Bài viết Mối liên quan giữa kiểu gen HBV và một số đặc điểm mô bệnh học có ý nghĩa tiên lượng trong carcinôm tế bào gan trình bày xác định các phân nhóm mô học HCC ở bệnh nhân nhiễm HBV và mối liên hệ với một số đặc điểm mô bệnh học; Khảo sát mối liên quan giữa kiểu gen HBV và các đặc điểm mô bệnh học có ý nghĩa tiên lượng trong carcinôm tế bào gan.
TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 MỐI LIÊN QUAN GIỮA KIỂU GEN HBV VÀ MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM MÔ BỆNH HỌC CĨ Ý NGHĨA TIÊN LƯỢNG TRONG CARCINƠM TẾ BÀO GAN Hồ Tấn Phát1, Nguyễn Đức Duy 5, Hoàng Văn Thịnh 1, Nguyễn Đình Song Huy1, Phạm Hùng Vân 3,4, Nguyễn Tiến Thịnh TÓM TẮT 35 Giới thiệu: Các nghiên cứu trước tác động kiểu gen vi rút viêm gan B (HBV) đến đặc điểm mơ bệnh học cịn Ngồi ra, có hay khơng ảnh hưởng kiểu gen HBV đến tiên lượng bệnh nhân carcinôm tế bào gan (HCC) chưa rõ ràng Mục tiêu: Xác định phân nhóm mơ học HCC bệnh nhân nhiễm HBV mối liên hệ với số đặc điểm mô bệnh học; khảo sát mối liên quan kiểu gen HBV đặc điểm mơ bệnh học có ý nghĩa tiên lượng carcinơm tế bào gan Đối tượng phương pháp nghiên cứu: Nghiên cứu tiến cứu, cắt ngang mô tả 107 bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen B C chẩn đốn ung thư biểu mơ tế bào gan (HCC) mô bệnh học sau phẫu thuật cắt khối u gan Bệnh viện Chợ Rẫy từ 10/2018-04/2019 Kết quả: Trong nhóm HCC, thường gặp HCC dạng thơng thường (78,5%), tiếp HCC dạng bè lớn (10,3%), Bệnh viện Chợ Rẫy Bệnh viện Đại học Y Dược TPHCM Đại học Y Khoa Phan Châu Trinh Nam Khoa Biotek Bệnh viện TWQĐ 108 Chịu trách nhiệm chính: Hồ Tấn Phát Email: bsphatbvcr@gmail.com Ngày nhận bài: 05.10.2022 Ngày phản biện khoa học: 07.10.2022 Ngày duyệt 24.10.2022 dạng tế bào sáng (8,4%) dạng viêm gan thối hóa mỡ (2,8%) HCC dạng bè lớn có tỷ lệ xâm nhập mạch máu số lượng phân bào cao nhóm cịn lại Khơng có khác biệt đặc điểm dạng mơ học, độ biệt hóa, hoại tử u, xâm nhập mạch máu số lượng phân bào nhóm bệnh có kiểu gen khác Kết luận: HCC dạng bè lớn có đặc điểm mơ bệnh học với tiên lượng xấu nhóm khác Kiểu gen HBV không ảnh hưởng đến đặc điểm mô bệnh học có ý nghĩa tiên lượng carcinơm bào gan Từ khóa: ung thư biểu mơ tế bào gan, vi rút viêm gan B, giải phẫu bệnh SUMMARY RELATIONSHIP BETWEEN HBV GENOTYPE AND PROGNOSTIC HISTOLOGICAL FEATURES IN HEPATOCELLULAR CARCINOMA Background: Previous studies on the impact of hepatitis B virus (HBV) genotype on histopathological characteristics are few In addition, the effect of the HBV genotype on the prognosis of patients with hepatocellular carcinoma (HCC) is unclear Aim: Determining the proportion of HCC subtypes in HBV-infected patients and their relationship with some histopathological characteristics To investigate the correlation between HBV genotype and prognostic histopathological features in hepatocellular carcinoma 249 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 Patients and methods: Prospective and descriptive cross-sectional study of 107 HCC patients who were infected with HBV genotypes B and C, which were histologically diagnosed following hepatic resection at Cho Ray hospital from October 2018 to April 2019 Results: In the subtypes of HCC, the most common type of HCC is conventional HCC (78.5%), followed by macrotrabecular HCC (10.3%), clear cell HCC (8.4%), and steatohepatitis type (2.8%) Macrotrabecular HCC has a higher rate of vascular invasion and mitotic figure than other groups Among HBV genotypes, genotype C1 was found in 42.1%, and genotype B4 was found in 57.9% of patients There was no difference in histological characteristics, differentiation, tumor necrosis, vascular invasion, and mitotic figure between the two groups Conclusions: Large trabecular HCC has histopathological features with a worse prognosis than other groups HBV genotype did not affect the prognostic histological features of HCC Keywords: Hepatocellular carcinoma, hepatitis B virus, pathology I ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư gan nguyên phát loại ung thư phổ biến giới với tỷ lệ xuất ngày gia tăng nhiều quốc gia, tỷ lệ mắc bệnh khoảng 20% tổng số khoảng 350 đến 400 triệu người nhiễm HBV mạn tính tồn giới đa số trường hợp carcinôm tế bào gan (HCC) Bảng phân loại mô bệnh học HCC trải qua nhiều thời kỳ, bảng phân loại Tổ chức Y tế giới (WHO) 2019, với cập nhật đáng kể đưa phân nhóm HCC, bệnh cạnh HCC dạng thơng thường Các phân nhóm ngồi khác đặc điểm mơ bệnh 250 học, cịn có khác biệt đặc điểm đột biến gen tiên lượng Ở nước châu Á, nguyên nhân hàng đầu HCC nhiễm HBV Hiện xác định 10 kiểu gen HBV ký hiệu từ A-J kiểu gen phân bố khác tùy theo vùng địa lý Ở châu Á, kiểu gen thường gặp B C Các nghiên cứu cho thấy bệnh nhân nhiễm kiểu gen C có nguy cao dẫn đến HCC so với kiểu gen B, nhiên ảnh hưởng kiểu gen HBV đến tiên lượng bệnh lại chưa rõ ràng 2,8 Vì vậy, chúng tơi định thực nghiên cứu nhằm: (1) Xác định tỷ lệ biến thể HCC bệnh nhân nhiễm HBV mối liên hệ với số đặc điểm mô bệnh học (2) Khảo sát ảnh hưởng kiểu gen HBV đến số đặc điểm mô bệnh học có ý nghĩa tiên lượng HCC II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 107 bệnh nhân nhiễm HBV có khối u gan đến khám điều trị phẫu thuật khoa U gan, Bệnh viện Chợ Rẫy từ tháng 10/2018 đến tháng 4/2019 Tiêu chuẩn chọn mẫu - Có đầy đủ hồ sơ bệnh án - Có đầy đủ khối nến lưu trữ Tiêu chuẩn loại trừ Những bệnh nhân u gan nghi di căn, ung thư đường mật bệnh nhân từ chối tham gia nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu Tiến cứu, cắt ngang mô tả Cách tiến hành Lựa chọn bệnh nhân phù hợp với tiêu chuẩn chọn mẫu có anti-HCV âm tính đồng thời với HBsAg dương tính huyết HBV DNA dương tính mơ TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 gan kết mô bệnh học sau phẫu thuật cắt khối u gan HCC (các trường hợp u biệt hóa xác nhận lại hóa mơ miễn dịch Glypican-3 AFP cho kết dương tính) Mẫu bệnh phẩm gửi xuống khoa Giải phẫu bệnh - Bệnh viện Chợ Rẫy, phần gan mang u lấy để chẩn đốn mơ bệnh học, đồng thời lựa chọn khối nến có u mang khảo sát kiểu gen HBV Các biến số nghiên cứu Xác định độ biệt hóa u, phân nhóm biến thể u theo bảng phân loại WHO 2019 Số lượng phân bào đếm 10 quang trường lớn, đặc điểm xâm nhập mạch hoại tử u ghi nhận có vị trí có xâm nhập mạch hoại tử u Kiểu gen HBV ghi nhận thơng qua phân tích di truyền toàn chiều dài gen (full-length) kỹ thuật giải trình tự Sanger phịng xét nghiệm Nam Khoa Biotek Kết giải trình tự gen sử dụng để xác định kiểu gen HBV dựa sở tham chiếu với trình tự chuẩn kiểu gen HBV ngân hàng gen (Genbank) Dữ liệu thô quản lý mã hóa phần mềm Microsoft Excel, phiên 15.21.1 Dữ liệu mã hóa xử lý tiếp phần mềm thống kê SPSS phiên 14 Đạo đức nghiên cứu Nghiên cứu chấp thuận Hội đồng Đạo đức nghiên cứu Y sinh học Bệnh viện TWQĐ 108 Bệnh viện Chợ Rẫy cho phép thực theo Quyết định số 3746/HĐĐĐ ngày 13/09/2018 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Các đặc điểm dịch tễ học Nghiên cứu bao gồm 107 bệnh nhân, với 94 bệnh nhân nam giới (88%), tỷ lệ nam/nữ = 7,2 Tuổi trung bình nghiên cứu 51,4 ± 11,4 tuổi, với đa số bệnh nhân có độ tuổi từ 40 đến 60 tuổi 3.2 Phân nhóm HCC mối liên hệ với số đặc điểm mơ bệnh học Biểu đồ 1: Phân nhóm mơ bệnh học dân số nghiên cứu Nghiên cứu chúng tơi ghi nhân phân nhóm mơ bệnh học, nhóm thơng thường chiếm số ca bệnh nhiều nhất, tiếp nhóm bè lớn, tế bào sáng viêm gan thối hóa mỡ 251 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 Bảng 1: Đặc điểm mô bệnh học phân nhóm HCC (Đơn vị: n (%)) Dạng thơng Dạng bè Dạng VG thối Dạng tế bào Đặc điểm mơ bệnh học thường (n=84) lớn (n=11) hóa mỡ (n = 3) sáng (n = 9) Kích thước trung bình u (cm) 6,36 7,5 4,33 5,89 Độ biệt hóa Biệt hóa trung bình 66 (78,6%) 10 (90,9%) (66,7%) (66,7%) Biệt hóa 18 (21,4%) (9,1%) (33,3%) (33,3%) Hoại tử u 67 (79,8%) 11 (100%) (33.3%) (88,9%) Xâm nhập mạch 23 (27,4%) (72,7%) (0%) (44,4%) Số lượng phân bào 2,8 ± 0,43 7,18 ± 1,04 2* 2,33 ± 1,49 (trung bình ± KTC) VG: viêm gan; KTC: khoảng tin cậy *: số trung vị HCC dạng bè lớn có kích thước to HCC dạng bè lớn có số lượng phân bào u dạng khác, nhiên khác biệt cao đáng kể so với nhóm cịn lại (p < khơng có ý nghĩa thống kê (kiểm định t, p = 0,001) Chúng không ghi nhận khác 0,342) biệt đáng kể số lượng phân bào Nghiên cứu cho thấy rằng, nhóm HCC dạng thơng thường, dạng viêm so sánh với HCC dạng thơng thường, gan thối hóa mỡ dạng tế bào sáng HCC dạng bè lớn có tỷ lệ xâm nhập mạch 3.3 Kiểu gen HBV mối liên hệ với máu vi thể cao (p = 0,005) HCC dạng số đặc điểm mơ bệnh học HCC bè lớn có tỷ lệ hoại tử u cao so với Nghiên cứu chúng tơi cho thấy tỷ lệ nhóm lại, nhiên khác biệt bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen B4 62 khơng có ý nghĩa thống kê bệnh nhân (57,9%), nhiễm HBV kiểu gen C1 45 bệnh nhân (42,1%) Bảng 2: Một số đặc điểm mô bệnh học HCC kiểu gen B4 C1 (Đơn vị: n (%)) Kiểu gen C1 Kiểu gen B4 Đặc điểm mô bệnh học p (n = 45) (n = 62) Biến thể mô học Dạng thông thường 35 (42%) 49 (58%) Dạng bè lớn (27,27%) (72,73%) Dạng VG thối hóa mỡ (66,67%) (33,33%) Dạng tế bào sáng (55,56%) (44,44%) Độ biệt hóa Biệt hóa trung bình 36 (80%) 48 (77%) 0,784* Biệt hóa (20%) 14 (22,6%) Hoại tử u 36 (80%) 51 (82,26%) 0,767* Xâm nhập mạch máu 14 (31,11%) 21 (33,87%) 0,764* Số lượng phân bào 3,16 ± 3,19 ± 0,58 0,94** (trung bình ± ĐLC) VG: viêm gan; ĐLC: độ lệch chuẩn *Kiểm định χ,2, ** Kiểm định t 252 TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 Về dạng mô học, HCC dạng bè lớn có tỷ lệ nhiễm HBV type B4 cao so với dạng khác, nhiên khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (kiểm định Fisher, p = 0,3) Chúng tơi khơng tìm thấy khác biệt đáng kể đặc điểm có ý nghĩa tiên lượng khác độ biệt hóa u, hoại tử u, xâm nhập mạch máu hay số lượng phân bào ca bệnh nhiễm HBV kiểu gen C1 B4 IV BÀN LUẬN Tương tự với nghiên cứu trước, nghiên cứu cho thấy đa số HCC thuộc nhóm thơng thường Theo WHO 2019, khoảng 65% HCC thuộc nhóm thơng thường, cịn lại phân vào phân nhóm khác5 Các đặc điểm phân nhóm u, độ mô học u, xâm nhập mạch máu… đặc điểm mơ bệnh học có ảnh hưởng đến tiên lượng bệnh nhân Về HCC dạng bè lớn, nghiên cứu cho thấy dạng phân nhóm chiếm khoảng 1,7 – 12%3,5 Tỷ lệ khác biệt phân nhóm HCC dạng bè lớn nghiên cứu định nghĩa HCC dạng bè lớn nghiên cứu khác Những nghiên cứu định nghĩa bè lớn bè dày tế bào, có nghiên cứu lại định nghĩa dạng bè lớn bè dày 10 tế bào u Trong nghiên cứu này, sử dụng định nghĩa WHO 2019, bè dày 10 tế bào chiếm 50% u Hơn nữa, cách chọn mẫu nghiên cứu ảnh hưởng đến tỷ lệ HCC dạng bè lớn nghiên cứu Nghiên cứu Ziol lấy mẫu phẫu thuật HCC cho kết tỷ lệ dạng bè lớn gần (10% 16%), nghiên cứu Jeon thực mẫu sinh thiết mẫu phẫu thuật, cho kết dạng bè lớn có 1,7% Nghiên cứu chúng tơi Jeon cho thấy HCC dạng bè lớn có kích thước u lớn tỷ lệ xâm nhập mạch máu vi thể cao HCC dạng thông thường Nghiên cứu cho thấy rằng, HCC dạng bè lớn có số lượng phân bào cao tỷ lệ hoại tử u nhiều nhóm khác, phù hợp với diễn tiến lâm sàng HCC dạng bè lớn với tỷ lệ tái phát u cao tiên lượng sống cịn xấu HCC dạng thơng thường3 HCC dạng tế bào sáng dạng viêm gan thoái hóa mỡ gặp với tỷ lệ nhỏ trường hợp HCC5 HCC dạng viêm gan thối hóa mỡ có đặc điểm mơ bệnh học tượng thối hóa mỡ, thối hóa dạng bóng bay hay thể Mallory – Denke tế bào u7 Thể bệnh thường gặp bệnh nhân đái tháo đường, tăng huyết áp hay hội chứng tăng lipid máu Nghiên cứu Shihabara cho thấy thể bệnh thường có kích thước u nhỏ hơn, độ mơ học thấp hơn, tỷ lệ xâm nhập mạch máu vi thể thấp so với HCC dạng thông thường7 Nghiên cứu chúng tơi cho thấy HCC dạng viêm gan thối hóa mỡ có đặc điểm mơ bệnh học với ý nghĩa tiên lượng tốt HCC dạng thông thường Về mặt tiên lượng, số nghiên cứu cho thấy HCC dạng viêm gan thối hóa mỡ có tiên lượng tốt hơn, có nghiên cứu cho thấy khơng có khác biệt đáng kể tiên lượng thể bệnh HCC dạng thông thường5 Về thể bệnh HCC dạng tế bào sáng, nghiên cứu Liu không cho thấy khác biệt đáng kể kích thước u, tỷ lệ xâm nhập mạch máu hay độ mô học u so với HCC dạng thông thường4 Kiểu gen HBV mối liên hệ với số đặc điểm mô bệnh học HCC Ở Việt Nam, 90% bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen B4, có gần 10% bệnh nhân có HBV kiểu gen C16 Trong đó, nhóm bệnh nhân HCC nghiên cứu này, 253 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 tỷ lệ nhiễm HBV kiểu gen C1 lên đến 42,1% Điều phù hợp với nghiên cứu Chuon cho thấy kiểu gen C1 có tỷ lệ cao diễn tiến thành HCC2 Tỷ lệ số ca HCC nhiễm HBV kiểu gen C chí cịn cao nước Đông Nam Á khác Thái Lan, Campuchia2,8 Bệnh nhân HCC kèm nhiễm HBV kiểu gen C thường có tuổi trẻ tỷ lệ dương tính HBeAg cao so với kiểu gen B8 Tác động kiểu gen HBV lên tiên lượng bệnh chưa rõ ràng Các nghiên cứu Nhật Bản Đài Loan cho thấy HCC bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen C có tiên lượng xấu bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen B Tuy nhiên, nghiên cứu Thái Lan Hồng Kông lại cho thấy kiểu gen HBV không ảnh hưởng đến tiên lượng8 Ở Việt Nam chưa có nghiên cứu vấn đề Nghiên cứu chúng tơi cho thấy khơng có khác biệt đặc điểm mơ bệnh học có ý nghĩa tiên lượng dạng mơ học, độ biệt hóa u, tỷ lệ xâm nhập mạch hay số lượng phân bào kiểu gen B C, nhiên, để kết luận xác tác động kiểu gen HBV tiên lượng bệnh nhân Việt Nam, cần phải thực thêm nghiên cứu lâm sàng với cỡ mẫu lớn V KẾT LUẬN Nghiên cứu cho thấy biến thể HCC thường gặp HCC dạng thông thường, dạng bè lớn, dạng tế bào sáng dạng viêm gan thối hóa mỡ HCC dạng bè lớn mang đặc điểm mô bệnh học có tiên lượng xấu nhóm cịn lại Chúng chưa ghi nhận ảnh hưởng kiểu gen HBV đến đặc điểm mô bệnh học 254 TÀI LIỆU THAM KHẢO Ally A, Balasundaram M, Carlsen R, et al Comprehensive and Integrative Genomic Characterization of Hepatocellular Carcinoma Cell 2017;169(7):13271341.e1323 Chuon C, Takahashi K, Matsuo J, et al High possibility of hepatocarcinogenesis in HBV genotype C1 infected Cambodians is indicated by 340 HBV C1 full-genomes analysis from GenBank Scientific Reports 2019;9(1):12186 Jeon Y, Benedict M, Taddei T, Jain D, Zhang X Macrotrabecular Hepatocellular Carcinoma: An Aggressive Subtype of Hepatocellular Carcinoma The American journal of surgical pathology 2019;43(7):943-948 Liu Z, Ma W, Li H, Li Q Clinicopathological and prognostic features of primary clear cell carcinoma of the liver Hepatology research : the official journal of the Japan Society of Hepatology 2008;38(3):291-299 Lokuhetty D, White VA, Watanabe R, Cree IA Digestive system tumours World Health Organization; 2019 Matsuo J, Do SH, Yamamoto C, et al Clustering infection of hepatitis B virus genotype B4 among residents in Vietnam, and its genomic characters both intra- and extra-family PloS one 2017;12(7):e0177248 Shibahara J, Ando S, Sakamoto Y, Kokudo N, Fukayama M Hepatocellular carcinoma with steatohepatitic features: a clinicopathological study of Japanese patients Histopathology 2014;64(7):951-962 Tangkijvanich P, Mahachai V, Komolmit P, Fongsarun J, Theamboonlers A, Poovorawan Y Hepatitis B virus genotypes and hepatocellular carcinoma in Thailand World J Gastroenterol 2005;11(15):22382243 ... độ mô học u so với HCC dạng thông thường4 Kiểu gen HBV mối liên hệ với số đặc điểm mô bệnh học HCC Ở Việt Nam, 90% bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen B4, có gần 10% bệnh nhân có HBV kiểu gen C16 Trong. .. nhiên khác biệt bệnh nhân nhiễm HBV kiểu gen B4 62 khơng có ý nghĩa thống kê bệnh nhân (57,9%), nhiễm HBV kiểu gen C1 45 bệnh nhân (42,1%) Bảng 2: Một số đặc điểm mô bệnh học HCC kiểu gen B4 C1 (Đơn... hệ với số đặc điểm mô bệnh học (2) Khảo sát ảnh hưởng kiểu gen HBV đến số đặc điểm mơ bệnh học có ý nghĩa tiên lượng HCC II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu 107 bệnh nhân