Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 ẢNH HƯỞNG CỦA β-GLUCAN LÊN ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG BỆNH DO Streptococcus agalactiae TRÊN CÁ RƠ PHI Oreochromis niloticus Bùi ị Bích Hằng1 TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm đánh giá ảnh hưởng β-glucan lên sức khỏe khả kháng bệnh Streptococcus agalactiae cá rô phi giống í nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với nghiệm thức bổ sung 0, 0,5, 2% β-glucan vào thức ăn tuần Cá thu máu (3 cá/bể) sau tuần thí nghiệm để phân tích tiêu huyết học hoạt tính lysozyme Kết thúc thí nghiệm, cá cảm nhiễm với S agalactiae Kết cho thấy mật độ tổng bạch cầu, lympho, bạch cầu đơn nhân, tiểu cầu hoạt tính lysozyme nghiệm thức bổ sung β-glucan tăng cao so với nghiệm thức đối chứng Nghiệm thức 1% β-glucan có mật độ tế bào máu hoạt tính lysozyme tăng cao Sau cảm nhiễm với S agalactiae, tỉ lệ chết cá nghiệm thức bổ sung β-glucan thấp có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với nghiệm thức đối chứng, nghiệm thức 1% β-glucan có tỉ lệ chết thấp (33%) Kết nghiên cứu cho thấy, việc bổ sung β-glucan vào thức ăn với liều lượng 1% 2% giúp tăng cường đáp ứng miễn dịch không đặc hiệu khả kháng bệnh cá rô phi S agalactiae Từ khóa: Cá rơ phi, β-glucan, hệ miễn dịch, lysozyme, S agalactiae I ĐẶT VẤN ĐỀ Cá rô phi (Oreochromis niloticus) đối tượng ni phổ biến ĐBSCL đặc tính dễ ni, có sức đề kháng cao, chịu đựng tốt biến đổi môi trường Tuy nhiên, việc nuôi cá rô phi mật độ cao đối mặt với nhiều trở ngại, dịch bệnh trở ngại khó kiểm sốt gây thiệt hại kinh tế lớn cho người nuôi (Nguyễn Viết Khuê ctv., 2009) Việc sử dụng thuốc kháng sinh phịng trị bệnh ni trồng thủy sản thường người nuôi áp dụng Tuy nhiên biện pháp chưa thật hiệu mà mang lại nhiều rủi ro gia tăng tính kháng thuốc vi khuẩn, tồn lưu kháng sinh thịt cá, ảnh hưởng sức khoẻ người tiêu dùng (Sapkota et al., 2008) Do vậy, việc tìm giải pháp thay thuốc kháng sinh phòng trị bệnh cho đối tượng thủy sản nhiều nhà khoa học quan tâm nghiên cứu Bổ sung chất điều biến miễn dịch vào thức ăn có hiệu tăng cường miễn dịch phòng bệnh đối tượng thủy sản (Bùi ị Bích Hằng ctv., 2019; 2020) Trong đó, β-glucan chất bổ trợ tiềm nghiên cứu cho thấy hiệu kích thích miễn dịch kích thích tăng trưởng nhiều đối tượng nuôi cá tuyết Đại Tây Dương (Skjermo et al., 2006), cá hồi vân (Sealey et al., 2008) cá chim vây ngắn (Nguyễn Văn Quang ctv., 2018) Các nghiên cứu trước cho thấy β-glucan có khả kích hoạt hoạt động thực bào, tăng cường hoạt tính lysozyme, bổ thể phịng bệnh cho động vật thủy sản (Petit and Wiegertjes, 2016; Amphan et al., 2019) Nghiên cứu thực nhằm tìm hiểu ảnh hưởng β-glucan lên đáp ứng miễn dịch khả kháng bệnh cá rô phi Streptococcus agalactie II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu Nguồn cá: Cá rô phi giống bệnh (khối lượng - g) mua trại cá giống Cần dưỡng tuần bể m3 Trại thực nghiệm Khoa ủy sản, Trường Đại học Cần để cá thích nghi với điều kiện thí nghiệm ức ăn thí nghiệm: ức ăn công nghiệp 30% đạm (Proconco) sử dụng cho thí nghiệm β-glucan (Sigma) cân theo tỉ lệ nghiệm thức, pha loãng với nước phun vào thức ăn, để Sau viên thức ăn áo ngồi với 0,5% dầu mực, để ráo, đóng gói trữ 4°C tuần thí nghiệm Chuẩn bị vi khuẩn: Vi khuẩn S agalactiae nuôi tăng sinh môi trường TSB, ly tâm 6000 vòng/phút 10 phút 4ºC Lấy phần kết tủa rửa lần với dung dịch NaCl 0,85% Mật độ vi khuẩn xác định máy so màu quang Bộ môn Bệnh học Thủy sản, Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ E-mail: btbhang@ctu.edu.vn 113 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 phổ bước sóng 610 nm (OD = 0,1) tương ứng với mật độ 108 CFU/mL Nguồn vi khuẩn sử dụng cho thí nghiệm cảm nhiễm 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 iết kế thí nghiệm bổ sung β-glucan í nghiệm bố trí hồn tồn ngẫu nhiên với nghiệm thức: NT1- 0,5% β-glucan, NT21% β-glucan, NT3- 2% β-glucan, NT4- đối chứng (không bổ sung β-glucan), nghiệm thức lặp lại lần Mỗi bể (500 L) bố trí 40 cá, cho ăn lần/ngày với phần 3% khối lượng thân í nghiệm bố trí hệ thống tuần hồn, có sục khí, kéo dài tuần Tiến hành thu mẫu máu cá/bể vào tuần thứ tuần thứ thí nghiệm để phân tích tiêu huyết học hoạt tính lysozyme Kết thúc thí nghiệm, cá cảm nhiễm với S.agalactiae 2.2.2 iết kế thí nghiệm cảm nhiễm í nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với nghiệm thức, bao gồm ba nghiệm thức cá ăn thức ăn bổ sung β-glucan cảm nhiễm với vi khuẩn, nghiệm thức đối chứng dương (cá ăn thức ăn không bổ sung β-glucan cảm nhiễm với vi khuẩn) nghiệm thức đối chứng âm (cá tiêm với dung dịch NaCl 0,85%) Mỗi nghiệm thức lặp lại lần í nghiệm bố trí bể thể tích 75 lít, bể chứa 10 cá Mỗi cá tiêm 0,1 mL vi khuẩn có mật độ 105 CFU/mL í nghiệm bố trí điều kiện có sục khí, cá cho ăn theo nhu cầu, khơng thay nước suốt q trình thí nghiệm Ghi nhận dấu hiệu bệnh, tỉ lệ chết cá 14 ngày cảm nhiễm Cá lờ đờ, chết thu cá/nghiệm thức để tái định danh vi khuẩn Tỉ lệ chết (%) = (Tổng số cá chết/Tổng số cá thí nghiệm) × 100 2.2.3 Phương pháp phân tích Định lượng hồng cầu: Được thực theo phương pháp Natt and Herrick (1952), mật độ hồng cầu xác định buồng đếm Neubauer tính theo cơng thức: HC = C × 10 × × 200 (tế bào/mm3) (C: Tổng số hồng cầu vùng đếm) Định lượng tổng bạch cầu loại bạch cầu: Được thực theo phương pháp Hrubec cộng tác viên (2000) Trải mẫu máu cách nhỏ giọt máu lên lame, dùng lamelle chạm vào giọt máu đẩy lamelle trượt lame Mẫu máu khô cố định methanol, để khô nhuộm Wright & Giemsa Tổng bạch cầu tính theo công thức: 114 TBC (tế bào/mm3) = (Số BC 1.500 tế bào × R)/ Số HC 1.500 tế bào (TBC: mật độ tổng bạch cầu, BC: bạch cầu, R: mật độ hồng cầu, HC: hồng cầu) Định lượng loại bạch cầu tổng số 200 tế bào bạch cầu Tính mật độ loại bạch cầu theo công thức: Mật độ loại BC (tế bào/mm3) = (Số lượng loại BC × TBC)/200 Xác định hoạt tính lysozyme: ực theo phương pháp Ellis (1990) Dựng đường chuẩn lysozyme với nồng độ 0, 2, 4, 16 μg/mL kết OD đo máy so màu quang phổ Cho 10 μL dung dịch từ nồng độ chuẩn huyết cá vào đĩa 96 giếng, tiếp tục cho 200 μL/giếng dịch huyền phù Micrococcus luteus (Sigma) Hỗn hợp ủ nhiệt độ 27oC đo bước sóng 495 nm Hoạt tính lysozyme tính dựa vào đường chuẩn lysozyme theo công thức y = ax + b với y nồng độ x giá trị OD 2.2.4 Xử lý số liệu Số liệu tính tốn xử lý phần mềm Excel Xử lý thống kê phương sai nhân tố ANOVA so sánh khác biệt có ý nghĩa phép thử Ducan mức ý nghĩa 5% với phần mềm SPSS 16.0 2.3 ời gian địa điểm nghiên cứu Nghiên cứu thực từ tháng 10 năm 2020 đến tháng năm 2021 Khoa ủy sản, Trường Đại học Cần III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ảnh hưởng β-glucan lên số tiêu huyết học cá rô phi Mật độ hồng cầu: Mật độ hồng cầu cá dao động từ 2,26 - 2,61 × 106 tế bào/mm3 hai thời điểm lấy mẫu (Bảng 1) Các nghiệm thức bổ sung β-glucan có mật độ hồng cầu cao so với đối chứng, nhiên khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Mật độ tổng bạch cầu: Sau tuần thí nghiệm, mật độ bạch cầu nghiệm thức bổ sung β-glucan cao đối chứng (Bảng 1) Tuy nhiên có NT2 có mật độ tổng bạch cầu (25,14 × 104 tế bào/mm3) cao khác biệt thống kê so với đối chứng (20,29 × 104 tế bào/mm3) (p < 0,05) Sau tuần, mật độ tổng bạch cầu nghiệm thức bổ sung β-glucan tiếp tục tăng cao so với nghiệm thức đối chứng Trong đó, mật độ bạch cầu NT2 (28,22 × 104 tế bào/mm3) NT3 (27,19 × 104 tế bào/mm3) cao khác biệt thống kê so với hai nghiệm thức cịn lại (p < 0,05) Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 Bảng Mật độ hồng cầu bạch cầu cá rô phi sau bổ sung β-glucan Hồng cầu (× 106 tế bào/mm3) Bạch cầu (× 104 tế bào/mm3) tuần tuần tuần tuần NT 2,44 ± 0,21 2,47 ± 0,21 22,26 ± 2,19ab 23,01 ± 2,00a NT2 2,62 ± 0,15 2,66 ± 0,16 25,14 ± 2,43b 28,22 ± 1,42b NT3 2,49 ± 0,17 2,57 ± 0,17 23,18 ± 1,12ab 27,19 ± 1,89b a NT4 2,43 ± 0,31 2,26 ± 0,23 20,29 ± 1,52 21,33 ± 1,13a Ghi chú: Giá trị thể bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Các ký tự (a,b) giống cột thể khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Nghiệm thức Mật độ tế bào lympho: Sau tuần bổ sung β-glucan, mật độ tế bào lympho nghiệm thức không khác biệt nghiệm thức (p > 0,05) (Bảng 2) Sau tuần, mật độ tế bào lympho cá nghiệm thức bổ sung β-glucan tăng cao, NT2 có mật độ lympho cao (12,88 × 104 tế bào/mm3), nhiên khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức khác Bạch cầu đơn nhân: Sau tuần, nghiệm thức bổ sung β-glucan có mật độ bạch cầu đơn nhân cao đối chứng (Bảng 2) Mật độ bạch cầu đơn nhân NT2 (14,08 × 104 tế bào/mm3) tăng cao khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng (10,46 × 104 tế bào/mm3) (p < 0,05) Sau tuần, mật độ bạch cầu đơn nhân cá nghiệm thức bổ sung β-glucan cao có ý nghĩa thống kê so với đối chứng (p < 0,05) Trong đó, NT2 có mật độ bạch cầu đơn nhân cao (17,43 × 104 tế bào/mm3) khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức lại Bảng Mật độ lympho bạch cầu đơn nhân cá rô phi sau bổ sung β-glucan Lympho ( × 104 tế bào/mm3) Bạch cầu đơn nhân ( × 104 tế bào/mm3) tuần tuần tuần tuần NT 9,74 ± 1,32 10.81 ± 1,97 12,42 ± 2,02 ab 14,00 ± 2,66 b NT2 9,61 ± 0,43 12,88 ± 3,63 14,08 ± 1,48 b 17,43 ± 1,27 c ab NT3 9,60 ± 1,16 10,79 ± 1,23 12,87 ± 1,82 15,55 ± 1,32 b NT4 9,13 ± 0,47 9,45 ± 1,76 10,46 ± 1,79 a 10,79 ± 1,73a Ghi chú: Giá trị thể bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Các ký tự (a,b) giống cột thể khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Nghiệm thức Bạch cầu trung tính: Kết cho thấy có gia tăng bạch cầu trung tính nghiệm thức bổ sung β-glucan khác biệt có ý nghĩa thống kê so với đối chứng (Bảng 3) Sau tuần bổ sung β-glucan, mật độ bạch cầu trung tính tiếp tục tăng cao NT2 (5,61 × 103 tế bào/mm3) khác biệt thống kê so với nghiệm thức khác (ngoại trừ NT3) Tiểu cầu: Kết định lượng tiểu cầu sau tuần bổ sung β-glucan cho thấy mật độ tiểu cầu nghiệm thức bổ sung β-glucan tăng cao so với đối chứng, đặc biệt NT2 (2,8 × 103 tế bào/mm3) tăng cao nhất, khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Sau tuần, mật độ tiểu cầu có gia tăng nghiệm thức, NT (5,73 × 103 tế bào/mm3) NT (5,6 × 103 tế bào/mm3) có mật độ tiểu cầu cao khác biệt có ý nghĩa so với nghiệm thức lại (Bảng 3) Bảng Mật độ bạch cầu trung tính tiểu cầu cá rô phi sau bổ sung β-glucan Nghiệm thức Trung tính (× 103 tế bào/mm3) Tiểu cầu (× 103 tế bào/mm3) tuần tuần tuần tuần NT 3,16 ± 0,76 b 3,44 ± 0,6 a 2,66 ± 1,03 3,26 ± 0,84 a NT2 3,59 ± 1,36 b 5,61 ± 0,87 b 2,80 ± 1,77 5,73 ± 1,20 b b ab NT3 3,48 ± 1,43 4,18 ± 1,61 2,10 ± 1,60 5,60 ± 0,87 b a a NT4 2,07 ± 0,57 3,35 ± 1,38 1,50 ± 2,68 3,30 ± 1,06a Ghi chú: Giá trị thể bảng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn Các ký tự (a,b) giống cột thể khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 115 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 Kết thí nghiệm ghi nhận gia tăng loại tế bào máu cá rô phi sau bổ sung β-glucan vào thức ăn Các tiêu huyết học thường theo dõi để đánh giá sức khỏe tình trạng dinh dưỡng cá (Cnaani et al., 2004) Tế bào bạch cầu giữ vai trò quan trọng đáp ứng miễn dịch cá mầm bệnh (Smith et al., 2019) Các kết nghiên cứu ảnh hưởng β-glucan lên tiêu huyết học trước tương đồng với kết nghiên cứu Mật độ bạch cầu gia tăng bổ sung β-glucan vào thức ăn Rutilus frisii (Rufchaie and Hoseinifar, 2014) Aramli cộng tác viên (2015) bổ sung 0,3% β-glucan vào thức ăn cá tầm (Acipenser persicus) ghi nhận gia tăng mật độ tổng bạch cầu tế bào lympho máu cá Bạch cầu đơn nhân trung tính cá Lutjanus guttatus báo cáo tăng cao cá ăn thức ăn có 0,05 0,1% β-glucan (RioZaragoza et al., 2011) Tương tự, Do-Huu cộng tác viên (2018) thử nghiệm bổ sung β-glucan vào thức ăn cá chim vây vàng (Trachinotus ovatus) cho thấy cá tăng trưởng nhanh gia tăng số huyết học so với nhóm đối chứng 3.2 Ảnh hưởng β-glucan lên hoạt tính lysozyme Sau tuần thí nghiệm, hoạt tính lysozyme nghiệm thức bổ sung β-glucan tăng cao có ý nghĩa so với đối chứng (p < 0,05), NT2 có hoạt tính lysozyme tăng cao (Hình 1) Sau tuần, hoạt tính lysozyme tiếp tục tăng cao tất nghiệm thức, NT2 NT3 có hoạt tính lysozyme cao nhất, đạt 302 290 µg/mL, khác biệt có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức lại (p < 0,05) Kết thí nghiệm cho thấy, việc bổ sung β-glucan vào thức ăn kích hoạt hoạt tính lysozyme cá rơ phi cảm nhiễm với S agalactiae Tương đồng với kết thí nghiệm này, hoạt tính lysozyme bổ thể cá tầm (Acipenser persicus) ăn thức ăn có 0,3% β-glucan cao so với nhóm đối chứng (Aramli et al., 2015) Hình Hoạt tính lysozyme cá rơ phi sau tuần ăn thức ăn bổ sung β-glucan Ghi chú: Các ký tự (a, b, c) giống đợt thu mẫu thể khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 3.3 Ảnh hưởng β-glucan lên khả kháng bệnh cá rô phi Cá rô phi sau tiêm S agalactiae có xuất dấu hiệu bệnh lý bơi lội bất thường, lờ đờ, mắt cá lồi đục giác mạc, sưng xuất huyết nội tạng Hình Tỉ lệ chết cá rô phi sau 14 ngày cảm nhiễm với S agalactiae Ghi chú: Các ký tự a,b giống nghiệm thức thể khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 116 Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 Sau 14 ngày cảm nhiễm, ghi nhận tỉ lệ chết cá nghiệm thức dao động từ 33 - 73% (Hình 2) Trong NT2 NT3 có tỉ lệ chết thấp 33% 40%, thấp có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) so với NT1 (57%) đối chứng (73%) Kết tái định danh vi khuẩn cá cảm nhiễm cho thấy vi khuẩn gây bệnh S agalactiae Tương đồng với kết thí nghiệm chúng tơi, Sirimanapong cộng tác viên (2015) ghi nhận gia tăng đáp ứng miễn dịch khả kháng bệnh cá tra vi khuẩn Edwardsiella ictaluri bổ sung 0,1% 0,2% β-glucan vào thức ăn Tương tự, cá rô phi sử dụng β-glucan cho thấy gia tăng sức đề kháng khả kháng bệnh loài vi khuẩn Aeromonas hydrophila Flavobacterium columnare (Amphan et al., 2019) Trong thí nghiệm này, việc gia tăng mật độ bạch cầu hoạt tính lysozyme máu cá cho ăn thức ăn bổ sung β-glucan cho thấy tính đáp ứng miễn dịch cá cải thiện hoàn toàn phù hợp với kết giảm tỉ lệ chết cá cảm nhiễm với mầm bệnh IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 Kết luận Việc bổ sung β-glucan vào thức ăn cá rơ phi tuần kích thích gia tăng mật độ tổng bạch cầu, bạch cầu đơn nhân, bạch cầu trung tính hoạt tính lysozyme Sau cảm nhiễm với S agalactiae, tỉ lệ chết cá nghiệm thức bổ sung β-glucan thấp có ý nghĩa thống kê so với đối chứng Hai nghiệm thức bổ sung 1% 2% β-glucan cho kết kích hoạt tiêu miễn dịch tốt khả kháng bệnh cao cá rô phi 4.2 Đề nghị Từ kết trên, đề xuất: (i) tiếp tục nghiên cứu chế ảnh hưởng việc bổ sung β-glucan lên hệ miễn dịch cá rô phi thông qua số gene miễn dịch (ii) nghiên cứu bổ sung 1% β-glucan vào thức ăn cá rô phi điều kiện nuôi thực tế TÀI LIỆU THAM KHẢO Bùi ị Bích Hằng Nguyễn Hồng Vũ, 2019 Ảnh hưởng thức ăn có bổ sung chitosan lên số tiêu miễn dịch không đặc hiệu cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Cần ơ, 55 (5B): 33-41 Bùi ị Bích Hằng Nguyễn anh Phương, 2020 Ảnh hưởng chất chiết từ hoàn ngọc (Pseuderanthemum palatiferum (Wall.) Radlk) lên tăng trưởng đáp ứng miễn dịch cá tra (Pangasianodon hypophthalmus) Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Cần ơ, 56 (3B): 101-111 Nguyễn Viết Khuê, Trương ị Mỹ Hạnh, Đồng anh Hà, Nguyễn ị Hà, Phạm ành Đô, Bùi Ngọc anh, Nguyễn ị Nguyện, Nguyễn Hải Xuân, Phạm Giang Nguyễn ị u Hà, 2009 Xác định nguyên nhân gây chết hàng loạt cá rô phi nuôi thương phẩm số tỉnh miền Bắc Báo cáo khoa học Viện Nghiên cứu Nuôi trồng ủy sản I Nguyễn Văn Quang, Lương Cơng Trung, Huỳnh Hữu Hồng, Cao Văn Nguyện Huỳnh Minh Sang, 2018 Ảnh hưởng β-glucan bổ sung vào thức ăn lên tăng trưởng tỉ lệ sống cá chim vây ngắn (Trachinotus ovatus, Linnaeus 1758) giai đoạn giống Tạp chí Khoa học Công nghệ nhiệt đới, 17: 49-55 Amphan S., Unajak S., Printrakoon C., Areechon N., 2019 Feeding-regimen of β-glucan to enhance innate immunity and disease resistance of Nile tilapia, Oreochromis niloticus Linn., against Aeromonas hydrophila and Flavobacterium columnare Fish Shell sh Immunology, 87: 120-128 Aramli, M.S., Kamangar, B., Nazari, R.M., 2015. E ects of dietary ß-glucan on the growth and innate immune response of juvenile Persian sturgeon, Acipenser persicus Fish Shell sh Immunology, 47 (1): 606-610 Cnaani A., Tinman S., Avidar Y., Ron M., Hulata G., 2004 Comparative study of biochemical parameters in response to stress in O aureus, O mossambicus and two strains of O niloticus Aquaculture Research, 35: 1434-1440 Do-Huu, H., Lam H.S., Nguyen, C.V., 2018 E ciency of dietary ß-glucan supplementation on growth, body composition, feed, and nutrient utilization in juveniles of pompano sh (Trachinotus ovatus, Linnaeus, 1758) Israeli Journal of Aquaculture, 70: 1-13 Ellis, A.E., 1990 Lysozyme activity In: Stolen TC, Fletcher PD, Anderson BS, Roberson BS, Muiswinkel WB, editors Technique in Fish Immunology New York: SOS Publications: 101-103 Hrubec, T.C., J.L Cardinale and S.A Smith, 2000 Hematology and plasma chemistry reference intervals for cultured Tilapia (Oreochromis hybrid ) Vet Clin Pathology, 29: 7-12 117 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nơng nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 Natt, M P and C.A Herrick, 1952 A new blood diluent for counting erythrocytes and leukocytes of the chicken Poult Science, 31: 735-738 Petit J and Wiegertjes G.F., 2016 Long-lived e ects of administering β-glucans: Indications for trained immunity in sh Developmental and Comparative Immunology, 64: 93-102 Rio-Zaragoza, O.B., Fajer-Ávila, E.J and AlmazánRueda, P., 2011 In uence of β-glucan on innate immunity and resistance of Lutjanus guttatus to an experimental infection of dactylogyrid monogeneans Parasite Immunology, 33 (9): 483-494 Rufchaie, R and Hoseinifar, H.S., 2014 E ects of dietary yeast glucan on innate immune response, hematological parameters, intestinal microbiota and growth performance of white sh (Rutilus kutum) fry. Croatian Journal of Fisheries, 72 (4): 156-163 Sapkota, A.A.R., Kucharski, M., Burke, J., McKenzie, S., Walker, P., Lawrence, R., 2008 Aquaculture practices and potential human health risks: current knowledge and future priorities Environment International, 34 (8): 1215-1226 Sealey, W.M., Barrows, F.T., Hang, A., Johansen, K.A., Overturf, K., LaPatra, S.E., Hardy, R.W., 2008 Evaluation of the ability o arley genotypes containing di erent amount of β- glucan to alter growth and disease resistance of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) Animal Feed Science and Technology, 41: 115-128 Sirimanapong, W., ompson, K.D., Ooi, E.L., Bekaert, M., Collet, Taggart, J., Bron, J., Green, D., Shinn, A., Adams, A and Leaver, M., 2015 e e ects of feeding β-glucan to Pangasianodon hypophthalmus on immune gene expression and resistance to Edwardsiella ictaluri Fish Shell sh Immunology, 47 (1): 595-605 Skjermo J., Storseth T.R., Hansen K., Handa A., Oie G., 2006 Evaluation of beta-(1-3, 1-6)-glucans and high-M alginate used as immunostimulatory dietary supplement during rst feeding and weaning of Atlantic code (Gahus morhua L.) Aquaculture, 261: 1088-1101 Smith, N.C., Rise, M.L., & Christian, S.L., 2019 A Comparison of the Innate and Adaptive Immune Systems in Cartilaginous Fish, Ray-Finned Fish, and Lobe-Finned Fish. Frontiers in immunology, 10: 2292 E ect of β-glucan on immune response and resistance against Streptococcus agalatiae in tilapia (Oreochromis niloticus) Bui i Bich Hang Abstract is study aimed to evaluate the e ect of dietary β-glucan supplementation on immune response and the resistance against Streptococcus agalactiae in Tilapia e experiment was arranged in a completely randomized design with treatments: 0, 0,5%, 1%, 2% β-glucan for weeks Fish blood was sampled at the 2nd and 4th week of experiment to analyze haematological parameters and lysozyme activity At the end of experiment, sh were challenged with S agalactiae e results revealed that total of leukocytes, lymphocytes, monocytes, thrombocytes and lysozyme activity of β-glucan supplemented treatments were all increased signi cantly in comparison to the control treatment e treatment of 1% β-glucan showed the highest value of hematological parameters and lysozyme activity A er a challenge with S agalactiae, accumulated mortality of sh in β-glucan supplemented treatment was signi cantly lower than those in the control treatment, the treatment with 1% β-glucan had the lowest mortality rate (33%) ese results demonstrated that supplementation of 1% and 2% β-glucan in the diet could enhance non-speci c immune response and protect tilapia against S agalactiae Keywords: Tilapia, β-glucan, immune system, S agalactiae Ngày nhận bài: 01/10/2021 Ngày phản biện: 10/10/2021 118 Người phản biện: TS Nguyễn Ngày duyệt đăng: 29/10/2021 ị Ngọc Tĩnh Tạp chí Khoa học Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam - Số 10(131)/2021 ƯƠNG CÁ CHIM VÂY VÀNG Trachinotus blochii TRONG LỒNG VỚI MẬT ĐỘ KHÁC NHAU Ở XÃ HÒN TRE, HUYỆN KIÊN HẢI, TỈNH KIÊN GIANG Lý Văn Khánh1*, Đỗ Trung2, Cao Mỹ Án1, Lê Quốc Việt1, Trần Nguyễn Duy Khoa1 Trần Ngọc Hải1 TÓM TẮT Nghiên cứu ương cá chim vây vàng (Trachinotus blochii) lồng với mật độ khác thực từ tháng 07/2019 đến tháng 12/2019 xã Hòn Tre, huyện Kiên Hải, tỉnh Kiên Giang Nghiên cứu thực với nghiệm thức mật độ 200, 300, 400, 500 600 con/m3, nghiệm thức lặp lại lần Cá chim vây vàng giống có khối lượng ban đầu 1,88 g/con ương lồng tích m3 Cá cho ăn thức ăn viên (55% protein) Sau 30 ngày ương, khác biệt tăng trưởng cá nghiệm thức khơng có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tỷ lệ sống cá nghiệm thức 400 con/m3 (98,6%) cao khác biệt có ý nghĩa (p < 0,05) so với nghiệm thức 300, 500 600 con/m3 Ương cá chim vây vàng lồng cho kết tốt mật độ thả 400 con/m3 Từ khóa: Cá chim vây vàng, ương lồng, mật độ, tỷ lệ sống I ĐẶT VẤN ĐỀ II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Cá chim vây vàng (Trachinotus blochii) loài phân bố tương đối rộng biển nhiệt đới, tìm thấy tây Bình Dương nước thuộc khu vực Đông Nam Á như: Nhật Bản, Đài Loan, Indonesia, miền nam Trung Quốc (Juniyanto et al., 2008; Trần Ngọc Hải ctv., 2017) Việt Nam chúng tập trung nhiều Vịnh Bắc Bộ, Trung Bộ Nam Bộ Những năm gần đây, cá chim vây vàng trở thành đối tượng chọn ni nhiều có đặc tính ưu việt rộng muối, sống chủ yếu tầng tầng mặt, dễ ni, ăn tạp, phát triển với quy mô công nghiệp - nuôi lồng ao đất thủy vực nước lợ nước mặn, đem lại hiệu kinh tế cao, thị trường nước ưa chuộng (Ngô Vĩnh Hạnh, 2007) Trong ương nuôi, sinh trưởng tỷ lệ sống cá phụ thuộc vào nhiều yếu tố mơi trường nước, dinh dưỡng, mơ hình ni, mật độ mật độ yếu tố ảnh hưởng trực tiếp đến tốc độ sinh trưởng tỷ lệ sống, hệ số phân đàn cá Đặc biệt, chưa có nghiên cứu thức ương cá chim vây vàng lồng biển tỉnh Kiên Giang Chính vậy, “Nghiên cứu ương giống cá chim vây vàng (Trachinotus blochii) lồng với mật độ khác tỉnh Kiên Giang” thực nhằm tìm mật độ ương giống cá chim vây vàng lồng thích hợp vùng biển Kiên Giang nhằm đa dạng hóa đối tương ni, làm sở nhân rộng đáp ứng nhu cầu nuôi cá chim vây vàng lồng biển 2.1 Đối tượng nghiên cứu Cá chim vây vàng giống có khối lượng trung bình ban đầu 1,88 ± 0,26 g/con, sản xuất nhân tạo trại cá giống Nha Trang, Khánh Hòa 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm í nghiệm bố trí với nghiệm thức mật độ khác 200, 300, 400, 500 600 con/m3, nghiệm thức lặp lại lần Cá có khối lượng ban đầu 1,88 ± 0,26 g/con bố trí lồng lưới có tích m3 (1,5 × × 1,5 m), lồng đặt ngập nước 1,0 m ời gian ương tháng Cá cho ăn thức ăn công nghiệp dành cho cá biển dạng viên có hàm lượng đạm 55%, cho cá ăn lần/ngày (6 giờ, 10 giờ, 14 17 giờ), cá cho ăn thỏa mãn nhu cầu tất nghiệm thức Các yếu tố môi trường nước: Nhiệt độ pH đo tuần/lần (7 h 14 h) máy đo pH Độ mặn đo tuần/lần khúc xạ kế Độ đo tuần/lần đĩa sechi Oxy đo tuần/lần máy đo oxy Mẫu cá giống ban đầu cân khối lượng ngẫu nhiên 30 để tính chung cho tất nghiệm thức Kết thúc thí nghiệm mẫu cá cân khối lượng ngẫu nhiên 30 con/lồng đếm số lượng cá Khoa Thủy sản, Trường Đại học Cần Thơ Trung tâm Khuyến nông Kiên Giang, tỉnh Kiên Giang * Tác giả chính: E-mail: lvkhanh@ctu.edu.vn 119