Số liệu đƣợc thu thập và chuyển đổi bằng chƣơng trình Microsoft Excel 2010. Phân tích thống kê ANOVA và trắc nghiệm phân hạng theo phần mềm MSTATC.
23
Chƣơng 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1 Xác định mơi trƣờng nhân ni thích hợp ngài gạo, nguồn cung cấp trứng cho ong ký sinh bản địa.
Bảng 3.1 Ảnh hƣởng của các thức ăn khác nhau đến tỷ lệ nở, tỷ lệ hóa nhộng, tỷ lệ vũ
hóa và tỷ lệ ngài dị tật của ngài gạo Corcyra cephalonica Stain trong điều kiện phịng thí nghiệm
STT Nghiệm thức Chỉ tiêu theo dõi (%)
Tỷ lệ nở Tỷ lệ hóa nhộng Tỷ lệ vũ hóa Tỷ lệ ngài dị tật 1 125 g tấm gạo 41,67 bcd 91,88 bc 93,08 bc 3,04
2 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo 45,67 bc 94,20 abc 99,29 a 3,98 3 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng 38,00 cde 92,96 abc 96,11 ab 1,99 4 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột
đậu phộng 57,33 a 97,11 a 95,23 abc 1,28
5 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột 36,33 de 93,41 abc 90,58 c 4,18 6 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột 40,67 bcde 95,07 ab 95,74 abc 1,80 7 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 32,33 e 90,47 c 94,53 abc 3,37 8 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột
đậu phộng + 5 g sữa bột 48,67 b 94,54 abc 98,60 a 2,18
CV (%) 8,23% 1,16% 1,43% 50,66
Mức ý nghĩa ** * * ns
Ghi chú: số liệu tỷ lệ hóa nhộng và tỷ lệ vũ hóa được chuyển sang căn bậc hai (x) để thống kê. Số liệu tỷ lệ ngài dị tật được chuyển sang căn bậc hai (x + 0,5) để thống kê. (**): khác biệt rất có ý nghĩa thống kê ở mức 1%; (*) khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức 5%; (ns) khác
24
biệt khơng có ý nghĩa thống kê. Trong cùng một cột các kí tự theo sau giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan.
Qua bảng 4.1 ta thấy tỷ lệ nở của sâu gạo Corcyra cephalonica Stain cao nhất ở thức ăn kết hợp tấm gạo, cám gạo và bột đậu phộng là 57,33%, thấp nhất ở thức ăn tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột là 32,33. Về tỷ lệ hóa nhộng đạt cao nhất là 97,11% ở thức ăn tấm gạo, cám gạo và bột đậu phộng và thấp nhất là 90,47% ở thức ăn tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột. Tỷ lệ vũ hóa cao nhất ở thức ăn tấm gạo và cám gạo đạt 99,29% và thấp nhất ở thức ăn tấm gạo và sữa bột đạt 90,58%.
Tỷ lệ ngài dị tật là khá thấp trên tất cả các thức ăn khác nhau và khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê, cho thấy rằng tỷ lệ dị tật không phải do thức ăn khơng thích hợp hay không đầy đủ chất dinh dƣỡng quyết định.
Tỷ lệ nở và tỷ lệ hóa nhộng có giá trị cao hơn ở thức ăn tấm, cám gạo và đậu phộng, giá trị thấp nhất ở thức ăn tấm gạo,bột đậu phộng và sữa bột. Đậu phộng là một loại ngũ cốc có hàm lƣợng dinh dƣỡng cao khi phối trộn với tấm gạo và cám gạo là môi trƣờng lý tƣởng cho ấu trùng Corcyra cephalonica Stain phát triển. Tuy nhiên trong q trình thí nghiệm do ảnh hƣởng mơi trƣờng thức ăn tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột bị vón cục làm quá trình phát triển của ấu trùng Corcyra cephalonica Stain khơng thuận lợi.
Tỷ lệ vũ hóa đạt khá cao trên môi trƣờng thức ăn tấm gạo và cám gạo gần 100%. Theo Nathan (2006) ghi nhận tỷ lệ vũ hóa 70,4 ở lúa mì, gạo và lúa miến 68 . Tƣơng tự Allotey và Azalekor (2000) tìm thấy 83,7% ngài xuất hiện trên đậu đũa và 67,5 trên đậu phộng. Có thể thấy tỷ lệ vũ hóa ở tấm gạo và cám gạo cao hơn các thức ăn khác do môi trƣờng quen thuộc và ổn định cho ngài phát triển.
25
Bảng 3.2 Ảnh hƣởng của thức ăn khác nhau đến tỷ lệ giới tính và thời gian chết của
con đực, con cái của Corcyra cephalonica Stain trong điều kiện phịng thí nghiệm.
STT Nghiệm thức Chỉ tiêu theo dõi
Tỷ lệ đực (%) Tỷ lệ cái (%) Tuổi thọ con đự (ngày) Tuổi thọ con cái (ngày) 1 125 g tấm gạo 54,79 45,21 13,00 abc 7,00 b 2 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo 53,04 46,96 9,67 c 7,67 b 3 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng 49,38 50,62 15,00 a 8,33 ab 4 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng 47,77 52,23 14,00 ab 8,67 ab 5 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột 46,03 53,97 12,33 abc 7,67 b 6 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột 41,97 58,03 10,67 bc 8,67 ab 7 125 g tấm gạo + 5 g bột
đậu phộng + 5 g sữa bột 53,04 46,96 11,00 abc 10,00 a 8 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 47,19 52,81 13,33 abc 7,76 b CV (%) 15,14% 14,64% 5,93% 5,38% Mức ý nghĩa ns ns ** *
Ghi chú: số liệu tuổi thọ con đực và con cái được chuyển sang căn bậc hai (x + 0,5) để thống kê. (**): khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%; (*): khác biệt có ý nghĩa ở mức 5%; (ns): khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê.Trong cùng một cột các kí tự theo sau giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan.
Về tuổi thọ bảng 4.2 cho thấy con đực sống lâu hơn con cái, con đực sống ở thức ăn tấm gạo và đậu phộng có tuổi thọ dài nhất 15 ngày và tuổi thọ ngắn nhất trên tấm gạo, cám gạo, trong khi đó con cái tuổi thọ cao nhất 10 ngày trên tấm gạo, bột đậu phộng và sữa bột và thấp nhất từ 7 đến 7,76 ngày trên gạo và tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột tƣơng ứng. Bhandari (2014) cho rằng tuổi thọ con đực 14,08 ngày trên lúa mì và đậu phộng, 12 ngày ở bắp. Allotey (1986) quan sát thấy tuổi thọ con đực13,4 ngày và con cái 8,5 ngày trên đậu phộng.
26
Tỷ lệ giới tính gần bằng 1:1 và khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê. Kết quả này cũng tƣơng tự nhƣ Kamel và Hasanein (1967), Cox (1981) và Etman (1988) thu đƣợc tỷ lệ gần 1:1 cho thấy tỷ lệ đực, cái không ảnh hƣởng đến nguồn thức ăn.
Bảng 3.3 Trọng lƣợng và tổng số trứng của ngài gạo Corcyra cephalonica Stain ở các
thức ăn khác nhau trong điều kiện phịng thí nghiệm.
STT Nghiệm thức Chỉ tiêu theo dõi
Trọng lƣợng con đực (mg) Trọng lƣợng con cái (mg) Tổng số trứng (trứng) 1 125 g tấm gạo 10,09 c 16,61 c 146,00 c 2 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo 13,54 ab 23,92 b 255,00 ab 3 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng 12,91 ab 22,05 b 218,00 abc 4 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng 14,19 a 26,26 ab 260,00 ab 5 125 g tấm gạo + 5 g sữa bột 10,21 bc 17,79 c 230,00 abc 6 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g sữa bột 13,20 ab 25,71 ab 296,00 ab 7 125 g tấm gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 13,25 ab 25,06 ab 195,00 bc 8 75 g tấm gạo + 50 g cám gạo + 5 g bột đậu phộng + 5 g sữa bột 13,47 ab 29,08 a 330,00 a CV (%) 7,85% 7,51% 12,33% Mức ý nghĩa ** ** *
Ghi chú: số liệu tổng số trứng được chuyển sang căn bậc hai (x) để thống kê. (**): khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%, (*): khác biệt có ý nghĩa ở mức 5%. Trong cùng một cột các kí tự theo sau giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan.
Qua bảng trên ta thấy trọng lƣợng con cái nặng hơn so với con đực, cân nặng con cái ở thức ăn tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột đạt cao nhất 29,08 mg, thấp nhất 16,61 mg trên gạo và 17,79 mg trên tấm gạo và sữa bột. Trong khi đó con đực nặng nhất là 14,19 mg ở thức ăn tấm gạo, cám gạo và bột đậu phộng và thấp nhất ở chế độ ăn là gạo đạt 10,09 mg.
Kết quả này cao hơn so với Cox (1981) cho rằng trọng lƣợng của Corcyra cephalonica Stain là 12,9 mg và 24,6 mg cho con đực và con cái tƣơng ứng. Tƣơng tự
27
Mbata (1989) tìm thấy cân nặng con đực là 12,7 mg và con cái là 22,4 mg. Trọng lƣợng phụ thuộc nhiều vào thức ăn và thành phần dinh dƣỡng có trong thức ăn.
Khả năng đẻ trứng của con cái đạt cao nhất 330.00 trứng trên tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột và thấp nhất trên gạo với 146.00 trứng. Theo Aswini Kumar (2000) tìm thấy số lƣợng trứng đạt 321 trứng ở bắp, 285 trứng ở lúa mì và 226 trứng ở gạo. Allotey (1985) nghiên cứu thì con cái đẻ đƣợc 154 trứng trên bắp và 210 trứng trên đậu phộng. Qua đó ta thấy khả năng đẻ trứng khác nhau ở các thức ăn khác nhau và tƣơng quan với trọng lƣợng cơ thể con cái.
Biểu đồ 3.1 Biểu đồ thể hiện sự tƣơng quan giữa trọng lƣợng con cái và khả năng đẻ
trứng của con cái.
Qua biểu đồ 2 ta thấy trọng lƣợng con cái có mối tƣơng quan với thức ăn cũng nhƣ tƣơng quan với sức sinh sản trung bình của con cái. Cả trọng lƣợng con cái và số lƣợng trứng đẻ ra ở con cái đều cao nhất ở thức ăn tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột và thấp nhất trên gạo. Khi trọng lƣợng con cái nặng thì khả năng sinh sản càng cao và ngƣợc lại. Thức ăn bổ sung thêm đậu phộng và sữa bột thì khả năng sinh sản cao nhất do phong phú về thành phần dinh dƣỡng. Theo Bhandari và Regmi (2014) 88 của sự thay đổi trong khả năng sinh sản phụ thuộc vào trọng lƣợng cơ thể con cái. 0 5 10 15 20 25 30 35 0 50 100 150 200 250 300 350 1 2 3 4 5 6 7 8 T rọng lƣợng c on c ái S ố lƣợng trứ ng Nghiệm thức Số lƣợng trứng (trứng) Trọng lƣợng con cái (mg)
28
Tóm lại, để ngài gạo Corcyra cephalonica Stain phát triển ổn định, trọng lƣợng con cái cao và khả năng đẻ trứng nhiều thì lựa chọn thức ăn kết hợp giữa tấm gạo, cám gạo, bột đậu phộng và sữa bột để nhân nuôi.
3.2 Xác định loài ong ký sinh trứng sâu đục trái bƣởi Citripestis sagittiferella Moore Moore
Qua kết quả thu mẫu ở một số khu vực và định danh thì chỉ có một lồi ong ký sinh trứng sâu đục trái bƣởi Citripestis sagittiferella Moore là Trichogrammatoidea
cojuangcoi Nagaraja.
3.2.1 Khóa phân loại đến giống Trichogrammatoidea
1’ Bề rộng của mặt lƣng và bụng bằng nhau, khơng có phần nào lớn hơn ........... 3 3’ Cánh trƣớc không quá dài và hẹp, thông thƣờng mở rộng ở phần cuối cánh .. 5 5’ Phần roi của râu đầu thành trùng cái nhiều hơn 3 đốt....................................... 9 9’ Phần phình to ở cuối của roi râu của thành trùng cái ít hơn 5 đốt: ............... 19 19’ Rìa gân cánh trùng với viền trƣớc của cánh trƣớc đối với thành trùng cái.... 23 23’ Đĩa cánh trƣớc không quá ngắn hay nhiều lông cứng nhỏ mà thƣa thớt, gần
nhƣ khơng có hoặc nếu có thì thành từng hàng hoặc theo những đƣờng gân cánh, nếu khơng theo hàng thì thƣờng khơng q nhiều và ngắn ................ 38 38 Phần phình to ở cuối của roi râu của thành trùng có 1 đốt; đoạn giữa cuống
râu và phần phình to ở cuối của roi râu có 2 đốt .......................................... 39 39’ Các đốt của đoạn giữa cuống râu và phần phình to ở cuối của roi râu tách
rời nhau, có khớp, khơng có các lơng gai to và mập .................................... 40 40 Đƣờng viền gân cánh cong và cách xa đƣờng viền trƣớc của cánh trƣớc, kéo
dài, gân cánh phía sau sƣờn cánh thì sắc ...................................................... 41 41’ Gân cánh RS1 khơng có; phần cuối roi của râu thành trùng đực 3 đốt; gân
29
3.2.2 Khóa phân loại đến lồi Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
1 Phần gốc ở cánh trƣớc với màu đen sẫm rõ; lơng ở rìa cánh dài trung bình; mảnh hình tam giác trên đốt ngực giữa, mảnh trên lƣng của đốt ngực sau và chân không phải màu nâu sáng .......................................................................... 2 2 Đốt chậu của chân giữa và sau có màu vàng hơi nâu; cấu tạo phiến nơi đầu
trong và ngoài của bộ phận sinh dục ngoài của thành trùng đực hơi thon nhọn; đốt bụng giữa của thành trùng cái màu hơi đen ......................................... ........................................................ Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
3.2.3 Đặc điểm hình thái của ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja Nagaraja
Thành trùng đực: Chiều dài cơ thể 0,70 mm, chiều rộng cơ thể 0,25 mm. Đầu, mảnh hình tam giác trên đốt ngực giữa, đốt sau của bụng và chân có màu vàng son; đốt trƣớc của bụng có màu hơi đen; lơng cứng trên râu dài trung bình; đốt chậu ở chân giữa và sau màu vàng hơi nâu; đốt đùi ở chân giữa và sau màu vàng đục; cấu tạo phiến nơi đầu trong và ngoài của bộ phận sinh dục ngoài của thành trùng đực hơi thon nhọn.
Thành trùng cái: Chiều dài cơ thể 0,85 mm, chiều rộng cơ thể 0,28 mm. Mảnh hình tam giác trên đốt ngực giữa; đốt ngực sau; đốt bụng sau và chân màu vàng. Phần phình to ở cuối roi râu ngắn hơn phần chân râu. Cánh trƣớc khơng có gân RS1. Rìa cánh trƣớc có lơng dài trung bình, dài nhất là ở nơi mép sau cánh trƣớc. Rìa cánh sau cũng có lơng và hơi dài hơn so với lơng ở rìa cánh trƣớc. Cơ quan đẻ trứng dài bằng với đốt chày chân sau.
Từ các đặc điểm trên, cho thấy loài ong ký sinh trứng của sâu đục trái bƣởi
Citripestis sagittiferella đƣợc định danh là loài Trichogrammatoidea cojuangcoi
Nagaraja (Hymenoptera: Trichogrammatidae). Lim (1983) đã ghi nhận loài ong ký sinh này trên trên trứng của sâu đục quả ca cao Conopomorpha cramerella Snellen ở
Sabah, Malaysia vào năm 1983. Thời điểm đấy ơng định danh là lồi
Trichogrammatoidea bactrae fumata Nagaraja. Nhƣng 3 năm sau đó Nagaraja định
danh lại là loài Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja (Nagaraja, 1985). Từ đó, có rất nhiều nghiên cứu sử dụng loài ong ký sinh này để nghiên cứu đánh giá hiệu quả
30
phòng trừ sâu đục quả ca cao trong điều kiện phịng thí nghiệm cũng nhƣ ngồi đồng ruộng (Lim và Chong, 1987; Lee và ctv, 1995). Kết quả cho thấy, ban đầu thì việc phịng trừ lồi sâu này thì chậm nhƣng về sau cho thấy kết quả rất tốt.
Theo Melanie (1988) thì Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja là lồi ong ký sinh trứng đƣợc sử dụng trong phòng trừ sinh học có hiệu quả rất cao và đƣợc sản xuất để phóng thích ra đồng ruộng phòng trừ sâu đục quả ca cao Conopomorpha cramerella Snellen ở Davea del Sur, Philippine bởi phịng thí nghiệm Phịng trừ sinh
học Cacao Investors Incorporated (CII).
Ở Việt Nam thì theo Đặng Văn Mạnh và ctv (2004) thì ong mắt đỏ (Trichogramma sp.) đƣợc nghiên cứu qui trình nhân ni sau đó thả ra đồng để phịng trừ sâu đục thân trên cây mía, bắp ở Phú Yên.
Hình 3.1: Cánh trƣớc ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
A: Cánh trƣớc ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja theo khóa phân loại Doutt và Viggiani (1968)
B: Cánh trƣớc ong cái Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja quan sát dƣới kính hiển vi với độ phóng đại 40 x 10.
31
3.3 Ảnh hƣởng tia UV đến khả năng ký sinh trên trứng ngài gạo của ong ký sinh
Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
Bảng 3.4 Ảnh hƣởng của tia cực tím (tia UV) đến khả năng ký sinh trên trứng ngài
gạo của ong ký sinh Trichogrammatoidea cojuangcoi Nagaraja
STT Nghiệm thức
Chỉ tiêu theo dõi (%) Tỷ lệ ký sinh (TB ± SD) Tỷ lệ vũ hóa (TB ± SD) Tỷ lệ đực (TB ± SD) Tỷ lệ cái (TB ± SD) 1 Có xử lý UV 82,10 ± 4,84 94,19 ± 3,23 20,56 ± 5,00 79,44 ± 5,00 2 Không xử lý UV 67,60 ± 4,14 90,54 ± 3,16 24,55 ± 4,84 75,45 ± 4,84 Mức ý nghĩa ** ** * *
Ghi chú: TB: trung bình, SD: độ lệch chuẩn. Số được chuyển sang căn bậc hai (x) trƣớc khi
so sánh T-test. (**): khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1%; (*): khác biệt có ý nghĩa ở mức
5%.Trong cùng một cột các kí tự theo sau giống nhau thì khác biệt khơng có ý nghĩa ở mức 5% theo Ducan.
Qua bảng trên ta thấy khi trứng Corcyra cephalonica Stain khơng xử lý UV thì tỷ lệ ký sinh và tỷ lệ vũ hóa thấp hơn so với có xử lý UV, tỷ lệ ong trƣởng thành cái cũng cao hơn. Việc sử dụng tia cực tím (UV) để làm giảm sự phát triển phôi thai của trứng Corcyra cephalonica Stain. Theo Goldstein (1983) chùm tia cực tím làm giảm sự phát triển phơi có nghĩa là q trình tổng hợp protein trong trứng vật chủ Corcyra