Đề cương ôn thi Bác sĩ Nội trú - 2021 Bộ môn Di truyền Y học — ĐHYD Huế Câu Trình bày bước chế nhân đơi DNA Nêu ví dụ ứng dụng chế nhân đôi DNA thực hành y khoa Cơ chế phân tử q trình nhân đơi DNA gồm bước sau: Trình tự base điểin gốc nhân đôi nhận dạng '2 Enzyme helicase bẻ gãy liên kết hydrogen cặp base gắn bổ sung Điều cho phép hai mạch DNA bắt đầu tháo xoắn hình thành hai chạc nhân đơi Protein SSB (single-stranded DNA -binding) gắn vàọ/các mạch đơn DNA, ngăn không cho chúng tái bổ sung lại với nhau, đồng thời bảo vệ DNA khỏi bị giáng “hóa nuclease Enzyme primase tổng hợp moi RNA ngan (khoảng 10 nucleotide) theo hướng 5*-> 3’, bắt đầù tư 'điểm gốc mạch đơn Hai mạch đơn phấn tử DNA miẹdược sử dụng làm khn mẫu chqq trình nhân đôi Mồi RNA cần thiết vTDNA polymerase lỊdiờiđau^ổng hợp DNA, kéo dài mạch đơn từ đầu 3’ mồi bo sung sẵn khuôn mẫu EnzymeDNA polymerase in tổng hợp DNA theo hướng 5’->3’, đầu ’ củamỉỗi/nồi RNA Mạch tổng hợp bổ sung đối song với mạch khn mẫu - Mạch tổng họp liên tục thành đoạn dài gọi “mạch liên tục” (leading strand) - “Mạch gián đoạn” (lagging strand) tổng hợp không liên tục dạng loạt đoạn nhỏ, gọi đoạn Okazaki Ị Mỗi chạc1 nhân đôi nhiễm sắc thể có mạch liên tục mạch gián đoạn Các mồi RNA loại bỏ enzyme RNAse H eukaryote DNA polymerase không đặc trưng điền DNA vào chỗ trống Ở prokaryote, DNA polymerase I vừa loại bỏ mồi nhờ hoạt tính 5’ exonuclease; vừa tổng hợp DNA mới, bắt đầu đầu 3’ đoạn Okazaki kế cận Cả DNA polymerase eukaryote prokaryote có khả “đọc sửa sai” (proofreading) sản phẩm chựng hoạt tính 3’->5’ exonuclease Nếu DNA polymerase tạọ4ỗi trình tổng hợp DNA, base khơng bắt cặp (^au 3’^ìaưnạcmDNA tổng hợplsẽ bị loại bỏ trước trình tổngmưbđươc jtetffflc Enzyme DNA ligase bít lỗ hờ ^iữa đoạn Okazaki, chuyên chúng thành mạch DNA liên tục Enzyme DNA gyrase (DNA topoisomerase II) tháo phầnDNA siêu xoắn trước chạc nhân đơị Bởi helicase tháo xoắn DNA(^)chạc nhân đơi, DNA phía trước ưở nên xoắn hình thành siêu xoắn dương Enzyme DNA gyrase tạo lỗ hở ưên hai mạch DNA, sau tháo siêu xoắn xong bít lỗ hở lại