SỬ DỤNG 17α – HYDROXY - 20β -DIHYDROPROGESTERON (17,20P) VÀ PROGESTERON (P) KÍCH THÍCH SINH SẢN CÁ CHÉP CYPRINUS CARPIO

TẠP CHÍ KHOA HỌC, Đại học Huế, Số 49, 2008 SỬ DỤNG 17α – HYDROXY - 20β -DIHYDROPROGESTERON (17,20P) VÀ PROGESTERON (P) KÍCH THÍCH SINH SẢN CÁ CHÉP CYPRINUS CARPIO Lê Văn Dân Trường Đại học Nông Lâm, Đại học Huế Nguyễn Tường Anh Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG - HCM TĨM TẮT Đã thử nghiệm kích thích cá chép Cyprinus carpio sinh sản lần tiêm 17α - hydroxy - 20β - dihydroprogesteron (17,20P) liều lượng 1; 2; mg/kg cá Progesteron (P) liều lượng 10; 12,5 15 mg/kg cá Kết thử nghiệm cho biết liều tối ưu 17,20P mg/kg cá liều tối ưu P 15 mg/kg cá Nghiên cứu thảo luận kết so sánh hiệu kích thích cá chép sinh sản 17,20P; P LRH-A3 (thuốc sử dụng địa phương) liều tối ưu I Đặt vấn đề Trong thực nghiệm in vitro 17α - hydroxy - 20β - dihydroprogesteron (17,20P) Progesteron (P) chứng minh steroid có hiệu gây rụng trứng cho nhiều lồi cá ni Trong điều kiện sản xuất 17,20P dùng cách hiệu kích thích sinh sản cá chép Cyprinus carpio (Jalabert cs., 1977; Nguyễn Dương Dũng, Nguyễn Tường Anh, 2003; Nguyễn Thị Yến Linh et al., 2006) Cũng đối tượng cá chép, Progesteron có hiệu tương tự (Popov & Budarin, 1976) Tuy nhiên, tất công bố ngồi nước cho steroid C21 nói chung, cụ thể 17,20P phát huy tác dụng cách đơn độc Phản ứng chín rụng trứng đầy đủ cá cái, ngồi 17,20P cần có thêm kích dục tố Đó dịch chiết não thùy cá chép, HCG hay số chất kích dục tố khác Nguyễn Tường Anh (2003) thử nghiệm kích thích cá chép sinh sản nhân tạo liều sơ với LRH – A3 (5 – mcg/kg + – mg Dom/kg) liều định với mg 17,20P/kg cho kết rụng trứng 90% Jalabert et al., (1977) kích thích sinh sản cá chép liều sơ não thùy cá chép 0,6mg/kg liều định với 2mg17,20P/kg cho kết 50 – 70% cá rụng trứng Mục đích nghiên cứu thử nghiệm loại steroid 17,20P P để kích thích sinh sản cá chép điều kiện sản xuất cách đơn độc không sử dụng kích dục tố 29 II Vật liệu phương pháp Thí nghiệm tiến hành trại cá Đại An Khê - Quảng Trị Cá bố mẹ dùng thí nghiệm cá chép Cyprinus carpio trực tiếp nuôi vỗ để tiến hành nghiên cứu chọn theo tiêu chí thành thục dựa vào ngoại hình bình thường với thao tác thăm trứng vuốt sẹ P Progesteron (Merck – Đức), dạng bột, pha dầu ăn tinh luyện 17,20P chế từ 17P (17α hydroxyprogesteron – Sigma) theo Norymberski & Woods (1955) phản ứng khử NaBH4 Hormon steroid 17,20P hòa tan phần dạng huyền phù cồn 95o Thể tích dung dịch tiêm cho kg cá ml LRH-A sản xuất Trung Quốc 17,20P P tiêm vào xoang thân, LRH-A tiêm vào cơ, tiêm lần cho cá cái, cá đực không tiêm Kết kích thích sinh sản đánh giá theo tiêu chí là: (1) đẻ róc – cá đẻ hết trứng; (2) rụng trứng - cá đẻ khơng róc cá rụng trứng không đẻ (3) cá không rụng trứng Các thông số khác tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở, suất cá bột đánh giá theo cách thông dụng sản xuất III Kết thảo luận 3.1 Thử nghiệm kích thích sinh sản cá chép 17,20P 17,20P có hiệu gây chín rụng trứng cá hồi (Salmo gairdneri) với liều hiệu mg/kg (Jalabert et al., 1977), cá chép Cyprinus carpio mg/kg sau liều sơ 0,6 mg não thuỳ cá /kg (Jalabert et al., 1977); cá mè vinh Barbodes gonionotus 1mg/kg cá he vàng B altus 2,5 mg/kg sau liều sơ não thuỳ cá 0,5 mg/kg (Nguyễn Tường Anh, 2002) Trên sở đó, chúng tơi tiến hành thử nghiệm 17,20P kích thích sinh sản cá chép Cyprinus carpio với mức 1; 2; 3; mg 17,20P /kg Kết thể qua bảng Bảng 1: Kết thử nghiệm kích thích sinh sản cá chép 17,20P Cá thử nghiệm Lô Số cá Tổng trọng lượng cá ( kg) 5 10 2,0 2,4 2,0 2,2 4,0 Ghi chú: Liều (mg17,20P/kg) tiêm - Thời gian cho đẻ ngày 9/3/2007 - Nhiệt độ nước lúc cá đẻ 250C - Tỷ lệ đực: = 45/30 =1,5 30 Kết sinh sản % % % khơng đẻ róc rụng rụng trứng trứng 25 50 25 66,6 16,7 16,7 80 20 80 20 20 30 50 Kết bảng cho thấy, tiêm liều với mức 1; 2; 3; mg 17,20 P/kg kích thích sinh sản nhân tạo cá chép mức mg/kg cho kết cao, tỷ lệ đẻ róc đạt 80%, tỷ lệ rụng trứng 20% Ở mức mg/kg 17,20P % tỷ lệ đẻ róc đạt 25%, tỷ lệ rụng trứng 50% thấp nhất, điều giải thích đưa vào thể cá mg 17,20 P/kg thấp nên gây chín rụng tế bào gần thành thục Kết dẫn đến chín buồng trứng khơng hồn tồn (Nguyễn Tường Anh, 2003) So sánh với lơ đối chứng cho cá đẻ tự nhiên (không tiêm), thu kết đẻ róc đạt 20% rụng trứng đạt 30% Con số cho thấy phương pháp cho đẻ tự nhiên khơng sử dụng chất kích thích khơng đạt u cầu sản xuất Tuy nhiên, nghiên cứu này, chúng tơi, kích thích sinh sản cá chép 17,20P lần tiêm cho kết cao, mức mg; mg 17,20 P/kg Kết có ý nghĩa quan trọng thực tiễn khoa học, làm tăng khả chín đồng loạt trứng cá chép tác dụng 17,20P, mặt khác giảm stress cho cá, giảm giá thành sản xuất, nâng cao hiệu kinh tế cho trại sản xuất giống cá Theo kết nghiên cứu gần chúng tôi, sử dụng 17,20P kích thích sinh sản cá trắm cỏ Ctenopharyngodon idellus cá trôi Ấn Độ Labeo Rohita cần phải tiêm liều khởi động cụ thể 13,3 mcgLRH-A3/kg cá (Lê Văn Dân, Nguyễn Tường Anh, Võ Văn Phú, 2007) Điều cho thấy cách sử dụng 17,20P để kích thích sinh sản lồi cá khác khác nhau, lồi cá có khả đẻ tự nhiên ao cần tiêm 17,20P Tuy nhiên, để có kết luận xác cần phải nghiên cứu nhiều loài cá, đặc biệt lồi cá địa 3.2 Thử nghiệm kích thích sinh sản cá chép Progresteron Progesteron coi chất hình thành nang trứng tác dụng kích dục tố gây chín nỗn bào Những cơng trình sử dụng Progesteron để kích thích sinh sản cá nghiên cứu từ lâu, trước hết thử nghiệm cá chạch Misgurnus fossilis (Kirshenblat, 1952), cá đối Crenimugil labrosus (Cassifour, Chambolle, 1975), cá chép (Popov & Budarin, 1976), cá trê phi Clairas gariepinus (Nguyễn Tường Anh, 1981) cá bống tượng Oxyeleotris marmoratus (Nguyễn Tường Anh, 1985) Với cách thức tiêm liều lượng thuốc khác tuỳ theo loài cá: cá chép tiêm dạng dung dịch dầu, tiêm xoang với liều hiệu qủa 7,5 - 16,25 mg P/kg; cá trê phi tiêm vào buồng trứng liều 15 – 25 mg P/kg; cá chạch tiêm vào với liều 25 mg/kg; cá bống tượng tiêm vào xoang với liều 40 mg P/kg; cá đối tiêm vào xoang với liều hiệu qủa 20 x ngày Dựa sở đó, liều Progesteron mà chúng tơi thăm dị cá chép 10; 12,5 15 mg P/kg tiêm lần thí nghiệm Kết bảng cho thấy, tiêm liều với mức 10, 12,5 15 mg P/kg cho tỷ lệ đẻ róc 25, 50 70% Tỷ lệ rụng trứng liều 15 mg/kg cao 100%, liều 10 mg; 12,5 mg/kg tỷ lệ rụng trứng 66,6% 75% Lô đối chứng cho cá đẻ tự nhiên bể đẻ có nước chảy, tỷ lệ rụng trứng đạt 40% 31 Bảng 2: Kết thử nghiệm kích thích sinh sản cá chép Progresteron Cá thử nghiệm Lô Số cá Tổng trọng lượng cá (kg) 12 10 10 3,6 3,0 2,2 4,0 Ghi chú: Liều (mg/kg) % đẻ róc 10,0 12,5 15,0 tiêm 25,0 50,0 70,0 20,0 Kết sinh sản % % rụng trứng không rụng trứng 41,6 33,4 25,0 25,0 30,0 20,0 60,0 - Thời gian cho đẻ 3/3/2007 - Nhiệt độ nước lúc cá đẻ 290C - Tỷ lệ đực: = 52/35 ≈ 3/2.So với lô đối chứng thực tế cách chuNn bị điều kiện cho cá đẻ gần giống với điều kiện tự nhiên cá đẻ, biến động hàm lượng hormon thời gian sinh sản cá đực phụ thuộc vào có hay khơng hành động đẻ trứng cá thả chung với chúng (Hukutuna M M., 1983) Hay nói cách khác diện steroid sinh dục thể cá có đủ để gây chín rụng trứng hay không? Do vậy, đẻ tự nhiên thường đem lại tỷ lệ rụng trứng thấp không ổn định phụ thuộc nhiều vào yếu tố bên thành thục đàn cá Kết thử nghiệm kích thích sinh sản cá chép lần tiêm thành cơng có ý nghĩa quan trọng thực tiễn sản xuất khoa học Một lần khẳng định vai trò steroid làm tăng khả chín thành thục trứng cá chép Mặt khác, P có nhiều ưu điểm dễ bảo quản, dễ sử dụng, giá thành thấp Tính đến thời điểm chi phí P để kích thích 1kg cá sinh sản ½ so với LRH-A Trung Quốc Cũng tương tự 17,20P sử dụng P để kích thích sinh sản cá trắm cá trơi Ấn Độ, cần phải có liều khởi động 3.3 So sánh kết kích thích sinh sản cá chép 17,20P; P LRH-A3 Dựa kết thí nghiệm thăm dị, sử dụng liều mg 17,20 P/kg (lô A), 15 mgP/kg (lô B) liều 20 mcg LRH-A3/kg (lô ĐC) cho cá chép Kết thể qua bảng Kết bảng cho thấy, tỷ lệ đẻ róc cá sử dụng LRH –A3 (chất kích thích sử dụng địa phương) cao nhất, tiếp đến 17,20P sau P Tuy nhiên, tỷ lệ thụ tinh tỷ lệ nở sử dụng 17,20P P cao nhiều sử dụng LRH-A3 (p