1. Trang chủ
  2. » Giáo Dục - Đào Tạo

(LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var makapuno) ở tỉnh trà vinh

182 20 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Tiêu đề Cải Thiện Kỹ Thuật Nhân Giống Từ Phôi Và Biện Pháp Nâng Cao Tỷ Lệ Sáp Trên Dừa Sáp (Cocos Nucifera Var. Makapuno) Ở Tỉnh Trà Vinh
Tác giả Võ Minh Hải
Người hướng dẫn PGS. TS. Nguyễn Bảo Toàn, PGS. TS. Lê Vĩnh Thúc
Trường học Trường Đại Học Cần Thơ
Chuyên ngành Khoa Học Cây Trồng
Thể loại luận án tiến sĩ
Năm xuất bản 2022
Thành phố Cần Thơ
Định dạng
Số trang 182
Dung lượng 2,06 MB

Cấu trúc

  • CHƯƠNG 1 (18)
    • 1.1 Tính cấp thiết của luận án (18)
    • 1.2 Câu hỏi nghiên cứu (19)
    • 1.3 Mục tiêu (20)
    • 1.4 Kết quả mong đợi (20)
    • 1.5 Nội dung nghiên cứu (20)
      • 1.5.1 Nội dung 1: Cải thiện kỹ thuật nhân giống dừa sáp từ phôi (20)
      • 1.5.2 Nội dung 2: Xác định các biện pháp để nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh (20)
      • 1.5.3 Nộng dung 3: Hiệu quả kinh tế và đánh giá tỷ lệ trái sáp/buồng (quày) các yếu tố tác ảnh hưởng tỷ lệ sáp ở tỉnh Trà Vinh (21)
    • 1.6 Phạm vi nghiên cứu (21)
    • 1.7 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của luận án (22)
    • 1.8 Những đóng góp mới của luận án (22)
    • 2.1 Tổng quan địa bàn nghiên cứu (23)
      • 2.1.1 Vị trí địa lý (23)
      • 2.1.2 Địa hình (23)
      • 2.1.3 Sông ngòi (23)
      • 2.1.4 Khí hậu (24)
      • 2.1.5 Tài nguyên thiên nhiên (24)
    • 2.2 Tổng quan về dừa sáp (24)
      • 2.2.1 Khái niệm dừa sáp (24)
      • 2.2.2 Phân loại (25)
      • 2.2.3 Nguồn gốc tại Trà Vinh (25)
      • 2.2.4 Đặc điểm sinh học của dừa sáp (26)
      • 2.2.5 Tổng quan về kỹ thuật nuôi cấy mô thực vật (35)
      • 2.2.6 Vai trò của chất điều hoà sinh trong nuôi cấy in-vitro (40)
    • 2.3 Nhân giống dừa sáp bằng phương pháp truyền thống và kỹ thuật nhân giống bằng phương pháp In-vitro trên thế giới và Việt Nam (41)
      • 2.3.1 Nhân giống trong bằng phương pháp truyền thống (41)
      • 2.3.2 Nhân giống bằng phương pháp in-vitro (42)
    • 2.4 Hiện trạng sản xuất và kỹ thuật nâng cao tỷ lệ trái sáp trên dừa sáp (45)
      • 2.4.1 Hiện trạng sản xuất (45)
      • 2.4.2 Năng suất (45)
      • 2.4.3 Giống (45)
      • 2.4.4 Phương pháp cải thiện tỷ lệ trái dừa sáp hiện nay trên thế giới và Việt Nam (47)
    • 2.5 Hiệu quả kinh tế và đánh giá hiện trạng các yếu tố tác ảnh hưởng tỷ lệ trái sáp trong sản xuất dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh (52)
      • 2.5.1 Giá trị dinh dưỡng của dừa sáp (0)
      • 2.5.2 Giá trị thương phẩm (54)
      • 2.5.3 Diện tích trồng dừa sáp trên thế giới và Việt Nam (54)
    • 3.1 Nội dung 1: Cải thiện kỹ thuật nhân giống dừa sáp từ phôi (57)
      • 3.1.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu (57)
      • 3.1.2 Phương tiện (57)
      • 3.1.3 Phương pháp nghiên cứu (61)
    • 3.2 Nội dung 2: Nghiên cứu các biện pháp kỹ thuật để nâng cao tỷ lệ trái sáp trên dừa sáp cấy phôi ở tỉnh Trà Vinh (67)
      • 3.2.1 Ảnh hưởng của acid boric lên sự nảy mầm của hạt phấn và khả năng đậu trái dừa sáp cấy phôi tại tỉnh Trà Vinh (67)
      • 3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của phân bón lên tăng trường, năng suất và chất lượng dừa sáp cấy phôi (69)
    • 3.3 Hiệu quả kinh tế và đánh giá hiện trạng các yếu tố ảnh hưởng tỷ lệ sáp trên dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh (75)
      • 3.3.1 Thời gian và địa điểm (75)
      • 3.3.2 Phương tiện (75)
    • 4.1 Cải thiện kỹ thuật nhân giống dừa sáp từ phôi (77)
      • 4.1.1 Giai đoạn nảy mầm (77)
      • 4.1.2 Giai đoạn tạo rễ (80)
      • 4.1.3 Giai đoạn cây con ngoài vườm ươm (85)
      • 4.1.4 Quy trình nhân giống phôi dừa sáp (92)
    • 4.2 Xác định các biện pháp để nâng cao tỷ lệ trái sáp trên dừa sáp cấy phôi ở tỉnh Trà Vinh (94)
      • 4.2.1 Ảnh hưởng của nồng độ acid boric lên tốc độ nảy mầm của hạt phấn dừa sáp cấy phôi (94)
      • 4.2.2 Không trùm kín phát hoa mới nở: ảnh hưởng của nồng độ và thời điểm phun (0)
      • 4.3.1 Hiệu quả kinh tế mô hình dừa sáp thường và dừa sáp cấy phôi (116)
      • 4.3.2 Chi phí và cơ cấu chi phí cơ bản của dừa sáp thường và dừa Sáp cấy phôi 92 (118)
      • 4.3.3 Phân tích hiệu quả kinh tế mô hình dừa sáp thường và dừa sáp cấy phôi (121)
      • 4.3.4 Các yếu tố ảnh hưởng đên tỷ lệ trái sáp và chất lượng cơm dừa sáp của dừa sáp thường và dừa sáp cấy phôi (123)
    • 5.1 Kết luận (127)
    • 5.2 Kiến nghị (127)
  • TÀI LIỆU THAM KHẢO (128)

Nội dung

Tính cấp thiết của luận án

Trà Vinh, một tỉnh ven biển thuộc Đồng bằng sông Cửu Long, nổi tiếng với nhiều loại cây ăn trái đặc sản, trong đó dừa sáp là một trong những sản phẩm đặc trưng nhất Dừa sáp không chỉ có hương vị thơm ngon mà còn mang đến giá trị kinh tế cao, gấp 10-20 lần so với dừa thông thường (Phạm Thị Phương Thúy và cộng sự, 2016) Đây là giống dừa đột biến tự nhiên, lần đầu tiên được phát hiện ở Trà Vinh, góp phần làm nổi bật danh tiếng của tỉnh này cả trong nước và quốc tế.

Nội nhũ dừa Sáp ở Philippines nổi bật với hàm lượng polysaccharide thủy phân cao gấp 30 lần so với dừa thường Khi phân tích thành phần, Galactomanan hòa tan trong cơm dừa sáp tăng từ 2-8 lần so với dừa thường Đặc biệt, cơm dừa sáp chứa 12 amino acid với sự thay đổi đáng kể, trong khi dừa thường chỉ có 2 amino acid Các amino acid thay đổi bao gồm: Arginine tăng 163%, threonine tăng 144%, phenylalanine tăng 140%, methionine tăng 130%, trong khi glutamic acid và alanine giảm lần lượt 59% và 57%.

Theo Santoso và cộng sự (1996), dừa sáp không chỉ có thể tiêu thụ trực tiếp mà còn được sử dụng để chế biến nhiều loại thực phẩm và hương liệu cho kem, bánh ngọt Nghiên cứu đã chiết xuất galactomanan từ dừa sáp, ứng dụng trong sản xuất sản phẩm “Mak gum”, một nguyên liệu quan trọng cho ngành chế biến thực phẩm (màng bao thực phẩm), dược phẩm (màng bao thuốc, gạc bao vết thương, thành phần trong gel agarose, polyacrylamide) và mỹ phẩm (Maria et al., 2003).

Dừa sáp chứa nhiều thành phần quý giá, mang lại giá trị cao cho ngành thực phẩm, dược phẩm và mỹ phẩm, đồng thời có giá bán cao, tạo ra lợi nhuận lớn cho nhà vườn Tuy nhiên, việc mở rộng diện tích trồng dừa sáp gặp nhiều khó khăn, đặc biệt về mặt di truyền Nghiên cứu của Zuniga (1953) cho thấy khi tiến hành thụ phấn nhân tạo, tỷ lệ thu được là 3 trái bình thường trên 1 trái sáp, chứng tỏ đặc tính trái sáp do một gen đơn lặn quy định Trái dừa từ cây dừa sáp tự thụ có 3 kiểu gen: 1 MMM (trái bình thường), 1 MMm và 1 Mmm (trái có biểu hiện bình thường), và 1 mmm (trái dừa sáp) Do trái dừa sáp là đồng hợp tử lặn, chúng không thể nảy mầm tự nhiên để tạo cây giống Vì vậy, phương pháp nhân giống truyền thống yêu cầu phải ươm trái bình thường trên cây dừa sáp, với tỷ lệ trái sáp từ 20-25% ở thế hệ tiếp theo.

Nghiên cứu nâng cao năng suất trái dừa sáp đang được nhiều nhà khoa học thực hiện, tập trung vào các giải pháp như nuôi cấy phôi, kỹ thuật canh tác và tăng tỷ lệ thụ phấn Nuôi cấy phôi, hay còn gọi là giải cứu phôi, là kỹ thuật trong ống nghiệm nhằm nâng cao tỷ lệ trái sáp đạt từ 80 đến 100%, nhưng tỷ lệ thành công chỉ đạt 45-50% với giá thành cao và số lượng cây giống hạn chế Các yếu tố như phôi nảy mầm yếu và cây có rễ phát triển kém ảnh hưởng đến tỷ lệ thành công Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng việc sử dụng chất kích thích sinh trưởng thực vật có thể cải thiện phát triển rễ và mầm Đối với kỹ thuật canh tác, nghiên cứu sẽ tập trung vào ảnh hưởng của liều lượng và loại phân bón đến năng suất và chất lượng trái dừa sáp, trong khi việc bón phân đúng cách có thể thúc đẩy sinh trưởng và cải thiện chất lượng trái Cuối cùng, để nâng cao tỷ lệ thụ phấn và đậu trái, nghiên cứu sẽ xem xét biện pháp trùm phát hoa và phun acid boric.

Dừa sáp lùn và dừa sáp lai là hai nhóm chính của dừa sáp Theo nghiên cứu của Hanson và Proebsling (1996), hoa dừa cần một lượng boron cao trong quá trình nở để hình thành trái Việc phun boron lên hoa được áp dụng phổ biến nhằm hỗ trợ quá trình thụ tinh, hình thành trái và phát triển trái trong giai đoạn đầu (Solar và Štampar, 2001).

Luận án “Cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (Cocos nucifera var Makapuno) ở tỉnh Trà Vinh” được thực hiện nhằm giải quyết các vấn đề liên quan đến kỹ thuật nhân giống và nâng cao chất lượng sản phẩm dừa sáp.

Câu hỏi nghiên cứu

- Nhân giống phôi dừa sáp để thành cây con còn bị hạn chế bởi những vấn đề gì: tỷ lệ nảy mầm? tỷ lệ sống của cây con?

- Kỹ thuật canh tác có ảnh hưởng đến năng suất, tỷ lệ và chất lượng trái sáp trên dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh như thế nào?

- Hiệu quả kinh tế và các yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ trái sáp trên cây dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh?

Mục tiêu

- Nâng cao tỷ lệ thành công quy trình nhân giống dừa sáp bằng phương pháp nuôi cấy phôi.

- Nâng cao năng suất và tỷ lệ trái dừa sáp cấy phôi bằng kỹ thuật canh tác tại tỉnh Trà Vinh.

Đánh giá hiện trạng và xác định các yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ trái sáp là rất quan trọng trong việc so sánh lợi nhuận giữa mô hình dừa sáp thường và dừa sáp cấy phôi tại tỉnh Trà Vinh Nghiên cứu này giúp hiểu rõ hơn về hiệu quả kinh tế của từng mô hình, từ đó đưa ra những khuyến nghị phù hợp nhằm nâng cao sản xuất và tối ưu hóa lợi nhuận cho người trồng dừa trong khu vực.

Kết quả mong đợi

 Nâng tỷ lệ (phôi/cây con) thành công trong nhân giống dừa sáp cấy phôi so với hiện nay (hiện nay < 50%).

 Tìm ra giải pháp nâng cao năng suất, chất lượng và tỷ lệ sáp trên quày dừa sáp cấy phôi ở tỉnh Trà Vinh (hiện nay < 83,6%)

Nghiên cứu xác định nồng độ acid boric và áp dụng phương pháp trùm phát hoa nhằm nâng cao tỷ lệ đậu trái và chất lượng trái sáp trên cây dừa sáp cấy phôi tại tỉnh Trà Vinh.

Bài viết so sánh hiệu quả kinh tế giữa mô hình dừa sáp cấy phôi và dừa sáp thường tại tỉnh Trà Vinh, đồng thời xác định các yếu tố chính ảnh hưởng đến tỷ lệ sáp trên dừa sáp Nghiên cứu này nhằm cung cấp cái nhìn sâu sắc về lợi ích kinh tế của từng mô hình, từ đó giúp nông dân đưa ra quyết định phù hợp trong việc trồng trọt và phát triển cây dừa sáp.

Nội dung nghiên cứu

1.5.1 Nội dung 1: Cải thiện kỹ thuật nhân giống dừa sáp từ phôi

- Địa điểm: Phòng thí nghiệm Tế bào thực vật khoa Nông nghiệp Thủy sản Trường Đại học Trà Vinh.

Nghiên cứu này tập trung vào việc khảo sát ảnh hưởng của tuổi trái, kiểu trái, nồng độ các chất điều hòa sinh trưởng, giá thể, cũng như điều kiện ánh sáng và ẩm độ đến kỹ thuật nhân giống bằng phôi dừa Sáp Các yếu tố này đóng vai trò quan trọng trong việc tối ưu hóa quy trình nhân giống, từ đó nâng cao hiệu quả sản xuất dừa Sáp.

1.5.2 Nội dung 2: Xác định các biện pháp để nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh

- Địa điểm: Vườn dừa sáp cấy phôi 5 năm tuổi (2018) tại xã Lương Hòa huyện Châu Thành tỉnh Trà Vinh.

Vườn nghiên cứu được mô tả là khu vực trồng dừa sáp cấy phôi tập trung, không có dừa thường, với diện tích 2 hecta Phía Đông giáp lộ nông thôn và gần các cây dừa thường của các hộ nông dân khác, cách khoảng 10 mét.

Vườn dừa sáp cấy phôi đầu tiên và lớn nhất nằm ở phía Bắc, Nam và Tây giáp với ruộng lúa, tạo điều kiện lý tưởng cho nghiên cứu này.

Nghiên cứu này tập trung vào việc phân tích ảnh hưởng của kỹ thuật trùm kín phát hoa mới nở kết hợp với phun axit boric, cũng như tác động của hàm lượng và thời gian bón phân đến tỷ lệ sáp dừa sáp cấy phôi Kết quả sẽ cung cấp thông tin quan trọng cho việc tối ưu hóa quy trình sản xuất dừa sáp, góp phần nâng cao hiệu quả kinh tế trong ngành nông nghiệp.

Phân bón cho cây dừa cần tuân thủ hàm lượng theo khuyến cáo của Hiệp Hội Dừa Bến Tre (2013), dựa trên độ tuổi của cây và loại đất, đặc biệt là vùng đất cát và cát pha.

Bảng 1.1: Lượng phân bón khuyến cáo cho dừa theo tuổi cây

Nguồn: Hiệp Hội Dừa Bến Tre (2013)

1.5.3 Nộng dung 3: Hiệu quả kinh tế và đánh giá tỷ lệ trái sáp/buồng (quày) các yếu tố tác ảnh hưởng tỷ lệ sáp ở tỉnh Trà Vinh

- Địa điểm: Huyện Cầu Kè tỉnh Trà Vinh

- Đối tượng nghiên cứu: Các yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ sáp/quày

Nghiên cứu về dừa sáp thường được thực hiện tại huyện Cầu Kè, Trà Vinh, nơi có diện tích trồng dừa sáp thường lên tới 225 ha (theo Phòng Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn huyện Cầu Kè, 2017) Bên cạnh đó, thông tin về dừa sáp cấy phôi được cung cấp bởi Phạm Thị Phương Thúy.

(2018), dừa sáp cấy phôi đã được trồng ở Trà Vinh từ năm 2008.

Phạm vi nghiên cứu

Nghiên cứu quy trình nhân giống dừa sáp từ giai đoạn phôi đến giai đoạn tạo rễ nhằm nâng cao tỷ lệ thành công và giải quyết tình trạng thiếu hụt nguồn giống dừa sáp cấy phôi tại Việt Nam Mục tiêu là phát triển quy trình trồng thâm canh cây dừa sáp cấy phôi theo hướng bền vững, từ đó gia tăng giá trị kinh tế trên cùng một đơn vị diện tích, tạo nền tảng cho việc xây dựng vùng nguyên liệu dừa sáp chất lượng cao.

Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của luận án

Luận án trình bày thông số kỹ thuật chi tiết về quy trình sản xuất cây giống dừa sáp cấy phôi, cùng với số liệu về sinh trưởng, năng suất và chất lượng trái của dừa sáp cấy phôi ở độ tuổi 5 năm.

Các yếu tố ảnh hưởng đến tỷ lệ và chất lượng trái dừa sáp bao gồm điều kiện khí hậu, chất lượng đất và kỹ thuật canh tác Nghiên cứu cũng chỉ ra rằng mô hình dừa sáp thường và dừa sáp cấy phôi có sự khác biệt rõ rệt về lợi nhuận Trong khi dừa sáp thường mang lại lợi nhuận ổn định, dừa sáp cấy phôi có tiềm năng sinh lợi cao hơn nhưng đòi hỏi kỹ thuật chăm sóc chuyên sâu hơn Việc so sánh lợi nhuận giữa hai mô hình này sẽ giúp nông dân lựa chọn phương pháp canh tác phù hợp để tối ưu hóa hiệu quả kinh tế.

Kết quả của luận án sẽ cung cấp cơ sở khoa học cho việc ứng dụng quy trình và kỹ thuật canh tác giống dừa sáp cấy phôi, đồng thời có tính ứng dụng cao trong sản xuất ngành dừa sáp tại tỉnh Trà Vinh Nghiên cứu cũng đưa ra khuyến nghị cho khu vực Đồng bằng Sông Cửu Long.

Những đóng góp mới của luận án

Nghiên cứu này tập trung vào việc khắc phục các trở ngại trong quy trình nhân giống cây trồng, bao gồm vấn đề phôi bất thường không nảy mầm, hệ thống rễ phát triển kém ảnh hưởng đến tỷ lệ sống khi chuyển cây ra môi trường tự dưỡng, cùng với giá thể và kỹ thuật chăm sóc sau khi chuyển cây Kết quả nghiên cứu đã nâng tỷ lệ thành công của kỹ thuật nhân giống từ 45% lên trên 55% (hơn 55 cây xuất vườn trên 100 phôi) và rút ngắn thời gian sản xuất cây giống từ trên 24 tháng xuống còn dưới 14 tháng.

Dừa sáp cấy phôi đã được trồng ở Việt Nam từ năm 2012, nhưng kỹ thuật bón phân cho loại cây này vẫn chưa được nghiên cứu đầy đủ và chưa có quy trình khuyến cáo nào Nghiên cứu cho thấy bón phân cho cây dừa sáp cấy phôi mỗi tháng một lần mang lại hiệu quả cao nhất Tuy nhiên, biện pháp trùm phát hoa kết hợp với phun acid boric vẫn chưa cho thấy kết quả rõ ràng trong việc nâng cao tỷ lệ đậu trái và trái sáp trên mô hình trồng dừa sáp cấy phôi.

Nghiên cứu chỉ ra rằng lợi nhuận từ mô hình dừa sáp phôi cao gấp 3,9 lần so với dừa sáp thông thường Tỷ lệ trái sáp/quày chịu ảnh hưởng từ nhiều yếu tố như mùa nắng và phương pháp trồng chuyên canh, tuy nhiên, giống dừa sáp là yếu tố quyết định chính đến tính sáp của sản phẩm.

Dừa sáp đạt chất lượng tốt nhất khi trái có độ tuổi 11 tháng Chất lượng của dừa sáp phụ thuộc vào nhiều yếu tố, bao gồm mùa nắng, giống dừa, việc bón phân hữu cơ và độ tuổi của trái.

Tổng quan địa bàn nghiên cứu

Trà Vinh là một tỉnh ven biển ở đồng bằng sông Cửu Long, miền Nam Việt Nam.

Thành phố Trà Vinh, tỉnh lỵ của tỉnh Trà Vinh, tọa lạc trên Quốc lộ 53, cách Thành phố Hồ Chí Minh 130 km và Thành phố Cần Thơ 100 km Quyết định thành lập thành phố Trà Vinh được thực hiện dựa trên toàn bộ diện tích tự nhiên, dân số và các đơn vị hành chính trực thuộc của thị xã Trà Vinh.

Trà Vinh là một tỉnh thuộc đồng bằng sông Cửu Long; vị trí địa lý giới hạn từ 9°31'46" đến 10°4'5" vĩ độ Bắc và từ 105°57'16" đến 106°36'04" kinh độ Đông.

Diện tích tự nhiên của khu vực là 2.341 km², được bao quanh bởi sông Tiền và sông Hậu, cùng với hai cửa sông Cung Hầu và Định An, tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển giao thông đường thủy (DGAA, 2018).

Trà Vinh là một tỉnh ven biển thuộc đồng bằng sông Cửu Long, nằm ở phía Đông giáp Biển Đông, phía Tây giáp Vĩnh Long, phía Nam giáp Sóc Trăng và phía Bắc giáp tỉnh Bến Tre, với tổng chiều dài bờ biển lên tới 65 km (DGAA, 2018) Tỉnh có một đơn vị hành chính cấp thành phố là thành phố Trà Vinh và bảy huyện trực thuộc, bao gồm các huyện Càng Long, Tiểu Cần, Cầu Kè, Trà Cú, Châu Thành, Cầu Ngang và Duyên Hải (DGAA, 2018).

Trà Vinh, nằm ở cuối cù lao giữa sông Tiền và sông Hậu, có địa hình chủ yếu là đất bằng phẳng với độ cao khoảng 1m so với mực nước biển Khu vực đồng bằng ven biển này nổi bật với các giồng cát chạy dài theo hình vòng cung, song song với bờ biển, và càng ra xa biển, các giồng này càng cao và rộng lớn hơn.

Địa hình tỉnh Trà Vinh phức tạp do sự chia cắt bởi các giồng và hệ thống trục lộ, kinh rạch chằng chịt Vùng trũng và giồng cao xen kẽ, với độ dốc chỉ rõ trên từng cánh đồng Phía nam tỉnh là vùng đất thấp, bị chia cắt bởi các giống cát hình cánh cung, tạo thành nhiều vùng trũng cục bộ Nhiều khu vực chỉ ở độ cao 0,5-0,8 m, thường xuyên bị ngập mặn từ 0,4-0,8 m trong thời gian 3-5 tháng mỗi năm (Chi cục thống kê Tỉnh Trà Vinh, 2018).

Trà Vinh có hệ thống sông phong phú với tổng chiều dài 578 km, nổi bật với hai dòng sông lớn là sông Hậu và sông Cổ Chiên Các sông ngòi, kênh rạch trong khu vực này hợp lưu và đổ ra biển qua hai cửa sông chính: cửa Cổ Chiên (còn gọi là cửa Cung Hầu) và cửa Định An.

Tỉnh Trà Vinh, nằm trong vùng đồng bằng sông Cửu Long, sở hữu điều kiện khí hậu thuận lợi với ánh sáng bức xạ dồi dào, nhiệt độ trung bình từ 26-27°C và độ ẩm cao 80-85%/năm Tuy nhiên, vùng khí hậu ven biển cũng gặp một số hạn chế như gió chướng mạnh, bốc hơi cao và lượng mưa không đều Trà Vinh ít bị ảnh hưởng bởi bão và lũ, với mùa mưa kéo dài từ tháng 5 đến tháng 11 và mùa khô từ tháng 12 đến tháng 4 năm sau Lượng mưa trung bình hàng năm đạt từ 1.400-1.600 mm, tạo điều kiện thuận lợi cho sản xuất, kinh doanh và phát triển du lịch.

Tỉnh có tổng diện tích đất là 234.115 ha, bao gồm 185.868 ha đất nông nghiệp, 6.745 ha đất lâm nghiệp, 12.880 ha đất chuyên dùng, 3.845 ha đất ở nông thôn, 566 ha đất ở thành thị và 900 ha đất chưa sử dụng, trong đó đất cát giồng chiếm 6,62%.

(Chi cục thống kê Tỉnh Trà Vinh, 2018).

Tổng quan về dừa sáp

Dừa sáp, hay còn gọi là dừa đặc ruột, dừa kem, và makapuno (Philippines), là một phân loài dừa nổi bật với trái đặc ruột và cơm dừa dày, mềm dẻo, béo ngậy hơn so với dừa thông thường Nước dừa của loại dừa này có độ đặc và trong suốt như sương sa Đặc sản này chỉ có tại Trà Vinh, Việt Nam, với diện tích trồng chủ yếu tập trung ở huyện Cầu Kè, tỉnh Trà Vinh.

Freemond et al (1966) đã phân loại dừa bình thường thành ba nhóm chính: cao, lùn và lai/trung gian (var Aurantiaca) Dừa sáp thường xuất hiện ở nhóm dừa cao và dừa lùn, nhưng cũng có trường hợp dừa sáp được phát hiện ở các loài lai tại một số địa điểm như Pati, Trung Java và Jember, Đông Java.

Hình 2.2: Cây dừa sáp cấy phôi

2.2.3 Nguồn gốc tại Trà Vinh

Dừa sáp, hay còn gọi là Makapuno, có nguồn gốc từ Philippines và là kết quả của một đột biến gen trong giống dừa cao Laguna Tại Việt Nam, dừa sáp được cho là bắt nguồn từ Campuchia, được một vị Sư Kh’mer tên Thạch Sô mang về trồng tại chùa Chợ ở xã Hòa Tân, huyện Cầu Kè vào năm 1942 Sự kết hợp giữa đột biến gen và điều kiện thổ nhưỡng, khí hậu tại Cầu Kè đã tạo ra những trái dừa sáp đặc biệt, trở thành đặc sản nổi tiếng của Trà Vinh.

2.2.4 Đặc điểm sinh học của dừa sáp

Rễ : Dừa sáp có rễ bất định sinh ra liên tục ở phần đáy gốc thân, không có rễ cọc.

Cây dừa con khi mới mọc có màu trắng, sau đó chuyển sang màu đỏ nâu Rễ của cây dừa không có rễ lông hút mà chỉ có những rễ nhỏ dinh dưỡng, hình thành trên rễ chính và hoạt động như rễ hô hấp để giúp cây trao đổi khí Tuy cây dừa chịu nước, nhưng nếu bị ngập nước liên tục sẽ ảnh hưởng đến khả năng hô hấp của bộ rễ, dẫn đến giảm sức tăng trưởng Rễ già sẽ chết trong khi rễ mới tiếp tục phát triển Trong tuần đầu tiên sau khi nảy mầm, cây dừa con sẽ mọc ra một rễ cấp 1 dài trung bình 5 cm, và sau mười ngày sẽ có thêm rễ thứ hai, với sự phát triển tiếp theo trong vòng sáu tuần.

3 rễ cấp 1, với chiều dài rễ dài nhất khoảng 20cm (Trương Quốc Ánh, 2012)

Hình 2.3: Rễ dừa sáp cấy phôi

Thân: Thân dừa sáp mọc thẳng, không phân nhánh, chiều cao trung bình từ 15-

Trong giai đoạn đầu sau khi trồng, cây dừa có thân ngắn và phát triển chậm, chỉ bắt đầu cao lên khi chiều ngang phát triển đầy đủ, thường kéo dài khoảng 4 năm tùy theo giống Do đó, thân dừa cao chỉ phát triển mạnh sau 4-5 năm Cấu trúc thân dừa không có tầng sinh mô thứ cấp, khiến cho những tổn thương trên thân không thể phục hồi, và đường kính thân cũng không tăng theo thời gian Việc quan sát một đoạn thân có thể giúp đánh giá tình hình sinh trưởng của cây trong giai đoạn này Thêm vào đó, thân cây phát triển từ đỉnh sinh trưởng (củ hủ), do đó khi bị đuông tấn công, cây sẽ dễ bị chết (Trương Quốc Ánh, 2012; Pradeepkumar et al.).

Hình 2.4: Thân cây dừa sáp cấy phôi

Cây dừa sáp trưởng thành có khoảng 30-35 tàu lá, mỗi tàu dài từ 5-6m Mỗi tàu lá gồm hai phần: phần cuống lá không có lá chét, lồi ở mặt dưới và phẳng ở mặt trên, để lại vết sẹo khi rụng, và phần mang lá chét với 90-120 lá chét mỗi bên, không đối xứng Cây dừa sinh trưởng liên tục, mỗi năm cho ra ít nhất 14-16 lá, với tốc độ ra lá nhanh hơn trong mùa khô Một tàu lá có tuổi thọ 5 năm, từ khi hình thành đến khi rụng Điều kiện tự nhiên ảnh hưởng đến tốc độ ra lá; nếu bất lợi, số lượng lá giảm nhưng không rút ngắn tuổi thọ của lá Cây được cung cấp đủ dinh dưỡng và nước sẽ cho nhiều lá hơn, có thể đạt 35-40 tàu.

Hình 2.5: Lấy chỉ tiêu số tàu lá cây dừa sáp cấy phôi

Hoa dừa thường phát triển từ mỗi nách lá, với số lượng phát hoa tương ứng với số lá có trên cây Tuy nhiên, trong giai đoạn 15-16 tháng trước khi hoa nở, phát hoa có thể bị thui do thiếu dinh dưỡng, khô hạn hoặc ngập úng, dẫn đến hiện tượng "mùa treo" ở dừa Hoa dừa là đơn tính, đồng chu, với trung bình 20-40 hoa cái trên mỗi phát hoa và mỗi phát hoa chứa từ 5-10 g phấn hoa Hoa đực có khoảng 272 triệu hạt phấn rất nhỏ, nhưng chỉ khoảng 40% trong số đó có khả năng thụ phấn Thời gian từ khi hoa cái đầu tiên nở đến khi hoa cái cuối cùng thụ phấn xong kéo dài từ 5-7 ngày, trong khi thời gian cho hoa đực là khoảng 18-22 ngày.

Theo Zuniga (1953), các đặc điểm kích thước và hình dạng của phát hoa, hoa đực và hoa cái của dừa sáp không khác biệt so với giống dừa cao Laguna Cả dừa sáp và dừa thường đều có hai kiểu thụ phấn: tự thụ phấn và thụ phấn chéo, trong đó ong là tác nhân chính cho quá trình thụ phấn chéo ở cây dừa.

Theo nghiên cứu của Trương Quốc Ánh (2012), trong giống dừa sáp, pha đực thường xuất hiện trước pha cái, dẫn đến sự lệch pha và thụ phấn chéo phổ biến Nghiên cứu của Trần Văn Hâu và Nguyễn Chí Linh (2011) cho thấy, thời gian ra hoa trung bình của pha đực là 18,6 ngày, trong khi pha cái chỉ là 5,2 ngày.

Hoa dừa chủ yếu được thụ phấn nhờ gió và côn trùng, trong đó ong mật đóng vai trò quan trọng nhất Việc nuôi ong trong vườn dừa có thể tăng đáng kể năng suất dừa.

Bảng 2.2 Đặc điểm sinh học của hoa dừa sáp Đặc điểm

Trung bình số hoa cái/ bông mo 21,8 15,3 13,1

Số ngày pha cái của bông mo thứ nhất (n) trùng với pha đực của bông mo số 2 (n + 1)

Nguồn: Nguyễn Thị Lệ Thủy, 2013

Hình 2.6: Hoa dừa sáp cấy phôi

Trái: Dừa thuộc loại trái hạch, nhân cứng Trái gồm có ba phần là ngoại trái bì

Vỏ dừa bao gồm ba phần chính: lớp cutin bên ngoài, trung trái bì (xơ dừa) và nội trái bì với gáo, nước và cơm dừa Vỏ dừa có độ dày từ 1-5 cm, trong đó phần cuống có thể dày đến 10 cm, với 30% là xơ dừa và 70% là bụi xơ dừa Bụi xơ dừa nổi bật với khả năng hút và giữ ẩm cao từ 400-600% so với thể tích của nó Gáo dừa có độ dày từ 3-6 mm và hình dạng khác nhau tùy theo giống Sau bốn tháng thụ phấn, gáo dừa bắt đầu hình thành và chuyển sang màu nâu khi được 8 tháng tuổi Nước dừa xuất hiện từ tháng thứ ba và đạt thể tích lớn nhất ở tháng thứ tám Cơm dừa hình thành sau 5 tháng, với lớp cơm sáp dày màu trắng ở những trái có sáp, bên trong chứa chất lỏng giống như nước cơm Cơm dừa non có vị ngọt và mềm, trong khi cơm dừa già cứng hơn; cơm dừa sáp thì mềm, dẻo và có mùi thơm đặc trưng.

Theo Trương Quốc Ánh (2012), việc phân biệt trái dừa sáp và trái dừa thường chỉ có thể thực hiện khi trái đã chín (≥ 11 tháng tuổi) bằng cách lắc trái Khi lắc trái chín, nếu nghe tiếng nước bên trong, trái dừa sáp sẽ phát ra âm thanh đục và nặng, trong khi trái dừa thường phát ra âm thanh róc rách và trong Tuy nhiên, phương pháp này có độ chính xác tương đối và phụ thuộc vào kinh nghiệm của người lắc, do đó ngay cả những người kinh doanh dừa sáp lâu năm cũng có thể nhầm lẫn nếu trái được thu hoạch sớm hoặc không đúng tuổi.

Năm 1931, Adriano và Manahan đã phân loại dừa sáp thành 3 kiểu tiêu biểu, giống với Dolores et al (1998) như sau:

Kiểu A: phần nước dừa hơi sền sệt, phần cơm dừa có cấu trúc giống như cơm nhão và độ dày của cơm dừa sáp kiểu A giống như dừa thường.

Kiểu B của dừa có phần nước dừa sệt và trắng trong, với cơm dừa dày hơn so với dừa thông thường Cơm dừa ở đây được chia thành hai lớp rõ rệt: lớp bên ngoài tiếp giáp với gáo dừa có cấu trúc giống như cơm nhão, trong khi lớp bên trong tiếp giáp với nước dừa lại bồng lên như bông.

Kiểu C: phần nước dừa hầu như không còn và nó được thay thế bằng cơm dừa đặc, xốp và có dầu

Theo nghiên cứu của Toan và Thanh (2011), dừa sáp ở Trà Vinh, Việt Nam có những đặc điểm tương tự như cây dừa bình thường, bao gồm lá, thân, chiều cao và kích thước trái.

Trái dừa sáp được phân loại thành ba kiểu hình trái (A, B và C) như sau:

Hình 2.7: Các kiểu dừa sáp (Toan and Thanh, 2011)

Nội nhũ của trái dừa có độ dày và độ mềm cao hơn so với dừa thông thường, với khoảng 50% khoang trống bên trong trái Điều đặc biệt là nội nhũ gần như chiếm trọn khoang trống của trái dừa, dẫn đến việc ít hoặc không còn nước bên trong.

- Kiểu A : Nội nhủ hơi dày và mềm hơn dừa bình thường

- Kiểu B: Nội nhũ chứa khoảng 50% khoang trống của trái và

- Kiểu C: Nội nhũ gần như chiếm hết khoang trống của trái, ít hoặc không có nước.

Nhân giống dừa sáp bằng phương pháp truyền thống và kỹ thuật nhân giống bằng phương pháp In-vitro trên thế giới và Việt Nam

2.3.1 Nhân giống trong bằng phương pháp truyền thống:

Việc chọn và sản xuất giống dừa hiện nay chủ yếu dựa vào phương pháp truyền thống, trong đó người dân chọn trái không sáp từ cùng một quày có trái sáp để ươm giống Phương pháp này cho phép tạo ra cây giống dừa chất lượng, được thực hiện trực tiếp bởi người nông dân.

Nhân giống dừa sáp chủ yếu từ trái dừa, được tuyển chọn từ những cây đầu dòng trên 10 năm tuổi, khỏe mạnh và không bị bệnh Cần chọn buồng dừa có nhiều trái, trái to và màu sắc đẹp, đặc biệt lưu ý chọn trái dừa nước Nếu chọn trái sáp, cần lưu ý rằng trái sẽ không nảy mầm.

Sau khi hái trái dừa, cần treo chúng lên dây để phơi khô Tiếp theo, vạt mặt trái dừa và xếp chúng xuống đất hoặc cho vào túi nylon chứa xơ dừa và phân chuồng Cuối cùng, đưa chúng vào vườn ươm để phát triển.

Làm giàn lưới để che bớt ánh sáng, ngày tưới 1 lần, mùa mưa không cần tưới.

Sau khoảng 35 ngày ươm trong vườn, trái dừa sẽ nảy mầm, và cần sử dụng phân bón lá để kích thích sự phát triển của lá và rễ Sau 25 ngày chăm sóc tiếp theo, khi cây dừa đạt chiều cao 50cm và rễ đã đâm ra khỏi vỏ dừa, cây đã sẵn sàng để chuyển giao Tại Việt Nam, phương pháp nhân giống dừa Sáp phổ biến bao gồm ươm trái và nuôi cấy phôi hữu tính Phương pháp ươm trái sử dụng trái không sáp từ cây dừa có trái sáp để tạo ra cây giống, tuy nhiên tỷ lệ trái sáp từ phương pháp này thường thấp hơn 25% (Võ Văn Long, 2007).

2.3.2 Nhân giống bằng phương pháp in-vitro 2.3.2.1 Nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy mô

Phôi soma là loại phôi được hình thành từ các bộ phận sinh trưởng của cây, có cùng đặc điểm với phôi hữu tính Tuy nhiên, điểm khác biệt là phôi soma không trải qua quá trình thụ tinh để hình thành.

Nghiên cứu gần đây chỉ ra rằng việc nhân giống vô tính cây dừa sử dụng các mẫu cấy khác nhau được thực hiện thông qua quá trình hình thành phôi vô tính, với môi trường cơ bản là Y3 và có hàm lượng cao 2,4-D (Perera et al., 2009b).

Theo Fernando and Gage (2000), cho thấy ảnh hưởng của BA đến quá trình cảm ứng tạo phôi soma của dừa sáp từ mô sẹo như sau:

Trong môi trường 72 (BM 72), việc bổ sung 24µM 2,4-D, 2,5 đến 7,5µM BA và 2,5g than hoạt tính trong quá trình nuôi cấy từ 2 đến 3 tháng trước khi tái sinh đã dẫn đến việc 50% số sẹo phát sinh phôi.

Trong môi trường sử dụng nồng độ 2,4-D giảm dần kết hợp với BA từ 2,5 đến 5 àM, chu kỳ cấy chuyền 5 tuần 1 lần cho thấy ở nồng độ 24 xuống 16 àM 2,4-D, tỷ lệ cảm ứng tạo phôi đạt 61,14% và cảm ứng chồi đạt 11,4% Khi sử dụng nồng độ 2,4-D 2,5 và 7,5 àM kèm BA, tỷ lệ cảm ứng phôi lần lượt là 67,4% và tỷ lệ cảm ứng chồi là 9,4% Đặc biệt, ở nồng độ 7,5 àM, tỷ lệ cảm ứng phôi đạt 73,7%, trong khi tỷ lệ cảm ứng chồi là 0% (Fernando et al., 2010).

+ Ngoài ra Fernando và Gage (2000) còn cho thấy kích thước phôi lớn hơn cho tỷ lệ tạo sẹo tốt hơn

Theo nghiên cứu của Samosir (1999), môi trường Y3 cần bổ sung 600 µM 2,4-D để tạo ra mụ sẹo, trong khi môi trường cảm ứng phụ mụ sẹo chỉ cần 6 µM 2,4-D và 300 µM BA.

Theo nghiên cứu của Toan và Thanh (2011), mô sẹo đã được hình thành trên môi trường Y3 bổ sung NAA 4 mg/L và BA 8 mg/L sau 3 tháng nuôi cấy Tuy nhiên, đến thời điểm hiện tại, việc chuyển đổi từ phôi soma sang cây con vẫn chưa đạt được thành công.

2.3.2.2 Nhân giống bằng phương pháp nuôi cấy phôi Nguyên nhân trái dừa sáp không nảy mầm: Trong tự nhiên trái dừa có sáp không phát triển thành cây Phôi dừa sáp như dừa thường về mặt hình thái, nhưng không nảy mầm do các đặc tính sinh hóa và sinh lý không bình thường của phôi đã ngăn cản sự nảy mầm của nó Theo Abraham et al (1965) chỉ ra rằng, phôi dừa sáp thường lớn hơn phôi dừa thường và tiếp tục phát triển bên trong trái mà không nảy mầm, các nguyên nhân chính cho thấy tần số cao của các tế bào đa bội nhỏ bất thường được tìm thấy trong nội nhũ trái dừa sáp Theo Cruz and Ramirez (1968), sự nhân lên một cách không tổ chức của các tế bào (microcell, có hình dạng không hệ thống bởi kỳ phân chia tế bào chất (cytokinesis) bất thường dẫn đến sự tăng sinh không kiểm soát của mô nội nhũ làm mất kết nối giữa nội nhũ và giát mút (haustorium), kết quả mô không thể nuôi dưỡng sự phát triển của phôi trong quá trình nảy mầm Ngoài ra, do sự thiếu hụt của các enzyme α-D-alactosidase và mannosidase có liên quan đến khả năng tích lũy galactomannan, điều này đã ngăn chặn việc hình thành các polysacarit chuyên biệt khác, do đó ngăn cản sự nảy mầm (Mujer et al., 1983, Mujer et al., 1984) Ngoài ra, hoạt động của enzyme mannanase đã được tìm thấy trong nội nhũ dừa sáp cao hơn trong nội nhũ bình thường, dẫn đến galactomannan ít nhớt hơn (Samonte et al., 1989).

Thay đổi trong cân bằng enzyme trong nội nhũ dừa sáp có thể do xác định sai gen mã hóa cho các enzyme đó, dẫn đến việc trái dừa không nảy mầm Để phát triển cây giống dừa sáp thuần chủng, phương pháp duy nhất là nuôi cấy trong ống nghiệm, cho phép tạo ra trái dừa sáp với tỷ lệ 100%.

2.3.2.3 Những nghiên cứu nhân giống dừa sáp bằng phương pháp nuôi cấy phôi trên thế giới và Việt Nam

Phương pháp nuôi cấy phôi dừa sáp đã được thực hiện lần đầu tiên cách đây hơn 50 năm bởi Abraham và Thomas (1962) Hai năm sau, Guzman và Rosario (1964) đã thành công trong việc phát triển phương pháp này bằng cách sử dụng môi trường cơ bản do White (1943) và Nitsch (1951) xây dựng.

Từ những năm 1960, dưới sự dẫn dắt của Guzman, nhóm nghiên cứu tại trường đại học Philipine ở Los Banos đã chứng minh rằng phôi dừa sáp có khả năng phát triển khi được nuôi cấy in-vitro trong môi trường White sau khi tách ra khỏi trái.

Kỹ thuật nuôi cấy phôi dừa sáp đã có những bước tiến đáng kể từ năm 1943, với tỷ lệ nảy mầm đạt 75-95% (Guzman và Rosario, 1964) Năm 1992, Rillo và Paloma đã phát triển môi trường nuôi cấy phôi dừa sáp, chứng minh rằng phôi dừa phát triển tốt trong môi trường Y3 mà không cần bổ sung chất điều hòa sinh trưởng Areza-Ubaldo et al (2003) đã cải tiến quy trình nuôi cấy phôi dừa sáp, tạo ra lượng cây giống lớn phục vụ thương mại, mặc dù tỷ lệ cây giống xuất vườn vẫn dưới 1 Tại Philippines, phương pháp nuôi cấy phôi (EMC) đã đạt tỷ lệ thành công trên 50% trong việc chuyển phôi thành cây con vào tháng 6/2006, cao hơn nhiều so với các kỹ thuật trước đó chỉ đạt 10-20% Tại Thái Lan, năm 1987, 60.000 phôi dừa sáp đã được cấy ghép thành công, và nghiên cứu lai tạo giữa giống dừa sáp và giống dừa dứa đã tạo ra trái dừa lai F1 có hương thơm đặc trưng, thu hút sự quan tâm từ ngành du lịch (Romulo, 2013).

Hiện trạng sản xuất và kỹ thuật nâng cao tỷ lệ trái sáp trên dừa sáp

Kết quả từ Viện nghiên cứu Dầu và Cây có dầu cho thấy dừa sáp chủ yếu được trồng tại huyện Cầu Kè, tỉnh Trà Vinh, với năng suất trung bình đạt 45 trái/cây/năm và tỷ lệ trái sáp đạt 19,3% Diện tích canh tác dừa sáp trung bình mỗi hộ là 0,42 ha, chiếm 75,4% tổng diện tích dừa của hộ, với mật độ trồng dày 235 cây/ha Tất cả các hộ đều thực hiện bồi bùn, 87% bón phân, 69,9% trồng xen và 32,6% nuôi xen trong vườn dừa sáp.

Năng suất dừa phụ thuộc nhiều vào điều kiện dinh dưỡng của cây Cung cấp đầy đủ dinh dưỡng giúp cây dừa đạt năng suất cao hơn Theo nghiên cứu của Ngô Thị Kiều Dương và cộng sự (2013), giống dừa cao cho ra 11,4-13,0 quày/cây/năm sau 28-32 ngày, trong khi giống dừa lùn cho khoảng 13,0-14,6 quày/cây/năm sau 25-28 ngày Tại Trà Vinh, giai đoạn 2011-2015, năng suất trái của giống dừa sáp đạt 55 trái/cây/năm, cho thấy tiềm năng năng suất cao của cây dừa khi được chăm sóc đúng cách.

Nông dân trồng dừa sáp thường chỉ bón phân từ 1-2 lần mỗi năm, với 13% không sử dụng phân bón Quy trình bón phân hiện nay chủ yếu là phân vô cơ, khuyến cáo từ 2-3 lần/năm Việc trồng dừa phụ thuộc chủ yếu vào lượng mưa, dẫn đến tình trạng "treo quày" trong mùa khô do cây thiếu nước và dinh dưỡng, ảnh hưởng đến quá trình phân hóa mầm hoa, ra hoa và đậu trái.

2.4.3 Giống Phân nhóm dừa sáp: Dừa sáp như dừa bình thường được phân thành hai nhóm -

Cao và Lùn (Mashud and Manaroinsong, 2007)

Cây dừa sáp cao nổi bật với kích thước lớn hơn so với cây lùn, từ thân cây đến tán lá Một đặc điểm đặc biệt của nó là phần mở rộng ở gốc thân cây, cùng với kích thước trái lớn và thời gian ra hoa từ 5-7 năm tuổi Cây dừa sáp cao có hoa thuộc nhóm thụ phấn chéo, dẫn đến sự biến động cao trong tỷ lệ trái sáp do sự thay đổi giữa các cây/cá thể và mật độ trồng (Mashud và Manaroinsong, 2007).

Dừa sáp lùn là loại cây có kích thước nhỏ, với chiều cao thân và tán lá thấp Cây không có phần phìn ở gốc, trái có kích thước từ nhỏ đến trung bình và mỗi chùm thường có nhiều trái, thường cho trái sau 3-4 năm Đặc biệt, dừa sáp lùn có kiểu hoa tự thụ phấn, giúp tăng mức độ đồng đều trong quần thể.

Fremond et al (1966) đã phân loại dừa bình thường thành ba nhóm: cao, lùn và lai (nhóm dừa trung gian) Ngoài ra, nhóm dừa sáp lai cũng được phát hiện ở một số khu vực như Pati, Trung Java và Jember, Đông Java.

Hiện nay, các giống dừa sáp chủ yếu được nhận diện qua màu sắc trái, trong đó huyện Cầu Kè, tỉnh Trà Vinh, nổi bật với trái dừa sáp màu xanh Qua thời gian, nhờ vào quá trình lai tạo tự nhiên, xuất hiện thêm những cây dừa sáp có màu nâu Kích thước trái dừa sáp cũng được phân loại thành hai nhóm chính: trái to và trái trung bình (Nguyễn Thị Thủy, 2008).

Nghiên cứu của Võ Văn Long (2007) về đa dạng di truyền của cây dừa tại Việt Nam sử dụng chỉ thị phân tử RAPD và RGA cho thấy giống dừa sáp Trà Vinh có mức độ tương đồng di truyền cao S=0,93, gần gũi với các giống dừa Dâu và Ta địa phương Kết quả khảo sát cho thấy dừa sáp Cầu Kè được phân chia thành 3 nhóm giống, và hình thái bên ngoài của chúng, bao gồm thân, lá, hoa và trái, không khác biệt so với các giống dừa thông thường.

Nhóm I: Trái tròn, màu xanh, kích thước trung bình, cơm dừa đặc ruột kiểu B và kiểu tự thụ phấn bán trực tiếp.

Nhóm II: Trái to, màu xanh, có 3 khía rỏ, cơm dừa đặc ruột kiểu A và kiểu thụ phấn chéo hoàn toàn.

Nhóm III: Trái to, tròn, màu nâu, cơm dừa đặc ruột kiểu A và kiểu tự thụ phấn bán trực tiếp

Hình 2.12: Đại diện 2 dạng màu trái giống dừa sáp tại huyện Cầu Kè, tỉnh Trà Vinh (A) dừa sáp trái vàng và (b) dừa sáp trái xanh (Võ Văn Long, 2007)

Dừa sáp cấy phôi ở tỉnh Trà Vinh chủ yếu được cung cấp từ Viện Cây có Dầu và Trường Đại học Trà Vinh Theo khảo sát tháng 6 năm 2017, các giống dừa sáp cấy phôi có độ tuổi từ 1-6 năm tuổi cho thấy tỷ lệ trái sáp/quày đạt trên 80% Ngoài ra, các giống dừa này cũng có nhiều dạng trái khác nhau, với màu sắc vỏ trái đa dạng như vàng, xanh, và đỏ.

2.4.4 Phương pháp cải thiện tỷ lệ trái dừa sáp hiện nay trên thế giới và Việt Nam

2.4.4.1 Cơ sở khoa học về di truyền ảnh hưởng đến tỷ lệ trái sáp

Nghiên cứu của Torres (1937) và Zuniga (1953) đã chỉ ra rằng di truyền nội nhũ đóng vai trò quan trọng trong việc hình thành trái dừa sáp Hiện tượng dừa sáp được cho là do gen m lặn kiểm soát và chỉ biểu hiện khi ở trạng thái đồng hợp tử (mmm) (Islam et al., 2013).

Nghiên cứu của Zuniga (1953) cho thấy khi thực hiện thụ phấn nhân tạo, thụ phấn trợ lực và tự thụ phấn giữa các cây dừa sáp, tỷ lệ trái bình thường so với trái sáp đạt 3:1, từ đó kết luận rằng đặc tính trái sáp do một gen đơn lặn quy định Cây dừa sáp tự thụ sẽ tạo ra ba kiểu gen: 1 MM (trái có cơm dừa bình thường), 2 Mm (trái dừa có biểu hiện cơm dừa bình thường) và 1 mm (trái mang gen mm sẽ không phát triển thành cây) Theo lý thuyết của Zuniga, tỷ lệ xuất hiện của thể tam bội đồng hợp tử (mmm) nên là 1:8 (12,5%), phản ánh năng suất tương đương của gen này trong phấn hoa và trong noãn.

(1959) cho thấy việc tự thụ phấn của cây dừa sáp dẫn đến trái có sáp đạt theo tỷ lệ

Năng suất trái dừa sáp có sự biến động lớn, dao động từ 2% đến 17% khi thụ phấn không kiểm soát Đặc biệt, tỷ lệ trái sáp trong các thử nghiệm thụ phấn có kiểm soát đạt từ 54% đến 69% (Zuniga, 1953).

Bảng 2.3: Kiểu gen nội nhủ và phôi dừa sáp theo Torres, (1937) và Zuniga, (1953)

Phôi nảy mầm Phôi nảy mầm Nội nhủ bình thường

Phôi nảy mầm Phôi không nảy mầm

Nội nhủ bình thường Dừa sáp

Cây dừa sáp có kiểu gen đồng hợp tư lặn (mm) không tồn tại tự nhiên và cần được nhân giống thông qua phương pháp nuôi cấy mô (Guzman et al.).

Theo nghiên cứu của Islam et al (2013) và Cedo et al., khả năng sản xuất trái dừa sáp từ cây mẹ mang dừa sáp đạt khoảng 25% Các tác giả Guzman và Manuel (1977) cũng đã đề cập đến vấn đề này trong các nghiên cứu của họ.

Khả năng thu hoạch trái dừa sáp có thể đạt tới 85% nếu được thu hoạch từ cây giống sản xuất bằng phương pháp giải cứu phôi, theo nghiên cứu của Guzman et al (1964) Cedo et al (1984) cũng ghi nhận rằng năng suất trái dừa sáp phụ thuộc vào quá trình tự thụ phấn hoặc thụ phấn chéo giữa các cây dừa sáp nuôi cấy phôi cùng loại, trong khi thụ phấn chéo với dừa bình thường chỉ cho ra trái bình thường.

Hiệu quả kinh tế và đánh giá hiện trạng các yếu tố tác ảnh hưởng tỷ lệ trái sáp trong sản xuất dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh

2.5.1 Giá trị dinh dưỡng của dừa sáp Đặc điểm dinh dưỡng trong cơm dừa sáp: Dừa sáp có độ dầu cao hơn dừa thường, mùi thơm đặc trưng hơn được ứng dụng trong việc sản xuất bánh kẹo và các sản phẩm khác đem lại nguồn lợi kinh tế cao

Bảng 2.5: Thành phần dinh dưỡng trong 100g cơm dừa sáp

Thành phần Hàm lượng Thành phần Hàm lượng

Năng lượng 194 kcal Photpho 59 mg

Xơ 5g Vitamin B2 0,02 mg Đường 9,5 Vitamin B6 0,6 mg

Theo nghiên cứu của Dolores và Mendoza (1998), hàm lượng tổng polysaccharide thủy phân trong nước dừa sáp cao gấp 30 lần so với dừa thường Khi phân tích thành phần polysaccharide từ cơm dừa sáp, hàm lượng Galactomanan hòa tan cao gấp từ 2-8 lần so với dừa thường Cơm dừa sáp chứa 12 amino acid với hàm lượng biến đổi, trong khi cơm dừa thường chỉ có 2 amino acid biến đổi Các amino acid có sự thay đổi đáng kể bao gồm: Arginine tăng 163%, threonine tăng 144%, phenylalanine tăng 140%, và methionine tăng 130% Ngược lại, glutamic acid và alanine giảm lần lượt 59% và 57% Sự giảm hàm lượng acid glutamic và tăng arginine trong cơm dừa sáp cho thấy protein ở đây rất đặc trưng.

Bảng 2.6: Thành phần acid béo cơ bản của dừa sáp

Nguồn: Trần Phạm Thanh Giang (2012)

Dừa sáp là nguyên liệu quý giá trong chế biến thực phẩm như kem, bánh, kẹo và mỹ phẩm, đồng thời cũng được sử dụng để làm nhiều loại nước giải khát Cơm dừa khi kết hợp với sữa, đường, cà phê hoặc ca cao và nước đá tạo thành thức uống béo ngậy và ngọt ngào Với hàm lượng dầu cao và hương thơm đặc trưng, dừa sáp có tiềm năng lớn trong sản xuất bánh kẹo và các sản phẩm khác, mang lại lợi ích kinh tế cao Philippines hiện đang dẫn đầu trong nghiên cứu và phát triển giống dừa sáp cũng như chế biến các sản phẩm từ loại dừa này Tuy nhiên, tại Việt Nam, dừa sáp chủ yếu được trồng để lấy trái phục vụ tiêu thụ tươi và nước giải khát, trong khi nguồn cung vẫn chưa đáp ứng đủ nhu cầu thị trường.

Cơm dừa sáp không chỉ được sử dụng để ăn tươi mà còn có tiềm năng ứng dụng trong ngành dược phẩm và mỹ phẩm Nghiên cứu của Maria et al (2003) đã chỉ ra khả năng chiết xuất galactomanan từ dừa sáp, mở ra cơ hội phát triển các sản phẩm mới trong lĩnh vực này.

“Mak gum” là nguyên liệu quan trọng trong nhiều ngành công nghiệp, bao gồm chế biến thực phẩm (màng bao thực phẩm), dược phẩm (màng bao thuốc, gạc bao vết thương) và mỹ phẩm Nó cũng được sử dụng trong các thành phần của gel agarose và polyacrylamide.

Dừa sáp, loại dừa có giá trị cao gấp 10-20 lần so với dừa thường, đã chứng kiến sự tăng giá mạnh mẽ từ năm 2000, trở thành loại dừa đắt nhất tại Việt Nam do sản lượng cung cấp hạn chế Giá dừa sáp hiện nay dao động từ 100.000đ đến 180.000đ mỗi trái, với Trà Vinh là tỉnh duy nhất trồng loại dừa này, chỉ cung cấp khoảng 10.000 trái mỗi năm (Viện Nghiên cứu Dầu và Cây có dầu, 2012).

Dừa sáp ngày càng được người tiêu dùng và nông dân ưa chuộng nhờ hương vị thơm ngon và giá trị kinh tế cao Loại cây này không chỉ phù hợp với ngành dịch vụ và du lịch mà còn có khả năng chịu hạn, mặn, phèn và ngập, làm cho nó trở thành lựa chọn lý tưởng cho nhiều vùng đất.

Giá trị trái dừa sáp duy trì ổn định theo thời gian, với mức giá năm 2017 dao động từ 57.000đ đến 128.000đ/trái, trung bình khoảng 91.000đ/trái, và có thể tăng lên 160.000-170.000 đồng/trái vào mùa lễ hội, cao gấp 10-20 lần so với trái dừa thường Khoảng 75% trái dừa thường là nguồn giống dừa sáp với giá từ 20.000-25.000 đồng/trái, cao gấp 2-2,5 lần so với dừa thường Nhu cầu sử dụng dừa sáp tăng do phục vụ sản xuất giống, làm quà và chế biến món ăn, đôi khi cầu vượt cung (Sở NN & PTNT Trà Vinh, 2018) Điều này cho thấy trồng dừa sáp mang lại thu nhập cao và ổn định cho nông dân.

2.5.3 Diện tích trồng dừa sáp trên thế giới và Việt Nam 2.5.3.1 Trên thế giới

Trong 93 nước trồng dừa trên thế giới thì dừa sáp được trồng ở 9 nước Ở mỗi nước dừa sáp có tên gọi khác nhau: Cambodia gọi là Dong Kathi; Ấn Độ gọi là Thairu Thengai; Indonesia gọi là Kelapa Kopyor; Malaysia gọi là Kelapa Kopyor; Papua New Guinea gọi là Moon Makan; Philippines gọi là Makapuno; Sri LanKa gọi là Dikiri Pol;

Thái Lan gọi là Maphao Kathi và Việt Nam gọi là dừa sáp (Nguyễn Thị Bích Hồng, 2013).

Vào năm 1937 tại Philippines, Torres đã quan sát sự xuất hiện của một số cây dừa sáp, và một số nông dân đã nhận ra sự di truyền của các đặc điểm hình thái của giống dừa này (Dolores et al., 1998) Theo thống kê từ Ủy ban dừa Philippines (PCA), năm

Từ năm 2009, diện tích trồng dừa sáp đã tăng mạnh từ 577 ha, chủ yếu là giống dừa sáp cao nuôi cấy phôi Tại Indonesia, dừa sáp được tìm thấy ở các khu vực như Sumenep Madura, Đông Java, trung tâm Java và Lampung Giống dừa sáp phổ biến ở đây thuộc nhóm dừa cao, với tỷ lệ trái sáp rất thấp, chỉ đạt từ 1-3 trái/buồng, hoặc thậm chí không có trái sáp Ngoài ra, Viện nghiên cứu dầu cọ của Indonesia cũng đã phát hiện giống dừa sáp lùn.

Dừa sáp tại Indonesia có diện tích trồng lên tới 711,74 ha, sản lượng đạt khoảng 1.000-1.500 trái mỗi tháng, với giá bán trung bình từ 15.000-40.000 Rp/trái, gấp 10 lần so với dừa thường Điều này cho thấy thị trường cây giống và sản phẩm trái dừa sáp vẫn còn nhiều tiềm năng phát triển tại Indonesia.

Tại Việt Nam dừa sáp là đặc sản duy nhất được trồng nhiều ở huyện Cầu Kè, tỉnh Trà Vinh (Viện nghiên cứu dầu và cây có dầu, 2012).

Trà Vinh có diện tích trồng dừa lên đến 15.000 ha, đứng thứ hai tại đồng bằng sông Cửu Long, chỉ sau Bến Tre Trong đó, giống dừa sáp chiếm 154 ha, chủ yếu tập trung ở xã Hòa Tân, Hòa Ân và thị trấn Cầu Kè thuộc huyện Cầu Kè.

Cây dừa sáp tại huyện hiện nay vẫn còn manh mún và chưa được phát triển tập trung, dẫn đến tình trạng lai tạp và thoái hóa giống Giá cả thị trường không ổn định khiến cây dừa không thể cạnh tranh với các loại cây ăn trái có giá trị kinh tế cao khác Số lượng tổ hợp tác và hợp tác xã dừa sáp còn hạn chế, trong khi các làng nghề thủ công mỹ nghệ và cơ sở chế biến để khai thác hiệu quả cây dừa sáp vẫn chưa được hình thành.

Bảng 2.7: Diện tích dừa và dừa sáp tỉnh Trà Vinh

Năm Diện tích dừa sáp Tổng diện tích dừa Chiếm tỷ lệ (%)

Đến năm 2017, huyện Cầu Kè đã trồng hơn 15.000 cây dầu, trong đó khoảng 6.000 cây cho trái Năng suất đạt từ 40 đến 80 trái mỗi cây mỗi năm, với tỷ lệ sáp chiếm khoảng 25-30%.

2.5.3.3 Tình hình nghiên cứu về vai trò kinh tế của dừa sáp tại Việt Nam

Nội dung 1: Cải thiện kỹ thuật nhân giống dừa sáp từ phôi

3.1.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu

- Địa điểm: Phòng thí nghiệm Tế bào thực vật khoa Nông nghiệp Thủy sản Trường Đại học Trà Vinh.

3.1.2 Phương tiện 3.1.2.1 Điều kiện ngoại cảnh Nhiệt độ: Nhiệt độ phòng nuôi cấy mô thường được điều chỉnh ổn định từ 28±

2 0 C Theo Trương Quốc Ánh và ctv (2012) nhiệt độ thích hợp của phòng nuôi cấy mô dừa sáp cấy phôi là 28±2 0 C.

Cường độ ánh sáng trong phòng nuôi cấy phôi dừa sáp nên đạt từ 2.000-2.500 lux với thời gian chiếu sáng 16 giờ mỗi ngày, theo nghiên cứu của Phạm Thị Phương Thúy và cộng sự (2020) Tuy nhiên, Trương Quốc Ánh và cộng sự (2012) cho rằng cường độ ánh sáng tối ưu cho cây dừa cấy phôi là 4.000 lux với thời gian chiếu sáng 9 giờ mỗi ngày Ngoài ra, độ pH thích hợp trong quá trình nuôi cấy phôi dừa sáp nằm trong khoảng từ 5,8 đến 6,0.

3.1.2.2 Điều kiện vô trùng

Các dụng cụ thủy tinh sử dụng trong thí nghiệm nuôi mô và tế bào thực vật cần được tiệt trùng để đảm bảo tính vô trùng Chúng được hấp khử trùng trong nồi hấp (autoclave) với thời gian từ 15-30 phút, ở áp suất hơi nước bão hòa 103,4 kPa (1 atm) tương đương với nhiệt độ 121 độ C.

Sau khi được khử trùng, các dụng cụ sẽ được làm khô trong tủ sấy ở nhiệt độ cao trong nhiều giờ Để đảm bảo không bị nhiễm khuẩn trở lại, chúng luôn được bảo quản trong giấy nhôm hoặc hộp kim loại.

Môi trường nuôi cấy được khử trùng trong nồi hấp (autoclave) bằng áp suất hơi nước bão hòa, với thời gian hấp từ 15-30 phút ở áp suất 103,4 kPa (1atm) tương đương 121 oC Ở nhiệt độ này, hầu hết vi sinh vật, bao gồm cả dạng bào tử, đều bị tiêu diệt Sau khi quá trình vô trùng hoàn tất, cần làm khô nắp ống nghiệm hoặc nút nông để tránh nhiễm trở lại.

Cồn 90 O là một chất khử trùng bề mặt hiệu quả, thường được sử dụng để tiêu diệt vi khuẩn và nấm Trước khi áp dụng các phương pháp khử trùng khác, cồn thường được rửa để đảm bảo hiệu quả tối ưu Với sức căng bề mặt thấp, cồn dễ dàng thâm nhập vào các sợi lông của lá, giúp làm ướt bề mặt tốt hơn Ngoài ra, tia UV cũng được sử dụng để khử trùng bề mặt phòng cấy và các thiết bị sau khi đã được khử trùng bằng cồn 90 O, tăng cường mức độ sạch sẽ và an toàn.

Trước khi vào phòng cấy, tất cả các dụng cụ cần thiết đều phải được tiệt trùng, bao gồm áo choàng, mũ vải, khẩu trang của người thực hiện cấy, cũng như dao, kéo, kẹp (forceps), giấy lọc và bình đựng nước cất.

Trên bàn làm việc, luôn có một đèn cồn và một cốc chứa cồn 90% để ngâm dụng cụ Trước khi tiến hành cấy, người cấy cần phải rửa tay bằng xà phòng và sau đó lau sạch đến khuỷu tay bằng cồn 90% để đảm bảo vệ sinh.

Các dụng cụ kim loại như kẹp cấy, dao mổ và mũi kim nhọn có thể được khử trùng hiệu quả bằng cách đốt dưới ngọn đèn cồn Trước khi tiến hành đốt, những dụng cụ này cần được nhúng vào cồn tuyệt đối để đảm bảo quá trình khử trùng diễn ra an toàn và hiệu quả.

- Cân 4 số lẻ: Cân được thiết kế tinh tế cho phép thực hiện các phép đo nhanh và cho kết quả chính xác cao với sai số cực nhỏ.

- Máy cất nước 2 lần: chưng cất nước để pha môi trường nuôi cấy phôi.

- Tủ sấy: tủ sấy được sử dụng để sấy khô, diệt khuẩn và tiệt trùng các dụng cụ trong phòng thí nghiệm.

- Tủ cấy sinh học: được sử dụng cho các thao tác cấy phôi vào trong ống nghiệm và chai nuôi cây phôi.

- Máy khoan: lấy phôi dừa ra khỏi trái dừa được thực hiện như sau:

(a) (b)Hình 3.13: Máy khoan dừa (a) và dùng dao khoét lấy phôi ra khỏi trái dừa sáp (b)

Hình 3.14: Phôi được tách khỏi trái dừa bằng máy khoan có phần gáo dừa và cơm dừa bao quanh (a) và được ngâm vào cồn 70% (b) a) b)

Hình 3.15: Phôi dừa sáp sau khi tách xong (a) được cho vào môi trường Y3 lỏng (b)

Máy đo pH là thiết bị phổ biến trong phòng thí nghiệm, được sử dụng để đo độ pH của dung dịch mẫu một cách nhanh chóng và chính xác.

- Lò vi sóng: dùng để đun nóng hoặc cô cạn một số dung dịch khi cần thiết.

Trong phòng thí nghiệm, bên cạnh các thiết bị chính, còn có nhiều dụng cụ thí nghiệm quan trọng như ống đong, ống nghiệm, chai thủy tinh 750 ml, và các cốc thủy tinh với dung tích 100ml, 250ml, 1.000ml, cùng với micro pipet.

Môi trường Y3 chuẩn của Eeuwens, (1976) được sử dụng trong nghiên cứu gồm có các thành phần như sau:

Thành phần môi trường Y3 chuẩn: Đa lượng

Thành phần môi trường Nồng độ

Ghi chú: các chất đa lượng, vi lượng, Fe-EDTA, Vietamins và Amino acid sử dụng sản phẩm của công ty Merck của Đức

Môi trường Y3 cải tiến như sau:

- Giai đoạn tạo chổi được sử dụng môi trường Y3 chuẩn có bổ sung 2 mg/l BAP, 0,2 mg/l NAA, 1 g/l than hoạt tính, 60 g/l đường saccharose

- Giai đoạn tạo rễ sử dụng môi trường Y3 chuẩn có bổ sung 0,2 mg/l BAP, 02 mg/l NAA, 1 g/l than hoạt tính, 40 g/l đường saccharose.

Trái dừa sáp 12-12,5 tháng tuổi được xử lý bằng cách tách bỏ vỏ bên ngoài và cạo sạch trước khi đưa vào phòng lấy mẫu để tách phôi Phôi dừa được lấy ra bằng máy khoan với mũi khoan kính đường kính 34 mm, sau đó được đặt vào beaker thủy tinh đã khử trùng Giai đoạn tách vỏ và khoan lấy phôi diễn ra trong điều kiện phòng thí nghiệm tiêu chuẩn.

Theo nghiên cứu của Phạm Thị Phương Thúy và cộng sự (2016), tỷ lệ phôi nảy mầm yếu chiếm từ 10-15%, 13-17% cây có rễ phát triển kém, và tỷ lệ chết cây con dao động từ 9-14%, dẫn đến tỷ lệ thành công của quy trình nhân giống dừa sáp chỉ đạt dưới 45% Thời gian sản xuất một cây giống kéo dài trên 24 tháng Để cải thiện quy trình này, luận án đã thực hiện các nghiên cứu theo sơ đồ như Hình 3.16.

Hình 3.16: Sơ đồ vắn tắt quy trình nuôi cấy phôi dừa sáp in-vitro (Phạm Thị Phương Thúy và ctv, 2016)

Chọn trái dừa sáp 12-12,5 tháng tuổi, tách lấy phôi có dính 1 phần cơm dừa và cấy tạo chồi

- Môi trường Y3: 2 mg/l BAP, 0,2 mg/l NAA, 1 g/l than hoạt tính, 60 g/l saccharose.

- Môi trường Y3: 2 mg/l NAA, 0,2 mg/l BAP, 1,5 g/l than hoạt tính, 40 g/l saccharose.

Chuyển cây ra vườn ươm, trồng vào giá thể

- Giá thể: Trấu: Phân bò: Mụn dừa tỷ lệ 2:1:1

Cây xanh, cổ rễ láng, lá thẳng, rễ đi ra khỏi bầu

- Bầu: Chậu nhựa tròn, cao 27 cm x đường kính đáy

- Giá thể: Trấu: Phân bò: Mụn dừa tỷ lệ 1:1:1

Cây đủ tiêu chuẩn xuất vườn Cây có 4-5 lá, cao cây 40-50 cm

- Thí nghiệm 1: Thí nghiệm ảnh hưởng của tách màng bao phôi lên tỷ lệ nảy mầm của phôi dừa sáp

Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 5 nghiệm thức, 3 lần lặp lại với mỗi lần lặp lại là 5 phôi

- Nghiệm thức 1: Môi trường Y3 cải tiến (đối chứng)

- Nghiệm thức 2: Môi trường Y3 cải tiến + tách màng bao phôi

- Nghiệm thức 3: Môi trường Y3 cải tiến + 1 mg/L Kinetin

- Nghiệm thức 4: Môi trường Y3 cải tiến + 2 mg/L Kinetin

- Nghiệm thức 5: Môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L Kinetin

Chuẩn bị mẫu thí nghiệm: mẫu thí nghiệm là các phôi đã nuôi được 6 tuần trong môi trường Y3 cải tiến nhưng chưa nảy mầm.

Hình 3.17: Tách bỏ màng bao chồi mầm và cấy chuyền

Chuẩn bị môi trường nuôi cấy cho các nghiệm thức: Là môi trường Y3 cải tiến

(môi trường đặc) được bổ sung Kinetin với hàm lượng 1,2,3 mg/L vào môi trường tương ứng nồng độ với nghiệm thức 3, 4 và 5

Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ (%) phôi nảy mầm sau 1, 2, 3, và 4 tuần nuôi phôi dừa sáp Công thức tính tỷ lệ nảy mầm:

- Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của ánh sáng lên độ nảy mầm của phôi dừa sáp

Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên gồm 2 nghiệm thức, 3 lần lặp lại với mỗi lần lặp lại là 7 mầm.

- Nghiệm thức 1: Phôi dừa nuôi trong phòng có chiếu sáng với cường độ 2.000 – 2.500 lux.

- Nghiệm thức 2: Phôi dừa nuôi trong điều kiện tối hoàn toàn (0 lux). x 100

Cách thực hiện: Phương pháp thực hiện: môi trường Y3 được bổ sung 0,2 ppm

Môi trường nuôi cấy được chuẩn bị với thành phần gồm NAA, 2 ppm BAP, 60g/l sucrose, 1g/l than hoạt tính, và pH được điều chỉnh ở mức 5,6 Mỗi ống nghiệm chứa 20 ml môi trường và được hấp khử trùng ở nhiệt độ 121°C trong 20 phút Phôi từ trái dừa có sáp được tách ra và khử trùng bằng dung dịch cồn 70° trong 15 phút, sau đó được tách lấy và cấy vào môi trường nuôi cấy, cuối cùng được đặt trong điều kiện ánh sáng và tối phù hợp.

Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ nảy mầm của các phôi sau 1,2, 3, 4 và 5 tuần nuôi phôi.

- Thí nghiệm 1: Nghiên cứu bổ sung môi trường kích thích ra rễ, tạo lá khi cây phôi không ngập trong môi trường

Bố trí thí nghiệm được thực hiện với các cây phôi có chiều dài rễ vượt trội, gây ra tình trạng không ngập trong môi trường và ảnh hưởng đến sự phát triển của lá Để khắc phục, các cây phôi sẽ được bổ sung môi trường Y3 dạng lỏng với các nồng độ NAA khác nhau Thí nghiệm được thiết kế theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên, bao gồm 4 nghiệm thức và 5 lần lặp lại, mỗi lần lặp lại sẽ có 4 mầm.

- Nghiệm thức 1: Không bổ sung môi trường (Đối chứng)

- Nghiệm thức 2: Môi trường Y3 bổ sung 0,2 ppm BAP + 2 ppm NAA

- Nghiệm thức 3: Môi trường Y3 bổ sung 0,2 ppm BAP + 3 ppm NAA

- Nghiệm thức 4: Môi trường Y3 bổ sung 0,2 ppm BAP + 4 ppm NAA

- Nghiệm thức 5: Môi trường Y3 bổ sung 0,2 ppm BAP + 5 ppm NAA

Để thực hiện thí nghiệm, cần chuẩn bị mẫu thí nghiệm là những cây phôi có chiều dài rễ vượt trội, đảm bảo rằng cây phôi không bị ngập trong môi trường và lá không phát triển.

Môi trường thí nghiệm: Môi trường Y3 được bổ sung các nồng độ NAA; 0,2 ppm BAP; 40g/l đường succrose, 5g/l agar, 1g/l than hoạt tính, điều chỉnh ở pH = 5,6.

Môi trường được cho vào các chai và mang hấp khử trùng ở nhiệt độ 121 0 C thời gian

20 phút Sau khi hấp xong, để cho giảm nhiệt độ xuống và được bổ sung vào các chai thí nghiệm.

Chỉ tiêu theo dõi: Chiều dài rễ chính (cm); số lượng rễ thứ cấp; số lá chiều dài thân (cm).

- Thí nghiệm 2: nghiên cứu kích thích ra rễ đối với các cây phôi sau 4 tháng nhưng chiều dài rễ < 5 cm

Nội dung 2: Nghiên cứu các biện pháp kỹ thuật để nâng cao tỷ lệ trái sáp trên dừa sáp cấy phôi ở tỉnh Trà Vinh

3.2.1 Ảnh hưởng của acid boric lên sự nảy mầm của hạt phấn và khả năng đậu trái dừa sáp cấy phôi tại tỉnh Trà Vinh

Theo nghiên cứu của Nguyễn Thị Lệ Thủy (2013), giống dừa lùn thường tự thụ phấn do sự trùng khớp giữa pha cái và pha đực Trong khi đó, ở nhóm dừa lai, hiện tượng tự thụ có thể xảy ra trên cùng một phát hoa nhờ sự trùng pha một phần giữa hai loại pha này.

3.2.1.1 Địa điểm và thời gian nghiên cứu:

- Địa điểm: Vườn dừa sáp cấy phôi 6 năm tuổi của hộ bà Phạm Thị Út, ấp Bình

La, xã Lương Hoà, huyện Châu Thành, tỉnh Trà Vinh

Vật liệu: Cây dừa sáp cấy phôi thuộc nhóm dừa lùn và nhóm dừa lai

Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng của nồng độ acid boric lên sự nảy mầm của hạt phấn dừa sáp trong đĩa petri

Phương pháp bố trí thí nghiệm được thực hiện theo cách hoàn toàn ngẫu nhiên với 5 nghiệm thức và 4 lần lặp lại Mỗi lần lặp lại được thực hiện trên một đĩa petri.

Chuẩn bị môi trường: Môi trường nuôi hạt phấn bao gồm 1% agar, 10% đường và acid boric được bổ sung trực tiếp vào môi trường với các nồng độ:

- Nghiệm thức đối chứng không bổ sung acid boric.

- Nghiệm thức 1 bổ sung 0 mg/L acid boric.

- Nghiệm thức 2 bổ sung 5 mg/L acid boric.

- Nghiệm thức 3 bổ sung 10 mg/L acid boric.

- Nghiệm thức 4 bổ sung 15 mg/L acid boric

- Nghiệm thức 5 bổ sung 20 mg/L acid boric

Quy trình thu mẫu hoa đực bắt đầu bằng việc thu hoạch từ phát hoa mới nở vào sáng sớm Những mẫu hoa này được cho vào túi nilong màu trắng và đặt trong thùng mút Sau đó, chúng được đưa về phòng thí nghiệm để tiến hành khử trùng ngay lập tức bằng cồn 70 độ, trước khi đưa vào tủ cấy.

Phương pháp cấy mẫu vào môi trường dinh dưỡng bao gồm các bước sau: Sau khi môi trường nguội, tiến hành cấy hạt phấn vào các đĩa môi trường Hòa hạt phấn với nước cất, sau đó hút 0,1 mL dung dịch chứa hạt phấn và cho vào đĩa petri Dùng que cấy để trải đều dung dịch trên bề mặt đĩa, và đặt các đĩa trong phòng có nhiệt độ từ 26-28 độ C.

Chỉ tiêu theo dõi: Quan sát sự nảy mầm của hạt phấn vào các thời điểm 0, 3, 6,

Sau 12, 24 và 48 giờ gieo hạt phấn vào đĩa, số liệu được thu thập bằng cách đánh dấu 3 điểm ngẫu nhiên trên đĩa Số lượng hạt phấn nảy mầm tại mỗi điểm được đếm bằng kính hiển vi với vật kính 10X.

Công thức tính tỷ lệ phần trăm (%) số hạt phấn nảy mầm như sau:

Tỷ lệ nảy mầm của hạt phấn được tính bằng công thức: Số hạt phấn nảy mầm (%) = (Số hạt phấn nảy mầm đếm được / Tổng số hạt phấn tại điểm quan sát) × 100 Để có kết quả chính xác, cần trừ đi tỷ lệ hạt nảy mầm của các lần đếm trước đó.

Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng của nồng độ và thời điểm phun acid boric lên sự đậu trái dừa sáp

Phương pháp bố trí thí nghiệm được thực hiện theo thiết kế thí nghiệm hai nhân tố, áp dụng thể thức thừa số trong khối hoàn toàn ngẫu nhiên với 6 lần lặp lại Mỗi lần lặp lại tương ứng với một phát hoa trên tổng số 48 cây.

Bảng 3.8 trình bày cách bố trí thí nghiệm nhằm nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ và thời điểm phun acid boric lên sự đậu trái của dừa sáp trong điều kiện có trùm phát hoa Nghiên cứu này giúp xác định các yếu tố tối ưu để nâng cao năng suất và chất lượng trái dừa sáp.

Nhân tố: Nồng độ acid boric (mg/L)

Thời gian phun hóa chất (ngày sau khi nứt mo = SKNM)

Phương pháp tiến hành: Phun acid boric ở các nồng độ thí nghiệm với thể tích

200 mL dung dịch/phát hoa trên dừa sáp thuộc nhóm dừa lùn hoặc nhóm dừa lai mới nứt mo vào buổi sáng từ 8-10 giờ.

Chỉ tiêu theo dõi : Tỷ lệ trái /quày ở các thời điểm tháng 1, 2, 3, 4, 5, 6 sau phun.

Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng của nồng độ acid boric phun trong điều kiện có trùm phát hoa lên khả năng đậu trái trên cây dừa sáp

Phương pháp bố trí thí nghiệm hai nhân tố được thực hiện theo thể thức thừa số trong khối hoàn toàn ngẫu nhiên với 6 lần lặp lại Mỗi lần lặp lại tương ứng với một buồng hoa hoặc cây trong tổng số 36 cây.

Bảng 3.9: Cách bố trí thí nghiệm ảnh hưởng của nồng độ acid boric phun trong điều kiện có trùm phát hoa lên sự đậu trái dừa sáp

Nhân tố: Nồng độ acid boric (mg/L)

Thời gian phun hóa chất (ngày sau khi nứt mo = SKNM)

Phương pháp tiến hành thí nghiệm bao gồm việc sử dụng bao nilon trắng và trong để bao kín phát hoa trước khi nứt mo Theo dõi sự phát triển của mứt mo và tiến hành phun 200 ml dung dịch acid boric với các nồng độ khác nhau Chỉ mở miệng bao nilon khi thực hiện phun và sau đó buộc lại như ban đầu nhằm hạn chế tối đa sự xâm nhập của hạt phấn bên ngoài.

Chỉ tiêu theo dõi: Tỷ lệ trái /quày ở các thời điểm tháng 1, 2, 3, 4, 5, 6 sau phun.

Phân tích thống kê được thực hiện bằng phần mềm Microsoft Office Excel 2010 và IBM SPSS Statistics 20 Kiểm định độ khác biệt được thực hiện ở hai mức ý nghĩa 1% và 5% thông qua phép thử Duncan, cùng với việc sử dụng thống kê mô tả để cung cấp cái nhìn tổng quan về dữ liệu.

3.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng của phân bón lên tăng trường, năng suất và chất lượng dừa sáp cấy phôi

- Thời gian và địa điểm:

+ Địa điểm: ấp Bình La, xã Lương Hòa, huyện Châu Thành, tỉnh Trà Vinh, thể hiện ở hình sau:

Hình 3.18: Sơ đồ khoảng cách trồng dừa trong vườn dừa + Đối tượng nghiên cứu: phân vô cơ, phân hữu cơ và thời gian bón.

Phân hữu cơ được xem là giải pháp thay thế hiệu quả cho phân vô cơ dựa trên kết quả phân tích mẫu phân của Phạm Thị Phương Thúy và cộng sự (2018) Theo phân tích, phân hữu cơ có thành phần dinh dưỡng với 1,26% N, 0,4% P2O5, 1,2% K2O và độ ẩm 30% Việc áp dụng phân hữu cơ không chỉ giúp cải thiện chất lượng đất mà còn góp phần bảo vệ môi trường.

+ Phân vô cơ: Sử dụng các loại phân đơn gồm: Urê 46% N, Super lân 16,5%

Chưa có nghiên cứu cụ thể về công thức phân bón cho dừa sáp cấy phôi tại Việt Nam Luận án này áp dụng công thức khuyến cáo của Viện Nghiên cứu Dầu và Cây có dầu năm 2012, được sử dụng cho cây dừa sáp thường.

Bảng 3.10: Lượng phân bón theo tuổi của cây

Tuổi cây Loại phân (g/cây/năm)

(năm) Urê Super phosphate KCl

Ghi chú: Theo Viện nghiên cứu Dầu và Cây có dầu (2012)

Luận án nghiên cứu trên cây dừa 5 năm tuổi đã chỉ ra công thức phân bón hiệu quả là (0,8 kg Urê + 0,8 kg super lân + 0,8 kg Kali Clorua)/cây/năm Đối với phương pháp thay thế 100% phân vô cơ bằng phân hữu cơ, cần bón (62,4 kg Phân hữu cơ và 0,288 kg Kali Clorua)/cây/năm Trong khi đó, nếu thay thế 50% phân vô cơ bằng phân hữu cơ, lượng phân cần bón sẽ là (31,2 kg Phân hữu cơ + 0,4 kg Urê + 0,4 kg Super lân và 0,66 kg Kali Clorua)/cây/năm.

+ Đất thí nghiệm: phân tích đặc tính đất đầu vụ thí nghiệm và sau 2 năm thí nghiệm ở nghiệm thức cho năng suất thấp nhất:

Bảng 3.11: Kết quả phân tích lý hóa đất vùng trồng dừa sáp huyện Châu Thành tỉnh Trà Vinh

TT Chỉ tiêu phân tích Đất đầu vụ (Dừa sáp 5 năm tuổi) Thang đánh giá Đất sau khi bón phân 2 năm (dừa sáp 7 năm tuổi)

1 pH-H 2 O 6,7 6,7 Trung tính 6,8 6,7 Trung tính

2 pH-KCl 6,0 5,9 Trung tính 6,0 6,0 Trung tính

3 CHC (%OM) 1,6 1,6 Trung bình 1,1 1,0 Trung bình

9 P-dễ tiêu (mg/kg) 67,1 66,9 Cao 57,5 56,5 Cao

Bài viết đề cập đến các phương pháp đánh giá chất lượng đất tại Việt Nam, bao gồm pH H2O theo tiêu chuẩn FAO-UNESCO và pH KCL theo Sổ tay phân tích của ĐHTH Hà Nội Ngoài ra, các chỉ tiêu như CEC, N, P2O5, K2O được tổng hợp từ nghiên cứu của Hội Khoa học đất Việt Nam Phương pháp xác định P dễ tiêu được thực hiện theo phương pháp Mehlich2, với mẫu đất từ vườn dừa 5-7 tuổi tại xã Lương Hòa, huyện Châu Thành, tỉnh Trà Vinh.

3.2.2.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm:

Hiệu quả kinh tế và đánh giá hiện trạng các yếu tố ảnh hưởng tỷ lệ sáp trên dừa sáp ở tỉnh Trà Vinh

3.3.1 Thời gian và địa điểm

Dừa sáp thường chủ yếu được trồng tại huyện Cầu Kè, Trà Vinh, với tổng diện tích 225 ha (Phòng Nông nghiệp và Phát triển Nông thôn huyện Cầu Kè, 2017) Trong khi đó, dừa sáp cấy phôi cũng đang được nghiên cứu và phát triển, theo thông tin từ Phạm Thị Phương Thúy.

(2018), dừa sáp cấy phôi đã được trồng ở Trà Vinh từ năm 2008.

- Các tài liệu có liên quan đến vấn đề nghiên cứu.

- Bảng câu hỏi phỏng vấn.

3.3.3 Phương pháp nghiên cứu 3.3.2.1 Phương pháp thu thập số liệu

Nguồn: Sở NN&PTNT Trà Vinh, phòng NN&PTNT huyện Cầu Kè, Uỷ ban nhân dân xã và thị trấn.

Loại số liệu: Hình ảnh, bảng biểu, số liệu thống kê của các Ngành, báo cáo.

Nội dung: điều kiện tự nhiên, kinh tế xã hội, tổng diện tích trồng, năng suất, sản lượng, nhận định, đánh giá tình hình.

Nguồn: hộ trồng dừa Sáp trên địa bàn tỉnh Trà Vinh Nội dung: phỏng vấn trực tiếp người trồng dừa trên phiếu điều tra.

Địa bàn nghiên cứu của đề tài tập trung vào huyện Cầu Kè với mô hình dừa Sáp thường, bao gồm 03 xã: Hòa Tân, Tam Ngãi và Thị trấn Cầu Kè Ngoài ra, nghiên cứu cũng xem xét mô hình dừa Sáp cấy phôi tại tỉnh Trà Vinh.

Cỡ mẫu nghiên cứu được xác định theo phương pháp số lớn là 60 hộ trồng dừa Sáp thường Trong đó, số hộ trồng dừa Sáp cấy phôi được khảo sát là 7 hộ.

Số liệu sơ cấp: Số liệu sơ cấp được thu thập thông qua tiến trình sau:

Để xác định địa điểm điều tra cho nghiên cứu, cần liên hệ và trao đổi ý kiến với các chuyên gia nông nghiệp và cán bộ quản lý địa phương, bao gồm lãnh đạo Phòng NN & PTNT, Trạm Khuyến nông, Trạm Bảo vệ thực vật, và Hội làm vườn Qua đó, ba xã cụ thể được chọn làm địa bàn nghiên cứu là xã Hòa Tân, xã Tam Ngãi và Thị Trấn Cầu Kè, tập trung vào việc nghiên cứu dừa Sáp thường và dừa Sáp cấy phôi tại tỉnh Trà Vinh.

Tác giả tiến hành một cuộc điều tra thử nhằm kiểm tra tính phù hợp của phiếu điều tra, đồng thời điều chỉnh phiếu này để đảm bảo phù hợp với điều kiện thực tế tại khu vực nghiên cứu.

- Thực hiện điều tra chính thức: Sau bước thực hiện điều tra thử và hiệu chỉnh phiếu điều tra, tiến hành điều tra chính thức.

3.3.2.2 Phương pháp phân tích số liệu

Dữ liệu khảo sát đã được kiểm tra, phân tích, mã hóa và nhập vào chương trình Microsoft Excel Office 2013 và SPSS để thực hiện tính toán và phân tích.

Phương pháp phân tích thống kê mô tả được áp dụng để tính toán và trình bày các chỉ tiêu kinh tế liên quan đến tỷ lệ trái dừa sáp và chất lượng cơm dừa sáp Các chỉ số như trung bình, độ lệch chuẩn, khoảng biến động, tần số và phần trăm sẽ được sử dụng để đánh giá các yếu tố ảnh hưởng đến những chỉ tiêu này.

Phương pháp phân tích chi phí-lợi nhuận (CRA) là công cụ hữu ích để đánh giá hiệu quả tài chính của các hộ canh tác dừa Sáp tại huyện Cầu Kè, tỉnh Trà Vinh Phương pháp này bao gồm việc tính toán tỷ suất doanh thu/chi phí, tỷ suất lợi nhuận/chi phí và tỷ suất lợi nhuận/doanh thu, giúp xác định mức độ sinh lời và khả năng bền vững của hoạt động canh tác.

- Các chỉ tiêu kinh tế

Tổng chi phí sản xuất bao gồm tất cả chi phí lao động, vật tư sản xuất và đầu tư cơ bản, nhưng không tính đến công lao động hàng ngày không đáng kể như thăm vườn Chi phí vật tư sản xuất bao gồm phân bón, thuốc bảo vệ thực vật và nhiên liệu Đầu tư cơ bản như giống cây, làm đất, đào ao/mương, máy móc và trang thiết bị sẽ được khấu hao hàng năm Các khoản chi phí liên quan đến lãi suất vốn đầu tư và các loại phí sản xuất khác không được tính vào tổng chi phí.

Sử dụng phương pháp kiểm định Independent-Samples T test để so sánh 2 mô hình dừa Sáp cấy phôi và dừa Sáp thường Đặt giả thuyết

+ H0 : không có sự khác biệt giữa hai nhóm hộ + H1 : có sự khác biệt giữa hai nhóm hộ.

Với mức ý nghĩa 5%, nguyên tắc quyết định là + Bác bỏ giả thuyết H0 nếu Sig.T < 0,5

+ Chấp nhận giả thuyết H0 nếu Sig.T > 0,5

CHƯƠNG 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

Cải thiện kỹ thuật nhân giống dừa sáp từ phôi

4.1.1 Giai đoạn nảy mầm 4.1.1.1 Ảnh hưởng của tách màng bao phôi lên tỷ lệ nảy mầm của phôi dừa sáp

Theo nghiên cứu của Cueto et al (2012), các phôi sau 2-3 tháng không nảy mầm cần được tách màng bao phôi để thúc đẩy sự phát triển Cụ thể, việc tách màng phôi được thực hiện trên các phôi đã được nuôi trong môi trường Y3 cải tiến trong 6 tuần nhưng vẫn chưa nảy mầm.

Sự tăng nồng độ Kinetin có thể gây ra hiện tượng hóa nâu ở mẫu thí nghiệm do sự không tương khích giữa hormon nội sinh và hormon ngoại sinh Bên cạnh đó, Kinetin có khả năng kích thích tế bào tiết ra nhiều hợp chất phenol, làm tăng tốc độ hóa nâu của mẫu cấy (Trương Quốc Ánh và ctv., 2012).

Kết quả nghiên cứu cho thấy, sau một tuần quan sát, tất cả các phôi chưa có dấu hiệu nảy mầm Đến tuần thứ hai, nghiệm thức 2 (tách màng bao phôi) có tỷ lệ nảy mầm cao nhất đạt 66,67% và duy trì đến tuần thứ tư mà không có thêm phôi nảy mầm Nghiệm thức 3 (Y3 cải tiến + 1 mg/L Kinetin) chỉ có 7,55% phôi nảy mầm và duy trì tỷ lệ này trong suốt 4 tuần Nghiệm thức 4 (Y3 cải tiến + 2 mg/L Kinetin) ghi nhận tỷ lệ nảy mầm rất thấp, chỉ đạt 3,78% sau 3 tuần Nghiệm thức 5 (Y3 cải tiến + 3 mg/L Kinetin) có tỷ lệ nảy mầm cao, đạt 48,2% sau 4 tuần Đặc biệt, nghiệm thức đối chứng không có phôi nảy mầm nào sau 4 tuần.

Hình 4.20: Tỉ lệ nảy chồi của các nghiệm thức qua các tuần thí nghiệm

Hình 4.21: Sự hình thành chồi của nghiệm thức 2 (Y3 cải tiến + cắt màng bao phôi)

Hình 4.22: Phôi không hình thành chồi ở nghiệm thức 4 (Y3 cải tiến + 1 mg/L Kinetin Y3 cải tiến + không cắt màng bao phôi)

Kết quả từ Hình 4.20, Hình 4.21 và Hình 4.22 cho thấy rằng phương pháp tách màng phôi đối với phôi không nảy mầm và được cấy nuôi trong môi trường Y3 cải tiến giúp các phôi tiếp tục nảy mầm Đây là bước quan trọng trong quy trình nhân giống dừa sáp cấy phôi, nhằm giảm tỷ lệ phôi bất thường và nâng cao tỷ lệ thành công.

4.1.1.2 Ảnh hưởng của ánh sáng lên độ nảy mầm của phôi dừa

Theo nghiên cứu của Nan et al (2012), phôi được duy trì ở nhiệt độ 27 độ C trong bóng tối từ 3 đến 6 tháng cho đến khi lá đầu tiên xuất hiện Sau giai đoạn này, phôi sẽ được tiếp xúc với ánh sáng trong 12 giờ mỗi ngày.

(1993) cũng cho rằng cây dừa sáp cấy phôi được nuôi cấy ở trong bóng tối cho đến khi phôi đã nảy mầm.

Nuôi cấy phôi dừa sáp yêu cầu điều kiện nhiệt độ từ 29-30°C và độ ẩm 30-50% Trong giai đoạn tiền nảy mầm, phôi cần được giữ trong bóng tối hoàn toàn Sau khi nảy mầm, phôi sẽ được chuyển vào môi trường chiếu sáng 12 giờ, chỉ cho những phôi đã nảy mầm (Kennedy et al., 1997).

Nghiên cứu cho thấy phôi dừa sáp nảy mầm hiệu quả hơn trong bóng tối, với tỷ lệ nảy mầm đạt 80% sau 5 tuần, so với 70% khi có ánh sáng.

Hình 4.23 cho thấy ảnh hưởng của ánh sáng đến sự nảy mầm của phôi dừa sáp Sau 3 tuần, tỷ lệ nảy mầm ở nghiệm thức có chiếu sáng đạt 28,6%, trong khi nghiệm thức không chiếu sáng đạt 38,1% Đến tuần thứ 4, tỷ lệ nảy mầm ở nghiệm thức chiếu sáng tăng lên 38,1%, còn nghiệm thức không chiếu sáng đạt 71,4% Tại tuần thứ 5, nghiệm thức chiếu sáng đạt 47,6% và không chiếu sáng đạt 85,7% Kết quả cho thấy phôi dừa sáp nảy mầm trong điều kiện bóng tối đạt 85,7% sau 5 tuần, trong khi điều kiện chiếu sáng chỉ đạt 47,6% Tuy nhiên, sự khác biệt giữa hai nghiệm thức không có ý nghĩa thống kê với giá trị t 0,177.

Hình 4.24: Phôi được nuôi trong điều kiện tối hoàn toàn (nhiều phôi đã nảy mầm)

Trong thí nghiệm nuôi phôi, không có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa điều kiện ánh sáng và tối Tuy nhiên, các hình ảnh 4.23, 4.24 và 4.25 cho thấy phôi nuôi trong điều kiện tối phát triển đều, nhanh và nhiều hơn Vì vậy, quy trình nhân giống dừa sáp cấy phôi đã chọn phương pháp nuôi phôi trong điều kiện tối.

4.1.2.1 Nghiên cứu bổ sung môi trường kích thích ra rễ, tạo lá khi cây phôi không ngập trong môi trường

Rễ cây đóng vai trò quan trọng trong việc cung cấp dinh dưỡng cho cây, chủ yếu bằng cách hấp thụ nước và muối khoáng hòa tan để chuyển lên các bộ phận quang hợp Cây có bộ rễ phát triển kém thường có tốc độ sinh trưởng chậm.

Bảng 4.12 cho thấy rằng khi phôi không được ngập trong môi trường, sự phát triển của lá cây diễn ra chậm, thậm chí nhiều trường hợp không có sự hình thành lá Cụ thể, ở nghiệm thức không bổ sung môi trường, chiều dài rễ không thay đổi, vẫn giữ ở mức 10,4 cm, số lượng rễ thứ cấp chỉ khoảng 1,4 rễ, gần như không có lá và chiều cao cây chỉ đạt 6,5 cm Ngược lại, ở nghiệm thức tối ưu với 3 mg/L NAA, cây phát triển tốt hơn với chiều dài rễ đạt 14,7 cm, số lượng rễ thứ cấp tăng lên 4,7 rễ, gần 3 lá được hình thành, và chiều cao cây đạt 28,9 cm.

Kết quả nghiên cứu trong Bảng 4.12 cho thấy việc bổ sung môi trường kích thích ra rễ và tạo lá cho cây phôi dừa sáp không bị ngập trong môi trường đã ảnh hưởng tích cực đến sự phát triển của rễ, lá và chiều cao cây.

Nghiệm thức Chiều dài rễ chính (cm)

Số lượng rễ thứ cấp Số lá Chiều dài thân (cm)

Không bổ sung môi trường

cho thấy sự khác biệt ý nghĩa ở mức 1%, trong khi ký hiệu * chỉ ra sự khác biệt ý nghĩa ở mức 5% Ký hiệu ns được sử dụng để chỉ không có sự khác biệt.

Hình 4.26: Nghiệm thức được bổ sung môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L NAA cây dừa có bộ rễ phát triển tốt

Hình 4.27: Nghiệm thức đối chứng không bổ sung môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L NAA cây dừa có bộ rễ phát triển kém

Trong quy trình nhân giống dừa sáp phôi, hệ thống rễ của cây phôi đóng vai trò quan trọng, vì rễ kém phát triển là nguyên nhân chính gây chết cây con khi chuyển ra môi trường vườn ươm.

4 27 chứng minh, phương pháp bổ sung môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L NAA giúp cây phôi phát triển hệ thống rễ tốt hơn, tăng tỷ lệ sống khi ra ngôi.

4.1.2.2 Nghiên cứu nồng độ chất điều hòa sinh trưởng kích thích ra rễ đối với các cây phôi sau 4 tháng nhưng chiều dài rễ nhỏ hơn 5 cm

Nghiên cứu của Nwite et al (2017) chỉ ra rằng bổ sung 1,0-1,5 mg/l NAA trong môi trường tạo rễ là thích hợp Kết quả cho thấy, sau 4 tháng, cây có chiều dài rễ nhỏ hơn 5 cm sử dụng Y3 cải tiến + 3 ppm IAA đạt hiệu quả tốt nhất với chiều dài rễ chính là 13,6 cm, số lượng rễ thứ cấp 3,3 rễ, số lá 2,6 lá và chiều dài thân 22,7 cm, có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức 1% so với các nghiệm thức khác Ngược lại, nghiệm thức đối chứng cho thấy sự phát triển kém nhất với chiều dài rễ chính 4,5 cm, 1 rễ, 1,5 lá và chiều dài thân 14,5 cm.

Bảng 4.13: Nghiên cứu nồng độ chất điều hòa sinh trưởng kích thích ra rễ đối với các cây phôi sau 4 tháng nhưng chiều dài rễ nhỏ hơn 5 cm

Nghiệm thức Chiều dài Số lượng Số lá Chiều rễ chính

(cm) rễ thứ cấp dài thân

Môi trường Y3 cải tiến + 2 ppm NAA (đối chứng) 4,5 d

Môi trường Y3 cải tiến + 1 ppm IAA 5,4 cd

Môi trường Y3 cải tiến + 2 ppm IAA 6,1 c

Môi trường Y3 cải tiến + 3 ppm IAA 13,6 b

Môi trường Y3 cải tiến + 4 ppm IAA 12,7 b

Môi trường Y3 cải tiến + 5 ppm IAA 12,3 b

Xác định các biện pháp để nâng cao tỷ lệ trái sáp trên dừa sáp cấy phôi ở tỉnh Trà Vinh

4.2.1 Ảnh hưởng của nồng độ acid boric lên tốc độ nảy mầm của hạt phấn dừa sáp cấy phôi

Theo Lê Hùng (2018), vi lượng Bo đóng vai trò quan trọng trong quá trình ra hoa và đậu trái của cây trồng Bo là một trong 10 chất trung vi lượng thiết yếu cho sự phát triển của cây.

Vi lượng Bo đóng vai trò lớn trong quá trình ra hoa thụ phấn và hình thành trái.

Bo giúp ngăn ngừa hiện tượng cháy hoa, rụng hoa và rụng trái, đồng thời giữ lá luôn xanh và không bị xoăn Việc bổ sung Bo cải thiện chất lượng hạt phấn, tăng cường khả năng thụ tinh cho trái, và hỗ trợ quá trình chuyển dẫn dinh dưỡng vào trái, giúp trái phát triển to hơn Thiếu Bo sẽ làm tăng tỷ lệ bông đực và dễ dẫn đến hiện tượng rụng bông.

Ngoài ra Bo giúp rễ chống chịu được với đất có độ pH thấp (chất nhôm nhiều).

Cây trồng đủ Bo sẽ hấp thụ các dưỡng chất như lân và Kali Clorua dễ dàng hơn.

Boron là một nguyên tố vi lượng quan trọng cho sự phát triển của cây, có thể được áp dụng qua bón đất hoặc phun lên lá Nguyên tố này thúc đẩy sự nảy mầm của hạt phấn và sự phát triển của ống phấn Theo nghiên cứu của Nguyễn Văn Cử và Nguyễn Bảo Toàn (2006), việc phun Boron lên lá với nồng độ từ 100 đến 250 mg/L đã tăng năng suất cây cam Sành so với đối chứng.

Nghiên cứu của Ba và cộng sự (2006) cho thấy việc phun Bo với nồng độ 2 g/L trên cây xoài Cát Hòa Lộc không chỉ nâng cao khả năng đậu trái mà còn làm tăng năng suất lên đến 58% so với nhóm đối chứng.

Nghiên cứu của Ali et al (2015) cho thấy việc phun acid boric với nồng độ 25 mg/L trên giống cà chua lai BARI ở Bangladesh đã giúp cây ra hoa sớm hơn, tăng số lượng trái trên cây và nâng cao năng suất so với nhóm đối chứng chỉ phun nước.

Theo nghiên cứu của Trần Văn Hâu và Trần Thị Thúy Ái (2011), xử lý acid boric ở nồng độ 10 mg/L giúp hạt phấn dừa Ta Xanh nảy mầm đạt tỷ lệ 100% chỉ sau 3 giờ nuôi cấy trong đĩa petri, đồng thời thúc đẩy sự phát triển nhanh gấp 10 lần so với mẫu đối chứng Tương tự, Tạ Thu Cúc (2005) cho biết việc bổ sung acid boric không chỉ thúc đẩy sự nảy mầm của hạt phấn mà còn cải thiện sự sinh trưởng của ống phấn, từ đó tăng khả năng đậu trái và nâng cao năng suất cây cà chua.

Nghiên cứu của Trần Văn Hâu và Nguyễn Thị Thúy Ái (2011) chỉ ra rằng việc sử dụng acid boric với nồng độ 10 mg/L giúp hạt phấn nảy mầm nhanh chóng, đạt tỷ lệ nảy mầm 100% sau 12 giờ, trong khi nghiệm thức đối chứng chỉ đạt 14,04% sau 12 giờ và 17,64% sau 48 giờ.

Nghiên cứu về sự nảy mầm của hạt phấn dừa sáp cấy phôi cho thấy hạt phấn nảy mầm nhanh chóng, với sự khởi đầu sau chỉ một giờ Tốc độ nảy mầm đạt đỉnh sau 48 giờ, chứng tỏ khả năng sinh trưởng mạnh mẽ của hạt phấn này.

Kết quả từ Hình 4.33 cho thấy sự nảy mầm của hạt phấn trong môi trường nuôi cấy với nồng độ 15 mg/L qua các giai đoạn 3 giờ và 12 giờ Theo Bảng 4.19, tỷ lệ nảy mầm hạt phấn dừa sáp cấy phôi có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức 1% Ở giai đoạn 3 giờ, tỷ lệ nảy mầm thấp, dao động từ 4,5-6,5 hạt/cm², trong đó nghiệm thức acid boric 15 mg/L đạt 6,5 hạt/cm² Sau 6 giờ, nồng độ acid boric 20 mg/L cho thấy tốc độ nảy mầm cao nhất với 53,5 hạt/cm², tăng gấp 9,7 lần so với nghiệm thức đối chứng chỉ tăng gấp 7,8 lần.

Sau 12 giờ cấy, số lượng hạt phấn nảy mầm tăng nhanh, đạt trung bình từ 230,5 đến 353,5 hạt/cm², với nồng độ 20 mg/L vẫn là cao nhất Đến 24 giờ, số lượng hạt phấn nảy mầm ở nồng độ 20 mg/L đạt 843,5 hạt/cm², gấp 1,7 lần so với đối chứng (486 hạt/cm²) Các nồng độ khác cũng cao hơn so với đối chứng, nhưng không có sự khác biệt lớn như ở nghiệm thức 20 mg/L.

Giai đoạn 48 giờ sau khi cấy, hầu hết tất cả các hạt phấn đều đã nảy mầm, số hạt phấn nảy mầm trung bình là 881,3 hạt/cm 2

Kết quả từ Bảng 4.19 cho thấy tỷ lệ nảy mầm hạt phấn dừa sáp cấy phôi có sự khác biệt thống kê đáng kể ở mức 1% Cụ thể, nghiệm thức sử dụng acid boric với nồng độ 20 mg/L đã giúp hạt phấn nảy mầm nhanh chóng chỉ sau 24 giờ nuôi cấy Kết quả này phù hợp với nghiên cứu của Wang et al (2003), cho thấy nồng độ acid boric thấp dẫn đến tỷ lệ nảy mầm kém.

Nồng độ acid boric có ảnh hưởng đáng kể đến tốc độ nảy mầm của hạt phấn dừa sáp cấy phôi tại xã Lương Hòa, huyện Châu Thành, tỉnh Trà Vinh Bảng 4.19 trình bày kết quả nghiên cứu cho thấy sự thay đổi nồng độ acid boric có thể tác động tích cực hoặc tiêu cực đến quá trình nảy mầm, từ đó ảnh hưởng đến năng suất và chất lượng cây dừa sáp Việc điều chỉnh nồng độ acid boric phù hợp sẽ giúp tối ưu hóa quá trình sinh trưởng của hạt phấn, góp phần nâng cao hiệu quả sản xuất dừa sáp tại địa phương.

Số hạt phấn nảy mầm (hạt/cm

3 giờ 6 giờ 12 giờ 24 giờ 48 giờ

cho sự khác biệt ý nghĩa ở mức 1%, trong khi ký hiệu ns cho thấy không có sự khác biệt.

Tác động của acid boric đến sự nảy mầm của hạt phấn cây dừa sáp cấy phôi tương tự như cây dừa thường, với việc hạt phấn nảy mầm nhanh hơn trong môi trường có nồng độ acid boric cao.

4.2.2 Không trùm kín phát hoa mới nở: ảnh hưởng của nồng độ và thời điểm phun acid boric lên sự đậu trái dừa sáp 4.2.2.1 Thời điểm 15 ngày sau khi nứt mo (hoa nở)

Kết luận

Nghiên cứu đã xác định các biện pháp cải tiến kỹ thuật nhân giống từ phôi, bao gồm cắt màng bao phôi và nuôi phôi trong điều kiện tối ưu cho phôi kém phát triển Việc bổ sung môi trường nuôi cấy hoặc tăng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng NAA lên 3 mg/L cho trường hợp môi trường không ngập hết cổ rễ, cùng với duy trì độ ẩm 90-95% và sử dụng giá thể phân bò và mụn dừa theo tỷ lệ 2:1 với ánh sáng giảm 70% trong giai đoạn cây con, đã giúp nâng cao tỷ lệ thành công từ 45% lên trên 55% (>55 cây xuất vườn/100 phôi) Thời gian sản xuất cây giống cũng được rút ngắn từ trên 24 tháng xuống còn dưới 14 tháng.

Kỹ thuật bón phân cho cây dừa sáp cấy phôi trên 5 năm tuổi yêu cầu liều lượng 1,6 kg Urê, 1,6 kg Supper Lân và 1,6 kg Kali Clorua mỗi cây mỗi năm Việc bón phân nên được thực hiện định kỳ mỗi tháng để đảm bảo cây phát triển khỏe mạnh và đạt năng suất cao.

Biện pháp trùm phát hoa kết hợp với phun acid boric chưa cho thấy hiệu quả rõ ràng trong việc nâng cao tỷ lệ đậu trái và trái sáp trong mô hình trồng dừa sáp cấy phôi.

Lợi nhuận trung bình của mô hình dừa sáp phôi hơn dừa sáp thường gấp 3,9 lần,

Tỷ lệ trái sáp/quày của cây dừa sáp chịu ảnh hưởng bởi nhiều

Kiến nghị

- Tiếp tục nghiêm cứu rút ngắn thời gian sản xuất cây giống tương đồng với thời gian sản xuất cây giống từ trái dưới 10 tháng.

Cần tiến hành nghiên cứu sâu hơn về lượng phân bón cho cây dừa sáp cấy phôi, xem xét nhiều yếu tố như loại đất, tuổi cây, mật độ trồng và chủng loại phân bón Điều này sẽ cung cấp cơ sở khoa học vững chắc để xác định lượng phân bón phù hợp cho cây dừa sáp.

Ngày đăng: 28/09/2022, 06:37

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Bảng 1.1: Lượng phân bón khuyến cáo cho dừa theo tuổi cây - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Bảng 1.1 Lượng phân bón khuyến cáo cho dừa theo tuổi cây (Trang 21)
• Một tổ chức có thể xây dựng một CSDL rất lớn lưu trữ trên các máy tính có cấu hình mạnh - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
t tổ chức có thể xây dựng một CSDL rất lớn lưu trữ trên các máy tính có cấu hình mạnh (Trang 22)
Hình 2.2: Cây dừa sáp cấy phôi - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 2.2 Cây dừa sáp cấy phôi (Trang 25)
Hình 2.7: Các kiểu dừa sáp (Toan and Thanh, 2011). - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 2.7 Các kiểu dừa sáp (Toan and Thanh, 2011) (Trang 31)
• Cơ sở dữ liệu? Mô hình dữ liệu? Hệ quản trị cơ sở dữ liệu? Vai trò của hệ quản trị cơ sở dữ liệu? Xu hướng ?của hệ quản trị cơ sở dữ liệu? Xu hướng ? - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
s ở dữ liệu? Mô hình dữ liệu? Hệ quản trị cơ sở dữ liệu? Vai trò của hệ quản trị cơ sở dữ liệu? Xu hướng ?của hệ quản trị cơ sở dữ liệu? Xu hướng ? (Trang 31)
Bảng 2.5: Thành phần dinh dưỡng trong 100g cơm dừa sáp - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Bảng 2.5 Thành phần dinh dưỡng trong 100g cơm dừa sáp (Trang 52)
Bảng 3.11: Kết quả phân tích lý hóa đất vùng trồng dừa sáp huyện Châu Thành tỉnh Trà Vinh - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Bảng 3.11 Kết quả phân tích lý hóa đất vùng trồng dừa sáp huyện Châu Thành tỉnh Trà Vinh (Trang 71)
Hình 3.19: Vị trí đo chu vi gốc (13 sẹo lá) - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 3.19 Vị trí đo chu vi gốc (13 sẹo lá) (Trang 74)
Hình 4.27: Nghiệm thức đối chứng không bổ sung môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L NAA - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 4.27 Nghiệm thức đối chứng không bổ sung môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L NAA (Trang 82)
Hình 4.29: Cây ở nghiệm thức khơng cắt rễ và cấy vào môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 4.29 Cây ở nghiệm thức khơng cắt rễ và cấy vào môi trường Y3 cải tiến + 3 mg/L (Trang 85)
Hình 4.30: Cây dừa sáp cấy phơi được trồn gở độ ẩm 90% sau 28 ngày - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 4.30 Cây dừa sáp cấy phơi được trồn gở độ ẩm 90% sau 28 ngày (Trang 87)
Bảng 4.17: Kết quả ảnh hưởng của cường độ ánh sáng lên sinh trưởng của cây phôi giai đoạn thuần dưỡng - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Bảng 4.17 Kết quả ảnh hưởng của cường độ ánh sáng lên sinh trưởng của cây phôi giai đoạn thuần dưỡng (Trang 90)
Hình 4.32: Quy trình nhân giống phôi dừa sáp được cải tiến - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Hình 4.32 Quy trình nhân giống phôi dừa sáp được cải tiến (Trang 93)
Bảng 4.25: Ảnh hưởng của phân bón đến số tàu lá trung bình năm 2018, 2019, và 2020 (tàu) - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Bảng 4.25 Ảnh hưởng của phân bón đến số tàu lá trung bình năm 2018, 2019, và 2020 (tàu) (Trang 105)
Bảng 4.28: Ảnh hưởng của phân bón đến số trái/quày năm 2020 - (LUẬN án TIẾN sĩ) cải thiện kỹ thuật nhân giống từ phôi và biện pháp nâng cao tỷ lệ sáp trên dừa sáp (cocos nucifera var  makapuno) ở tỉnh trà vinh
Bảng 4.28 Ảnh hưởng của phân bón đến số trái/quày năm 2020 (Trang 108)

TRÍCH ĐOẠN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w