(Luận án tiến sĩ) nghiên cứu quy trình tổng hợp afatinib dimaleat

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TỔNG HỢP AFATINIB DIMALEAT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI, NĂM 2021 luan an BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TỔNG HỢP AFATINIB DIMALEAT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ DƯỢC PHẨM & BÀO CHẾ THUỐC MÃ SỐ: 9720202 Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Đình Luyện TS Nguyễn Văn Hải HÀ NỘI, NĂM 2021 luan an LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác NCS Nguyễn Thị Ngọc luan an LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc GS.TS Nguyễn Đình Luyện TS Nguyễn Văn Hải, hai Thầy tận tình dìu dắt, bảo, hướng dẫn, giúp đỡ có động viên sâu sắc để tơi có động lực hồn thành luận án Tôi xin trân trọng gửi lời cảm ơn đến PGS.TS Đinh Thị Thanh Hải, TS Nguyễn Văn Giang, TS Đào Nguyệt Sương Huyền toàn thể thầy cô giáo Bộ môn Công nghiệp dược - Trường đại học Dược Hà Nội ủng hộ động viên tơi suốt q trình nghiên cứu Tơi xin gửi lời cảm ơn đến gúp đỡ, cộng tác Thầy cô, anh chị công tác Quý quan: Viện Hóa học - Viện Hàn lâm khoa học Cơng nghệ Việt Nam, Khoa Hóa học - Trường đại học Khoa học tự nhiên - Đại học Quốc gia Hà Nội, Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương, Viện Công nghệ dược phẩm quốc gia Tôi xin chân thành cảm ơn Đảng ủy, Ban giám hiệu, Phòng sau đại học, Phịng chức năng, Bộ mơn chun ngành công nghệ dược phẩm bào chế thuốc – Trường đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi q trình học tập hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô lãnh đạo Khoa Dược, Bộ môn Bào chế Công nghiệp dược – Trường đại học Y Dược Thái Nguyên, quý đồng nghiệp tạo điều kiện tốt cho tơi q trình học tập hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn đến hệ sinh viên, dược sĩ K69, K70, K71 Trường Đại học Dược Hà Nội tơi làm việc để hồn thành kết luận án Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến bố mẹ, người thân, bạn bè động viên tạo động lực giúp phấn đấu để hoàn thành luận án NCS Nguyễn Thị Ngọc luan an MỤC LỤC MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC CÁC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN .2 1.1 Tổng quan afatinib dimaleat .2 1.1.1 Cấu trúc tính chất hóa lý 1.1.2 Tác dụng dược lý ứng dụng điều trị 1.2 Các phương pháp tổng hợp afatinib dimaleat .6 1.2.1 Tổng hợp afatinib base 1.2.2 Tạo muối afatinib dimaleat .17 1.2.3 Tổng quan yêu cầu chất lượng nguyên liệu afatinib dimaleat 20 1.3 Tổng quan phương pháp tổng hợp khung quinazolin 20 1.3.1 Phương pháp ngưng tụ acid anthranilic với formamid 20 1.3.2 Phương pháp ngưng tụ aminobenzophenon với benzylamin 21 1.3.3 Phương pháp ngưng tụ (2-bromophenyl)methylamin với amid 22 1.3.4 Phương pháp ngưng tụ N-arylamidin isonitril .22 1.3.5 Phương pháp ngưng tụ với DMF-DMA qua trung gian base Schiff 22 1.3.6 Phương pháp tổng hợp khung quinazolin thông qua gốc tự 22 1.3.7 Phương pháp tổng hợp dựa chuyển vị quang hóa Fries .23 1.3.8 Phương pháp đóng vịng hợp chất pyrimidin enediyn 23 1.3.9 Phương pháp tổng hợp quinazolin theo Niementowski 23 1.3.10 Phương pháp ngưng tụ acetanilid với urethan 23 1.3.11 Phương pháp ngưng tụ axit N-acylanthranilic với amin .23 1.3.12 Phương pháp ngưng tụ 2-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)anilin với cyanogen bromid .24 luan an 1.4 Một số phương pháp tổng hợp amid từ amin thơm ứng dụng tổng hợp thuốc 24 1.4.1 Tổng hợp amid từ acid carboxylic 24 1.4.2 Tổng hợp amid từ halogenid acid 24 1.4.3 Tổng hợp amid từ anhydrid 27 1.4.4 Tổng hợp amid từ nguyên liệu ester .29 1.4.5 Tổng hợp amid theo phản ứng trao đổi amid 31 1.4.6 Tổng hợp amid từ nguyên liệu alcol .31 1.4.7 Tổng hợp amid từ nguyên liệu khác 33 1.5 Phân tích lựa chọn đường tổng hợp 34 1.5.1 Lựa chọn đường tổng hợp afatinib dimaleat 36 1.5.2 Lựa chọn phương pháp tổng hợp alcol (S)-3-hydroxytetrahydrofuran (9) .37 1.5.3 Lựa chọn phương pháp tổng hợp acid (E)-4-dimethylaminobut-2-enoic hydroclorid (93) 37 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 2.1 Nguyên liệu thiết bị 40 2.1.1 Thiết bị, dụng cụ sử dụng .42 2.2 Nội dung nghiên cứu .44 2.3 Phương pháp nghiên cứu .47 2.3.1 Phương pháp tổng hợp hóa học .47 2.3.2 Phương pháp kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm 48 2.3.3 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định afatinib dimaleat tổng hợp 49 2.3.4 Thử độc tính sản phẩm afatinib dimaleat .49 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 51 3.1 Khảo sát phản ứng tổng hợp afatinib dimaleat quy mô g/mẻ 51 3.1.1 Khảo sát tổng hợp khung quinazolin (N-03a, N-03b) từ acid 2-amino4-clorobenzoic (N-01a) acid 2-amino-4-fluorobenzoic (N-01b) 51 3.1.2 Khảo sát tổng hợp dẫn chất sulfon N-06a N-06b từ nguyên liệu N-03a N-03b 59 luan an 3.1.3 Khảo sát tổng hợp ether (S)-N-(3-cloro-4-fluorophenyl)-6-nitro-7((tetrahydrofuran-3-yl)oxy)quinazolin-4-amin (N-10) 73 3.1.4 Khảo sát tổng hợp afatinib base .85 3.1.5 Tạo muối afatinib dimaleat .94 3.1.6 Khảo sát phương pháp tinh chế afatinib dimaleat .95 3.2 Xây dựng tiêu chuẩn sở (TCCS) 98 3.3 Xây dựng quy trình tổng hợp afatinib dimaleat 20 g/mẻ đạt tiêu chuẩn sở xây dựng .101 3.3.1 Sơ đồ tổng quát quy trình .101 3.3.2 Mơ tả quy trình tổng hợp afatinib dimaleat đạt TCCS quy mô 20 g/mẻ 106 3.3.3 Kết kiểm nghiệm sản phẩm afatinib dimaleat tổng hợp quy mô 20 g/mẻ theo tiêu chuẩn sở xây dựng .131 3.4 Kết thử độ ổn định 132 3.4.1 Kết đánh giá điều kiện lão hóa cấp tốc 132 3.4.2 Kết đánh giá điều kiện thực 134 3.4.3 Kết dự đoán tuổi thọ .135 3.5 Kết thử độc tính sản phẩm afatinib dimaleat 135 3.5.1 Kết thử nghiệm với mức liều thứ 135 3.5.2 Kết thử nghiệm với mức liều thứ hai 136 3.5.3 Kết thử nghiệm với mức liều thứ ba 137 3.5.4 Kết phân loại độc dựa mức liều thử 137 CHƯƠNG BÀN LUẬN .139 4.1 Về phản ứng tổng hợp trung gian sản phẩm afatinib dimaleat 139 4.1.1 Các phản ứng tổng hợp trung gian chứa khung quinazolin: 7-cloro-N(3-cloro-4-fluorophenyl)-6-nitroquinazolin-4-amin (N-05a) 7-fluoro-N-(3cloro-4-fluorophenyl)-6-nitroquinazolin-4-amin (N-05b) .139 4.1.2 Các phản ứng tổng hợp dẫn chất sulfon N-06a, N-06b, N-06’a, N-06’b 142 4.1.3 Các phản ứng tổng hợp (S)-3-hydroxytetrahydrofuran (N-09) từ acid L-malic .144 luan an 4.1.4 Phản ứng tạo (S)-N-(3-cloro-4-fluorophenyl)-6-nitro-7((tetrahydrofuran-3-yl)oxy)quinazolin-4-amin (N-10) 145 4.1.5 Tổng hợp (S)-N4-(3-cloro-4-fluorophenyl)-7-((tetrahydrofuran-3yl)oxy)-quinazoline-4,6-diamin (N-11) 146 4.1.6 Các phản ứng tổng hợp acid (E)-4-dimethylaminbut-2-enoic (N-13) 147 4.1.7 Phản ứng tổng hợp afatinib base tạo muối afatinib dimaleat .149 4.2 Về trình tinh chế afatinib dimaleat đạt tiêu chuẩn sở 150 4.3 Về cấu trúc sản phẩm tổng hợp 151 4.3.1 Cấu trúc 7-cloroquinazolin-4-(3H)-on (N-02a) 7fluoroquinazolin-4-(3H)-on (N-02b) 151 4.3.2 Cấu trúc 7-fluoro-6-nitroquinazolin-4-(3H)-on (N-03a) 7fluoro-6-nitroquinazolin-4-(3H)-on (N-03b) 152 4.3.3 Cấu trúc 4,7-dicloro-6-nitroquinazolin (N-04a) 154 4.3.4 Cấu trúc 7-cloro-N-(3-cloro-4-fluorophenyl)-6-nitroquinazolin-4amin (N-05a) 7-fluoro-N-(3-cloro-4-fluorophenyl)-6-nitroquinazolin-4amin(N-05b) .155 4.3.5 Cấu trúc sulfon trung gian N-06a, N-06b, N-06’a, N-06’b 155 4.3.6 Cấu trúc trung gian tổng hợp (S)-3-hydroxytetrahydrofuran (N-09) 156 4.3.7 Cấu trúc (S)-N-(3-cloro-4-fluorophenyl)-6-nitro-7((tetrahydrofuran-3-yl)oxy)quinazolin-4-amin (N-10) tổng hợp từ nguyên liệu N-06a N-05b 157 4.3.8 Cấu trúc (S)-N4-(3-cloro-4-fluorophenyl)-7-((tetrahydrofuran-3yl)oxy)-quinazoline-4,6-diamin (N-11) 158 4.3.9 Cấu trúc trung gian acid (E)-4-bromobut-2-enoic (N-12) acid (E)-4-dimethylaminbut-2-enoic (N-13) 159 4.3.10 Cấu trúc afatinib base afatinib dimaleat 161 4.4 Về cải tiến, xử lí mơi trường lưu ý an tồn lao động quy trình tổng hợp 163 4.4.1 Những cải tiến xử lí mơi trường quy trình tổng hợp 163 4.4.2 Các lưu ý an toàn lao động quy trình tổng hợp 165 4.5 Về độ ổn định sản phẩm afatinib dimaleat tổng hợp 166 4.6 Về thử độc tính cấp sản phẩm afatinib dimaleat 166 luan an KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 168 KẾT LUẬN 168 KIẾN NGHỊ 169 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 170 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC luan an DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 13 C-NMR H-NMR Phổ cộng hưởng từ hạt nhân carbon 13 (Carbon 13 nuclear magnetic resonance) Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton (Proton nuclear magnetic resonance) AcOH Acid acetic AIBN Azobisisobutyronitril ALK ALK tyrosine kinase (Anaplastic Lymphoma Kinase) AR Thuốc thử phân tích (Analytical reagent) AUC Diện tích đường cong BCRP Protein kháng ung thư vú (Breast cancer resistance protein) bh Bão hòa n-Bu n-Butyl t-Bu tert-Butyl CrCl Độ thải creatinin (creatinine clearance) CrCl Độ thải creatinin (Creatinine clearance) Cmax Nồng độ thuốc tối đa huyết tương CTCAE Tiêu chuẩn thông dụng để đánh giá biến cố bất lợi (Common Terminology Criteria for Adverse Events) CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử DBU 1,8-diazabicyclo [54]undec-7-en DCM Dicloromethan DĐVN V Dược điển Việt Nam V DEPT Phổ DEPT (Distortionless enhancement by polarization transfer) DMF N,N-Dimethylformamid DMSO Dimethyl sulfoxid luan an luan an luan an luan an luan an luan an luan an Phụ lục 104 Kết thử độc tính cấp sản phẩm afatinib dimaleat luan an BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CẤP AFATINIB DIMALEAT HÀ NỘI, 12.2020 luan an luan an NGUYÊN VẬT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.1 Mẫu thử Afatinib dimaleat, NSX: 3/2020; ngày nhận mẫu 03/11/2020 Mẫu chất rắn màu trắng, đựng lọ thủy tinh màu nâu, nút kín 1.1.2 Chuẩn bị mẫu nghiên cứu Mẫu thử pha thành hỗn dịch dung môi dung dịch natri carboxy methyl cellulose 0,5% với nồng độ 15mg/ ml 100 mg/ ml động vật uống 1.2 Phương tiện nghiên cứu 1.2.1 Động vật nghiên cứu - Chuột nhắt trắng trưởng thành, giống cái, Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương cung cấp - Động vật nuôi ổn định với điều kiện phịng thí nghiệm Bộ mơn Dược lực, Trường ĐH Dược Hà Nội ngày trước thực nghiên cứu, nuôi dưỡng thức ăn tiêu chuẩn Viện Vệ sinh dịch tễ trung ương cung cấp, uống nước tự 1.2.2 Thiết bị dụng cụ nghiên cứu - Cân phân tích 10-4 A&D, GR200 (Nhật Bản) - Cân kĩ thuật 10-2A&D, EK410i (Hàn Quốc) - Các dụng cụ bắt giữ động vật, bơm kim đầu tù động vật uống - Bộ dụng cụ mổ 1.3 Phương pháp nghiên cứu Phương pháp thử độc tính cấp theo phương pháp phân loại độc OECD (No 423) [1], [3] 1.3.1 Thiết kế thí nghiệm - Chuột nhắt trắng, giống cái, nhịn ăn trước thí nghiệm Kiểm tra cân nặng trước thử nghiệm luan an - Cách dùng mẫu thử: Chuột nghiên cứu cho uống mẫu thử mức liều tương ứng theo hướng dẫn OECD, với thể tích 0,2 mL/10 g chuột Sau uống mẫu thử giờ, chuột cho ăn trở lại, uống nước bình thường - Tiến hành thử nghiệm: chuột thí nghiệm chia thành nhóm, nhóm Mỗi nhóm chuột dùng mức liều khởi đầu số mức: 5, 50, 300 2000 mg/ kg Tùy thuộc kết quan sát biểu độc tính số động vật tử vong nhóm sau dùng mức liều khởi đầu để tiếp tục lựa chọn mức liều dùng cho nhóm tiếp theo, thử thêm nhóm với liều dùng chuyển sang dùng mức liều thấp cao có xác định phân loại độc mẫu thử theo mức độ độc GHS - Theo dõi động vật vòng 14 ngày sau dùng mẫu thử (theo dõi chặt chẽ động vật 30 phút sau cho uống, theo dõi liên tục vòng theo dõi thường xuyên vòng 24 sau dùng mẫu thử) 1.3.2 Theo dõi, đánh giá - Tình trạng chung chuột: hoạt động tự nhiên, tư thế, màu sắc (mũi, tai, đuôi), lông, tiết dịch, phản xạ với kích thích, phân, nước tiểu… - Sự tiêu thụ thức ăn, nước uống, thay đổi cân nặng - Khi có động vật chết, mổ để quan sát đại thể quan phủ tạng Nếu có dấu hiệu đáng nghi mà không xác định rõ nguyên nhân, cần, làm thêm vi thể để xác định nguyên nhân - Tiếp tục theo dõi động vật 14 ngày sau uống chế phẩm thử - Căn vào kết số lượng chuột chết thu nhóm để phân loại mẫu thử theo mức độ độc GSH theo hướng dẫn với mức liều khởi đầu cụ thể (phụ lục [3]) KẾT QUẢ 2.1 Kết thử nghiệm với mức liều khởi đầu lần Dựa số tài liệu tham khảo độc tính afatinib [2], [4], tiến hành thử nghiệm với mức liều khởi đầu 300 mg/ kg cân nặng chuột dùng theo đường uống cho nhóm chuột luan an Kết quả: vòng sau uống mẫu thử, chuột biểu bất thường, sau chuột giảm hoạt động, xù lơng, niêm mạc nhợt nhạt, ăn uống Sau ngày, chuột cịn xù lơng, 2/3 chuột giảm hoạt động, ăn 1/3 chuột giảm cân nặng, 2/3 chuột tăng cân nhẹ Sau 7-8 ngày, chuột dần hồi phục, bớt xù lông, tăng dần vận động ăn uống, niêm mạc hồng hào trở lại Sau ngày, 3/ chuột ăn uống, vận động bình thường, phản xạ tốt với kích thích, lơng mượt, niêm mạc hồng hào, mắt sáng, phân khô, nước tiểu bình thường; khơng có chuột chết sau 14 ngày Sự thay đổi cân nặng chuột thời gian thử nghiệm thể hình Hình1: Sự thay đổi cân nặng chuột, thử nghiệm liều 300 mg/ kg lần 2.2 Kết thử nghiệm với mức liều khởi đầu lần hai Từ kết thử nghiệm với mức liều thứ nhất, tiến hành thử nghiệm nhóm chuột khác với mức liều 300 mg/ kg cân nặng chuột dùng theo đường uống Kết quả: vòng sau uống mẫu thử, chuột khơng có biểu bất thường, sau 3- giờ, chuột giảm hoạt động, xù lông, niêm mạc nhợt nhạt, ăn uống Sau ngày, chuột cịn xù lơng, 3/3 chuột giảm hoạt động, ăn 3/3 chuột giảm cân nặng Sau 6- ngày, chuột dần hồi phục, bớt xù lông, tăng dần vận động ăn uống, niêm mạc hồng hào trở lại Sau ngày, chuột ăn uống, vận động bình thường, phản xạ tốt với kích thích, luan an lơng mượt, niêm mạc hồng hào, mắt sáng, phân khô, nước tiểu bình thường; khơng có chuột chết sau 14 ngày Sự thay đổi cân nặng chuột thời gian thử nghiệm thể hình Hình 2: Sự thay đổi cân nặng chuột, thử nghiệm liều 300 mg/ kg lần 2.3 Kết thử nghiệm với mức liều thứ hai Từ kết thử nghiệm với mức liều 300 mg/ kg lần thứ hai, tiến hành thử nghiệm với mức liều cao 2000 mg/ kg cân nặng chuột dùng theo đường uống cho nhóm chuột Kết quả: vịng sau uống mẫu thử, chuột khơng có biểu bất thường, sau chuột giảm hoạt động, xù lơng, niêm mạc nhợt nhạt, ăn uống Trong vịng 72 giờ, có chuột chết, mổ chuột quan sát đại thể thấy tim, phổi bình thường, niêm mạc dày mỏng Trong vòng 96 giờ, chuột lại chết, mổ chuột quan sát đại thể thấy tim, phổi bình thường, niêm mạc dày mỏng Như vậy, sau ngày, chuột uống mức liều 2000mg/ kg chết 2.4 Kết phân loại độc dựa mức liều thử Từ kết thử nghiệm nhóm chuột với mức liều 300 mg/ kg 2000 mg/ kg Sử dụng phụ lục 2c hướng dẫn 423 OECD [3], xác định phân loại độc giá trị LD50 cut-off mẫu afatinib dimaleat thử Kết thể hình 3: luan an Hình 3: Kết mức liều thử phân loại độc mẫu afatinib dimaleat KẾT LUẬN Mẫu thử afatinib dimaleat thử độc tính cấp theo phương pháp phân loại độc, hướng dẫn số 423 OECD, dùng theo đường uống chuột nhắt trắng, thể độc tính cấp mức độ (LD50 < 300 - 2000) theo phân loại GHS, giá trị LD50 cut-off 500 mg/ kg Biểu độc tính quan sát mức liều thử (300 mg/ kg 2000 mg/ kg) xù lông, giảm hoạt động, niêm mạc nhợt nhạt, giảm ăn uống, giảm cân nặng, chết Những chuột sống, thường phục hồi dần sau 6-7 ngày trở bình thường sau 9- 10 ngày Sau 14 ngày, chuột ăn uống, vận động bình thường, phản xạ tốt với kích thích, lơng mượt, niêm mạc hồng hào, mắt sáng, phân khô, nước tiểu bình thường luan an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Đỗ Trung Đàm (2015), Phương pháp xác định độc tính cấp thuốc, Nhà xuất Y học, Hà Nội Tiếng Anh EMA (2013), Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP) report:Giotrif, https://www.ema.europa.eu/en/documents/assessment-report/giotrif-epar-public-assessment-report_en.pdf OECD (2002), Test No 423: Acute Oral Toxicity – Acute Toxic Method, OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4, OECD Publishing, Paris DOI: https://doi.org/10.1787/9789264071001-en TGA (2014), Australian Public Assessment Report for Afatinib (as dimaleat), https://www.tga.gov.au/auspar/auspar-afatinib-dimaleate luan an ... việc nghiên cứu quy trình cơng nghệ tổng hợp hoạt chất cần thiết Từ chúng tơi thực luận án: ? ?Nghiên cứu quy trình tổng hợp afatinib dimaleat” với mục tiêu sau: - Xây dựng quy trình tổng hợp afatinib. .. L-malic quy mơ 20 g/mẻ 113 Hình 3.6 Sơ đồ quy trình tổng hợp N-08 từ N-07 quy mơ 20 g/mẻ .115 Hình 3.7 Sơ đồ quy trình tổng hợp N-09 từ N-08 quy mơ 20g/mẻ 117 Hình 3.8 Sơ đồ quy trình tổng hợp. .. Kết độ lặp lại quy trình tổng hợp N-10 quy mơ 20 g/mẻ .118 Bảng 3.45 Kết độ lặp lại quy trình tổng hợp N-11 quy mơ 20 g/mẻ .120 Bảng 3.46 Kết độ lặp lại quy trình tổng hợp N-02b quy mô 20 g/mẻ