BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA NÔNG HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG ONG KÝ SINH Trichogrammatoidae cojuangcoi Nagaraja (Hymenoptera Trichogrammat.
Sơ lược về sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Moore
Phân loại
Loài sâu đục trái cây có múi Citripestis sagittiferella đƣợc Moore mô tả lần đầu vào năm 1891 và phân loại nhƣ sau:
Tên khoa học: Citripestis sa gittiferella Moore
Tên khác: Nephopteryx sagittiferella Moore
Phân bố
Sâu đục trái cây có múi đã được ghi nhận tại nhiều quốc gia Đông Nam Á như Thái Lan, Malaysia, Singapore, Indonesia, Brunei và Việt Nam Tại Campuchia, mặc dù loài này nằm trong danh sách kiểm dịch, nhưng có khả năng đã xuất hiện trong sản xuất nông nghiệp.
Từ năm 1993, loài sâu này đã chuyển từ một loại dịch hại thứ yếu thành một dịch hại quan trọng và phổ biến tại Malaysia (Nguyễn Văn Hòa và ctv, 2013) Tại Việt Nam, chưa có báo cáo chính thức về sự xuất hiện và tác hại của loài sâu này (Nguyễn Văn Huỳnh, 2013), nhưng chúng đã được ghi nhận gây hại ở các tỉnh Khánh Hòa, Bình Phước, và các vùng trồng cây có múi ở Đồng bằng sông Cửu Long (ĐBSCL) dọc theo tuyến sông Hậu vào cuối năm 2011.
Châu Thành (Hậu Giang) và Kế Sách (Sóc Trăng) là hai huyện liền kề nhau, cùng với các tỉnh lân cận như Bạc Liêu, Bến Tre, Tiền Giang và Vĩnh Long.
Ký chủ
Ký chủ của Citripestis gattiferella Moore bao gồm các loại cây như chanh (Citrus aurantiifolia), chanh núm (Citrus limon), bưởi (Citrus maxima), quýt hồng (Citrus reticulata) và cam ngọt (Citrus sinensis) Tại ĐBSCL, sâu này gây hại nặng nề nhất trên bưởi Gần đây, sự lây lan của sâu đục trái đã ảnh hưởng đến cây cam sành và một số cây có múi khác.
Phát tán
Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Hòa và cộng sự (2013), sâu đục trái có khả năng lây lan qua nhiều con đường, bao gồm khả năng bay mạnh mẽ của trưởng thành và sự phát tán rộng rãi nhờ gió Trứng sâu trên trái cũng là nguồn lây lan mạnh, không chỉ trong khu vực mà còn giữa các vùng thông qua quá trình thu mua và vận chuyển của thương lái Thêm vào đó, trái bưởi nhiễm sâu rụng xuống đất và nhộng nằm trong đất cũng góp phần vào sự phát tán của chúng.
Đặc điểm hình thái
Ngài đẻ trứng rời rạc, mỗi lần từ 4 đến 8 trứng, trên vỏ trái với màu trắng đục khi mới đẻ và chuyển sang màu cam đỏ khi sắp nở Trứng có hình dạng như vảy, kích thước khoảng 1,25 x 1 mm và thời gian ủ trứng kéo dài từ 5 đến 7 ngày Chúng thường được đẻ trên trái non, nhưng cũng có thể đẻ trên trái già khi mật số ngài cao (Hồ Văn Chiến và Vũ Bá Quan, 2013).
Giai đoạn ấu trùng của sâu bướm kéo dài 4 tuổi, với sâu tuổi 1 có chiều dài khoảng 4 mm, màu đỏ cam và đầu nhỏ màu nâu đậm, cứng Sâu mới nở thường đục vào vỏ trái cây hoặc di chuyển đến các vị trí gần đó, tạo lỗ đục có độ sâu từ 0,3 đến 2,5 cm Sâu tuổi 2 có chiều dài từ 4 đến 8 mm và mới lột xác.
Sâu non có màu đỏ nhạt, sau đó chuyển sang đỏ cam đậm với đầu to, cứng màu nâu đậm Chúng thải phân ra ngoài lỗ đục, có độ sâu từ 0,7 đến 6,4 cm Sâu tuổi 3 có màu đỏ đậm, ăn rất khỏe, đục sâu vào vỏ trái và thải phân ra ngoài với độ sâu lỗ đục từ 3,0 đến 6,9 cm Sâu tuổi 4 tương tự như tuổi 3, cũng ăn khỏe và đục sâu vào múi trái, thải phân ra ngoài lỗ đục với độ sâu từ 3,6 đến 6,2 cm (trung bình 4,9 cm) Khi đã đủ sức, sâu sẽ chui ra khỏi trái, rơi xuống đất và nhanh chóng chui vào các kẽ nứt để tạo kén và làm nhộng.
Sau khi rơi xuống đất, sâu nhả tơ để kết dính các hạt đất mịn và mảnh vụn hữu cơ, từ đó hình thành kén Phần lớn nhộng được bảo vệ bên trong kén, trong khi chỉ một số ít nhộng thoát ra ngoài.
1 – 6 là nhộng không đƣợc bảo vệ trong kén) Nhộng màu nâu đậm, dài khoảng 12 –
14 mm (Hồ Văn Chiến và Vũ Bá Quan, 2013)
Ngài có màu nâu đậm đến xám nâu, với những vệt màu đậm dọc theo gân cánh trên cánh trước Đây là một loài côn trùng nhỏ, có hình dạng hẹp và dài, với cánh xếp dọc theo thân mình.
10 – 12 mm, khi đậu đầu hơi nhô cao và có 2 râu hơi cong từ trước đầu kéo dài hơn nửa thân mình (Hồ Văn Chiến và Vũ Bá Quan, 2013).
Đặc điểm sinh học
Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Hòa và cộng sự (2013), thành trùng sau khi vũ hóa 2-3 ngày sẽ bắt cặp và đẻ trứng vào ban đêm, thường trên nửa dưới của trái bưởi khi trái đã đạt đường kính lớn hơn 5 cm (khoảng 1 tháng sau khi đậu trái) Tuy nhiên, gần đây, chúng đã bắt đầu đẻ trứng và gây hại ngay cả khi trái còn rất nhỏ (từ 2-3 cm) cho đến những trái gần thu hoạch, dẫn đến khả năng gây hại và lây lan mạnh hơn trước Trong suốt ban ngày, thành trùng thường nằm yên trên tán lá và có thể sống đến 6 ngày, trong khi một con cái có thể đẻ từ 30 trứng trở lên.
Trứng sẽ nở trên bề mặt vỏ trái sau 5 – 6 ngày ủ, và sau 1 – 2 giờ từ khi nở, sâu non bắt đầu đục vào bên trong vỏ trái để gây hại Giai đoạn này rất quan trọng, cần được xác định kịp thời để thực hiện phun xịt hiệu quả, nếu không sẽ rất khó khăn trong việc xử lý sau này.
6 do sâu đã chui vào bên trong trái, ít chịu ảnh hưởng của thuốc (Nguyễn Văn Hòa và ctv, 2013).
Cách gây hại
Sâu đục trái bưởi gây hại nghiêm trọng từ giai đoạn mới nở, chúng bắt đầu đục vào vỏ trái và ăn phần xốp, sau đó xâm nhập vào bên trong để ăn thịt trái và hạt Quá trình này diễn ra nhanh chóng, tạo ra lớp mùn cưa bên ngoài vỏ trái và khiến trái bị xì mủ Sâu thường đục từ giữa trái xuống đáy, gây vết thương cho trái, tạo điều kiện cho nấm, vi khuẩn và ruồi đục trái xâm nhập, dẫn đến hư hỏng và rụng trái, ảnh hưởng đáng kể đến chất lượng và giá trị thương phẩm Khảo sát gần đây cho thấy sâu có thể gây hại ở tất cả các giai đoạn phát triển của trái, từ lúc đậu trái cho đến gần thu hoạch.
Biện pháp quản lý
Theo Nguyễn Văn Huỳnh (2013); Hồ Văn Chiến (2013), để giảm thiệt hại và hạn chế sự lây lan, các biện pháp trước mắt cần thực hiện như sau:
Theo dõi sự gia tăng mật số và lây lan trên bưởi và các loại cây có múi khác để có thông tin kịp thời
Giới hạn khả năng lây lan bằng cách thu nhặt trái rụng do bị sâu đục và chôn để diệt sâu còn ở bên trong
Để xử lý an toàn các trái cây bị đục, cần thực hiện tỉa trái và bao lại Nên sử dụng các loại thuốc chuyên dụng để điều trị sâu bệnh, đảm bảo ít độc hại cho thiên địch và môi trường.
Nên tỉa cành và tỉa trái để ra hoa đồng loạt, hoặc xen canh với các loại cây có múi khác có trái không cùng mùa
Nuôi kiến vàng trong vườn mang lại nhiều lợi ích, vì chúng tiêu diệt trứng sâu và làm gián đoạn quá trình đẻ trứng của ngài Tuy nhiên, cần chú ý tiêu diệt kiến hôi, vì chúng thường tấn công kiến vàng để tranh giành lãnh thổ.
Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Hòa và cộng tác viên (2013), biện pháp bao trái là cần thiết cho những trái có giá trị thương phẩm cao Việc sử dụng túi bao trái chất lượng và thực hiện bao trái khi trái được 2-3 cm tuổi là rất quan trọng Đồng thời, cần tiến hành tỉa thưa trái và phun thuốc bảo vệ thực vật trước khi bao Theo dõi thường xuyên để phát hiện sớm những trái bị nhiễm bệnh là điều không thể thiếu, và biện pháp này cần được thực hiện liên tục Trước khi bao trái, cần kiểm tra kỹ lưỡng để phát hiện ổ trứng trên trái.
Sơ lƣợc về ong mắt đỏ Trichogramma sp ký sinh trên trứng của côn trùng
Đặcđiểm sinh thái sinh học
Ong mắt đỏ (Trichogramma sp.) là một loài ong ký sinh nhỏ, thuộc họ Trichogrammatidae, có kích thước từ 0,2 – 1,5 mm Chúng ký sinh trên trứng của nhiều loại côn trùng có hại, chủ yếu là trứng của bộ cánh vảy Lepidoptera, nhưng cũng có thể ký sinh trên trứng của các bộ khác như Hymenoptera, Neuroptera, Diptera, Coleoptera và Hemiptera Ong mắt đỏ có đặc điểm hình thái như bàn chân ba đốt, cánh trước rộng và cơ thể thường có màu vàng hay đỏ gụ Chúng trải qua 4 pha phát triển hoàn toàn trong trứng vật chủ, với giai đoạn trưởng thành sống tự do và cần dinh dưỡng từ mật hoa và phấn hoa Khi vũ hóa, ong mắt đỏ có thể giao phối và đẻ trứng ngay lập tức, di chuyển bằng cách bò hoặc nhảy.
Ứng dụng ong mắt đỏ Trichogramma sp trong phòng trừ sâu hại
Tại Việt Nam, nghiên cứu và ứng dụng ong mắt đỏ bắt đầu từ năm 1972, nhưng chỉ trong vài năm gần đây, việc áp dụng chúng vào thực tiễn nông nghiệp mới được nghiên cứu một cách cụ thể.
Ong mắt đỏ là một biện pháp hiệu quả trong việc kiểm soát sâu hại như sâu đục thân ngô, sâu cuốn lá nhỏ, sâu đo xanh và sâu xanh hại bông Các loài ong mắt đỏ thường được sử dụng trong công tác bảo vệ thực vật ở Việt Nam bao gồm Trichogramma japonicum, T chilonis, T dendrolim, T evanescens, T eaproctidis và T embrypragum (Nguyễn Lân Dũng, 2011) Nghiên cứu của Đặng Văn Mạnh và cộng sự (2004) đã chỉ ra quy trình nhân nuôi ong mắt đỏ và ứng dụng thả ra đồng để phòng trừ sâu đục thân trên cây mía và bắp tại Phú Yên.
Phạm Hữu Nhượng và Vũ Quang Côn (1996) đã nghiên cứu hiệu quả của việc thả ong mắt đỏ để kiểm soát sâu xanh hại bông tại Ninh Thuận Kết quả cho thấy, khi thả 2,2 triệu cá thể/ha, tỷ lệ trứng sâu xanh bị ký sinh đạt trung bình trên 30%, tối đa 70% Đối với phương pháp thả lây nhiễm với 0,7 triệu cá thể/ha, tỷ lệ ký sinh trung bình là 31,8%, tương đương với phương pháp thả tràn Nghiên cứu này cũng tương thích với kết quả của Vũ Quang Côn năm 1992, khi thả ong mắt đỏ mình đen để kiểm soát sâu cuốn lá nhỏ hại lúa với mật độ 0,5 – 1 lần mật độ trứng sâu, tỷ lệ ký sinh đạt 40 – 50%.
Theo nghiên cứu của Cao Anh Đương (2003) tại Viện Nghiên cứu mía đường Bến Cát, hiệu quả của việc sử dụng ong mắt đỏ Trichogramma chilonis Ishii trong việc phòng trừ sâu đục thân mía không ổn định do nguồn giống ong chưa được tuyển chọn chặt chẽ Để nâng cao hiệu quả này, cần tiến hành tuyển chọn những chủng ong mắt đỏ Trichogramma chilonis Ishii có khả năng nhân nuôi tốt và hiệu quả ký sinh cao.
Trên thế giới các loài chủ yếu đƣợc sử dụng trong phòng trừ sinh học là T atopovirilia, T brevicapillum, T deion, T exiguum, T fuentesi, T minutum, T nubilale, T platneri, T pretiosum, and T thalense
Từ những năm 1920, Trichogramma sp đã được áp dụng để kiểm soát sâu đục thân mía tại Mỹ Đến năm 1930, phương pháp sản xuất ong mắt đỏ từ trứng của ngài gạo đã được triển khai Các phương pháp sản xuất ong mắt đỏ từ trứng của các loài mọt kho thuộc bộ Lepidoptera cũng được mở rộng, nhằm sử dụng loài ong này như một tác nhân phòng trừ sinh học cho cây trồng.
Nguyễn Văn Uyển và Nguyễn Tiến Thắng (1997) cho biết ong mắt đỏ hiện đang được sử dụng rộng rãi ở nhiều quốc gia như Trung Quốc, Liên Xô, và Philippines Tại Thái Lan, ong mắt đỏ ký sinh trên trứng ngài gạo được dán trên các bảng giấy để cung cấp cho nông dân, với mỗi bảng có hàng trăm trứng (Danida, 2003) Nếu tính trung bình mỗi hecta thả 300.000 ong mắt đỏ, tổng sản lượng ong mắt đỏ trên toàn cầu có thể đạt tới 3.000 tỷ con mỗi năm (Nguyễn Văn Đĩnh, 2004).
Rachappa và Naik (2000) chỉ ra rằng từ năm 1930, Ấn Độ đã áp dụng việc sử dụng ong mắt đỏ Trichogramma japonicum và Trichogramma chilonis để kiểm soát sâu đục thân mía một cách hiệu quả trên diện rộng Đặc biệt, việc thả ong trên các ruộng mía trồng xen với rau mùi mang lại hiệu quả cao hơn so với những khu ruộng mía không có ong.
Nước Mỹ đã bắt đầu sử dụng ong mắt đỏ để tiêu diệt trứng của nhiều loại sâu hại từ những năm 1920-1930 Liên Xô cũ áp dụng phương pháp này từ thập kỷ 1930-1940, trong khi Trung Quốc bắt đầu ứng dụng vào năm 1934 và phát triển sản xuất quy mô lớn từ những năm 1950 Tại Việt Nam, ong mắt đỏ được thả lần đầu tiên vào năm 1973 (Nguyễn Lân Dũng, 2011).
Nghiên cứu của Hoffmann và cộng sự (2002), Kuhar và cộng sự (2002), cùng với Wright và cộng sự (2002) cho thấy việc thả 70.000 con ong mắt đỏ Trichogramma ostriniae trên đồng bắp giúp giảm 50% sự phá hại do sâu đục thân bắp Ostrinia nubilalis Hubner gây ra.
Burbutis và Koepke (1981) đã ghi nhận rằng khi thả ong mắt đỏ Trichogramma ostriniae với tỷ lệ 12 con cái trên mỗi cây, có tới 80 trứng của sâu đục thân bắp Ostrinia nubilalis Hubner bị ký sinh trên đồng bắp.
Sử dụng ngài gạo Corcyra cephalonica Stain trong quá trình nhân nuôi ong mắt đỏ Trichogramma sp
Đặc điểm sinh học
Cùng với Anagasta kuehniella Zeller và Sitotroga cerealella Olivier, ngài gạo Corcyra cephalonica Stain là một trong những vật chủ nhân tạo quan trọng được sử dụng để sản xuất Trichogramma spp ở nhiều quốc gia trên thế giới (Parra, 1997).
Công nghệ sản xuất trứng Anagasta kuehniella Zeller hiện có hạn chế trong việc nhân nuôi Corcyra cephalonica Stain, mặc dù đã được các nhà nghiên cứu Trung Quốc sử dụng cho sản xuất ong ký sinh Để phát triển phương pháp nhân nuôi khối lượng lớn trứng Corcyra cephalonica Stain cho sản xuất Trichogramma sp., cần so sánh các chế độ ăn nhân tạo dựa trên nghiên cứu sinh học và đời sống nhằm xác định chế độ thức ăn tối ưu cho loài này trong phòng thí nghiệm.
Thời gian phát dục của ngài gạo qua các pha:
Trứng bắt đầu nở sau 3 ngày, với 50% số lượng trứng nở vào ngày thứ 4 và hoàn toàn vào ngày thứ 5 Thời gian phát dục của trứng dao động từ 3 đến 5 ngày.
Pha sâu non là giai đoạn phát triển quan trọng, bắt đầu từ khi sâu non nở cho đến khi chúng hóa nhộng Thời gian này kéo dài từ 16 đến 28 ngày và sâu non trải qua 5 tuổi trong suốt quá trình phát dục.
Pha nhộng: Sâu non sau khi đẫy sức thì bắt đầu nhả tơ làm kén và hóa nhộng ngay trong kén Sau 10 – 13 ngày thì nhộng vũ hóa
Pha trưởng thành của loài này kéo dài từ 8 đến 14 ngày, với thời điểm vũ hóa chủ yếu diễn ra vào ban đêm Sau khi vũ hóa, chúng bắt đầu đẻ trứng ngay lập tức và thường đẻ rộ vào đêm hôm sau, trong điều kiện ánh sáng yếu Ban đầu, tỷ lệ ngài đực cao, nhưng theo thời gian, tỷ lệ ngài cái sẽ tăng dần.
Chu kỳ sinh trưởng của ngài gạo từ 37 – 60 ngày Trong đó: trứng: 3 – 5ngày, sâu non: 16 – 28 ngày, nhộng: 10 – 13 ngày, ngài: 8 – 14 ngày
Trứng ngài gạo là nguồn thức ăn cho ong mắt đỏ, và trong điều kiện đủ dinh dưỡng, ong trưởng thành có thể đẻ từ 400 đến 450 trứng, với số lượng tối đa lên tới 562 trứng Tuy nhiên, khi nguồn thức ăn giảm, số trứng giảm xuống còn 270 đến 320, với mức cao nhất là 400 và thấp nhất là 120 trứng Việc bổ sung thức ăn có thể giúp tăng lại số lượng trứng.
Nhiệt độ lý tưởng cho phòng nuôi ngài gạo dao động từ 27 đến 31 độ C, trong khi độ ẩm không khí cần duy trì từ 80 đến 90% Để tối ưu hóa sự sinh sản của ngài gạo, phòng nuôi cần được thiết kế kín và hạn chế ánh sáng.
Ứng dụng
Để nhân giống ong mắt đỏ, cần nuôi ngài gạo Corcyra cephalonica Stain trên tấm cám và hạt cao lương nhằm thu thập trứng quanh năm Những trứng này sẽ được sử dụng để nhân nuôi ong mắt đỏ hiệu quả (Nguyễn Lân Dũng, 2011).
Nghiên cứu về việc sử dụng ong mắt đỏ Trichogramma sp để kiểm soát trứng sâu hại trên cây trồng ở Quảng Nam trong giai đoạn 1997 – 1998 cho thấy tỷ suất nhân nuôi ngài gạo theo phương pháp thủ công dao động từ 1:11,8 đến 1:13,5, trong khi tỷ suất nhân của ong mắt đỏ đạt từ 1:24 đến 1:27 Kết quả thí nghiệm cho thấy tỷ lệ ký sinh của ong mắt đỏ trên trứng ngài gạo đạt từ 70% đến 80%.
Quy trình nhân nuôi ong mắt đỏ
Ong mắt đỏ Trichogramma đã được nhân nuôi và ứng dụng hiệu quả trong việc phòng trừ một số loài sâu hại cây trồng từ năm 1910 – 1911 tại Nga và Trung Á Nhiều quốc gia như Liên Xô cũ, Mỹ, Philippines, Trung Quốc, Cuba và Đức đã nghiên cứu và phát triển quy trình công nghệ nuôi ong mắt đỏ, trong đó có các phương pháp nuôi bán chuyên nghiệp (Nguyễn Văn Đĩnh, 2004).
Nguyễn Văn Tuất và Lê Văn Thuyết (2001) đã thực hiện nghiên cứu về quy trình nhân nuôi và tuyển chọn giống ong mắt đỏ tại Việt Nam từ năm 1998, với sự tài trợ của tổ chức Bánh Mỳ Thế Giới, nhằm sử dụng chúng trong việc phòng trừ một số loài sâu hại chính (Nguyễn Văn Đĩnh, 2004).
Có 2 phương pháp nhân nuôi ong mắt đỏ:
Nuôi nhân ong mắt đỏ trong phòng thí nghiệm hoặc xưởng sản xuất quy mô nhỏ dựa trên quy trình kỹ thuật đã đƣợc nghiên cứu đề xuất
Để ong mắt đỏ phát triển tự nhiên, cần tạo điều kiện thuận lợi bằng cách không sử dụng thuốc hóa học trong giai đoạn đầu vụ Điều này giúp tăng cường quần thể ong mắt đỏ, từ đó chúng có khả năng kiểm soát sâu hại và duy trì sự cân bằng sinh thái trong môi trường tự nhiên.
Năm 1982, Viện Bảo vệ Thực vật đã nghiên cứu và phát triển quy trình nhân nuôi ba loài ong mắt đỏ nhằm phòng chống các loại sâu hại như sâu đục thân ngô (Ostrinia nublalis), sâu đo xanh hại đay (Anmis flava), sâu xanh đục quả (Helicoverpa armigera) và sâu róm thông (Dendrolimus punctatus) Quy trình sản xuất ong mắt đỏ Trichogramma đã được áp dụng hiệu quả trong việc kiểm soát sâu bệnh.
Viện Bảo vệ thực vật nhƣ sơ đồ sau:
Thu nguồn trứng ngài gạo
Nhân vật chủ ngài gạo
- Nhiễm trứng vào thức ăn
- Diệt các loại tạp chất
Thu ngài cho đẻ trứng
Thu trứng, làm sạch để sản xuất ong mắt đỏ
Sản xuất hàng loạt ong mắt đỏ
- Xử lý trứng ngài gạo bằng tia cực tím UV
- Dán trứng ngài gạo lên giấy
- Nhiễm ong lên các tấm trứng ngài gạo
- Thu nguồn ong trưởng thành Đóng gói, bảo quản và sử dụng
Nuôi và duy trì giống ngài gạo
Thu thập ong mắt đỏ trên vườn bị ký sinh
Nuôi và duy trì giống ong mắt đỏ
Quy trình sản xuất ong mắt đỏ (Viện Bảo vệ thực vật 1973,1982)
Chương 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Thời gian: đề tài đƣợc thực hiện từ tháng 3/2015 – 7/2015 Địa điểm: phòng thí nghiệm Bộ môn Bảo Vệ Thực Vật, Viện CĂQ miền Nam.
Nội dung nghiên cứu
Nội dung 1: Xác định môi trường nhân nuôi ngài gạo Corcyra cephalonica Stain thích hợp, đây là nguồn cung cấp trứng cho ong ký sinh bản địa
Nội dung 2: Xác định loài ong ký sinh trên trứng sâu đục trái bưởi
Nội dung 3: Xác định sự ảnh hưởng tia UV đến khả năng ký sinh trên trứng ngài gạo Corcyra cephalonica Stain của ong ký sinh
Nội dung 4: Xác định ảnh hưởng của thức ăn thêm đến tuổi thọ của ong ký sinh
Nội dung 5: Đánh giá khả năng ký sinh của ong ký sinh trên trứng sâu đục trái bưởi.
Vật liệu nghiên cứu
Thiết bị cần thiết: kính lúp soi nổi Olympus, kính hiển vi, kính lúp, tủ chiếu tia
Để thực hiện thí nghiệm, bạn cần chuẩn bị các vật dụng thiết yếu bao gồm đĩa petri đường kính 9 cm và cao 1 cm, thước đo, vải bịt, xô nhựa, kẹp, chổi lông, dao, bông giữ ẩm, giấy hút ẩm, túi nhựa, lam, lamen, cồn 70 độ, hộp đựng mẫu, ống nghiệm, viết và máy tính.
Để nhân nuôi ong ký sinh hiệu quả, cần chuẩn bị một số vật dụng thiết yếu như trứng sâu đục trái bưởi, trứng sâu gạo, tấm, cám, sữa bột, bột đậu phộng, lồng lưới, hộp nhựa, keo dán, giấy và kéo Những vật dụng này đóng vai trò quan trọng trong quá trình nuôi dưỡng và chăm sóc ong ký sinh, giúp tăng cường sự phát triển và sức khỏe của chúng.
15 Điều kiện thí nghiệm: nhiệt độ 26 ± 1 o C, ẩm độ 80 ± 1%
Nhân nuôi ngài gạo Corcyra cephalonica Stain
Mục đích: thu đƣợc nguồn trứng sạch có cùng ngày tuổi để làm thí nghiệm và làm vật chủ cho ong ký sinh
Để tạo nguồn giống, cần thu thập sâu gạo Corcyra cephalonica Stain từ các kho thóc và nuôi chúng trong cám gạo hoặc tấm gạo Sau khi vũ hóa, ngài gạo sẽ bắt đầu đẻ trứng Trứng sau đó được thu gom và cho vào thùng giấy A4 để nhân nuôi.
Hình 2.1: Thùng giấy nhân nuôi sâu gạo
Mỗi buổi sáng, Thu trưởng thành bằng cách sử dụng ống nghiệm để bắt thành trùng và cho chúng vào ly nhựa Ly được đậy kín bằng vải lưới để tạo điều kiện cho thành trùng đẻ trứng Sau đó, ly nên được đặt trong phòng tối hoặc được che phủ bằng vải để đảm bảo môi trường tối ưu cho quá trình sinh sản.
Vào buổi sáng, hãy sử dụng cọ mềm để quét nhẹ nhàng trứng lên bề mặt ly, giúp trứng ngài gạo rơi xuống giấy Nguồn trứng này có thể được sử dụng cho các thí nghiệm hoặc để nhân nuôi ong ký sinh.
Nhân nuôi ong mắt đỏ
Mục đích: thu đƣợc nguồn ong có cùng ngày tuổi để tiến hành thí nghiệm
Tiến hành thu thập trứng của sâu đục trái bưởi bị ong mắt đỏ ký sinh trong tự nhiên và đưa về ống nghiệm để nuôi riêng từng ổ trứng Sau đó, nhân giống bằng trứng ngài gạo để tạo ra nguồn ong ban đầu.
Chuẩn bị ong mắt đỏ nhân nuôi: cắt các ổ trứng có màu đen cho vào ống nghiệm với một lƣợng nhất định
Chuẩn bị trứng ngài gạo mới từ 1 – 2 ngày tuổi để nhân ong mắt đỏ
Dán trứng ngài gạo lên giấy: dùng keo quét lên giấy và rải trứng ngài gạo lên giấy Ghi ngày tháng, kích thước mỗi bảng trứng nhỏ là 2 x 6 cm
Sau khi hoàn thành việc dán trứng ngài gạo, cần chờ cho keo khô Tiếp theo, tiến hành nhiễm ong mắt đỏ vào các bảng trứng bằng cách đưa chúng vào ống nghiệm đã chuẩn bị sẵn ong mắt đỏ.
Sau 3 – 4 ngày kể từ khi bị nhiễm ong mắt đỏ, các trứng ngài gạo bị ký sinh sẽ chuyển sang màu đen, trong khi những trứng không bị ký sinh vẫn giữ màu sắc bình thường và có khả năng nở thành sâu non Đây là thời điểm quan trọng để tiến hành vệ sinh và tiêu diệt các sâu non ngài gạo cũng như các trứng không bị ký sinh, nhằm ngăn chặn sự phát triển của chúng.
Phương pháp nghiên cứu
Xác định môi trường nhân nuôi thích hợp ngài gạo Corcyra cephalonica Stain, nguồn cung cấp trứng cho ong ký sinh bản địa
Mục đích: chọn nguồn thức ăn thích hợp cho ngài gạo phát triển tốt đẻ trứng nhiều để nhân nguồn ong ký sinh
Vật liệu: trứng ngài gạo mới đẻ, tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng, sữa bột
Thí nghiệm được thực hiện tại bộ môn Bảo vệ thực vật, viện cây ăn quả miền Nam, trong điều kiện phòng thí nghiệm Thiết kế thí nghiệm theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên với 8 nghiệm thức và 3 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại sử dụng 1 hộp Để chống nhiễm khuẩn, mỗi hộp được bổ sung 25 mg streptomyces sunfate.
Trộn thức ăn vào hộp nhựa kích thước 25 x 10 cm và rải đều 100 trứng sâu gạo lên bề mặt Sau đó, phủ vải lên hộp và buộc chặt, đặt hộp ở nơi kín đáo để tránh chuột và kiến phá hoại.
Các nghiệm thức trong thí nghiệm:
NT2: 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo
NT3: 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng
NT4: 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng
NT5: 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột
NT6: 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột
NT7: 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột
NT8: 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột
Tỷ lệ nở = (số sâu trưởng thành/số trứng bỏ vào ban đầu) x 100 (%)
Tỷ lệ hóa nhộng = (số nhộng tạo thành/số sâu trưởng thành) x 100 (%)
Tỷ lệ vũ hóa = (số ngài vũ hóa / số nhộng tạo thành) x 100 (%)
Tỷ lệ ngài dị tật = (số ngài dị tật/tổng số ngài) x 100 (%)
Trọng lƣợng ngài đực, cái = cân các con ngài vừa vũ hóa (mg)
Tỷ lệ đực, cái = (số ngài đực, cái/tổng ngài) x 100 (%)
Tuổi thọ con đực, con cái (ngày)
Số lƣợng trứng đƣợc đẻ ra trên mỗi ngài cái ở thế hệ tiếp = đếm số lƣợng trứng trung bình đƣợc ngài cái đẻ ra ở thế hệ kế tiếp (trứng)
Xác định loài ong ký sinh trứng sâu đục trái bưởi
Mục đích: xác định tên loài ong ký sinh trứng sâu đục trái bưởi
Để thu thập và định danh các mẫu trứng sâu đục trái bưởi có ong ký sinh, cần lấy trứng từ các trái bưởi ngoài đồng Sử dụng dao, cắt một lớp mỏng vỏ trái bưởi có trứng và đặt từng ổ trứng vào các hộp nhựa tròn với kích thước đáy 10 cm và miệng 12 cm Sau đó, đậy hộp bằng vải lưới để ngăn ong ký sinh thoát ra sau khi vũ hóa.
Ong ký sinh sau khi vũ hóa cần được ngâm ngay lập tức trong cồn 70 độ Sau đó, các mẫu ong ký sinh sẽ được làm tiêu bản để quan sát dưới kính hiển vi Tiêu bản ong ký sinh được chuẩn bị bằng môi trường Hoyer, bao gồm 25 ml nước cất, 15 g nhựa arabic, 100 g chloral hydrate và 10 ml glycerine Các mẫu này sẽ được quan sát dưới kính hiển vi với độ phóng đại từ 100 đến 400 lần, và việc định danh được thực hiện dựa trên khóa phân loại của Doutt và Viggiani (1968) cùng với Melanie (1988).
Ảnh hưởng tia UV đến khả năng ký sinh trên trứng ngài gạo của ong ký sinh
Mục đích: xác định ảnh hưởng của tia UV đến khả năng ký sinh
Phương pháp thực hiện: thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên
2 nghiệm thức, 10 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại gồm 10 cá thể ong cái và 100 trứng ngài gạo
Nghiệm thức 1: xử lý UV
Nghiệm thức 2: không xử lý UV
Tiến hành thu trứng ngài gạo mới đẻ và dán lên mảnh giấy kích thước 2 x 6cm, mỗi mảnh giấy chứa 100 trứng Sau đó, chọn 10 mảnh giấy để xử lý bằng tia UV với bước sóng 254nm trong 15 phút Nenet Susniahti và Agus Susanto (2005) cho rằng thời gian chiếu tia cực tím 15 phút là phù hợp để tiêu diệt phôi của trứng Corcyra cephalonica Stain.
Cho các mảnh giấy đã xử lý và không xử lý tia UV vào ống nghiệm, sau đó thả 10 con ong ký sinh cái mới vũ hóa trong khoảng 1 – 2 giờ để chúng bắt cặp Sau 24 giờ tiếp xúc, lấy các mảnh giấy trứng ngài gạo ra và chuyển vào ống nghiệm khác để theo dõi.
Theo dõi và ghi nhận:
Tỷ lệ trứng ngài gạo bị ký sinh = (tổng số trứng ngài gạo bị ký sinh/ 100 trứng ngài gạo) x 100 (%)
Tỷ lệ vũ hóa = (số trứng ngài gạo có ong vũ hóa/số trứng ngài gạo bị ký sinh) x
Tỷ lệ đực, cái = (số ong đực, cái/số ong vũ hóa) x 100 (%)
Hình 2.3: Mảnh giấy dán trứng ngài gạo Corcyra cephalonica Stain
Ảnh hưởng của thức ăn thêm đến tuổi thọ của ong ký sinh
Mục đích: xác định thức ăn thêm có hiệu quả gia tăng tuổi thọ của ong trong điều kiện không tiếp xúc với vật chủ
Thí nghiệm được thực hiện theo phương pháp hoàn toàn ngẫu nhiên với 3 nghiệm thức và 5 lần lặp lại Mỗi lần lặp lại bao gồm 1 ống nghiệm chứa 20 con ong trưởng thành cái.
Thả 20 con ong trưởng thành cái mới vũ hóa cho vào ống nghiệm có dán giấy thấm tẩm thức ăn trên thành ống nghiệm tương ứng với các nghiệm thức Dùng vải bịt đầu ống nghiệm lại để tránh ong bay ra Sau 24h thì thay thức ăn mới cho đến khi ong chết
Theo dõi và ghi nhận tuổi thọ trung bình của ong ký sinh cái (ngày)
Hình 2.5: Nồng độ mật ong
Hình 2.6: Bố trí thí nghiệm ảnh hưởng thức ăn thêm đến tuổi thọ ong ký sinh
Đánh giá khả năng ký sinh của ong ký sinh trên sâu đục trái bưởi trong điều kiện phòng thí nghiệm
2.4.5 Đánh giá khả năng ký sinh của ong ký sinh trên trứng sâu đục trái bưởi trong điều kiện phòng thí nghiệm
Thí nghiệm đƣợc thực hiện trên 4 nghiệm thức và 5 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại là
1 hộp nhựa với 30 trứng sâu đục trái bưởi
NT1: 1 ong cái với 30 trứng sâu đục trái bưởi
NT2: 2 ong cái với 30 trứng sâu đục trái bưởi
NT3: 3 ong cái với 30 trứng sâu đục trái bưởi
NT4: 4 ong cái với 30 trứng sâu đục trái bưởi
Thu thập trứng sâu đục trái bưởi mới đẻ từ ngoài đồng, có màu đỏ Cắt một lớp mỏng vỏ bưởi chứa trứng và xử lý bằng tia UV trong 15 phút để tiêu diệt phôi sâu và phôi ong ký sinh Đặt 30 trứng vào mỗi hộp và thả vào đó trùng cái ong ký sinh mới vũ hóa 1-2 giờ đã bắt cặp để chúng đẻ lên trứng sâu Đính giấy thấm mật ong 50% bên trong hộp và thay thức ăn hàng ngày Sau 24 giờ tiếp xúc, chuyển vỏ bưởi chứa trứng sang hộp khác để dễ quan sát.
Theo dõi và ghi nhận tỷ lệ ký sinh của ong ký sinh
Tỷ lệ trứng sâu đục trái bưởi bị ký sinh (%) = (tổng số trứng sâu đục trái bưởi bị ký sinh/tổng số trứng sâu đục trái bưởi quan sát) x 100
Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu được thu thập và chuyển đổi bằng chương trình Microsoft Excel 2010
Phân tích thống kê ANOVA và trắc nghiệm phân hạng theo phần mềm MSTATC
Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 Xác định môi trường nhân nuôi thích hợp ngài gạo, nguồn cung cấp trứng cho ong ký sinh bản địa
Bảng 3.1 trình bày ảnh hưởng của các loại thức ăn khác nhau đến tỷ lệ nở, tỷ lệ hóa nhộng, tỷ lệ vũ hóa và tỷ lệ dị tật của ngài gạo Corcyra cephalonica Stain trong điều kiện phòng thí nghiệm Nghiên cứu này giúp xác định sự tương quan giữa chế độ dinh dưỡng và sự phát triển của ngài gạo, từ đó cung cấp thông tin quan trọng cho việc cải thiện quy trình nuôi trồng và quản lý loài này.
STT Nghiệm thức Chỉ tiêu theo dõi (%)
Tỷ lệ nở Tỷ lệ hóa nhộng
Tỷ lệ ngài dị tật
1 125 g tấm gạo 41,67 bcd 91,88 bc 93,08 bc 3,04
2 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo 45,67 bc 94,20 abc 99,29 a 3,98
3 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng 38,00 cde 92,96 abc 96,11 ab 1,99
4 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng 57,33 a 97,11 a 95,23 abc 1,28
5 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột 36,33 de 93,41 abc 90,58 c 4,18
6 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột
7 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng +
8 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 48,67 b 94,54 abc 98,60 a 2,18
Ghi chú: Tỷ lệ hóa nhộng và tỷ lệ vũ hóa được chuyển đổi sang căn bậc hai (x) để phục vụ cho thống kê Đối với tỷ lệ ngài dị tật, số liệu được chuyển sang căn bậc hai (x + 0,5) để phân tích Kết quả thống kê cho thấy (**): sự khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%; (*) sự khác biệt có ý nghĩa ở mức 5%; và (ns) là sự khác biệt không có ý nghĩa.
24 biệt không có ý nghĩa thống kê Trong cùng một cột các kí tự theo sau giống nhau thì khác biệt không có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan
Theo bảng 4.1, tỷ lệ nở của sâu gạo Corcyra cephalonica Stain cao nhất đạt 57,33% khi sử dụng thức ăn kết hợp tấm gạo, cám gạo và bột đậu phộng, trong khi thấp nhất là 32,33% với thức ăn tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột Tỷ lệ hóa nhộng cao nhất là 97,11% ở thức ăn tấm gạo, cám gạo và bột đậu phộng, trong khi thấp nhất là 90,47% với thức ăn tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột Tỷ lệ vũ hóa cao nhất đạt 99,29% với thức ăn tấm gạo và cám gạo, và thấp nhất là 90,58% với thức ăn tấm gạo và sữa bột.
Tỷ lệ dị tật ở trẻ em là khá thấp và không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa các loại thực phẩm, điều này cho thấy rằng nguyên nhân gây dị tật không phải do chế độ ăn uống không phù hợp hoặc thiếu chất dinh dưỡng.
Tỷ lệ nở và tỷ lệ hóa nhộng của ấu trùng Corcyra cephalonica Stain cao hơn khi sử dụng thức ăn từ tấm, cám gạo và đậu phộng, trong khi giá trị thấp nhất được ghi nhận ở tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột Đậu phộng, với hàm lượng dinh dưỡng cao, khi kết hợp với tấm gạo và cám gạo, tạo ra môi trường lý tưởng cho sự phát triển của ấu trùng Tuy nhiên, trong quá trình thí nghiệm, sự vón cục của tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột đã ảnh hưởng tiêu cực đến sự phát triển của ấu trùng Corcyra cephalonica Stain.
Tỷ lệ vũ hóa trên môi trường thức ăn từ tấm gạo và cám gạo gần như đạt 100% Theo nghiên cứu của Nathan (2006), tỷ lệ vũ hóa ở các loại ngũ cốc như lúa mì, gạo và lúa miến được ghi nhận là 70,4%.
Theo nghiên cứu của Allotey và Azalekor (2000), 83,7% số lượng ngài xuất hiện trên đậu đũa và 67,5% trên đậu phộng Tỷ lệ vũ hóa của ngài trên tấm gạo và cám gạo cao hơn so với các loại thực phẩm khác, nhờ vào môi trường ổn định và quen thuộc cho sự phát triển của chúng.
Bảng 3.2 trình bày ảnh hưởng của các loại thức ăn khác nhau đối với tỷ lệ giới tính và thời gian sống của con đực và con cái của loài Corcyra cephalonica Stain trong điều kiện phòng thí nghiệm Nghiên cứu này giúp hiểu rõ hơn về sự tương tác giữa thức ăn và sự phát triển sinh lý của loài này.
STT Nghiệm thức Chỉ tiêu theo dõi
Tuổi thọ con đự (ngày)
Tuổi thọ con cái (ngày)
3 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng 49,38 50,62 15,00 a 8,33 ab
4 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng 47,77 52,23 14,00 ab 8,67 ab
5 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột 46,03 53,97 12,33 abc 7,67 b
6 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột 41,97 58,03 10,67 bc 8,67 ab
7 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 53,04 46,96 11,00 abc 10,00 a
8 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng +
Ghi chú: Để thống kê tuổi thọ của con đực và con cái, số liệu được chuyển sang căn bậc hai (x + 0,5) Các ký hiệu (**), (*), và (ns) chỉ ra mức độ ý nghĩa của sự khác biệt: khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%, khác biệt có ý nghĩa ở mức 5%, và không có ý nghĩa thống kê Nếu các ký tự theo sau giống nhau trong cùng một cột, điều này cho thấy sự khác biệt không có ý nghĩa ở mức 5% theo phương pháp Ducan.
Bảng 4.2 cho thấy rằng con đực có tuổi thọ cao hơn con cái, với con đực sống lâu nhất 15 ngày khi ăn thức ăn từ tấm gạo và đậu phộng, trong khi tuổi thọ ngắn nhất là trên tấm gạo, cám gạo Đối với con cái, tuổi thọ cao nhất là 10 ngày trên tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột, và thấp nhất từ 7 đến 7,76 ngày trên gạo và các loại thức ăn khác Theo Bhandari (2014), tuổi thọ của con đực đạt 14,08 ngày trên lúa mì và đậu phộng, và 12 ngày trên bắp Allotey (1986) ghi nhận tuổi thọ của con đực là 13,4 ngày và con cái là 8,5 ngày khi ăn đậu phộng.
Tỷ lệ giới tính gần như bằng 1:1, và sự khác biệt này không có ý nghĩa thống kê Kết quả này tương đồng với nghiên cứu của Kamel và Hasanein (1967), Cox (1981) và Etman (1988), cho thấy rằng tỷ lệ đực cái không ảnh hưởng đến nguồn thức ăn.
Bảng 3.3 Trọng lƣợng và tổng số trứng của ngài gạo Corcyra cephalonica Stain ở các thức ăn khác nhau trong điều kiện phòng thí nghiệm
STT Nghiệm thức Chỉ tiêu theo dõi
Trọng lƣợng con cái (mg)
2 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo 13,54 ab 23,92 b 255,00 ab
3 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng 12,91 ab 22,05 b 218,00 abc
4 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng 14,19 a 26,26 ab 260,00 ab
5 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột 10,21 bc 17,79 c 230,00 abc
6 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột 13,20 ab 25,71 ab 296,00 ab
7 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 13,25 ab 25,06 ab 195,00 bc
8 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng +
Ghi chú: Số liệu tổng số trứng được chuyển sang căn bậc hai (x) để thống kê Các ký hiệu (**): khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%, và (*): khác biệt có ý nghĩa ở mức 5% Trong cùng một cột, nếu các ký tự theo sau giống nhau thì khác biệt không có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan.
Theo bảng số liệu, con cái có trọng lượng nặng hơn con đực, với cân nặng cao nhất đạt 29,08 mg khi ăn tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột, trong khi thấp nhất là 16,61 mg trên gạo và 17,79 mg trên tấm gạo và sữa bột Ngược lại, con đực nặng nhất là 14,19 mg khi ăn tấm gạo, cám gạo và bột đậu phộng, còn thấp nhất chỉ đạt 10,09 mg với chế độ ăn gạo.
Kết quả nghiên cứu cho thấy trọng lượng của Corcyra cephalonica Stain cao hơn so với thông tin của Cox (1981), cụ thể là 12,9 mg cho con đực và 24,6 mg cho con cái.
Theo nghiên cứu của Mbata (1989), cân nặng của con đực là 12,7 mg và con cái là 22,4 mg Trọng lượng của chúng phụ thuộc chủ yếu vào chế độ ăn uống và thành phần dinh dưỡng có trong thức ăn.
Xác định loài ong ký sinh trứng sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Moore
Khóa phân loại đến giống Trichogrammatoidea
Mặt lưng và bụng của thành trùng cái có bề rộng bằng nhau, không có phần nào lớn hơn Cánh trước không dài và hẹp, thường mở rộng ở phần cuối Phần roi của râu đầu thành trùng cái có nhiều hơn 3 đốt, trong khi phần phình to ở cuối roi râu ít hơn 5 đốt Rìa gân cánh của thành trùng cái trùng với viền trước của cánh trước.
Đĩa cánh trước có kích thước 23’, không quá ngắn và không có nhiều lông cứng nhỏ, mà thường thưa thớt hoặc gần như không có Nếu có lông, chúng thường sắp xếp thành từng hàng hoặc theo những đường gân cánh, và nếu không theo hàng, số lượng lông cũng không nhiều và thường ngắn.
38 Phần phình to ở cuối của roi râu của thành trùng có 1 đốt; đoạn giữa cuống râu và phần phình to ở cuối của roi râu có 2 đốt 39
39’ Các đốt của đoạn giữa cuống râu và phần phình to ở cuối của roi râu tách rời nhau, có khớp, không có các lông gai to và mập 40
Gân cánh cong và cách xa đường viền trước của cánh trước, kéo dài, trong khi gân cánh phía sau sườn cánh thì sắc Gân cánh RS1 không có; phần cuối roi của râu thành trùng đực có 3 đốt; gân cánh phía sau sườn cánh cũng kéo dài.
Khóa phân loại đến loài Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
Phần cánh trước có màu đen sẫm rõ rệt, với lông ở rìa cánh dài trung bình Hình tam giác trên đốt ngực giữa và mảnh trên lưng của đốt ngực sau, cùng với chân không mang màu nâu sáng.
Đốt chậu của chân giữa và sau có màu vàng nâu, trong khi cấu tạo phiến ở đầu bộ phận sinh dục ngoài của thành trùng đực hơi thon nhọn Đốt bụng giữa của thành trùng cái có màu hơi đen Loài này được biết đến với tên gọi Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja.
Đặc điểm hình thái của ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
Thành trùng đực có kích thước cơ thể dài 0,70 mm và rộng 0,25 mm, với đầu hình tam giác trên đốt ngực giữa Màu sắc của chúng bao gồm màu vàng son ở đốt sau của bụng và chân, trong khi đốt trước của bụng có màu hơi đen Lông cứng trên râu có chiều dài trung bình, và đốt chậu ở chân giữa và chân sau có màu vàng hơi nâu Đốt đùi ở chân giữa và chân sau có màu vàng đục, cùng với cấu tạo phiến của bộ phận sinh dục ngoài hơi thon nhọn.
Thành trùng cái có kích thước cơ thể chiều dài 0,85 mm và chiều rộng 0,28 mm Đặc điểm nhận diện bao gồm mảnh hình tam giác trên đốt ngực giữa, cùng với đốt ngực sau, đốt bụng sau và chân có màu vàng Phần phình to ở cuối roi râu ngắn hơn phần chân râu Cánh trước không có gân RS1, với rìa cánh trước có lông dài trung bình, dài nhất ở mép sau cánh Rìa cánh sau cũng có lông và hơi dài hơn so với lông ở rìa cánh trước Cuối cùng, cơ quan đẻ trứng dài bằng với đốt chày chân sau.
Từ các đặc điểm trên, cho thấy loài ong ký sinh trứng của sâu đục trái bưởi
Citripestis sagittiferella đƣợc định danh là loài Trichogrammatoidea cojuangcoi
Nagaraja (Hymenoptera: Trichogrammatidae) Lim (1983) đã ghi nhận loài ong ký sinh này trên trên trứng của sâu đục quả ca cao Conopomorpha cramerella Snellen ở
Sabah, Malaysia vào năm 1983 Thời điểm đấy ông định danh là loài
Trichogrammatoidea bactrae fumata Nagaraja được định danh lại thành Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja vào năm 1985 Kể từ đó, loài ong ký sinh này đã trở thành đối tượng nghiên cứu quan trọng trong việc đánh giá hiệu quả trong nhiều nghiên cứu.
Nghiên cứu về 30 phương pháp phòng trừ sâu đục quả ca cao trong điều kiện phòng thí nghiệm và ngoài đồng ruộng đã chỉ ra rằng, mặc dù giai đoạn đầu việc kiểm soát loài sâu này diễn ra chậm, nhưng sau đó, hiệu quả phòng trừ đã đạt kết quả rất khả quan (Lim và Chong, 1987; Lee và ctv, 1995).
Theo nghiên cứu của Melanie (1988), loài ong ký sinh trứng Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja được sử dụng hiệu quả trong phòng trừ sinh học, đặc biệt để kiểm soát sâu đục quả ca cao Conopomorpha cramerella Snellen tại Davea del Sur, Philippines, do phòng thí nghiệm Cacao Investors Incorporated (CII) sản xuất và phóng thích Tại Việt Nam, Đặng Văn Mạnh và cộng sự (2004) đã nghiên cứu quy trình nhân nuôi ong mắt đỏ (Trichogramma sp.) và áp dụng thả ra đồng ruộng để phòng trừ sâu đục thân trên cây mía và bắp ở Phú Yên.
Hình 3.1: Cánh trước ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
A: Cánh trước ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja theo khóa phân loại Doutt và Viggiani (1968)
B: Cánh trước ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja quan sát dưới kính hiển vi với độ phóng đại 40 x 10
Ảnh hưởng tia UV đến khả năng ký sinh trên trứng ngài gạo của ong ký sinh
Bảng 3.4 Ảnh hưởng của tia cực tím (tia UV) đến khả năng ký sinh trên trứng ngài gạo của ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
Tỷ lệ ký sinh (TB ± SD)
Tỷ lệ vũ hóa (TB ± SD)
Tỷ lệ đực (TB ± SD)
Tỷ lệ cái (TB ± SD)
Ghi chú: TB biểu thị cho trung bình, trong khi SD là độ lệch chuẩn Trước khi thực hiện so sánh T-test, các số liệu được chuyển đổi sang căn bậc hai (x) Kết quả cho thấy (**): sự khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%; (*) cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa ở mức khác.
5%.Trong cùng một cột các kí tự theo sau giống nhau thì khác biệt không có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan
Nghiên cứu cho thấy rằng trứng Corcyra cephalonica Stain không được xử lý bằng tia cực tím (UV) có tỷ lệ ký sinh và tỷ lệ vũ hóa thấp hơn so với trứng đã qua xử lý UV, trong khi tỷ lệ ong trưởng thành cái lại cao hơn Việc sử dụng tia UV giúp giảm sự phát triển phôi thai của trứng Corcyra cephalonica Stain, do tia UV làm gián đoạn quá trình tổng hợp protein, khiến các tế bào không thể phân chia và phôi không được hình thành Điều này hạn chế sự xuất hiện của ấu trùng Corcyra cephalonica Stain, từ đó tăng cường khả năng ký sinh của ong ký sinh nhờ giảm cạnh tranh dinh dưỡng Ngoài ra, theo Caudle và Shneyder (2002), việc ứng dụng bức xạ UV càng sớm càng giúp tránh được ảnh hưởng tiêu cực, đặc biệt khi trứng vật chủ còn mới, màng chorlon vẫn mỏng, cho phép bức xạ UV dễ dàng xâm nhập.
Hình 3 2: Ong Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja đang ký sinh trên trứng ngài gạo Corcyra cephalonica Stain
Hình 3.3: Trứng ngài gạo chƣa ký sinh (A), trứng ngài gạo màu đen đã ký sinh bởi ong Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja (B)
Ảnh hưởng của thức ăn thêm đến tuổi thọ của ong ký sinh Trichogrammatoidea
Mật ong là nguồn dinh dưỡng quan trọng cho nhiều loài côn trùng ký sinh, như Hemiptarsenus varicornis và Neochrysocharis formosa, giúp kéo dài tuổi thọ và thời gian sinh sản của chúng (Lưu Đức Huy, 2009) Nghiên cứu ảnh hưởng của thức ăn bổ sung đến tuổi thọ của ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja đã được thực hiện bằng cách theo dõi tuổi thọ của chúng khi cung cấp các dung dịch mật ong với nồng độ 10%, 30%, 50% so với đối chứng là nước cất Kết quả thí nghiệm sẽ được trình bày trong bảng sau.
Bảng 3.5 Ảnh hưởng của thức ăn thêm đến tuổi thọ của thành trùng cái ong ký sinh
STT Nghiệm thức Tuổi thọ của thành trùng cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja (ngày)
Ghi chú: Số liệu được chuyển đổi sang căn bậc hai (x+0,5) để phục vụ cho việc thống kê (**): Sự khác biệt được coi là rất có ý nghĩa khi đạt mức 1% Trong cùng một cột, nếu các ký tự theo sau giống nhau, thì sự khác biệt không có ý nghĩa ở mức 5% theo phương pháp LSD.
Nghiên cứu cho thấy, tuổi thọ của ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja có sự khác biệt rõ rệt khi được cung cấp mật ong Ong trưởng thành được cho ăn mật ong 50% có tuổi thọ trung bình là 6,10 ngày, gấp đôi so với 1,95 ngày khi chỉ được cung cấp nước cất Khi nồng độ mật ong giảm xuống 30% và 10%, tuổi thọ lần lượt giảm còn 4,12 ngày và 2,66 ngày.
Nghiên cứu của Saljoqi và Khattak (2007) cho thấy ong ký sinh Trichogramma chilonis sống lâu hơn khi được cung cấp mật ong 50% so với không được cho ăn mật ong và các thực phẩm chức năng khác Hagazi (1998) cũng chỉ ra rằng mật ong là nguồn thực phẩm giàu protein tinh khiết, có ảnh hưởng đáng kể đến tuổi thọ của ong ký sinh.
Đánh giá khả năng ký sinh của ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi
Bảng 3.6: Ảnh hưởng của mật số ong ký sinh đến tỷ lệ ký sinh thành trùng cái
STT Nghiệm thức Tỷ lệ ký sinh (%)
Ghi chú: Số liệu được chuyển đổi sang acrsin(x) 1/2 để thực hiện thống kê (**): Sự khác biệt được coi là có ý nghĩa thống kê ở mức 1% Trong cùng một cột, các ký tự giống nhau cho thấy sự khác biệt không có ý nghĩa ở mức 5% theo phương pháp LSD.
Khả năng đẻ trứng của ong cái chịu ảnh hưởng bởi tuổi thọ sau khi vũ hóa và mật độ vật chủ cũng như mật độ ong cái tham gia vào quá trình đẻ trứng Điều này được giải thích qua phản ứng số lượng của ong ký sinh (Khuất Đăng Long, 2011).
Mật số ong ký sinh trưởng thành ảnh hưởng đáng kể đến khả năng ký sinh vào trứng vật chủ Khi mật độ ong trưởng thành tăng lên 3 con trên 30 trứng sđt bưởi (tỷ lệ 1:10), tỷ lệ ký sinh đạt cao nhất là 89,33% Tuy nhiên, khi tăng lên 4 con trên 30 trứng, tỷ lệ ký sinh giảm xuống còn 62,00% Kết quả cho thấy, trong điều kiện thí nghiệm, mật độ 3 con ong trưởng thành là tối ưu để ký sinh trên 30 trứng sđt bưởi Theo nghiên
Ong cái cần đủ thời gian để trứng chín trong buồng trứng, và trong khoảng thời gian này, quá trình nhiễm ký sinh ở trứng vật chủ do ong cái khác đảm nhiệm Khi mật độ trứng vật chủ ổn định, sự gia tăng mật độ ong cái ký sinh dẫn đến số lượng trứng đẻ vào mỗi vật chủ tăng lên, tuy nhiên, số lượng trung bình trứng đẻ của mỗi ong cái lại giảm.
Hình 3.4: Trứng sâu đục trái bưởi
A: Trứng sâu đục trái bưởi chưa ký sinh
B: Trứng sâu đục trái bưởi bị ký sinh bởi ong Trichogrammatoidea cojuangcoi
KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ
Từ những kết quả thu đƣợc ở trên, đề tài có những kết luận sau:
Ngài gạo Corcyra cephalonica Stain là loài ăn tạp phổ biến trong kho lưu trữ lúa gạo Nghiên cứu cho thấy, trong điều kiện nuôi dưỡng trong phòng thí nghiệm, con đực có thời gian sống trung bình 15 ngày khi ăn tấm gạo và bột đậu phộng, trong khi con cái sống lâu nhất 10 ngày với cùng loại thức ăn Đặc biệt, con cái đạt trọng lượng 29,08 mg và sản lượng trứng 330 trứng khi được cho ăn hỗn hợp tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột, cao hơn so với các công thức thức ăn khác Do đó, hỗn hợp thức ăn này là lựa chọn tối ưu cho việc sản xuất trứng ngài gạo Corcyra cephalonica Stain.
Theo nghiên cứu của Doutt, R L và G Viggiani (1968), loài ong ký sinh trứng của sâu đục trái bưởi Citripestis sagittiferella Moore đã được xác định là Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja thuộc họ Hymenoptera: Trichogrammatidae.
Ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja thể hiện khả năng ký sinh cao hơn khi trứng Corcyra cephalonica Stain được xử lý bằng tia cực tím, với tỷ lệ ký sinh đạt 82,10%, so với chỉ 67,60% khi không sử dụng tia cực tím.
Thành trùng ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja có thời gian sống tối đa 6,1 ngày khi được cho ăn mật ong nồng độ 50%, trong khi không được cho ăn chỉ sống được 1,95 ngày Khi mật số ong ký sinh là 3 con cái trên 30 trứng sâu đục trái bưởi (tỷ lệ 1:10), tỷ lệ ký sinh đạt cao nhất là 89,33%.
Nghiên cứu đặc điểm sinh học và vòng đời của ong ký sinh
Nghiên cứu nhân nuôi hàng loạt loài Corcyra cephalonica Stain nhằm sản xuất số lượng lớn ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja Các ong ký sinh này sẽ được phóng thích ra môi trường tự nhiên để đánh giá hiệu quả trong việc phòng trừ sâu đục trái bưởi bằng biện pháp sinh học.
Tiếp tục nghiên cứu các biện pháp sinh học quản lý hiệu quả sâu đục trái bưởi
Citripestis sagittiferella Moore ngoài đồng
