PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
Hình 4.1. Kết quả PCR kiểm tra mẫu dương tính với S. suis type 2
4.1.2. Phân lập và xác định đặc tính sinh học phân tử của vi khuẩn S. suis
Hình 4.6. Kết quả lên men đường glucose và lactose của vi khuẩn S. suis
Hình 4.8. Kiểm tra khả năng sinh indol của vi khuẩn S. suis
Bảng 4.2. Kết quả sinh hóa chủng vi khuẩn THHSS2
Hình 4.9. Kết quả PCR kiểm tra chủng vi khuẩn TTHSS2
Hình 4.10. Kết quả PCR nhân đoạn gen 6PGD của chủng TTHSS2
Hình 4.11. Kết quả biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào khả biến E. coli
Hình 4.12. Kết quả PCR nhân gen 6PGD trực tiếp từ khuẩn lạc trắng và kết quả các khuẩn lạc trắng PCR cùng cặp mồi M13
Bảng 4.3. Sự sai khác của gene 6PGD của vi khuẩn S. suis type 2 chủng TTHSS2 phân lập được với gene 6PGD của vi khuẩn S. suis type 2 chủng SC 19 trên ngân hàng gene
Hình 4.13. So sánh mức độ tương đồng của amino acid mã hóa từ đoạn gene 6PGD của chủng TTHSS2 và đoạn gene đã được công bố WP_012028448.1
4.1.3. Chế tạo kháng nguyên thô từ vi khuẩn S. suis type 2
Hình 4.14. Kết quả cấy vi khuẩn TTHSS2 bất hoạt cấy trên môi trường thạch máu cừu 5%
4.2. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT KHÁNG THỂ ĐA DÒNG
4.2.1. Kết quả xác định tính sinh miễn dịch của kháng nguyên
Bảng 4.4. Kết quả đánh giá khả năng sinh miễn dịch của kháng nguyên
Hình 4.15. Kết quả đánh giá tính an toàn của kháng nguyên TTHSS2
4.2.2. Kết quả xác định lượng kháng nguyên thích hợp cho khả năng đáp ứng miễn dịch ở chuột SA
Bảng 4.5. Ảnh hưởng của liều lượng kháng nguyên đến đáp ứng miễn dịch của chuột SA
Hình 4.16. So sánh đáp ứng chuột khi được tiêm kháng nguyên S. suis type 2 với các liều khác nhau
4.2.3. Kết quả xác định chất bổ trợ thích hợp cho khả năng sinh miễn dịch của chuột SA
Bảng 4.6. Ảnh hưởng của chất bổ trợ đến đáp ứng miễn dịch của chuột SA
Hình 4.17. Đáp ứng miễn dịch của chuột được tiêm kháng nguyên S. suis
4.2.4. Chế tạo, tách chiết và định lượng kháng thể IgG kháng S. suis type 2
Bảng 4.7. Kết quả chế tạo kháng thể kháng S. suis type 2
Hình 4.18. Gel nhuộm màu Coomassie Blue SDS-PAGE của các mẫu kháng thể đã tinh sạch
Hình 4.19. Kết quả xác định nồng độ protein kháng thể bằng Pierce BCA Protein Assay Kit
Hình 4.21. Kết quả xác định nồng độ kháng thể sau tinh sạch
Hình 4.22. Kết quả ELISA xác định hiệu giá kháng thể sau tinh sạch
4.3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO CONJUGATE – KHÁNG THỂ KHÁNG S. SUIS TYPE 2
4.3.1. Xác định pH của dung dịch gold colloid thích hợp để gắn kháng thể với hạt vàng nano
Hình 4.23. Kết quả xác định pH của dung dịch gold colloid thích hợp
Hình 4.24. Kết quả xác định pH dung dịch gold colloid thích hợp
4.3.2. Xác định nồng độ kháng thể kháng S. suis type 2 tối ưu để gắn với hạt vàng nano
Hình 4.25. Kết quả xác định nồng độ kháng thể thích hợp để gắn vào hạt vàng nano
4.3.3. Kết quả chế tạo kháng thể cộng hợp
Hình 4.27. Kết quả sản xuất kháng thể cộng hợp
4.4. KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ĐỘ NHẠY, ĐỘ ĐẶC HIỆU CỦA KIT CHẨN
4.4.1. Kết quả xác định nồng độ kháng thể bắt vi khuẩn thích hợp
Hình 4.29. Kết quả xác định nồng độ kháng thể bắt thích hợp
Bảng 4.8. Kết quả phát hiện vi khuẩn S. suis type 2 ở các nồng độ kháng thể bắt khác nhau
4.4.2. Kết quả xác định độ nhạy và độ đặc hiệu của KIT
Hình 4.30. Kết quả xác định độ nhạy của Kit
Hình 4.31. Kết quả xác định độ đặc hiệu của Kit Bảng 4.10. Đánh giá độ đặc hiệu của KIT
Bảng 4.11. Kết quả xác định độ đặc hiệu và độ nhạy của KIT