Nghiên cứu đánh giá khả năng kháng khuẩn của tinh dầu từ vỏ của cây ăn trái có múi họ Citrus khu vực Đồng bằng Sông Cửu Long.pdf

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TÔNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ• - GIẢNG VIÊN 2020 NGHIÊN cứu ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG KHÁNG KHUẨN CỦA TINH DẦU TỪ VỎ CỦA CÂY ĂN TRÁI CÓ MÚI HỌ CITRUS KHU vực ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG Tên đề tài: số hợp đồng: 2020.01.038 /HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: CN Nguyễn Thị Ngọc Quyên Đơn vị công tác: Viện Kỳ thuật Công nghệ cao NTT Thời gian thực hiện: 06 tháng (Từ tháng 01/2020 đến tháng 6/2020) TP Hồ Chí Minh, ngày 30 thảng 06 năm 2020 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2020 Tên đề tài NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ KHẢ NÀNG KHÁNG KHUẤN CỦA TINH DÀU TỪ VỎ CỦA CÂY ĂN TRÁI CĨ MÚI HỌ CITRUS KHU vực ĐỒNG BẢNG SƠNG cửu LONG số hợp đồng: 2020.01.038 HĐ-KHCN Chủ nhiệm đề tài: CN Nguyền Thị Ngọc Quyên Đơn vị công tác: Viện Kỳ Thuật Công nghệ cao NTT Thời gian thực hiện: 06 tháng (Từ tháng 01/2020 đến tháng 6/2020) Các thành viên phối hợp cộng tác: STT Họ tên Chuyên ngành Cơ quan công tác CN Nguyễn Thị Ngọc Quyên Công nghệ sinh học ĐH NTT KS Đào Tấn Phát Hóa học ĐH NTT KS Ngơ Thị Cẩm Quyên Hóa học ĐH NTT Ký tên MỤC LỤC DANH MỤC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIÉT TẤT iii DANH MỤC BẢNG BIỂU V DANH MỤC HÌNH ẢNH vi PHẦN 1: MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Đối tượng nghiên cún Phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học Ý nghĩa thực tiễn PHẦN 2: NỘI DUNG Chương 1: Tổng quan tài liệu trái họ Citrus 1.1 Giói thiện câu họ Citrus 1.2 Giới thiệu Bưởi 1.3 Giới thiệu Cam 1.4 Giói thiệu chanh 10 Chương 2: Tổng quan tinh dầu họ Citrus 13 2.1 Khái niệm tinh dầu 13 2.2 Tính chất vật lý thành phần hóa học tinh dầu 13 2.2.1 Tính chất vật lý 13 2.2.2 Tính chất hóa học 14 2.3 Tinh dầu họ Citrus 15 2.3.1 Thành phần hóa học tinh dầu vỏ Bưởi 18 2.3.2 Thành phần hóa học tinh dầu vỏ Chanh 18 2.3.3 Thành phần hóa học tinh dầu vỏ Cam 19 2.4 An toàn tinh dầu Citrus 20 2.5 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 21 2.6 Tình hình nghiên cứu nước 23 2.7 Các phương pháp trích ly 24 2.8 Giói thiệu sơ lược chủng vi sinh vật sử dụng đề tài ’ * 25 Chương 3: Vật liệu phương pháp nghiên cứu 28 3.1 Nội dung nghiên cứu 28 3.2 Thòi gian địa điểm 28 3.3 Vật liệu 28 3.4 Phương pháp bố trí thí nghiệm 32 3.4.1 Trích ly tinh dầu phân tích thành phần hóa học tinh dầu.32 3.4.1.1 Phương pháp chưng cất lôi nước 32 3.4.I.2 Phương pháp sắc kí khí ghép phối phổ GC-MS 34 3.4.2 Xác định tiềm kháng khuẩn loại tinh dầu 35 3.4.2.1 Các chủng vi khuẩn sử dụng nghiên cứu 35 3.4.2.2 Phương pháp khuếch tán đĩa thạch 35 3.4.3 Đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu 37 3.4.3.1 Phương pháp bắt gốc tự 2,2-diphenyl-l-picrylhydrazyl (DPPH) 37 3.4.3.2 Phương pháp bắt gốc tự 2,2’-azino-bis (3ethylbenzothiazoline-6-sulphonic axit) (ABTS*) 39 Chương 4: Ket biện luận 41 4.1 Phân tích thành phần hóa học phương pháp sắc kí khí ghép phối phổ GC-MS 41 4.2 Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn loại tinh dầu phương pháp khuếch tán đĩa thạch 53 4.3 Đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu phương pháp 64 PHẦN 3: KÉT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 Kết luận 69 ii Kiến nghị 70 TÀI LIỆU THAM KHẢO 71 Phụ lục 77 iii DANH MỤC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tên tiếng anh GRAS Generally Recognized As Safe WAT White adipose tissue ABTS 2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic axit) DPPH 2,2-diphenyl-1 -picrylhydrazyl ATP Adenosine Triphosphat ROS Reactive oxygen species RNS Reactive nitrogen species DNS 3,5-dinitrosalicylic GC-MS Gas Chromatography Mass spectometry MIC Minimum inhibition concentration MBC Minimum bactericidal concentration LSD Least Significant Difference LPS Lipopolysaccharide IV DANH MỤC BẢNG BIẾU Bảng 2.1: Danh mục hóa chất sử dụng 26 Bảng 2.2: Danh mục dụng cụ thỉ nghiêm 27 Bảng 2.3: Danh mục thiết bị thỉ nghiệm 28 Bảng 4.1: Thành phần hóa học tinh dâu Bưởi Năm Roi 38 Bảng 4.2: Thành phần hóa học tinh dâu Bưởi Da Xanh 39 Bảng 4.3: Thành phần hóa học tỉnh dầu Bưởi Thanh Kiều 40 Bảng 4.4: Thành phần hóa học tinh dầu Lơng Cơ Cị 41 Bảng 4.5: Thành phần hỏa học tỉnh dâu Chanh Không Hạt 42 Bảng 4.6: Thành phần hóa học tỉnh dâu Chanh Chúc 43 Bảng 4.7: Thành phần hóa học tinh dâu Chanh Hạt 44 Bảng 4.8: Thành phần tinh dầu vỏ Cam Sành 46 Bảng 4.9: Thành phần tinh dầu vỏ Cam Xoàn 47 Bảng 4.10: Thành phần tinh dâu vỏ Cam úc 47 Bảng 4.11: Ket đường kỉnh vòng khảng khuân 49 Bảng 4.12: Đánh giá mức độ khảng khuân loại tinh dầu 49 Bảng 4.13: Khả bắt gốc tự DPPH 59 Bảng 4.14: Khả bắt gốc tự ABTS 60 V DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 2.1: cấu trúc hóa học thành phần dề bay tinh dầu Citrus 16 Hình 2.2: cấu trúc hóa học thành phần khơng bay tinh dầu Citrus .16 Hình2.3: Hệ thống chiết tách tinh dầu chưng cất với nước có gia nhiệt 30 Hình 2.4: Quy trình chiết tách tinh dầu .30 Hình 2.5: Cơ sở phương pháp DPPH 35 Hình 4.1: Phổ GC-MS tinh dầu Bưởi Năm Roi 39 Hình 4.2: Phổ GC-MS tinh dầu Bưởi Da Xanh 40 Hình 4.3: Phổ GC-MS cùa tinh dầu Bưởi Thanh Kiều 41 Hình 4.4: Phổ GC-MS tinh dầu Bưởi Lơng cổ Cị 42 Hình 4.5: Phổ GC-MS cùa tinh dầu Chanh Không Hạt 43 Hình 4.6: Phổ GC-MS tinh dầu Chanh Chúc 44 Hình 4.7: Phổ GC-MS tinh dầu Chanh Hạt 45 Hình 4.8: Phổ GC-MS tinh dầu Cam Sành 46 Hình 4.9: Phổ GC-MS tinh dầu Cam Xoàn 47 Hình 4.10: Phổ GC-MS tinh dầu Cam úc 48 Hình 4.11: Vòng ức kháng khuẩn chủng E.Coli 8739 50 Hình 4.12: Vịng ức kháng khuẩn chủng E coli 8739 50 Hình 4.13: Vịng ức kháng khuẩn chủng s enterica 14028 .52 Hình 4.14: Vịng ức kháng khuẩn chủng B cereus 46 53 Hình 4.15: Vịng ức kháng khuẩn chủng B cereus 46 54 Hình 4.16: Vịng ức kháng khuẩn chủng S.aureus 6538 55 Hình 4.17: Vịng ức kháng khuẩn chủng S.aureus 6538 56 Hình 4.18: Vịng ức kháng khuẩn chủng S.aureus 6538 57 Hình 4.19: Khả bắt gốc tự DPPH cùa tinh dầu họ Citrus vitamin c 60 Hình 4.20: Khả bắt gốc tự ABTS tinh dầu họ Citrus vitamin c 61 vi vii TÓM TẮT KẾT QUẢ NGHIÊN cứu Cơng việc thực Ket đạt Trích ly thu tinh dầu phân tích Báo cáo hồn thiện kết nghiên thành phâng hóa học, cứu rõ ràng chi tiết cụ thể độ tin Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cậy, độ xác cao kháng oxi hóa loại tinh dầu họ Citrus khu vực đồng sông Cửu Long Sản phẩn đăng ký thuyết minh Sản phẩm đạt - báo tạp chí KH&CN NTT báo nước Thời gian đăng ký: từ ngày 01 / 01 / 2020 đến ngày 30 / 06 / 2020 Thòi gian nộp báo cáo: ngày 15 / / 2020 viii ... nhiều lình vực tinh dầu họ Citrus đặc biệt tinh dầu Bưởi, Cam, Chanh đề xuất thực đề tài: ? ?Nghiên cứu đánh giá khả kháng khu? ??n tinh dầu từ vỏ ăn trái có múi họ Citrus khu vực đồng sông Cửu Long... Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2020 Tên đề tài NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ KHẢ NÀNG KHÁNG KHU? ??N CỦA TINH DÀU TỪ VỎ CỦA CÂY ĂN TRÁI CĨ MÚI HỌ CITRUS KHU. .. xuất tinh dầu từ vỏ so loại Bưởi, Cam, Chanh đồng thời nghiên cứu đánh giá số hoạt tính sinh học như: hoạt tính kháng khu? ??n, kháng oxy hóa cùa tinh dầu từ vỏ số giống Bưởi, Cam, Chanh tiếng khu vực