (2015) Comparative nutrient composition of selected wild edible mushrooms from two agro-ecological zones, Uganda Springerplus, 4(1), 1-15 [3] Hsieh, H M & Ju, Y M (2018) Medicinal components in Termitomyces mushrooms Applied Microbiology and Biotechnology, 102(12), 4987-4994 [4] Chandra, K., Ghosh, K., Ojha, A K & Islam, S S., (2009) A protein containing glucan from an edible mushroom, Termitomyces microcarpus (var) Natural Product Communications, 4(4), 553-556 [5] Villares, A., Mateo-Vivaracho, L & Guillamón, E (2012) Structural features and healthy properties of polysaccharides occurring in mushrooms Agriculture, 2(4), 452-471 [6] Tibuhwa, D D (2012a) Folk taxonomy and use of mushrooms in communities around Ngorongoro and Serengeti National Park, Tanzania Journal of Ethnobiology and Ethnomedicine, 8(1), 1-9 [7] Venkatachalapathi, A & Paulsamy, S (2016) Exploration of wild medicinal mushroom species in Walayar valley, the Southern Western Ghats of Coimbatore District Tamil Nadu Mycosphere, 7(2), 118-130 [8] Njue, A W., Omolo, J O., Cheplogoi, P K., Langat, M K & Mulholland, D A (2018) Cytotoxic ergostane derivatives from the edible mushroom Termitomyces microcarpus (Lyophyllaceae) Biochemical Systematics and Ecology, 76, 12-14 [9] Mossebo, D C., Njounkou, A L., Piatek, M., Kengni, B., Diasbe, M D (2009) Termitomyces striatus f pileatus f nov and f brunneus f nov from Cameroon with a key to central African species Mycotaxon, 107, 315-329(15) [10] Heim, R (1977) Termites et Champignons Les termitophiles d'Afrique Noire at d'Asie Meridionale Paris, France: Societe Novelle des Edition 205 pp Boubee, Paris [11] Pegler, D N & Vanhaecke, M (1994) Termitomyces of southeast Asia Kew Bulletin, 717-736 [12] Tibuhwa, D D (2012b) Termitomyces species from Tanzania, their cultural properties and unequalled basidiospores Journal of Biology and Life Science, 3(1), 31-45 [13] Karun, N C & Sridhar, K R (2013) Occurrence and distribution of Termitomyces (Basidiomycota, Agaricales) in the Western Ghats and on the west coast of India Czech Mycology, 65(2), 233-254 [14] Trịnh Tam Kiệt (2011) Nấm lớn Việt Nam (Tập 1, Tái lần thứ 2) Nhà xuất Khoa học tự nhiên Công nghệ [15] Wong, M S., Oasis, Fragrance & Moralee, S (2013) Receptacle Structure of Termite Fungus (Termitomyces), KKU Sci J., 41(4), 928-935 [16] Borkar, P., Doshi, A & Navathe, S (2015) Mushroom diversity of Konkan region of Maharashtra, India Journal of Threatened Taxa, 7(10), 7625-7640 [17] Wei, T Z., Tang, B H., Yao, Y J & Pegler, D N (2006) A revision of Sinotermitomyces, a synonym of Termitomyces (Agaricales) Fungal Diversity, 21, 225-237 239 Nguyễn Thị Ngọc Nhi & Trần Nhân Dũng ABSTRACT ISOLATION OF Termitomyces microcarpus SPECIES AND GENETIC RELATIONSHIPS Nguyen Thi Ngoc Nhi 1*, Tran Nhan Dung2 Thu Dau Mot University, Can Tho University * Email: nhintn@tdmu.edu.vn Termite mushroom (Termitomyces microcarpus) is a natural mushroom with high nutritional value and a delicious taste In this study, Termitomyces microcarpus was isolated on the medium: agar 15 g/L; glucose 10 g/L; yeast extract g/L; KH2PO4 0.5 g/L; MgSO4.7H2O 0.5 g/L; (NH4)2SO4 0.5 g/L The successful isolation of Termitomyces microcarpus has contributed to the proactive supply of termite mushroom that natural seed sources are increasingly scarce, in order to serve the propagation and creation of biomass and as a basis for further studies Keywords: Identification, genetic relationship, isolation, termite fungus 240 .. .Phân lập nấm Mối (Terminomyces microcarpus) mối quan hệ di truyền Hình Hình thái khuẩn lạc nấm Mối T microcarpus a Phân lập 15 ngày; b Sau cấy chuyền 20 ngày); c Hình dạng bào tử nấm mối. .. ngày); c Hình dạng bào tử nấm mối 3.2 Mối quan hệ di truyền chủng nấm mối Bình Dương Một số thể cũng tổ mối (vườn cấy nấm) Bình Dương thu thập để phân lập giải trình tự DNA Kết giải trình tự... muốn tạo sản phẩm từ loài nấm 238 Phân lập nấm Mối (Terminomyces microcarpus) mối quan hệ di truyền TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Pegler, D N., & Piearce, G D (1980) The edible mushrooms of Zambia Kew bulletin,