tận thu hoa hồng từ nguồn thải ra của hoa hồng chưng nghiên cứu chiết tách anthoeyanin từ cánh hoa hồng

LỜI CÁM ƠN  Cho xin gửi lời biết ơn sâu sắc đến Vƣơng Ngọc Chính, cám ơn Cơ hết lịng bảo, truyền thụ cho kiến thức suốt khoảng thời gian thực tập trƣờng Đại học Bách Khoa, lúc thấy yêu nghề yêu ngƣời, say mê, nhiệt tình với nghiên cứu Cơ, lửa làm cho chúng khơng thể lùi bƣớc gặp khó khăn Với tất lịng ln cầu chúc Cơ thật nhiều sức khỏe Con cám ơn thật nhiều Ba Mẹ động viên, cổ vũ cho gặp khó khăn Em xin chân thành cảm ơn quý Thầy Cô Bộ môn Kỹ Thuật Hữu Cơ, Khoa Kỹ Thuật Hóa Học, trƣờng Đại Học Bách Khoa Thành Phố Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi giúp em hoàn thành luận văn Em xin chân thành cám ơn quý Thầy Cô Bộ môn Tổng Hợp Hữu Cơ trƣờng đại Học Tôn Đức Thắng tận tình truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm quý báu suốt thời gian học tập trƣờng Cuối em xin gửi lời cám ơn đến Anh, Chị học Cao học bạn trƣờng Đại Học Bách Khoa, trƣờng Đại Học Tôn Đức Thắng giúp đỡ, động viên chia sẻ với em suốt q trình thực luận văn i TĨM TẮT Mục đích luận văn nhằm tận thu hoa hồng từ nguồn thải hoa hồng chƣng, từ nghiên cứu chiết tách anthocyanin từ cánh hoa hồng, để tìm đƣợc điều kiện chiết anthocyanin tốt với hy vọng tạo tiền đề khai thác ứng dụng họat chất cách thích hợp tƣơng lai nhƣ ngành mỹ phẩm, thực phẩm, dƣợc phẩm… Trong trình khảo sát loại hoa hồng (đỏ, hồng, vàng, cam), ta thấy anthocyanin hoa hồng đỏ có chứa nhiều loại hoa cịn lại Q trình chiết tách anthocyanin hoa hồng đỏ đƣợc thực acid citric1.3% /ethanol 32% nhiệt độ 45oC, cao Sản phẩm phụ q trình chiết có giá trị cao nhƣ hợp chất flavonol, carotenoid… Bằng phƣơng pháp đo pH vi sai ta tính đƣợc hàm lƣợng anthocyanin tổng hoa hồng đỏ 1.909 g/ 100g hoa khơ Bằng cách đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa thơng qua phản ứng bao vây gốc tự DPPH đạt đƣợc kết sau: 24.8 ± 1.0 (µg/ml) ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC ĐỒ THỊ ix DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT x LỜI MỞ ĐẦU xi CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Đặc điểm 1.1.3 Phân bố sinh thái 1.1.5 Thành phần 1.1.6 Dƣợc tính 1.2 Anthocyanin 1.2.1 Giới thiệu anthocyanin 1.2.2 Các yếu tố ảnh hƣởng đến anthocyanin 1.2.3 Công dụng anthocyanin 10 1.3 1.4 Giới thiệu hoa hồng Favonol 10 1.3.1 Giới thiệu favonol 10 1.3.2 Tính chất flavanol 11 Carotenoid 11 1.4.1 Giới thiệu carotenoid 11 1.4.2 Cấu trúc hóa học 12 iii 1.4.3 1.6 Tính chất carotenoid 14 Các cơng trình nghiên cứu hợp chất hoa hồng 14 1.7 Nguyên tắc sở lý thuyết số phƣơng pháp xác định đánh giá dùng luận văn 15 1.7.1 Phƣơng pháp đo màu theo hệ CIE 15 1.7.2 Đo quang phổ hấp thu UV – vis 18 1.7.3 Phƣơng pháp pH vi sai 19 1.7.4 Phƣơng pháp DPPH 20 CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Nội dung nghiên cứu 23 2.2 Các phƣơng pháp nghiên cứu 23 2.2.1 Chuẩn bị nguyên liệu 23 2.2.2 Xác định độ ẩm 23 2.2.3 Xác định hàm lƣợng hoạt chất dịch chiết phƣơng pháp quang phổ hấp thu UV - Vis 24 2.2.4 2.3 Xác định hàm lƣợng anthocyanin dịch chiết từ cánh hoa hồng 24 Quy trình nghiên cứu 26 2.3.1 Khảo sát chế độ lƣu trữ nguyên liệu 26 2.3.2 Nhận danh nhóm họ chất theo phƣơng pháp phân tích sơ thành phần hóa thực vật (dùng phản ứng màu phối hợp với phổ Vis) 26 2.3.3 Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến quy trình chiết tách anthocyanin từ cánh hoa hồng 30 2.3.4 Xây dựng quy trình tách chiết anthocyanin từ cánh hoa hồng 31 2.3.5 Xác định khả kháng oxy hóa theo phƣơng pháp đánh bắt gốc tự thử nghiệm DPPH 34 CHƢƠNG KẾT QUẢ & BÀN LUẬN 37 3.1 Khảo sát chế độ lƣu trữ nguyên liệu 38 3.2 Nhận danh nhóm họ chất theo phƣơng pháp phân tích sơ thành phần hóa thực vật 40 iv 3.2.1 Nhận danh nhóm hợp chất phản ứng màu 40 3.2.2 Nhận danh nhóm họ chất hoa hồng thơng qua phổ Vis 41 3.3 Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến quy trình chiết anthocyanin cánh hoa hồng 46 3.3.1 Khảo sát ảnh hƣởng đồng thời nồng độ cồn nhiệt độ 46 3.3.2 Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ citric acid 47 3.3.3 Khảo sát ảnh hƣởng thời gian 48 3.4 Qui trình chiết tách anthocyanin - Xác định hàm lƣợng anthocyanin tổng thành phần phần trăm cao thu đƣợc 100g cánh hoa khô 49 3.5 Đánh giá khả kháng oxi hóa cao anthocyanin cao phụ thu từ qui trình chiết tách 53 3.5.1 Đánh giá khả kháng oxi hóa anthocyanin 53 3.5.2 Đánh giá khả kháng oxi hóa sản phẩm phụ trình chiết anthocyanin 55 KẾT LUẬN 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 PHỤ LỤC 65 v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Nhóm anthocyanin Bảng 3.1 Thông số đo màu  loại cánh hoa điều kiện: nhiệt độ phịng, có ánh sáng; nhiệt độ phịng, khơng có ánh sáng;ở 20oC, khơng có ánh sáng 38 Bảng 3.2 Kết nhận dạng nhóm hợp chất cánh hoa phản ứng màu 40 Bảng 3.3 Kết khảo sát biến đổi hàm lƣợng Anthocyanin theo đồng thời nồng độ cồn nhiệt độ 46 Bảng 3.4 Kết khảo sát biến đổi hàm lƣợng Anthocyanin theo nồng độ citric acid47 Bảng 3.5 Hàm lƣợng anthocyanin theo thời gian chiết 48 Bảng 3.6 Hàm lƣợng anthocyanin tổng 52 Bảng 3.7 Thành phần phần trăm cao thu đƣợc 52 Bảng 3.8 Kết kiểm tra DPPH CA/EtOH nồng độ 1mg/ml 53 Bảng 3.9 Kết kiểm tra DPPH mẫu CA/EtOH theo phƣơng pháp IC50 53 Bảng 3.10 Kết kiểm tra DPPH vitamin C theo phƣơng pháp IC50 54 Bảng 3.11 Giá trị IC50 anthocyanin chiết tách từ hoa hồng đỏ, Vitamine C 54 Bảng 3.12 Kết kiểm tra DPPH nồng độ 0.1mg/ml hoạt chất phụ 55 Bảng 3.13 Kết kiểm tra DPPH HCl/EtOH CA/EtOH nồng độ 1mg/ml 55 vi DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Hoa hồng Hình 1.2 Lá hoa hồng Hình 1.3 Thân hoa hồng Hình 1.4 Flavylium cation Hình 1.5 Cấu trúc hóa học loại anthocyanin phổ biến Hình 1.6 Các dạng cấu trúc anthocyanin môi trƣờng pH khác Hình 1.7 Màu sắc dịch chiết anthocyanin bắp cải tím thay đổi môi trƣờng pH khác Hình 1.8 Phổ hấp thu cực đại malvin-3-glucoside mơi trƣờng pH khác Hình 1.9 Cấu trúc Aglugon 10 Hình 1.10 Tetraterpenoid 12 Hình 1.11 Một số carotenoid thƣờng gặp 13 Hình 1.12 Không gian màu CEI-Lab 16 Hình 1.13 Sơ đồ máy quang phổ UV-VIS 18 Hình 1.14 : Phổ hấp thu anthocyanin (acylated pelargonidin-3-sophoroside-5glucoside) dung dịch đệm pH pH 4.5 19 Hình 1.15 DPPH 20 Hình 1.16 Phổ Vis DPPH trƣớc sau phản ứng với hoạt chất 21 Hình 2.1 Qui trình chiết tách để nhận danh nhóm hoạt chất phản ứng màu 28 Hình 2.2 Qui trình chiết tách để nhận biết nhóm hoạt chất thơng qua phổ UV-Vis 29 Hình 2.3 Qui trình dùng để khảo sát yếu tồ ảnh hƣởng đến chiết tách anthocyanin từ cánh hoa hồng đỏ 31 Hình 3.1 : Sơ đồ tổng hợp nhóm họ anthocyanin flavonoid hoa hồng theo đƣờng sinh tổng hợp 45 vii Hình 3.2 Sơ đồ chiết anthocyanin số nhóm hoạt chất phụ từ cánh hoa hồng sau khảo sát yếu tố ảnh hƣởng 50 viii DANH MỤC ĐỒ THỊ Đồ thị 3.1 So sánh mức độ hợp chất cánh hoa hồng vàng, đỏ, cam, hồng39 Đồ thị 3.2 Sự biến đổi ∆E theo thời gian hoa hồng 40 Đồ thị 3.3 Phổ Vis dịch chiết V1 hoa hồng đỏ 41 Đồ thị 3.4 Phổ Vis dịch chiết V2 hoa hồng đỏ 42 Đồ thị 3.5 Phổ Vis dịch chiết V3 hoa đỏ 43 Đồ thị 3.6 Phổ Vis dịch chiết V4 hoa hồng đỏ 43 Đồ thị 3.7 Phổ Vis dịch chiết V5 hoa hồng đỏ 44 Đồ thị 3.8 Hàm lƣợng anthocyanin theo đồng thời nồng độ cồn nhiệt độ 46 Đồ thị 3.9 Hàm lƣợng anthocyanin theo nồng độ acid citric 47 Đồ thị 3.10 Hàm lƣợng anthocyanin theo thời gian 48 Đồ thị 3.11 Phổ dịch chiết thu đƣợc qui trình chiết 51 Đồ thị3.12 Đƣờng chuẩn tính IC50 anthocyanin tách từ hoa hồng đỏ vitamine C.54 ix DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT EtOH : ethanol Et2O : diethyl ether PE : petro ether CA : citric acid DPPH: 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl x PHỤ LỤC Phụ lục 19: Kết Loại hoa Ngày Hoa hồng 10 đo màu hoa hồng điều kiện lạnh Lần đo L a b c h Lần 69.21 27.59 13.59 30.75 26.2 Lần 69.33 26.89 10.57 28.89 21.4 Lần 69.21 24.97 12.01 27.7 25.6 Lần 68.97 26.92 13.58 30.15 26.7 Lần 68.77 25.93 11.16 28.22 23.2 Lần 70.62 22.23 8.73 23.88 21.4 Lần 70.55 23.45 9.03 25.12 21 Lần 70.86 23.9 12.03 26.75 26.7 Lần 69.47 25.98 11.77 28.52 24.3 Lần 70.14 25.5 10.99 27.76 23.2 Lần 68.96 27.65 8.47 28.91 17 Lần 68.8 25.91 9.7 27.66 20.4 Lần 71.49 22.28 8.57 23.87 21 Lần 73.33 19.56 8.98 21.52 24.6 Lần 72.64 20.72 6.77 21.79 18 Lần 72.52 19.06 5.3 19.78 15.5 Lần 69.81 20.22 5.75 21.02 15.8 Lần 69.98 15.41 7.93 17.33 27.2 Lần 70.45 15.41 7.89 17.31 27.1 Lần 70.12 17.47 6.83 18.75 21.3 75 PHỤ LỤC Phụ lục 20: Kết Loại hoa Ngày Hoa vàng 10 đo màu hoa vàng điều kiện thƣờng Lần đo L a b c h Lần 83.2 -7.62 57.51 50.1 97.4 Lần 84.05 -9.16 51.8 52.6 100 Lần 82.78 -7.72 58.76 59.26 97.4 Lần 84.06 -8.25 53.7 54.33 98.7 Lần 85.22 -11.64 53.16 54.41 102.3 Lần 85.35 -10.83 49.85 50.01 102.2 Lần 85.08 -11.33 54.13 55.3 101.7 Lần 85.31 -10.97 48.82 50.03 102.6 Lần 80.12 -2.11 43.56 43.56 89.9 Lần 83.13 -1.89 45.67 39.2 87.4 Lần 85.13 -3.14 46.13 36.65 85.9 Lần 83.21 -3.24 41.21 40.89 88.9 Lần 71.67 1.11 43.29 43.3 88.6 Lần 72.97 0.36 44.2 44.2 89.6 Lần 71.39 0.65 39.74 39.74 89.1 Lần 72.05 0.4 40.31 40.31 89.5 Lần 66.5 1.88 40.39 40.43 87.4 Lần 65.43 2.58 39.38 39.46 86.3 Lần 66.42 0.71 36.92 36.92 89 Lần 66.52 1.15 37.78 37.79 88.3 76 PHỤ LỤC Phụ lục Kết Loại hoa Ngày Hoa vàng 10 đo màu hoa vàng điều kiện tối Lần đo L a b c h Lần 83.38 -9.2 56.52 57.26 99.2 Lần 84.03 -8.51 53.06 53.73 99 Lần 84.77 -10.96 50.33 51.5 102.2 Lần 84.37 -10.81 55.59 56.63 100.9 Lần 84.48 -11.88 55.8 57.05 102 Lần 83.8 -11.47 50.18 51.47 102.8 Lần 83.79 -10.56 56.01 56.99 100.6 Lần 83.79 -9.91 49.62 50.59 101.3 Lần 84.23 -10.28 48.16 49.24 102 Lần 78.54 -5.8 39.93 40.34 98.2 Lần 80.32 -6.37 43.95 44.4 98.2 Lần 82.86 -8.5 46.69 47.45 100.2 Lần 69.38 0.27 36.69 36.69 89.7 Lần 69.2 0.09 34.46 34.46 89.9 Lần 66.57 1.74 35.36 35.4 87.3 Lần 66.25 1.47 34.09 34.12 87.6 Lần 57.08 4.51 26.36 26.74 86.4 Lần 58.78 3.8 29.69 29.93 82.8 Lần 57.42 3.73 27.06 27.31 82.2 Lần 60.28 2.92 30.06 30.2 84.5 77 PHỤ LỤC Phụ lục 22: Kết Loại hoa Ngày Hoa vàng 10 đo màu hoa vàng điều kiện lạnh Lần đo L a b c h Lần 84.85 -12.35 50.78 52.26 103.6 Lần 84.9 -12.1 44.62 46.23 105.1 Lần 83.79 -12.33 42.08 43.84 106.3 Lần 84.25 -13.23 49.81 51.53 104.8 Lần 84.32 -11.93 53.93 55.23 102.4 Lần 84.89 -12.24 50 51.47 103.7 Lần 85.77 -14.15 53.32 55.16 104.8 Lần 85.57 -13.67 47.26 49.19 106 Lần 84.59 -10.2 54.46 55.4 100.5 Lần 84.75 -11.49 51.56 52.86 102.7 Lần 84.77 -10.93 48.33 49.55 102.7 Lần 85.04 -11.69 48.12 49.39 102.9 Lần 83.7 -9.85 53.54 54.43 100.4 Lần 84.43 -10.77 52.09 53.19 101.6 Lần 84.08 -9.72 49.55 50.49 101 Lần 84.42 -11.16 47.81 49.09 103 Lần 84.15 -9.87 49.12 49.12 99.67 Lần 83.12 -9.23 48.67 49.67 99.98 Lần 83.23 -8.98 49.45 48.75 100.12 Lần 83.49 -8.95 50.12 48.12 100.32 78 PHỤ LỤC Phụ lục 23: Độ ẩm thể tích dịch chiết giàu anthocyanin khảo sát ảnh hƣởng nồng độ cồn nhiệt độ STN Lần Lần o Ẩm, % CEtOH,% 32 64 96 Ẩm, % CEtOH,% 32 64 96 Phụ lục 24: Hàm STN Lần Lần CEtOH (%) 32 64 96 32 64 96 15 C 82.8 0.027 0.031 0.03 0.028 84.1 0.029 0.032 0.03 0.031 Nhiệt độ 30 C 45oC 60oC 81.4 82.68 81.7 V Athocyanin, L 0.031 0.032 0.032 0.032 0.032 0.031 0.031 0.032 0.031 0.032 0.032 0.03 83.3 83.3 84.1 V Athocyanin, L 0.031 0.03 0.029 0.032 0.032 0.033 0.032 0.031 0.029 0.032 0.032 0.029 o 75oC 83.9 0.029 0.029 0.028 0.025 84.1 0.023 0.029 0.027 0.027 lƣợng anthocyanin CA 1% /EtOH, toC = 15oC: pH =1.0 Amax A = 700nm 1.075 0.002 1.608 0.008 1.660 0.006 1.685 0.024 1.620 - 0.002 2.481 - 0.002 2.726 0.008 2.695 0.051 pH =4.5 Amax A = 700nm 0.026 0.062 0.009 0.066 0.008 0.093 0.023 0.033 - 0.002 0.070 0.002 0.109 0.013 0.151 0.039 Hàm lƣợng anthocyanin (%) 0.573 0.972 0.970 0.903 0.961 1.013 1.042 1.038 79 PHỤ LỤC Phụ lục 25 : Hàm STN Lần Lần CEtOH (%) 32 64 96 32 64 96 pH =1.0 Amax A = 700nm 1.693 0.002 1.546 -0.003 1.496 0.004 1.293 0.002 1.690 - 0.037 1.590 - 0.034 1.307 - 0.045 1.399 0.013 Phụ lục 26 : Hàm STN Lần Lần CEtOH (%) 32 64 96 32 64 96 lƣợng anthocyanin CA 1% /EtOH, toC = 30oC: pH =4.5 Amax A = 700nm 0.037 0.005 0.052 0.004 0.068 0.012 0.037 0.005 0.072 - 0.022 0.045 - 0.026 0.004 - 0.031 0.108 0.006 Hàm lƣợng anthocyanin (%) 0.731 0.900 0.834 0.731 0.703 1.705 1.014 0.725 lƣợng anthocyanin CA 1% /EtOH, toC = 45oC: pH =1.0 Amax A = 700nm 1.808 - 0.002 1.743 - 0.001 1.861 0.008 1.917 0.032 1.695 0.051 1.714 0.039 1.652 0.018 1.710 0.073 pH =4.5 Amax A = 700nm 0.054 0.002 0.063 - 0.001 0.087 0.009 0.122 0.026 0.105 0.028 0.161 0.045 0.141 0.026 0.193 0.059 Hàm lƣợng anthocyanin (%) 1.132 1.082 1.143 1.152 1.607 1.709 1.629 1.671 80 PHỤ LỤC lƣợng anthocyanin CA 1% /EtOH, toC = 60oC: Phụ lục 27: Hàm STN Lần Lần CEtOH (%) 32 64 96 32 64 96 pH =1.0 Amax A = 700nm 1.597 0.008 1.544 0.010 1.492 0.017 1.680 0.053 1.575 0.005 1.569 0.010 1.524 0.018 1.513 0.050 Phụ lục 28 : Hàm STN Lần Lần CEtOH (%) 32 64 96 32 64 96 Hàm lƣợng anthocyanin (%) 0.930 0.862 0.818 0.864 1.071 0.968 1.004 0.750 lƣợng anthocyanin CA 1% /EtOH, toC = 75oC: pH =1.0 Amax A = 700nm 1.573 0.024 1.743 - 0.001 1.492 0.017 1.680 0.053 1.411 0.007 1.731 0.047 1.385 0.028 1.649 0.069 Phụ lục 29: Độ pH =4.5 Amax A = 700nm 0.074 0.011 0.081 0.008 0.111 0.021 0.164 0.049 0.109 0.010 0.124 0.009 0.168 0.028 0.109 0.006 pH =4.5 Amax A = 700nm 0.113 0.024 0.132 0.023 0.163 0.034 0.222 0.061 0.105 0.002 0.203 0.060 0.166 0.030 0.238 0.061 Hàm lƣợng anthocyanin (%) 0.916 1.026 0.816 0.793 1.109 1.424 1.314 1.422 ẩm thể tích dịch chiết giàu anthocyanin khảo sát ảnh hƣởng nồng độ citric acid STN Ẩm, % Lần Lần 83.90 79.64 0.70 0.033 0.033 1.00 0.033 0.032 Cacid citric, % 1.30 0.034 0.031 1.70 0.034 0.032 2.00 0.033 0.034 81 PHỤ LỤC Phụ lục 30 : Hàm CHCl (%) 0.7 1.3 1.7 lƣợng anthocyanin CA/EtOH 32%, toC = 45oC: pH =1.0 STN Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần Lần pH =4.5 Amax A = 700nm Amax A = 700nm Hàm lƣợng anthocyanin(%) 1.498 1.392 1.900 1.895 2.199 2.096 1.981 1.890 1.689 1.475 0.017 0.007 0.028 0.007 0.020 0.022 0.023 0.020 0.028 0.009 0.024 0.032 0.035 0.031 0.038 0.035 0.029 0.049 0.033 0.030 0.001 0.001 0.009 0.006 0.011 0.009 0.006 0.007 0.007 0.003 0.974 0.933 1.233 1.245 1.378 1.326 1.239 1.221 1.047 1.022 Phụ lục 31 : %A trung bình 0.953 1.239 1.352 1.230 1.034 Hàm lƣợng anthocyanin CA 1.3% /EtOH 32%, toC = 45oC khảo sát ảnh hƣởng thời gian: STN Lần Lần CHCl (%) 0.70 1.00 1.30 1.70 2.00 0.70 1.00 1.30 1.70 2.00 pH =1.0 Amax 0.458 0.570 0.618 0.495 0.525 0.305 0.312 0.331 0.276 0.322 A = 700nm -0.001 0.013 0.003 -0.001 0.000 -0.009 -0.006 -0.006 -0.006 -0.009 pH =4.5 Amax A = 700nm 0.064 0.017 0.034 0.009 0.038 0.010 0.039 0.009 0.028 0.006 0.069 0.003 0.064 0.024 0.030 0.007 0.055 0.018 0.041 0.013 Hàm lƣợng anthocyanin(%) 0.161 0.215 0.243 0.217 0.166 0.164 0.212 0.235 0.212 0.172 82 PHỤ LỤC Phụ lục 32 : Hàm STN Ẩm (%) 81.41 80.70 lƣợng tổng anthocyanin pH =1.0 VA,ml 0.250 pH =4.5 Amax A = 700nm Amax A = 700nm Hàm lƣợng anthocyanin(%) 0.093 0.000 0.008 0.001 1.918 0.098 0.000 0.007 0.000 1.899 Phụ lục 33: Các mũi Flavonol %A trung bình 1.909 hấp thu số flavonol EtOH, λmax(logε) 3-methoxy flavone 320, 299(4.21), 246(4.25) 3,4'-dihydroxy flavone 361(4.39) 3,2'-dihydroxy flavone 353(4.21), 303(3.92), 244(4.28) 3,5,7-trihydroxyflavone(galangin) 360(4.07), 267.5(4.23) 3,7,3',4'-tetrahydroxyflavone 370(4.43), 315(4.22), 252.5(4.33) 3,5,7,2'-tetrahydroxyflavone 360(3.99), 262.5(4.14) amurensin 377(4.23), 270(4.28) nor-β-anhydroicaritin 365(4.32), 271(4.38) 4',5-di-O-methylamurensin 365(5.42), 265(4.42) 4'-O-methylkaempferol 367, 266 mumenin 367, 320, 260 3,5-di-O-methylmumenin 344, 310, 260 penduletin 341(4.36), 271(4.28), 212(4.52) pendulin 332(4.34), 272(4.36), 212(4.58) 4'-O-methylpenduletin 336(4.39), 272(4.34), 212(4.6) morin 380(4.15), 263(4.22) penta-O-methylmorin 325, 242 distemonanthin 390(4.33), 374(4.34), 83 PHỤ LỤC 312(3.94) 268(4.24), 240(4.4) quercetin 3-L- arabinoside 360(4.24), 260(4.32) isoquercitrin 360(4.32), 258(4.41) isorhamnetin 360, 306, 254 quercetin 4'-glucoside 366, 254 azalein 339(4.23), 251(4.32) xanthorhamnin 362(4.22), 258(4.33) 3,3'-di-O-methylquercetin 360(4.31), 268(4.24)256(4.31) 7,3'-di- O- methylquercetin 375(3.27), 255(4.37) 3,5,3'-tri-O-methylquercetin 343, 303, 265, 249 dactylin 340, 262, 252 3,7,3'-tri-O- methylquercetin 360(4.31), 268(4.24), 257(4.32) 5,7-dihydroxy-3-methoxy-3',4'methylenedioxyflavone 353(4.25), 269(4.23), 256(4.29), 7,3',4'-tri-O-methylquercetin 367, 303, 254 3,7,4'-tri-O-methylquercetin 338(3.88), 271(3.93), 254(3.93) 3,7,3',4'- tetra-O-methylquercetin 352(4.34), 269(4.29), 254(4.37) 5,7,3',4'-tetra-O-methylquercetin 360(4.31), 250(4.3) 3,5,7,3'-tetra-O-methylquercetin 345(4.34), 263(4.22), 251(4.32) 3,5,3',4''-tetra-O-methylquercetin 341, 266, 249 penta-O-methylquercetin 339, 264, 249 isokanugin 340(4.32), 263(4.21), 250(4.35) oxyayanin-A 349(3.49), 302(3.74), 258(4.06) myricetin 378(4.29), 255(4.21) hexa-O-methylmyricetin 332, 262 84 PHỤ LỤC 3,3',4',5,7-penta-O-methylmyricetin 345, 305, 265 gossypetin 386(4.15), 341, 278(4.23), 262(4.26) gossypetin-7-glucoside 388(4.2), 350, 278, 262 gossypetin-8-glucoside 380(4.15), 262(4.12) 5,8,3'-trimethoxy-3,7,4'-trimethoxyflavone 351, 272, 253 3,7,4'-trihydroxy-5,8,3'-trimethoxyflavone 371, 274, 256 wharingin 377(4.27), 273(4.27), 261(4.32) 5,7,8-trihydroxy-3-methoxy3',4'methylenedioxyflavone 325(4.23), 285(4.31), 231(4.34) ternatin 368(4.28), 273(4.29), 259(4.33) 5,8-dihydroxy-3,7,3',4'-tetramethoxyflavone 330, 280, 255 5-hydroxy-3,7,8,3',4'-pentamethoxyflavone 360(4.18), 272(4.33), 255(4.34) 7-hydroxy-5,8,3,3',4'-pentamethoxyflavone 351, 270, 251 hexa-O-methylgossypetin 351(4.34), 273(4.33), 252(4.34) meliternin 351(4.29), 273(4.26), 256(4.35) 3-hydroxy-5,7,8,3',4'-pentamethoxyflavone 370, 273, 254 quercetagetin 361(4.34), 272(4.15), 259(4.34) 5,4'-dihydroxy-3,6,7,3'-pentamethoxyflavone 365, 274, 258 6-hydroxy-5,7,3'-trimethoxy-3',4'methylenedioxyflavone 337(4.35), 272(4.07), 245(4.24) melisimplexin 336(4.29), 235(4.3) hexa-O-methylquercetagetin 335(4.42), 240(4.37) 3,5,6,7,8,3',4'-heptamethoxyflavone 342, 270, 254 85 PHỤ LỤC Phụ lục 34: Các mũi Anthocyanin Cyanidin (Cyd) Cyd Cyd-3-ara Cyd-3,5-diglu Cyd-3-gal Cyd-3-glu Cyd-3-rut Cyd-3-sam-5-glu Cyd-3-sam-5-glu+ sinapic+caffeic+malonic Cyd-3-sam-5-glu+ sinapic+ferulic Cyd-3-sam-5-glu+ sinapic+ferulic+malonic Cyd-3-sam-5-glu+ sinapic+pcoum+malonic Cyd-3-soph-5-glu Cyd-3-soph-5-glu+malonic Cyd-3-soph-5-glu+sinapic Cyd-3-soph-5-glu+di-sinapic Cyd-3-soph-5-glu+ferulic Cyd-3-soph-5-glu+di-ferulic Cyd-3-soph-5-glu+p-coumaric Cyd-3-soph-5-glu+di-pcoumaric Delphinidin (Dpd) hấp thu số anthocyanin đặc trƣng max, nm  0.1% HCl/EtOH 0.1% HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 0.1N HCl Methanolic HCl 0.1% HCl/ methanol 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH Dung dịch đệm pH 0.1N HCl 1% HCl/ methanol 10% EtOH, pH 1.5 Dung dịch đệm pH 0.9 1% HCl Dung dịch đệm pH 0.9 Dung dịch đệm pH 0.9 510.5 547 538 535 520 508.5 530 535 535 535 510 520 530 512 510 523 522 538 24600 34700 44400 44460 30175 35000 34300 44900 46200 46230 26900 25740 34300 18800 7000 28840 3600 21200 Dung dịch đệm pH 0.9 528 15100 Dung dịch đệm pH 0.9 538 20100 Dung dịch đệm pH 0.9 536 19000 Methanolic HCl Methanolic HCl Methanolic HCl Methanolic HCl Methanolic HCl Methanolic HCl Methanolic HCl Methanolic HCl 524 528 528 530 528 530 526 528 37150 32360 37150 38020 32360 34670 38020 32360 Dung môi 86 PHỤ LỤC Dpd Dpd-3-glu Malvidin (Mvd) Mvd Mvd-3,5-diglu Mvd-3-glu Mvd-3-glu+p-coum Pelargonidin (Pg) Pg 0.1% HCl/EtOH 1% HCl/ methanol 10% EtOH, pH 1.5 0.1% HCl/EtOH 0.1% HCl/EtOH 0.1% HCl/EtOH 0.1% HCl/EtOH 0.1N HCl 0.1% HCl/ methanol 0.1% HCl/ methanol 0.1N HCl Methanol, pH 1.0 10% ethanol, pH 1.5 0.1% HCl/ methanol 0.1% HCl/EtOH 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol Pg-3,5-diglu HCl/ methanol Pg-3-(dicaffeoyglu)-soph-5-glu Dung dịch đệm pH 0.8 Pg-3-glu 1% HCl/H2O Pg-3-rut-5-glu+p-coumaric Pg-3-soph-5-glu Pg-3-soph-5-glu+ferulic Pg-3-soph-5-glu caffeoyl derivatives Pg-3-soph-5-glu+p-coumaric 522.5 543 520 34700 29000 23700 520 557 519 545 520 546 538 520 535 520 536 37200 36200 10700 10300 37700 13900 29500 28000 36400 20200 36400 504.5 505 17800 18420 524 510 512 496 1% HCl 1% HCl/EtOH 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol Dung dịch đệm pH 0.8 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol Dung dịch đệm pH 0.8 513 516 496 19780 32360 28000 27300 36600 22390 31620 15600 508 504 17330 32080 511 498 497 39591 18000-20000 25370 506 506 30690 24140 507 498 29636 18000-20000 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 506 28720 87 PHỤ LỤC Pg-3-soph-5-glu+ p-coumaric+malonic Pg-3-soph-5-glu+ ferulic+malonic Peonidin (Pnd) Pnd Pnd-3-ara Pnd-3,5-diglu Pnd-3-gal Pnd-3-glu Petunidin (Ptd) Ptd-3,5-diglu Ptd-3-glu 0.1% HCl/ methanol 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol 0.025M KOH đệm chloride, pH 1.0 0.1% HCl/ methanol 508 508 34889 33010 508 508 39785 31090 508 39384 0.1% HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 0.1N HCl 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 15:85 0.1N HCl/EtOH 0.1% HCl/EtOH 10% EtOH, pH 1.5 511 532 532 532 520 532 532 531 536 512 37200 40800 46100 46070 36654 48400 48400 48340 11300 14100 0.1N HCl HCl/methanol 0.1% HCl/methanol 10% EtOH, pH 1.5 520 535 546 520 33040 23440 12900 18900 ara: arabinoside; gal: galactoside; glu: glucoside; rut: rutinoside; sam: sambubioside; soph: sophoroside 88 PHỤ LỤC Phụ lục 35: Các mũi Carotenoid Lutein Lycopene α-Carotene β-Carotene β-Carotene-5,6-epoxide β-Carotene-5,6-epoxide β-Carotene-5,6,5‟,6‟diepoxide β-Carotene-5,6,5‟,6‟diepoxide γ-Carotene δ-Carotene δ-Carotene Bixin Crocetin hấp thu số carotenoi đặc trƣng λmax, nm Dung môi Chloroform Ethanol Pertroleum ether Acetone Chloroform Ethanol Pertroleum ether Acetone Chloroform Ethanol Hexan, petroleum ether Acetone Chloroform Ethanol Hexane, petroleum ether Ethanol Ethanol 435 422 421 448 458 446 444 424 433 423 458 445 445 474 484 472 470 448 457 444 485 474 474 505 518 503 502 476 484 473 422 445 473 429 435 425 452 461 450 478 485 478 425 450 477 423 407 445 428 474 452 Ethanol 417 440 468 Ethanol 388 400 425 Acetone Chloroform Ethanol Hexane, petroleum ether Chloroform Petroleum ether Ethanol Hexane, petroleum ether Chloroform Ethanol Chloroform 439 446 440 461 475 460 491 509 489 437 462 494 440 431 377 470 456 399 503 489 425 378 400 425 433 429 413 470 457 435 502 484 462 89