02 11 Bông sÑ 7 2020 chuyÃn in pdf �� KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVII SỐ 7 2020 1 ,(1 ,( (1 1 (1 , 1 3 2, (1 1 1 , 1 ,(1 ,(1 Nguyễn Văn Tuyên�� Nguyễn Thị Kim Lan�, Nguyễn Thị Ngân� TÓM TẮT Nghiên c[.]
KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVII SỐ - 2020 ,(1 (1 ,( (1 1 , 1 (1 ,(1 ,(1 , 2, Nguyễn Văn Tuyên Nguyễn Thị Kim Lan , Nguyễn Thị Ngân TÓM TẮT Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý lâm sàng bệnh giun phổi lợn địa tỉnh Điện Biên thực lợn gây nhiễm thực nghiệm năm 2018 - 2019 Kết nghiên cứu cho thấy thời gian hồn thành vịng đời giun phổi lợn gây nhiễm 31 - 36 ngày Kể từ giun phổi hồn thành vịng đời thể lợn, chúng liên tục thải trứng theo phân ngồi mơi trường đạt số lượng trứng cao ngày thứ 50 - 56, sau giảm dần Về triệu chứng lâm sàng, lợn gây nhiễm có triệu chứng gầy cịm, da khơ, ho khan ho kéo dài; tốc độ tăng trọng giảm 30% so với lợn không mắc bệnh Trên tiêu mô bệnh học quan sát thấy tổ chức phổi lợn nhiễm giun Metastrongylus spp cứng, rắn có màu xám trắng; phổi bị khí thũng, lịng phế nang tăng cường tiết dịch, có tượng xâm nhập tế bào viêm, mô phổi sung huyết, phế quản giãn, nhiều phế nang phổi bị rách với tăng sinh tế bào lympho, đại thực bào, bạch cầu toan Bề mặt gan có u hạt lớn thùy, gan có tượng cứng vàng; tim phì đại, xuất huyết Từ khóa: Bệnh tích, giun phổi lợn, lợn địa, triệu chứng, tỉnh Điện Biên 3DWKRORJLFDO D G FOL LFDO FKDUDFWHULVWLFV RI H SHULPH WDOO L IHFWHG ORFDO SLJV LWK OX J RUP L LH LH SURYL FH X HQ DQ X HQ X HQ KL LP DQ X HQ KL DQ SUMMARY 6W G RQ SDWKROR LFDO DQG FOLQLFDO FKD DFWH LVWLFV RI O Q R P GLVHDVH LQ WKH ORFDO SL V LQ LHQ %LHQ S RYLQFH DV FRQG FWHG RQ H SH LPHQWDO LQIHFWLRQ SL V LQ 7KH VW GLHG HV OWV VKR HG WKDW WKH OLIH F FOH FRPSOHWLRQ WLPH RI O Q R PV LQ WKH LQIHFWLRQ SL V DV GD V 6LQFH WKH OLIH F FOH FRPSOHWLRQ LQ WKH LQIHFWLRQ SL V WKH O Q R PV FRQWLQ DOO GLVFKD HG WKHL H V LQ WKH IHFHV WR WKH HQYL RQPHQW DQG HDFKHG WKH KL KHVW Q PEH RI H V RQ WKH GD WK WK WKHQ DG DOO GHFOLQHG 7KH FOLQLFDO PDQLIHVWDWLRQV RI WKH LQIHFWLRQ SL V LQFO GHG HDNQHVV G VNLQ G FR K DQG S RORQ HG FR K 7KH DWH RI HL KW DLQ GHF HDVHG E FRPSD HG WR WKH KHDOWK SL V 2EVH YDWLRQ RQ WKH KLVWROR LFDO OHVLRQV QGH PLF RVFRSH LQGLFDWHG WKDW WKH O Q R DQL DWLRQ RI WKH LQIHFWLRQ SL V EHFDPH KD G VROLG DQG S HVHQWLQ D R KLWH FROR V O Q LWK HPSK VHPD LQ DOYHROD V HQKDQFHG IO LG VHF HWLRQ LQIODPPDWR FHOO LQILOW DWLRQ FRQ HVWLYH O Q WLVV HV GLODWHG E RQFK V LWK S ROLIH DWLRQ RI O PSKRF WHV DQG PDF RSKD HV FHOOV HVSHFLDOO HRVLQRSKLOV OLYH V IDFH LWK OD H DQ ORPDV LQ OREHV OLYH LWK KD G DQG HOOR SKHQRPHQRQ KHD W P VFOH K SH W RSK KHPR KD H V /HVLRQV O Q R P ORFDO SL V V PSWRP I ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh giun tròn Metastrongylus spp gây lợn bệnh tương đối phổ biến gây tác Trường Cao đẳng Kinh tế - Kỹ thuật Điện Biên Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên LHQ %LHQ S RYLQFH hại lớn cho lợn nhiều nước giới, có Việt Nam Với đặc điểm tỉnh miền núi, Điện Biên gặp nhiều khó khăn phát triển kinh tế nông nghiệp, đặc biệt phát triển chăn nuôi lợn mặt dân trí thấp, chăn KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVII SỐ - 2020 ni lợn mang tính chất quảng canh, tận dụng, chủ yếu theo phương thức nhỏ lẻ, vài hộ gia đình, việc áp dụng tiến khoa học kỹ thuật vào sản xuất chăn nuôi cịn nhiều hạn chế Hơn nữa, tập qn chăn ni lợn người dân vùng chủ yếu nuôi thả rông, ý thức vệ sinh môi trường không tốt điều kiện thuận lợi cho loại giun sán hồn thành vịng đời khiến bệnh phát triển mạnh Một số bệnh giun phổi Metastrongylus spp Khi bị nhiễm giun Metastrongylus spp., lợn sinh trưởng chậm, tăng tiêu tốn thức ăn, gây thiệt hại đáng kể kinh tế cho người chăn nuôi Theo Phạm Sỹ Lăng cs (2006), giun Metastrongylus spp gây tổn thương đường hô hấp, gây viêm phế quản, viêm phổi, làm giảm tăng trọng so với lợn không mắc bệnh dễ chết không điều trị kịp thời Để có sở chẩn đốn phòng trị bệnh, từ năm 2018 - 2019, nghiên cứu số đặc điểm bệnh lý, lâm sàng bệnh giun phổi lợn địa gây nhiễm giun phổi tỉnh Điện Biên II NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu - Xác định thời gian hoàn thành vòng đời giun phổi Metastrongylus spp thể lợn địa gây nhiễm - Diễn biến thải trứng giun lợn sau gây nhiễm - Diễn biến lâm sàng lợn sau gây nhiễm - Tổn thương đại thể vi thể lợn mắc bệnh giun phổi gây nhiễm 2.2 Nguyên vật liệu nghiên cứu - Giun đất gây nhiễm trứng giun phổi Metastrongylus spp - Lợn địa 2,5 tháng tuổi khỏe mạnh, không nhiễm giun, sán: 10 - Bệnh phẩm lợn sau gây nhiễm 60 giun Metastrongylus spp (khí quản, chi nhánh khí quản, phổi, tim, ruột) - Kính hiển vi quang học, máy cắt tế bào Microtom, thuốc nhuộm Hematoxilin - Eosin, hóa chất dụng cụ thí nghiệm khác 2.3 Phương pháp nghiên cứu - Cách gây nhiễm trứng giun Metastrongylus spp cho giun đất: Thu thập giun phổi lợn sống từ lợn mổ khám, nuôi dung dịch NaCl 0,9% Trong dung dịch nước muối sinh lý, giun tiếp tục thải trứng Sau 24 giờ, loại bỏ giun, ly tâm lấy cặn Kiểm tra trứng giun phổi cặn Khi thu số trứng giun phổi nhiều, tưới dung dịch nước muối sinh lý chứa trứng giun phổi vào rơm mục, trộn với đất ẩm, xốp đặt vào hộp nuôi giun đất Hộp nuôi giun đất đặt phịng thí nghiệm, hàng ngày theo dõi độ ẩm, khơng để đất khô ướt - Sau gây nhiễm trứng giun Metastrongylus spp cho giun đất, kiểm tra thấy ấu trùng giun phổi tất mẫu giun đất, ấu trùng giun phổi có sức gây bệnh có hình cong lưỡi liềm, chóp tù có điểm dày giống nút áo Chúng thu thập giun đất, nghiền cho vào dung dịch nước muối sinh lý với tỷ lệ 1:10 (1 gram giun đất: 10ml dung dịch NaCl 0,9%), cho số viên bi vào đưa lên máy lắc khoảng 30 phút cho tan giun đất, lọc qua lưới lọc có đường kính lỗ lọc 0,5mm để bỏ cặn thô Nước lọc ly tâm 2.500 vòng/phút phút, gạn bỏ nước bên trên, lấy cặn; cặn cho vào ống nghiệm chứa dung dịch Ringer’s, ly tâm tiếp lần 2.500 vòng/phút phút, lấy cặn đưa lên buồng đếm Mc Master để đếm số lượng ấu trùng, tập trung số ấu trùng vào cốc thủy tinh chứa 50 ml nước muối sinh lý, đảm bảo ml chứa khoảng 100 ấu trùng giun phổi có sức gây bệnh, từ tính liều ấu trùng để gây nhiễm cho lợn - 10 lợn địa 2,5 tháng tuổi, khoẻ mạnh, lợn nhốt riêng lồng chia thành lơ: lơ thí nghiệm lợn, lơ đối chứng lợn Ni cách ly lợn lơ thí nghiệm lợn lô đối chứng, dùng thuốc tẩy KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVII SỐ - 2020 giun sán cho lợn lơ Sau xét nghiệm phân lợn tuần trước thí nghiệm để chắn lợn giun, sán Tiến hành gây nhiễm ấu trùng giun phổi có sức gây bệnh cho lợn lơ thí nghiệm qua đường miệng (lợn số 1: 1.500 ấu trùng, lợn số 2: 1.200 ấu trùng, lợn số 3: 900 ấu trùng, lợn số 4: 600 ấu trùng, lợn số 5: 300 ấu trùng) Lợn lô đối Số trứng/1 gram phân = chứng không gây nhiễm Nuôi tách riêng lợn, chế độ chăm sóc, ni dưỡng - Sau 20 ngày gây nhiễm, ngày lấy mẫu phân thải lợn để xét nghiệm tìm trứng giun phổi phân phương pháp Cherbovich với dung dịch MgSO4 bão hòa, đếm số trứng gram phân buồng đếm Mc Master tính theo cơng thức: Tổng số trứng đếm buồng đếm x 60 Ghi lại thời gian lợn bắt đầu thải trứng giun số lượng trứng/gram phân/ngày - Quan sát biểu lâm sàng lợn sau xuất trứng giun phổi phân: vừa quan sát kết hợp hoạt động thành ngực, thành bụng cánh mũi vừa đặt tay trước mũi lợn, cảm nhận luồng thở vào lòng bàn tay 15 giây nhân với để xác định tần số hô hấp, dùng ống nghe để nghe xác định tần số tim đập Các thông số xác định lần/ngày vào buổi sáng, ngày liên tục Quan sát triệu chứng, quay clip, chụp ảnh, ghi chép số liệu cá thể lợn - Phương pháp mổ khám: mổ khám tồn lợn lơ gây nhiễm lô đối chứng ngày thứ 64, 65 66 sau gây nhiễm phương pháp mổ khám không toàn diện (Skrjabin K.I., 1963) Lợn cố định bàn mổ, mổ khám bộc lộ tất khí quan để quan sát phát biến đổi đại thể, chụp ảnh tổn thương đại thể điển hình (nếu có) - Phương pháp xác định tổn thương vi thể: làm tiêu bệnh phẩm theo quy trình tẩm đúc para n, nhuộm Hematoxilin - Eosin (HE), quan sát kính hiển vi quang học, độ phóng đại 200 - 400 lần - Phương pháp xử lý số liệu: Các số liệu thu thập xử lý phần mềm Excel 2007 Minitab 16.0 - Thời gian nghiên cứu: 2018 - 2019 III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian giun phổi hồn thành vịng đời diễn biến thải trứng lợn gây nhiễm Bảng cho thấy sau gây nhiễm, lợn bắt đầu thải trứng giun từ ngày 31 - 36, nghĩa thời gian hồn thành vịng đời giun phổi Metastrongylus spp thể lợn địa 31 - 36 ngày Antipov A A cs (2018) cho biết, giun đất ký chủ trung gian loài giun phổi Metastrongylidae) Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012), Diana Gassó cs (2014), thời gian hồn thành vịng đời loài giun phổi lợn 25 - 30 ngày Sau gây nhiễm giun phổi cho lợn nuôi số tỉnh miền Trung Việt Nam, Nguyễn Đức Tân (1996) nhận xét giun phổi lợn cần 35 - 37 ngày để hồn thành vịng đời Như vậy, thời gian giun phổi hồn thành vịng đời thể lợn địa nuôi Điện Biên nằm khoảng thời gian mà tác giả Nguyễn Đức Tân (1996) xác định Kết theo dõi thải trứng giun phổi phù hợp với mô tả Dunn D R (1956), Humbert J F (1992) Ngoài ra, lợn gây nhiễm ấu trùng giun Metastrongylus spp với liều ấu trùng cao số lượng trứng thải lớn ngược lại Điều chứng tỏ, số ấu trùng gây nhiễm nhiều số lượng cá thể giun phát triển đến giai đoạn trưởng thành lớn từ số lượng trứng giun thải nhiều 61 KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVII SỐ - 2020 Bảng Thời gian giun phổi hồn thành vịng đời diễn biến thải trứng lợn gây nhiễm Lô Số TT lợn gây nhiễm Số ấu trùng gây nhiễm Thí nghiệm Đối chứng Ngày đầu xuất trứng giun phổi phân lợn Số trứng/gram phân/ngày sau gây nhiễm ( ±mx) Ngày thứ 31 - 36 Ngày thứ 37 - 42 Ngày thứ 43 - 49 Ngày thứ 50 - 56 Ngày thứ 57 - 63 2076,0 ± 28,3 2404,5 ± 12,8 2739,4 ± 20,6 3132,9 ± 24,5 2343,9 ± 61,2 1842,5 ± 22,1 2167,5 ± 22,4 2473,3 ± 18,6 2901,4 ± 27,4 2146,7 ± 84,5 1597,5 ± 22,8 1647,5 ± 10,1 1896,4 ± 13,2 2531,1 ± 15,9 1774,3 ± 50,6 1394,4 ± 12,2 1569,5 ± 6,1 1628,6 ± 16,2 2203,3 ± 29,4 1478,6 ± 64,8 1026,0 ± 7,65 1274,5 ± 14,9 1467,9 ± 11,6 1740,4 ± 20,6 1277,1 ± 35,0 lợn 3.2 Kết nghiên cứu số tiêu lâm sàng lợn địa sau gây nhiễm giun phổi Sau gây nhiễm ấu trùng giun phổi cho lợn địa 2,5 tháng tuổi, theo dõi biểu lâm sàng, cân khối lượng lợn gây nhiễm lợn đối chứng trước sau thí nghiệm Kết trình bày bảng Bảng Diễn biến lâm sàng lợn địa sau gây nhiễm giun phổi Lơ Thí nghiệm Đối chứng STT lợn gây nhiễm Biểu lâm sàng ±mx Thân nhiệt tăng, ăn kém, gầy, lông xù, ho khan nhiều, khó thở, vận động, chảy nước mũi 2572,5 ± 32,6 Thân nhiệt tăng, ăn ít, ho khan nhiều, hay nằm, gầy, da khô, lông xù, chảy nước mũi 2324,5 ± 34,3 Chảy nước mũi, ho vận động, lại, phân nhão 1925,4 ± 30,3 Ăn ít, gày, lông xù, ho khan 1673,8 ± 28,0 Ăn ít, gày, lông xù, ho khan 1431,1 ± 20,4 Lợn khỏe mạnh, lơng mượt, ăn uống bình thường Bảng cho thấy lợn có số trứng giun phổi phân nhiều triệu chứng lâm sàng bệnh giun phổi rõ rệt Những biểu triệu chứng như: lợn gầy, da khô, lông xù, chảy nước mũi, ho khan, đặc biệt ho nhiều lợn vận động Thời gian đầu sau gây nhiễm, 62 Số trứng giun/lần thải phân lợn ăn uống bình thường gầy dần, sau lợn ăn dần, có bữa bỏ ăn, lười vận động, hay nằm, mệt mỏi Những triệu chứng thấy lợn gây nhiễm với mức độ khác Cả lợn đối chứng khơng thấy có triệu chứng KHOA HỌC KỸ THUẬT THÚ Y TẬP XXVII SỐ - 2020 lâm sàng Vì vậy, nơi khơng có điều kiện xét nghiệm phân vào triệu chứng để chẩn đoán bệnh giun phổi cho lợn Tuy nhiên, lợn bị viêm đường hơ hấp có triệu chứng Do vậy, để chẩn đốn xác bệnh cần xét nghiệm phân dịch mũi lợn để tìm trứng giun phổi Bảng Sự thay đổi tần số hô hấp, nhịp tim khối lượng lợn gây nhiễm STT lợn gây nhiễm Lơ Thí nghiệm Tính chung Đối chứng lợn Tần số hơ hấp (lần/phút) Nhịp tim (lần/phút) 77,6 ± 0,98 Khối lượng lợn (kg) Trước gây nhiễm 63 ngày sau gây nhiễm 146,4 ± 2,99 6,8 17,6 67,2 ± 1,50 131,2 ± 1,50 5,8 18,2 57,6 ± 0,98 124,8 ± 1,50 6,0 18,9 46,4 ± 0,98 119,2 ± 1,50 6,3 19,5 39,2 ± 2,33 100,0 ± 1,79 6,2 19,8 57,60 ± 2,88 a 124,32 ± 3,20 6,22 ± 0,17 18,80b ± 0,41 22,56b ± 0,61 83,36b ± 0,72 6,20a ± 0,15 25,26a ± 0,38 a a Ghi chú: Theo hàng dọc, chữ khác khác có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Kết bảng cho thấy lợn gây nhiễm có thay đổi số tiêu lâm sàng so với lợn khỏe mạnh lô đối chứng, tần số hô hấp nhịp tim lợn bệnh tăng cao rõ rệt so với lợn đối chứng Sau 63 ngày gây nhiễm, lợn lơ đối chứng có khối lượng tăng 30% so với lợn lơ thí nghiệm (P