Thiết kế quy trình sản xuất enzyme Protease từ Chủng Bacilus Licheniformis với công suất 200 tấnnăm

Thiết kế quy trình sản xuất enzyme Protease từ Chủng Bacilus Licheniformis với công suất ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Page 3 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN 2 DANH MỤC HÌNH ẢNH 6 DANH MỤC BẢNG 7 ĐẶT VẤN ĐỀ 8 CHƢƠNG 1 TỔNG QUAN 9 1 1 Giới thiệu enzyme.

ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC HÌNH ẢNH DANH MỤC BẢNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu enzyme protease 1.1.1 Protease 1.1.2 Phân loại 10 1.1.3 Cơ chế phản ứng protease 12 1.1.4 Ứng dụng enzyme protease 13 1.2 Các yếu tố ảnh hƣởng lên trình sinh tổng hợp protease 15 1.2.1 Ảnh hƣởng thành phần môi trƣờng dinh dƣỡng 15 1.2.2 Ảnh hƣởng yếu tố môi trƣờng lên khả sinh tổng hợp protease 17 1.3 Khái quát chủng Bacillus licheniformis 19 1.3.1 Đặc điểm phân bố 19 1.3.2 Đặc điểm hình thái 20 1.4 Ứng dụng 22 CHƢƠNG 2: LỰA CHỌN CÔNG NGHỆ 23 2.1 Lựa chọn phƣơng pháp nuôi cấy 23 2.1.1 Phƣơng pháp lên men bề mặt 23 2.1.2 Phƣơng pháp lên men bán rắn 24 2.1.3 Phƣơng pháp lên men chìm 25 2.1.4 Kết luận lựa chọn phƣơng pháp lên men 25 2.2 Phƣơng pháp lên men 26 Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 2.2.1 Lên men gián đoạn 26 2.2.2 Lên men liên tục 27 2.2.3 Kết luận lựa chọn phƣơng pháp nuôi cấy 29 CHƢƠNG 3: QUY TRÌNH SẢN XUẤT ENZYME PROTEASE 30 3.1 Sơ đồ sản xuất 303.2 Thuyết minh quy trình 32 3.2.1 Quy trình ni cấy chủng Bacillus licheniformis để thu nhận enzyme protease ……………………………………………………………………………32 3.2.2 Quy trình thu nhận enzyme protease 33 CHƢƠNG 4: CÂN BẰNG VẬT CHẤT 44 4.1 Quá trình sấy phun 45 4.2 Lọc 46 4.3 Ly tâm 46 4.4 Lên men 47 4.4.1 Thành phần môi trƣờng nuôi cấy 49 CHƢƠNG 5: TÍNH TỐN THIẾT BỊ 51 5.1 Thiết bị lên men 51 5.1.1 Thiết bị nhân giống cấp (Thiết bị lên men chính) 51 5.1.2 Thiết bị nhân giống cấp 52 5.1.3 Thiết bị nuôi cấy 52 5.2 Qúa trình ly tâm 56 5.3 Qúa trình lọc 59 5.4 Sấy 62 CHƢƠNG 6: TÍNH TỐN KINH TẾ 69 6.1 Vốn cố định 69 6.1.1 Chi phí nhà đất xây dựng 69 6.1.2 Chi phí thiết bị 70 Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 6.2 Chi phí sản xuất trực tiếp 71 6.2.1 Chi phí nhân cơng 71 6.2.2 Chi phí nguyên liệu 72 6.2.3 Chi phí điện nƣớc 72 6.3 Chi phí sản xuất gián tiếp 72 6.3.1 Chi phí bảo trì 72 6.3.2 Chi phí bảo hiểm: 73 6.3.3 Chi phí bên ngồi nhà máy: 73 6.4 Vốn đầu tƣ 74 6.5 Lãi doanh thu 74 6.6 Lợi nhuận dòng tiền 74 6.7 Gía trị 76 6.8 Tỷ suất nội (IRR) 77 CHƢƠNG 7: RỦI RO KINH TẾ 78 7.1 Rủi ro giá biến động 78 7.2 Rủi ro sản phẩm tồn kho 78 7.3 Tổn thất sản phẩm không đạt chất lƣợng 79 PHỤ LỤC 80 Thiết bị 80 Điện, nƣớc 83 Nguyên liệu 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 86 Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1: Phản ứng thủy phân liên kết peptide Hình 2: Cấu trúc khơng gian enzyme protease 10 Hình 3: Sơ đồ phân loại protease 11 Hình 4: Hình dạng Baccilus Licheniformis .20 Hình 5: Đƣờng cong sinh trƣởng hệ thống kín (Theo sách Prescott, Harley Klein) 27 Hình 6: Sơ đồ thu nhận enzyme protease từ chủng Baccilus licheniformis 31 Hình 7: Quy trình ni B lichenifomis để sinh tổng hợp protease 32 Hình 8: Sơ đồ dây chuyền công nghệ nuôi cấy vi sinh vật phƣơng pháp ni chìm 35 Hình 9: Quy trình tách lọc khác vật liệu khác 37 Hình 10: Hiệu loại bỏ cặn loại màng khác 38 Hình 11: Màng lọc UF KOCH – USA 39 Hình 12: Hệ thống sấy phun tổ hợp 42 Hình 13: Thiết bị ly tâm dạng đĩa 57 Hình 14: Ramzin 64 Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1: Thông số kỹ thuật Màng lọc UF KOCH _ PURON MP 40 Bảng 4.1: Hiệu suất thu hồi enzyme Protease qua giai đoạn trình lên men chủng Bacillus licheniformis 44 Bảng 4.2: Tổng thời gian làm việc công ty năm 44 Bảng 4.3: Tỷ lệ thành phần môi trƣờng lên men 49 Bảng 4.4: Khối lƣợng thành phần môi trƣờng cần dùng năm 50 Bảng 5.1: Thông số bể nuôi cấy 53 Bảng 5.2: Thông số kỹ thuật thiết bị ly tâm 58 Bảng 5.3: Thông số trình lọc 59 Bảng 5.4: Thông số thiết bị sấy phun LPG - 150 68 Bảng 6.1: Chi phí xây dựng 69 Bảng 6.2: Chi phí thiết bị 70 Bảng 6.3: Chi phí nhân cơng 71 Bảng 6.4: Chi phí nguyên liệu cho năm sản xuất 72 Bảng 6.5: Chi phí điện nƣớc cho năm ni cấy 72 Bảng 6.6: Thống kê chi phí đầu tƣ 75 Bảng 6.7: Thống kê lợi nhuận dự án 75 Bảng 6.8: Bảng tính giá trị dự án 77 Bảng 7.1: Rủi ro giá biến động 78 Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 ĐẶT VẤN ĐỀ Cùng với phát triển, tiến vƣợt bậc qua nhiều thời kỳ nghành Cơng nghệ sinh học đóng góp nhiều cho tiến xã hội nói chung nghành nghiên cứu nói riêng Và enzyme protease loại enzyme quen thuộc thị trƣờng chế phẩm enzyme nay, khơng có ý nghĩa cho trình sinh trƣởng phát triển sinh vật mà cịn góp phần quan trọng nghành cơng nghệ chế biến thực phẩm, y học, công nghệ gen bảo vệ môi trƣờng, … công cụ giúp phục vụ nâng cao đời sống ngƣời Enzyme thu nhận từ nhiều nguồn khác nhƣ thực vật, động vật, nhƣng việc thu nhận enzyme từ nguồn vi sinh vật đƣợc coi thuận lợi Sự đa dạng hình dạng nhiều loài vi sinh vật khác tỷ lệ thuận kéo theo đa dạng hình dạng nhiều loài enzyme khác Và chủng Bacillus licheniformis lồi vi khuẩn có khả sản sinh nhiều enzyme protease loại enzyme quan trọng thuộc hệ thống tiêu hóa, có khả thủy phân glucid, lipid, protid, … thành thành phần có lợi cho đƣờng tiêu hóa Chính ƣu điểm enzyme protease nhìn thấy đƣợc lợi từ chủng Bacillus licheniformis nhóm chúng em định thực đề tài “Thiết kế quy trình sản xuất enzyme protease từ chủng Bacilus Licheniformis với công suất 200 tấn/năm" Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu enzyme protease 1.1.1 Protease Protease enzyme thuộc nhóm hydrolase, xúc tác cho q trình thủy phân liên kết peptide (-CO – NH-) phân tử protein giải phóng acid amin, peptone ditripeptone [Hình 1] Ngồi ra, protease cịn có khả thủy phân liên kết este vận chuyển acid amin +H2O H2N-CH-CO-NH-CH-CO - ….- NH-CH-COOH R1 R2 RX H2N-CH-COOH + H2N-CH-CO…NH-CH-COOH R1 R2 RX Hình 1: Phản ứng thủy phân liên kết peptide Thƣờng protease thể tồn dạng khơng hoạt động (zymogen) trở thành hoạt động protease tƣơng ứng tác động cắt đứt hay số liên kết peptide phân tử giúp làm thay đổi cấu trúc phân tử có lợi cho hoạt động xúc tác, enzyme chuyển sang trạng thái hoạt động Cấu trúc bậc bốn phân tử protein ảnh hƣởng đến trình phân giải chất dƣới tác dụng enzyme protease Page ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Protease cần thiết cho sinh vật sống, đa dạng chức từ mức độ tế bào, quan đến thể nên đƣợc phân bố rộng rãi: vi sinh vật (vi khuẩn, virus, nấm), thực vật (đu đủ, dứa…) động vật (gan, dày bê…) Hình 2: Cấu trúc khơng gian enzyme protease 1.1.2 Phân loại Page 10 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Protease (peptidase) thuộc phân lớp lớp thứ (E.C.3.4) Aminopeptidase Exopeptidase (E.C.3.4.11-17) Carboxypeptidase Peptidase (Protease) (E.C.3.4) Serine proteinase Cystein proteinase Endopeptidase (E.C.3.4.21-99) Aspartic proteinase Metallo proteinase Hình 3: Sơ đồ phân loại protease Enzyme protease đƣợc phân theo cách khác nhau, nhiên hai đặc điểm để phân loại protease gồm có: Dựa vào vị trí tác dụng protease lên liên kết peptide phân tử protein, ngƣời ta chia protease thành hai nhóm:  Endopeptidase (proteinase): chủ yếu phân giải liên kết peptide nằm phân tử protein tạo thành đoạn peptide có trọng lƣợng phân tử nhỏ  Exopeptidase (polypeptidase): chủ yếu phân cắt peptide hai đầu mạch Dựa vào thành phần amino acid vùng pH tối ƣu protease, ngƣời ta chia protease nhóm: Page 11 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC Q TRÌNH SINH HỌC 2019  Protease acid: pepsin, renin, … hoạt động vùng pH acid  Protease kiềm: trypsin, chymotrypsin, … hoạt động vùng pH kiềm  Protease trung tính: papain, … hoạt động vùng pH trung tính 1.1.3 Cơ chế phản ứng protease Mặc dù trung tâm hoạt động protease vi sinh vật có khác nhƣng chúng xúc tác cho phản ứng thủy phân liên kết peptide theo chế chung nhƣ sau: E + S → ES → ES’+ P1 → E + P2 Trong đó: E: Enzyme; S: chất ;ES: Phức chất enzyme – chất ES’: Phức chất trung gian enzyme- chất acyl hóa Acyl enzyme) P1: sản phẩm chuỗi phản ứng (nhóm amin tự đƣợc tạo thành) P2: sản phẩm thứ hai chuỗi phản ứng (nhóm carboxyl tự đƣợc tạo thành) Giai đoạn 1: Acyl hóa Cơ chất kết hợp với enzyme tạo phức hợp trung gian ES Sau tạo thành phức hợp ES, carbon nhóm cacboxyl liên kết peptide dễ bị phân cắt bới serin trung tâm hoạt động, qua tạo thành chất trung gian tứ diện với trung tâm oxylanion cacbon cacbonyl làm nhớ lại trạng thái chuyển tiếp phản ứng, Trạng thái chuyển tiếp đƣợc làm bền bời tƣơng tác liên kết hydro đặc hiệu gốc túi trung tâm hoạt động trung tâm oxylanion chất  Trong subtillizin, liên kết hydro đƣợc tạo thành từ nitơ serin 195 khung serin 155 chuỗi bên  Trong chymotrypsin, liên kết hydro đƣợc tạo thành nitơ gốc serin nhân glyxin trung tâm hoạt động Page 12 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 LNTT = 102 000 000 000 – 67 402 623 682 = 34 597 376 318 VNĐ - Khấu hao: 10% vốn cố định VNĐ K= - Thuế thu nhập doanh nghiệp: 21% lợi nhuận trƣớc thuế = 21% x 34 597 376 318 = 265 449 027 VNĐ - Lợi nhuận sau thuế = Lợi nhuận trƣớc thuế - Thuế doanh nghiệp = 34 597 376 318 – 265 449 027 = 27 331 927 291 VNĐ - Dòng tiến (CF) = lợi nhuận sau thuế + khấu hao = 27 331 927 291 + 273 345 863 = 31 605 273 154 VNĐ - Lợi nhuận ròng = lợi nhuận sau thuế - thuế thu nhập doanh nghiệp = 27 331 927 291 – 265 449 027 = 20 066 478 264 VNĐ - Thời gian hoàn vốn = năm Vậy thời gian hoàn vốn dự án là: năm tháng Bảng 6.6: Thống kê chi phí đầu tƣ Danh mục Thành tiền VNĐ Vốn cố định 42 733 458 632 Vốn lƣu động 24 677 035 829 Chi phí trực tiếp 14 547 576 000 Chi phí gián tiếp 821 284 923 Tổng chi phí đầu tƣ 67 402 623 682 Lãi suất ngân hàng 7% Khấu hao 273 345 863 Bảng 6.7: Thống kê lợi nhuận dự án Page 75 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Lợi nhuận Thành tiền VNĐ Doanh thu (lợi nhuận) 102 000 000 000 Lợi nhuận trƣớc thuế 34 597 376 318 Thuế thu nhập doanh nghiệp (21%) 265 449 027 Lợi nhuận sau thuế 27 331 927 291 Lợi nhuận ròng 20 066 478 264 31 05 273 154 Dịng tiền (CF) 6.7 Gía trị NPV = Trong đó: CFO : Là tiền đầu tƣ ban đầu (vốn cố định) : tổng giá trị dòng tiền dự án : tuổi thọ dự án : hệ số chiết khấu Giả sử vòng đời 10 năm Page 76 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Bảng 6.8: Bảng tính giá trị dự án Năm thứ t (n) Hiện - Hệ số chiết khấu CFn chọn 7% 67 02 623 682 Giá trị -67 402 623 682 20 066 478 264 (1+7%)1 18 753 718 004 20 066 478 264 (1+7%)2 17 526 839 256 20 066 478 264 (1+7%)3 16 380 223 604 20 066 478 264 (1 + 7%)4 15 308 620 190 20 066 478 264 (1 + 7%)5 14 307 121 673 20 066 478 264 (1 + 7%)6 13 371 141 751 20 066 478 264 (1 + 7%)7 12 496 394 160 20 066 478 264 (1 + 7%)8 11 678 873 046 20 066 478 264 (1 + 7%)9 10 200 780 021 10 20 066 478 264 (1 + 7%)10 10 914 834 623 Để tránh sai số + r nên sử dụng excel tính NPV  NPV = 73 535 900 000 VNĐ > 0; ta chấp nhận dự án 6.8 Tỷ suất nội (IRR) - Tỷ suất hoàn vốn nội lãi suất chiết mà NPV dự án ∑ - phần mềm Exel tính IRR ta đƣợc IRR = 19% > 7% dự án khả thi Page 77 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 CHƢƠNG 7: RỦI RO KINH TẾ 7.1 Rủi ro giá biến động Bảng 7.1: Rủi ro giá biến động Giảm 15% Giảm 10% Tăng 10% Tăng 15% 340 000 289 000 306 000 374 000 391 000 Doanh thu 102 000 86 700 000 91 800 000 112 200 117 300 VNĐ 000 000 000 000 000 000 000 Thuế 265 449 175 631 538 904 991 993 355 266 VNĐ 027 673 124 930 381 1,35 1,55 1,49 1,22 1,18 20 066 478 17 056 506 18 059 830 22 073 126 23 076 450 264 524 438 090 004 Dòng tiền ( 31 605 273 26 864 482 28 444 745 34 765 800 36 346 064 CF) 154 181 839 469 127 73 535 900 62 505 515 66 182 310 80 889 490 84 566 285 000 000 000 000 000 19 16,15 17,1 20,9 21,85 Giá bán VNĐ Thời gian hồn vốn Lợi nhuận rịng VNĐ NPV IRR (%) - Nhận xét: Khi giá trị trƣờng biến động, giá trị IRR thay đổi nhƣng lớn 7% Dự án trƣờng hợp thực đƣợc 7.2 Rủi ro sản phẩm tồn kho - Gỉa sử năm lƣợng sản phẩm tồn kho 1% - Lƣợng sản phẩm tồn kho năm là: Page 78 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 300 x 1% = sản phẩm/năm - Chi phí tổn thất sản phẩm tồn kho là: 3000 x 340 000 = 020 000 000 VNĐ 7.3 Tổn thất sản phẩm không đạt chất lƣợng Giả sử tỷ lệ sản phẩm không đạt chất lƣợng 0,1% - Lƣợng sản phẩm không đạt chất lƣợng là: 300 x 0,1 % = 0,3 = 300 kg - Chi phí tổn thất cho sản phẩm không đạt chất lƣợng là: 300 x 340 000 = 020 000 000 VNĐ  Tổng tổn thất chi phí sản phẩm biến động tồn kho năm 020 000 000 + 102 000 000 = 122 000 000 VNĐ Page 79 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 PHỤ LỤC Thiết bị STT Tên Giá đất Hình ảnh Tài liệu tham khảo https://chothuexuong.com/banggia-thue-dat-va-nha-xuong-taicac-khu-cong-nghiep-tai-tinhbinh-duong Thiết bị lên men http://www.fermenter.com.vn/san -pham/he-thong-len-men-tu-dongquy-mo-san-xuat-1780.html Máy phối trộn 50m3 NINGBO https://www.alibaba.com/productdetail/Stainless-steel-electricsteam-heatingdouble_1716281529.html Thanh trùng 20 m3 DTS https://www.alibaba.com/productdetail/Rotary-retort-autoclavesterilization-machinefor_60400199346.html Page 80 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC Q TRÌNH SINH HỌC 2019 Bình nhân giống https://www.alibaba.com/product- cấp JINGXIN detail/5-Liters-Clear-GlassBottle_1317643257.html Tank 200m3 https://www.alibaba.com/product- DEYEE DY008 detail/High-Quality-fermentationtank_582331128.html Máy chứa dịch đƣờng https://vietnamese.alibaba.com/pr oduct-detail/vertical-horizontalstainless-steel-beer-wine-watermilk-storage-tank60443105350.html Thiết bị lọc màng WENTONG https://www.alibaba.com/product- WTUF detail/UF-Equipment-membranefiltration-hollowfiber_60355715680.html Page 81 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Thiết bị ly tâm DHC https://www.alibaba.com/productdetail/DHC500-Series-DiscStackCentrifuge_60320895680.html 10 Máy sấy LPG 150 https://visong.vn/may-say-phun/ 11 Đóng gói http://www.vinacomm.vn/May- KSFYC60F dong-goi-bot-KSFYC60Fp41748.vnc Page 82 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Điện, nƣớc STT Tên Gía Điện http://pcbinhduong.evnspc.vn/Portals/0/Hinhbaiviet/ Nam_2017/Thang_12/4495_QD%20quy%20dinh% 20ve%20gia%20dien.pdf Nƣớc http://baobinhphuoc.com.vn/Content/se-tinh-lai-gianuoc-trong-cac-khu-cong-nghiep-32752 Nguyên liệu STT Tên Bột gạo Hình ảnh Tài liệu tham khảo http://www.camgaonguyenc hatsaigon.com/gia-cam-gaobao-nhieu.html Cao thịt http://www.sivico.vn/vn/pro duct-36539-43156101979/peptone-fromcasein,-cao-thit,-cao-nammen.htm NaCl https://vietnamese.alibaba.co m/product-detail/shuirunhigh-purity-industrial-saltprices-in-usa-nacl-99 Page 83 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 60675170074.html Lactose https://thichtapgym.net/lacto se-la-gi-bi-dau-bung-khiuong-whey-hay-mass-phailam-nao/ Giống https://sites.google.com/site/ Bacillus menvisinhthuysangiasucgiac lichenifor am/mendondong/men- mis bacillus-licheniformis Nƣớc http://soha.vn/ky-tich-locnuoc-bang-nang-luong-mattroi-giup-cho-hang-trieudan20170206151336961.htm Page 84 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 Page 85 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Giáo trình “Nhập mơn cơng nghệ sinh học” Thầy Nguyễn Hoàng Lộc, NXB Đại học Huế, năm 2007 [2] Đặng Thị Thu cộng sự, Công nghệ Enzyme ( 2012), Nhà xuất Khoa học kĩ thuật Hà Nội [ ] Nguyễn Đức Lƣợng (2002), Công nghệ vi sinh, tập 2: Vi sinh vật học công nghệ, Nxb ĐH Quốc gia Tp Hồ Chí Minh, tr 216-220, 266-268 [ ]Trần Ngọc Hùng (2010), Nghiên cứu tạo chế phẩm protease từ Bacillus subtilis để sử dụng chế biến thức ăn gia cầm, Luận văn tiến sĩ, Trƣờng ĐH Khoa học Tự nhiên, tr 36 – 42 [5] Nguyễn Đức Lƣợng (2004), Công nghệ enzyme, Nxb ĐH Quốc gia Tp Hồ Chí Minh, tr 304-306, 308-317 [6] Nguyễn Thị Trần Thụy (2009), Nghiên cứu tuyển chọn chủng vi khuẩn Bacillus phân lập từ đất vườn sinh protease kiềm, Luận văn Thạc sĩ Khoa Học, Trƣờng Đại học Sƣ phạm TP Hồ Chí Minh, tr 61 – 65 [ ] Bula J.A, Costilow R, Sapple E.S.1978, “Biology of Bacillus popillae, Adv Appl, Microbiol, 23, pp 1-18 [ ] Dƣơng Thị Thanh Diễm (2010), Nghiên cứu điều kiện nuôi cấy Bacillus bước đầu ứng dụng xử lí nước ni cá tra, Luận văn tiến sĩ sinh học, ĐH Khoa học Tự nhiên, tr – [ ] Lê Ngọc Tú, La Văn Chứ, Phạm Thị Trân Châu, Nguyễn Lân Dũng (1989), Enzyme vi sinh vật, tập 2, Nxb Thanh niên [ ] Lƣu Thị Liên , Ứng dụng enzyme protease sản xuất bia, Luận văn – Đồ án Khoa Học, trang Page 86 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 [ ] Dong Ho Ahn, Hoon Kim, Back My (1993), “ Cleavage of Bacillus subtilis endo-α- gluconane by B megaferian, Biotechnology letters GBR, 15(2), pp 127-132 [12] GS TSKH Nguyễn Bin, “ Các q trình thiết bị cơng nghệ hóa chất thực phẩm”, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội [13] Hà Thị Thanh Nga cộng sự, 30/8/2017, đƣợc đăng Tạp chí Khoa học Đại học Văn Hiến, “ Effects of spray – drying on carotenoid, phenolic content and DPPH of carrot powder and application in food grades” [14] Brar, S K., Verma, M., Tyagi, R D., Valéro, J R., & Surampalli, R Y (2006) Efficient centrifugal recovery of Bacillus thuringiensis biopesticides from fermented wastewater and wastewater sludge Water research, 40(6), 1310-1320 [15] Paul W Todd,Roger G Harrison, (2003), Bioseparation science and enginneering, Oxford University Press New York, 406,188-189 [16] Soni, S K Gupta, J K (2003), A solid state fermentation based bacterial α-amylase and fungal glucoamylase system and its suitability for the hydrolysis of wheat starch, Volume 39, Issue 2, 31 October 2003, Pages 185-192 [17] Akcan, N., & Uyar, F (2011) Production of extracellular alkaline protease from Bacillus subtilis RSKK96 with solid state fermentation EurAsian Journal of BioSciences [18] Manachini, P L., Fortina, M G., & Parini, C (1988) Thermostable alkaline protease produced by Bacillus thermoruber—a new species of Bacillus Applied microbiology and biotechnology, 28(4), 409-413 [19] Sellami-Kamoun, A., Haddar, A., Ali, N E H., Ghorbel-Frikha, B., Kanoun, S., & Nasri, M (2008) Stability of thermostable alkaline protease from Bacillus licheniformis RP1 in commercial solid laundry detergent formulations Microbiological Research, 163(3), 299-306 Page 87 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 [20] Thọ, N P., & Giang, D T H (2011) Nghiên cứu quy trình điều chê bột enzyme papain thơ từ nhựa đu đủ Tạp chí Khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ, 17, 158-166 [21] Huang, H., Ridgway, D., Gu, T., & Moo-Young, M (2004) Enhanced amylase production by Bacillus subtilis using a dual exponential feeding strategy Bioprocess and biosystems engineering, 27(1), 63-69 [22] Gimbun, J., Radiah, A D., & Chuah, T G (2004) Bioreactor design via spreadsheet––a study on the monosodium glutamate (MSG) process Journal of food engineering, 64(3), 277-283 [23] Pant, G., Prakash, A., Pavani, J V P., Bera, S., Deviram, G V N S., Kumar, A., & Prasuna, R G (2015) Production, optimization and partial purification of protease from Bacillus subtilis Journal of Taibah University for Science, 9(1), 50-55 [24] Ngạch Thị Xuân (2007) Công nghệ enzyme Trƣờng Đại học Bách Khoa Đà Nẵng [25] Salah Chenikher, 2010, Control of the specific growth rate of Bacillus subillis [26] Nguyễn Phú Thọ., & Giang, D T H (2011) Nghiên cứu quy trình điều chê bột enzyme papain thơ từ nhựa đu đủ Tạp chí Khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ, 17, 158-166 [27] Aikat, K., & Bhattacharyya, B C (2000) Protease extraction in solid state fermentation of wheat bran by a local strain of Rhizopus oryzae and growth studies by the soft gel technique Process Biochemistry, 35(9), 907-914 [28] Hanjing, H., Ridgway, D., Gu, T., & Moo-Young, M (2004) Enhanced amylase production by Bacillus subtilis using a dual exponential feeding strategy Bioprocess and biosystems engineering, 27(1), 63-69 Page 88 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 [29] El-Banna, N M., & Quddoumi, S S (2007) Effect of nitrogen source on the antimicrobial activity of the bacilli air flora Annals of microbiology, 57(4), 669-671 [30] Sổ tay q trình thiết bị cơng nghệ hóa chất tập 1, biên soạn TS Trấn Xoa, TS Nguyễn Trọng Khoảng, KS Hồ Lê Viên, NXB Khoa học kỹ thuật Hà Nội [31] Các trình thiết bị công nghệ sinh học, biên soạn PGS.TSKH Lê Văn Hoàng, NXB Đại học Bách Khoa & Đại học Đà Nẵng, năm 2007 [32] Bezawada, J., Yan, S., John, R P., Tyagi, R D., & Surampalli, R Y (2011) Recovery of Bacillus licheniformis alkaline protease from supernatant of fermented wastewater sludge using ultrafiltration and its characterization Biotechnology research international, 2011 Page 89 ... điểm enzyme protease nhìn thấy đƣợc lợi từ chủng Bacillus licheniformis nhóm chúng em định thực đề tài ? ?Thiết kế quy trình sản xuất enzyme protease từ chủng Bacilus Licheniformis với công suất 200. .. Năng suất: 200 / năm  Số mẻ sản xuất năm: /năm Với hiệu suất nhƣ để đạt suất enzyme 200 tấn/năm ta cần xây dựng quy trình sản xuất đạt công suất 778 533,f4 kg/năm ↔ 778,53 tấn/ năm (sau kết thúc... Mantodextrin Enzyme protease Hình 6: Sơ đồ thu nhận enzyme protease từ chủng Baccilus licheniformis Page 31 ĐỒ ÁN KỸ THUẬT CÁC QUÁ TRÌNH SINH HỌC 2019 3.2 Thuyết minh quy trình 3.2.1 Quy trình nuôi cấy chủng