BÁO CÁO KHOA HỌC, NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG, ĐẠI HỌC BÁO CÁO KHOA HỌC, NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG, ĐẠI HỌC BÁO CÁO KHOA HỌC, NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG, ĐẠI HỌC BÁO CÁO KHOA HỌC, NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG, ĐẠI HỌC BÁO CÁO KHOA HỌC, NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG, ĐẠI HỌC( 3 ) ( TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP HCM SỐ 3 (1) 2008 )KHOA HOC CÔNG NGO 49 NGHIÊN CÉU CÁC DIËU KIN TÖI UU CH A NIGER PHÂN GIÀI CELLULOSE CÓ TRONG PHÊ LIÄU DÉA NGUYE N OÚC LLØNG LÊ TH.
TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TP.HCM - SỐ (1) 2008 KHOA HOCMỞ - CÔNG NGO 49 NGHIÊN CÉU CÁC DIËU KI$N TÖI UU CH@ A NIGER PHÂN GIÀI CELLULOSE CÓ TRONG PHÊ LIÄU DÉA NGUYE N OÚC LL/ØNG * LÊ TH! THANH MAI ** Nham giåi quyet Indng chat thåi không nhô ô nhà máy hğp dúa, chúng tơi tien hành nghiên cúu tìm dieu kiên tÖi üu de A n/ger phân giài cellulose có phe lieu dúa, tao san pham húu ích Iàm sach mơi trng I NGUN LIWEU VÀ PHLÏONG PHÁP Nguyên lieu - Phe lieu dúa tù Công ty Thșc pham Xuät khau Tân Bình - Vi sinh vât: Aspergillus niger bo môn Công nghe Sinh hgc — tr0òng Dai hgc Bách khoa TP Ho Chi Minh cung cäp - Mơi trng: o Mơi trcfịng 1: mơi trng thąch — malt, sù dung de giú giÖng näm moc 1%) o Mơ i trc/ịng 2: mơi trng nhân sinh khÖi (cám gąo: 75%; Träu : 24%; (NH4) 2SO4 ' o Mơi trng 3: mơi trng thù khå phân giài cellulose cúa näm mÖc (Agar 2%; CMC : 0,5%; Pha dung d!ch dem Mc Livaine pH 5) Phú'dng pháp - Phudng pháp vi sinh vât: cäy chuyen giú giÖng thąch nghiêng; nhãn sinh khÖi näm mÖc; t?o tiêu bån quan sát vi sinh v/at dc/ói kính hien vi Phuong pháp phÖi tron mau xác d!nh dieu kiên lên men tÖi uu Phe lieu dúa sau dudc nghián nát, thu Iäy phan bã dem say de làm giàm am, có bo sung ho{ac khơng bo sung thêm 10% cám de Iàm mơi tru’ịng Iên men • Mơi trcfịng dugc bo sung thêm nc cho dat am 64% sau dó phƯi tron vói vi sinh vât theo tỵ Iê 1%, 3%, 6Oo, 9O/‹ , 12% ã Sự dung tẻ le phệi tro n vi sinh veat tÖi uu, de xác d!nh d{o am cho Iên men tƯi uu • Sú dqng ti I /ephÖi tr/on vi sinh v{at tÖi üu, duo am tÖi uu de xác dinh nhiét duo cho fen men tÖi uu ã Sự dỗ ng tẻ le phệi tron vi sinh vât toi uu, dğ am toi u’u nhiet dğ ni cäy tƯi uu de xác d!nh thịi gian Iên men tƯi uu PGS.TS Chu nhiêm Bơ mơn CNSH triJăng Dai hoc Bách khoa TP.HCM ’” Tiê“n si”, Phó ban Dào tsio Dai hgc O“c gia TP.HCM TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM - SỐ (1) 2008 TAP CHI KHOA HOC SÖ 1(12)-2008 50 Theo dõi múc giåm hàm lydng cellulose nguyên lieu de dánh giá chi tiêu - Phcfdng pháp sinh hóa o Xác •*!nh enzyme ngoai bào • Nguyên tac: Enzyme tác dqng Iên co chät cellulose mơi trng thach, co chat b! phân húy, dğ duc cúa mơi trng b! giam, mơi trng trơ nên suot Oo Ión cùa phan mịi trng st phån ánh hoat dong cúa enzyme • Cách tien hành: Cho vào moi dia petri 25mI mơi trûịng Khi mơi trng dơng lai dqc moi dia petri mơt lo trịn có dcfịng kính 8mm Nhơ vào moi lơ 0,2mI d!ch enzyme can thú Oe yên ô 40°C 24 giị, sau dó cho vào moi dïa 5mI dung d!ch thuÖc nhucom lod, tráng deu khap m{at thąch, de yên phút Gąn bô dung d!Ch thuoc nhu{om, xuät hien vùng CMC b! phân giåi suÖt nen dơ tím • Kích thc vịng phân giåi = (di 'dng kính vù ng phân giåi — dng kỵnh Io khoan) o Các phUdng pháp thng dùng thí nghiem hoá sinh [2, 3] II.KET OUÀ VÀ THÀO LULAN Änh hing cúa ti lę giong phoi trğn dƯi vói khå phân giãi cellulose cúa A niger - Oe khåo sát tỵ Ie vi sinh v{at cän dna vào phe lieu dúa chúng tơi sú d? ng hƯn hgp gưm A niger ni mơi trcfịng vói thành phän mơi trcfịng tƯi iJu dã khào sát (Ammonium sulfate: 0,8%; am: 64%; Thịi gian ni cay: 52 giị) de làm che pham vi sinh v{at dna vào phe lieu dúa Chúng tơi khåo sát nƯng duo che pham vi sinh v¿at nhu sau: o Mau (1O/o): 90g bã vô dúa + 10g cám + 1g che pham o Mãu (3%): 90g bã vô dúa + 10g cám + 3g che pham o Mäu (6%): 90g bã võ dúa + 10g cám + 6g che pham o Mau (9%): 90g bã vô dúa + 10g cám + 9g che pham o Máu (12%): 90g bã vò dúa + 10g cám + 12g che pham Theo dõi st thay doi hàm lugng cellulose tąi thòi diem ban dáu sau ngày ú Ket q diJpc trình bày Bàng sƯ 1, Bieu só Băng so 1.Hàm IlJğng cellulose cõ cac mäu phoi trğn vói ti lğ giong khac tpi thòi diem ban dau Ti le giong Hàm lhøng cellulose trung bình (%) OF 3% 6% 9% 12% 28,5 28,7 28,8 28,9 28,9 Ket quà cho thay mâu ban dau có hàm Inøng cellulose khơng chênh lech nhieu so vói hàm lng cellulose có bã vơ dúa, vây khåo sát st thay doi TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM - SỐ (1) 2008 KHOA HOC - CÓNG NGHÊ 51 hàm lugng cellulose theo nong duo che pham vi sinh vât ng tơi so sánh vói hàm Indng cellulose có bã vơ dúa (28,7%) Phe lieu dúa sau duqc ú ngày vói che pham vi sinh vât dugc thu nhân dem säy khơ trüóc xác d!nh hàm Iügng cellulose Bieu so Ành hiJơng cúa ti Iğ giƯng den hàm IiJğng cellulose cịn lai mau thí nghiğm sau ngày ú Ket quå thí nghiem cho thäy neu gia tăng tỵ le giƯng mot chùng mcc dó thỡ hm wỗlng cellulose mau thớ nghiem cỷ ng giàm dan Chúng tơi chgn ti le giƯng de ù phe lieu dúa 6% vói ti le giƯng cao hdn núa vãn có st giåm hàm lugng cellulose nhung st chênh lech Ià không dáng ke Ành hcfịng cúa am dƯi vói khà phân giåi cellulose cúa A niger Chúng sú dv ng mơi trüịng gom có 90g bã vơ dúa, 10g cám 6g che pham vi sinh vãt de khåo sát dğ am khác tù 40% den 75% Theo dõi st thay doi hàm wcing cellulose sau ngày ú Ket q dûdc trình bày Bieu sƯ 40 50 60 Do am ('7º) 70 80 Bieu dćỵ so 2.Ành hcfơng cùa dğ am mơi trcf”dng den hàm Icfğng cellulose cịn Iąi mâu thí nghiêm sau ngày ú 652 TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ - SỐ (1) 2008 TAP CHI KHOA HOC SÖTP.HCM 1(12)-2008 Ket quå cho thäy A niger có khà thúy phân cellulose tƯt nhät mơi trng có am khổng 60% — 70% 3.Änh hcfõng cûa nhiğt dğ dÖi või khå phân giài cellulose cûa A niger Chúng tơi sú dung mơi trng gom 90g bã vô dúa, 10g cám 6g che pham vi sinh vât, am 65% de khao sát nhiet dğ Iên men khác tù 30°C den 50°C Theo dõi st thay doi hàm wc/ng cellulose sau ngày ú Ket q disc trình bày Bieu sƯ Bieu dćỵ so 3.Ành hcfơng cûa nhiet dȘo ni cay den hàm Icfcing cellulose cịn Igi mau thí nghiem sau ngày û Nhiet dơ có ånh hng rät Ión den sinh trcfịng phát trien cúa A niger Quan sát bang mat thng ng tơi thay rang khổng nhiet dơ 30°C-35°C nam mƯc phát trien rat tƯt, mang Iüói khuan ty cûa nam phát trien chang ch!t khap mơ i trng Iàm cho mơi trng ket chăt lai Ơ 40°C nam mƯc phát trien yeu hdn, khuan ty Ian rat châm mơi trng Ị nhiet cao hon, nam mÖc phát trien rat yeu mơ i trng rịi rac, 50°C näm mƯc hau nhü khơng phát trien Do dó khà thùy phân cellulose cû ng bi ånh hc/ịng bơi nhiet Chúng thäy rang A niger sinh tri ông, phát trien thúy phân cellulose tƯt nhät 30°C Hàm lacing cellulose cd chät ni cay A niger ”ư nhiet dudng vói hàm wing cellulose có co chät ni cäy A niger ”ư dieu kien nhiet phòng (nhiet phòng thòi gian dao dong khổng 30°C-35°C) Ành hcfơng cùa thịi gian Iên men doi vói khå phân giåi cellulose cûa A niger Mơi trng dùc sú dq ng gom: 90g bã vô dúa, 10g cám 6g che pham vi sinh vât, dô am 65%, Iên men ô nhiet dơ phịng de theo dõi st thay doi hàm wdng cellulose sau thòi gian Iên men khác Ket q dUqc trình bày Bieu sƯ TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM - SỐ (1) 2008 KHOA HOC - CÔNG NGO 753 l0l5 Thịi gian lêr sec (ngày) Bieu dćỵ so 4.Ành hLfơng cúa thịi gian Iên men den hàm Icfcing cellulose cịn Igi mau thí nghiem Ket q thí nghiem cho thäy hàm Ining cellulose mau thí nghiem giåm dan nhanh ngày dau, sau dó tƯc giàm thäp dan Trong hai ngày dau näm moc sù dq ng cac chät dinh dũng hịa tan có san mơi trüịng de th¿c hien qua trình mam, hình thành sqi näm, enzyme mói bat ĆÍau disc tong hdp nên co chät cellulose chua thay doi nhieu Thòi gian tiep theo tù ngày thú ba den ngày thú năm Ià thòi kÿ phát trien manh mè cúa ski nam Sdi näm phát triên rat nhanh khap mơi trüịng, nhiêt dơ tăng nhanh có the Iên tói 40°C-45°C y thịi gian hàm wing cellulose disc tiêu hao nhieu nhanh chóng Chuyen sang giai doan tiep theo bào tú dã hình thành nhieu, nhiet dơ khƯi mơi trng am giam dan Trong giai doan trình trao doi chät yeu dan, wing enzyme giåm dó múc giåm chät dinh dũng châm Iqi Ket luan Dieu kien tƯi uu de A niger phân giåi cellulose có phe Ii/eu dúa Ià: Chuyen A niger vào bã vo dúa theo tỵ Iê giúa bã vo dúa: A niger Ià 100:6 Thêm nc dat dơ am Ià 65% Tron deu u ô 30°C ngày Sau dó tron thêm cám, urê mât rỵ theo tỵ le (% so vói bã vô dúa): cám: 40%, urê: 5% mât ri: 1% Tiep tqc ú ô 30°C ngày TÀI LI WEU THAM KHÁO 1.Nguyen Dúc Ladng, Lê Th! Thanh Mai tâp the: “Nghiên cúu xú Iÿ phe lieu nhà máy dÖ hop dúa de san xuät enzyme bromelin, phân sinh hgc thúc ăn gia súc” Be tài nghiem thu cäp Thành phÖ Nghiem thu năm 2004 2.Nguyen Lân Dúng cong tac viên: "Mot sÖ phuong phap nghiên cúu vi sinh vât hgc", năm 1978 3.Nguyen Oúc Lacing, Cao Cüịng: “Thí nghiem Hóa Sinh hoc" NXB OHQG TPHCM, năm 2003 4.Nguye n Văn Mùi, Thÿc hành Hoa Sinh hoc Nhà Xuät bàn Khoa hqc Ky thuât, năm 2001 54 TẠP CHÍ KHOA H ỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ TP.HCM - SỐ (1) 2008 TAP CHI KHOA HOC SO 1(12)—2008 5.Nguyen Oúc Lüdng: Vi sinh vât hgc công nghiep NXB OHQG TPHCM, nãm 2002 6.Helmut Uhlig: “Industrial enzymes and their applications” John Wiley and Sons, Inc, Newyork, nãm 2000 7.World Journal of Microbiology and Biotechnology ISSN 0959-3993-GBR, DA, 1998 Vol 14, No pp.399-404 BIBL-25 ref TÓM TAT Oieu kien toi ou de A niger phân giái cellulose có phe lieu dúa là: Chuyen A niger vào bã vô dúa theo ti le giúa bã vo dúa: A niger 100:6 Thêm nJóc dat am Ià 65% Tron deu ú ô 30°C ngày Sau dó tron thêm cám, urê mât ri theo ti le (% so vói bã vô dúa): cám: 40%, urê: 5% mât ri: 1% Tiep tqc ú ô 30°C ngày SUMMARY The optimal conditions that A niger can hydrolize cellulose in wasted pineapple are: - A niger/pineapple peel (w/w): 100/6 - Moisture: 65% - Mix and incubate at 30°C, in days Put mash, urea and molasses (% pineapple peel): 40:S:1 Incubate at 30°C, in days ... HOC SÖTP.HCM 1(12)-2008 Ket quå cho thäy A niger có khà thúy phân cellulose tƯt nhät mơi trng có am khổng 60% — 70% 3.Änh hcfõng cûa nhiğt dğ dƯi või khå phân giài cellulose cûa A niger Chúng tơi... giong Hàm lhøng cellulose trung bình (%) OF 3% 6% 9% 12% 28,5 28,7 28,8 28,9 28,9 Ket quà cho thay mâu ban dau có hàm Inøng cellulose khơng chênh lech nhieu so vói hàm lng cellulose có bã vơ dúa,... cao hdn núa vãn có st giåm hàm lugng cellulose nhung st chênh lech Ià khơng dáng ke Ành hcfịng cúa am dƯi vói khà phân giåi cellulose cúa A niger Chúng tơi sú dv ng mơi trüịng gom có 90g bã vô dúa,