LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin được cảm ơn ThS Nguyễn Hoàng Lê – Giảng viên Bộ môn Hóa phân tích – Độc chất trường Đại học Dược Hà Nội, người đã chỉ bảo, giúp đỡ và động viên em rất nhiều trong suốt.
LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, em xin cảm ơn ThS Nguyễn Hồng Lê – Giảng viên Bộ mơn Hóa phân tích – Độc chất trường Đại học Dược Hà Nội, người bảo, giúp đỡ động viên em nhiều suốt trình thực hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Phạm Thị Thanh Hà, ThS Vũ Ngân Bình thầy kỹ thuật viên mơn Hóa phân tích – Độc chất trường Đại học Dược Hà Nội tạo điều kiện tốt giúp đỡ em trình học tập, nghiên cứu môn Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô Ban giám hiệu, phịng Đào tạo tồn thể thấy trường Đại học Dược Hà Nội trang bị cho em kiến thức kỹ thời gian em theo học mái trường Cuối cùng, lời cảm ơn thân thương em muốn gứi đến gia đình, bạn bè, người động viên âm thầm giúp đỡ em suốt thời gian qua Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 24 tháng năm 2021 Sinh viên Đoàn Thị Tươi BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN THỊ TƯƠI MÃ SINH VIÊN: 1601858 ĐỊNH LƯỢNG VITEXIN TRONG CHẾ PHẨM TỪ DƯỢC LIỆU CHỨA LẠC TIÊN BẰNG HPLC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS Nguyễn Hoàng Lê Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa phân tích – Độc chất HÀ NỘI – 2021 MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan lạc tiên Passiflora foetida L 1.1.1 Đặc điểm hình thái thực vật phân bố 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Tác dụng dược lý công dụng 1.2 Tổng quan vitexin 1.2.1 Cấu trúc hóa học tính chất 1.2.2 Tác dụng dược lý 1.2.3 Các phương pháp xác định 1.3 Tổng quan phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 10 1.3.1 Định nghĩa 10 1.3.2 Các thông số đặc trưng trình sắc ký 10 1.3.3 Máy HPLC 12 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Nguyên liệu thiết bị 13 2.1.1 Đối tượng 13 2.1.2 Nguyên liệu 13 2.1.3 Thiết bị - dụng cụ 13 2.2 Nội dung nghiên cứu 14 2.3 Phương pháp nghiên cứu 14 2.3.1 Chuẩn bị mẫu chạy sắc ký 14 2.3.2 Khảo sát xác định điều kiện sắc ký 14 2.3.3 Thẩm định phương pháp định lượng 15 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 17 CHƯƠNG THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 18 3.1 Chuẩn bị dung dịch 18 3.2 Khảo sát 18 3.2.1 Khảo sát bước sóng phát 18 3.2.2 Khảo sát dung môi chiết 19 3.2.3 Khảo sát thành phần pha động 21 3.2.4 Khảo sát tốc độ dòng thể tích tiêm mẫu 25 3.3 Thẩm định phương pháp định lượng 26 3.3.1 Độ đặc hiệu 26 3.3.2 Độ ổn định hệ thống 28 3.3.3 Đường chuẩn 28 3.3.4 Độ lặp lại phương pháp 30 3.3.5 Độ phương pháp 30 3.3.6 Giới hạn phát LOD giới hạn định lượng LOQ 31 3.4 Xác định hàm lượng vitexin mẫu chế phẩm 32 3.5 Bàn luận 32 3.5.1 Điều kiện xử lý mẫu 32 3.5.2 Xây dựng phương pháp định lượng 33 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên tiếng Anh tên khoa học Tên tiếng Việt ACN Acetonitril Acetonitril EtOH Ethanol Ethanol HPLC High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao LOD Limit of Detection Giới hạn phát LOQ Limit of Quantitation Giới hạn định lượng MeOH Methanol Methanol RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn THF Tetrahydrofuran Tetrahydrofuran DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1 Công thức cấu tạo vitexin Hình Cấu tạo máy HPLC 12 Hình Phổ hấp thụ UV vitexin 19 Hình Chế phẩm chiết MeOH 40% 20 Hình 3 Chế phẩm chiết EtOH 60% 20 Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy chương trình gradient 22 Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy chương trình gradient 22 Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy chương trình gradient 22 Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy đẳng dòng 17,5% ACN 25 Hình Sắc ký đồ kết độ đặc hiệu 27 Hình Tương quan tuyến tính diện tích pic nồng độ vitexin 29 vitexin isovitexin có khả chống đái tháo đường nhờ tác dụng ức chế enzym PTP-1B – enzym điều hòa âm tính hoạt động insulin mơ đích [20] e Tác dụng tim mạch Trong nghiên cứu thực thỏ người tình nguyện khỏe mạnh, vitexin tạo tác dụng co bóp tích cực tâm nhĩ bị cô lập thỏ mà không liên quan đến hoạt hóa thụ thể β1 - adrenergic Vitexin khơng có hoạt tính giãn mạch khơng thể đảo ngược phản ứng co mạch động mạch phổi bị cô lập thỏ kali clorua phenylephrine Vitexin làm tăng đáng kể lưu lượng nước tiểu tiết natri, kali nước tiểu người tình nguyện khỏe mạnh tăng huyết áp nhẹ thỏ Hơn nữa, vitexin làm giảm đáng kể huyết áp động mạch trung bình người tình nguyện thỏ cao huyết áp nhẹ Tác dụng hạ huyết áp vitexin không liên quan đến việc giãn mạch trực tiếp chẹn thụ thể α, β - adrenergic Cơ chế hoạt động có khả vitexin hợp chất hạ huyết áp thơng qua tác dụng lợi tiểu [13] f Tác dụng an thần Uống trà làm từ hoa lạc tiên, đặc biệt Passiflora incarnata, từ lâu biết có tác dụng an thần gây ngủ [32] Nó loại thảo mộc an tồn, đăng ký làm thực phẩm với Bộ An toàn Thực phẩm Dược phẩm Hàn Quốc (KFDA) Kim G cộng tiêu chuẩn hóa quy trình chiết xuất Passiflora incarnata với rượu etylic để tạo sản phẩm gây ngủ an toàn Vitexin sản phẩm phương pháp chiết xuất xây dựng nhóm nghiên cứu [30] Kết nghiên cứu cho thấy việc sử dụng chiết xuất Passiflora incarnata có tác dụng gây ngủ, mơ hình động vật mà khơng gây rối loạn hành vi chuyển hóa bất lợi (như tăng cảm giác thèm ăn, tăng trọng lượng thể) 1.2.3 Các phương pháp xác định Lữ Thị Kim Chi cộng [5] chiết xuất, phân lập vitexin từ lạc tiên định lượng dung dịch vitexin tinh chế sắc ký lỏng hiệu cao với thử chiết ethanol 60% có số purity factor cao 0,997 Điều giải thích vitexin có chứa nhiều nhóm hydroxyl linh động cấu trúc phân tử lớn nên có độ phân cực gần với độ phân cực ethanol 60% khiến chúng hòa tan tốt Kết luận: Lựa chọn ethanol 60% làm dung môi chiết 3.2.3 Khảo sát thành phần pha động Thành phần pha động có ảnh hưởng đến lực tương tác chất phân tích với pha tĩnh pha động Do thay đổi thành phần pha động làm thay đổi thứ tự rửa giải chất, tức làm thay đổi thời gian lưu chất phân tích Trong q trình nghiên cứu, điều kiện sau giữ cố định suốt q trình khảo sát: - Cột phân tích SunfireTM C18 (250mm*4,6mm; 5µm); - Nhiệt độ cột: 25ºC; - Thể tích tiêm: 20 µl; tốc độ dịng: 1,2 ml/phút - Detector DAD; bước sóng làm việc: 342 nm a Hệ pha động thứ Theo tài liệu [36], khảo sát hệ pha động gồm đệm phosphat KH2PO4 pH 4,5 ACN với chương trình gradient khác Bảng Kết khảo sát chương trình gradient điều kiện thứ Chương Thời trình gian gradient (phút) Kết Thời gian lưu % ACN vitexin mẫu thử (phút) Hệ số phân giải Purity factor Match → 60 → 25 43,356 → 25 15 → 30 13,852 0,93 0,892 75,1% → 25 15 → 25 15,489 1,23 0,998 94,2% → 22 15 → 33 12,168 1,57 0,659 97,3% 21 thử chiết ethanol 60% có số purity factor cao 0,997 Điều giải thích vitexin có chứa nhiều nhóm hydroxyl linh động cấu trúc phân tử lớn nên có độ phân cực gần với độ phân cực ethanol 60% khiến chúng hòa tan tốt Kết luận: Lựa chọn ethanol 60% làm dung môi chiết 3.2.3 Khảo sát thành phần pha động Thành phần pha động có ảnh hưởng đến lực tương tác chất phân tích với pha tĩnh pha động Do thay đổi thành phần pha động làm thay đổi thứ tự rửa giải chất, tức làm thay đổi thời gian lưu chất phân tích Trong trình nghiên cứu, điều kiện sau giữ cố định suốt trình khảo sát: - Cột phân tích SunfireTM C18 (250mm*4,6mm; 5µm); - Nhiệt độ cột: 25ºC; - Thể tích tiêm: 20 µl; tốc độ dịng: 1,2 ml/phút - Detector DAD; bước sóng làm việc: 342 nm a Hệ pha động thứ Theo tài liệu [36], khảo sát hệ pha động gồm đệm phosphat KH2PO4 pH 4,5 ACN với chương trình gradient khác Bảng Kết khảo sát chương trình gradient điều kiện thứ Chương Thời trình gian gradient (phút) Kết Thời gian lưu % ACN vitexin mẫu thử (phút) Hệ số phân giải Purity factor Match → 60 → 25 43,356 → 25 15 → 30 13,852 0,93 0,892 75,1% → 25 15 → 25 15,489 1,23 0,998 94,2% → 22 15 → 33 12,168 1,57 0,659 97,3% 21 thử chiết ethanol 60% có số purity factor cao 0,997 Điều giải thích vitexin có chứa nhiều nhóm hydroxyl linh động cấu trúc phân tử lớn nên có độ phân cực gần với độ phân cực ethanol 60% khiến chúng hòa tan tốt Kết luận: Lựa chọn ethanol 60% làm dung môi chiết 3.2.3 Khảo sát thành phần pha động Thành phần pha động có ảnh hưởng đến lực tương tác chất phân tích với pha tĩnh pha động Do thay đổi thành phần pha động làm thay đổi thứ tự rửa giải chất, tức làm thay đổi thời gian lưu chất phân tích Trong q trình nghiên cứu, điều kiện sau giữ cố định suốt q trình khảo sát: - Cột phân tích SunfireTM C18 (250mm*4,6mm; 5µm); - Nhiệt độ cột: 25ºC; - Thể tích tiêm: 20 µl; tốc độ dịng: 1,2 ml/phút - Detector DAD; bước sóng làm việc: 342 nm a Hệ pha động thứ Theo tài liệu [36], khảo sát hệ pha động gồm đệm phosphat KH2PO4 pH 4,5 ACN với chương trình gradient khác Bảng Kết khảo sát chương trình gradient điều kiện thứ Chương Thời trình gian gradient (phút) Kết Thời gian lưu % ACN vitexin mẫu thử (phút) Hệ số phân giải Purity factor Match → 60 → 25 43,356 → 25 15 → 30 13,852 0,93 0,892 75,1% → 25 15 → 25 15,489 1,23 0,998 94,2% → 22 15 → 33 12,168 1,57 0,659 97,3% 21 Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy chương trình gradient Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy chương trình gradient Hình Sắc ký đồ mẫu chế phẩm chạy chương trình gradient Nhận xét: Chương trình gradient 1, sắc ký đồ mẫu chế phẩm có 22 Bảng 1 Một số phương pháp phân tích vitexin HPLC Tài liệu tham Mẫu Chuẩn bị mẫu khảo Pha tĩnh Pha động Detector Chiết xuất, phân Lạc tiên [5] lập, tinh C18 Acetonitril - Passiflora chế (150×4,6 acid acetic foetida mm; 5µm) 0,1% (20:80) vitexin PDA qua giai đoạn Isopropanol Lạc tiên [43] Methanol C18 THF - H2O Passiflora 40%, siờu (250ì4,6 (5:15:80) v foetida mm; 5àm) 0,3% formic âm DAD acid Lạc tiên [30] tây Passiflora incarnata Ethanol C18 Acetonitril - 50%, siêu (250×4,6 H3PO4 0,1% âm mm; 5àm) (13:87) C18 Acetonitril - (250ì4,6 m phosphat mm; 5µm) pH 4,5 DAD Viên nang Low–Glu, [36] Ficus deltoidea Methanol, siêu âm Jack DAD The Scientific World Journal 13 Ali Al-jeboory D Kawa F Dizaye D (2006), "Cardiovascular effects of vitexin isolated from Prosopis farcta", Iraqi Journal of Pharmacy, 6(1), pp.14– 19 14 Andersen L., Adsersen A., Jaroszewski J.W (1998), "Cyanogenesis of Passiflora foetida", Phytochemistry, 47(6), pp.1049–1050 15 Asadujjaman Md., Mishuk A.U., Hossain Md.A., et al (2014), "Medicinal potential of Passiflora foetida L plant extracts: biological and pharmacological activities", Journal of Integrative Medicine, 12(2), pp.121– 126 16 Association of Official Analytical Chemists (2016), Guidelines for Standard Method Performance Requirements 17 Babaei F., Moafizad A., Darvishvand Z., et al (2020), "Review of the effects of vitexin in oxidative stress-related diseases", Food Science & Nutrition, pp.8 18 Chiavaroli A., Di Simone S., Ibrahime S., et al (2020), "Pharmacological Properties and Chemical Profiles of Passiflora foetida L Extracts: Novel Insights for Pharmaceuticals and Nutraceuticals", Processes, 8, pp.1034 19 Choi H., Eun J., Kim B., et al (2007), "Vitexin, an HIF-1α inhibitor, has anti-metastatic potential in PC12 cells", Molecules and cells, 22, pp.291–299 20 Choi J.S., Nurul Islam Md., Yousof Ali Md., et al (2014), "Effects of Cglycosylation on anti-diabetic, anti-Alzheimer’s disease and anti- inflammatory potential of apigenin", Food and Chemical Toxicology, 64, pp.27–33 21 Choo C.Y., Sulong N.Y., Man F., et al (2012), "Vitexin and isovitexin from the Leaves of Ficus deltoidea with in-vivo α-glucosidase inhibition", Journal of Ethnopharmacology, 142(3), pp.776–781 22 Costa E.C., Menezes P.M.N., de Almeida R.L., et al (2020), "Inclusion of 37 vitexin in β-cyclodextrin: preparation, characterization and expectorant/antitussive activities", Heliyon, 6(12) 23 Echeverri F., Arango V., Quiñones W., et al (2001), "Passifloricins, polyketides alpha-pyrones from Passiflora foetida resin", Phytochemistry, 56(8), pp.881–885 24 Ezzat S and Salama M (2014), "A new α-glucosidase inhibitor from Achillea fragrantissima (Forssk.) Sch Bip growing in Egypt", Natural product research, pp.28 25 Foudah A.I., Alam P., Kamal Y.T., et al (2019), "Development and validation of a high-performance thin-layer chromatographic method for the quantitative analysis of vitexin in Passiflora foetida herbal formulations", Saudi Pharm Journal, 27(8), pp.1157–1163 26 Fu Y., Zu Y., Liu W., et al (2008), "Determination of vitexin and isovitexin in pigeonpea using ultrasonic extraction followed by LC-MS", Journal of Separate Science, 31(2), pp.268–275 27 Ganesan K and Xu B (2017), "Molecular targets of vitexin and isovitexin in cancer therapy: a critical review", Annals of the New York Academy of Sciences, 1401(1), pp.102–113 28 Guerrero F.A and Medina G.M (2017), "Effect of a medicinal plant (Passiflora incarnata L) on sleep", Sleep Sci, 10(3), pp.96–100 29 Hasan S.Q., Ahmad I., Sherwani M.R.K., et al (1980), "Studies on Herbaceous Seed Oils X", Fette, Seifen, Anstrichmittel, 82(5), pp.204–205 30 Kim G H Yi S S (2019), "Chronic oral administration of Passiflora incarnata extract has no abnormal effects on metabolic and behavioral parameters in mice, except to induce sleep", Lab Anim Res, pp.35 31 Kim J H., Lee B C., Kim J H., et al (2005), "The isolation and antioxidative effects of vitexin from Acer palmatum", Arch Pharm Res, 28(2), pp.195 32 Kim M., Lim H S., Lee H H., et al (2017), "Role Identification of Passiflora incarnata Linnaeus : A Mini Review", Journal of Menopausal Medicine, 38 23(3), pp.156 33 Lee C Y., Chien Y S., Chiu T H., et al (2012), "Apoptosis triggered by vitexin in U937 human leukemia cells via a mitochondrial signaling pathway", Oncology Reports, 28(5), pp.1883–1888 34 López-Lázaro M (2009), "Distribution and biological activities of the flavonoid luteolin", Mini reviews in medicinal chemistry, 9, pp.31–59 35 Mareck U., Herrmann K., Galensa R., et al (1991), "The 6-C-chinovoside and 6-C-fucoside of luteolin from Passiflora edulis", Phytochemistry, 30(10), pp.3486–3487 36 Marzouk H.M., Teaima M.H., El-Desoky A.M., et al (2020), "A validated HPLC-DAD method for simultaneous determination of major bioactive constituents of Antidiabetic herbal extracts; application to a newly Coformulated nutraceutical product", Microchemical Journal, pp.159 37 Mohanasundari C., Natarajan D., Srinivasan K., et al (2007), "Antibacterial properties of Passiflora foetida L – a common exotic medicinal plant", African Journal of Biotechnology, 6(23) 38 Nguyen T.Y., To D.C., Tran M.H., et al (2015), "Anti-inflammatory Flavonoids Isolated from Passiflora foetida", Natural Product Communications, 10(6), pp.929–931 39 Ni M., Hu X., Gong D., et al (2020), "Inhibitory mechanism of vitexin on αglucosidase and its synergy with acarbose", Food Hydrocolloids, pp.105 40 Panthosh S., Venugopal R., Nilakash S., et al (2010), "Antidepressant activity of methanolic extract of Passiflora foetida leaves in mice", International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 3, pp.112–115 41 Patel S., Soni H., Mishra K., et al (2011), "Recent updates on the genus Passiflora: A review", International Journal of Research in Phytochemistry and Pharmacology, 42 Paulraj J.A., Subharamanian H., Suriyamoorthy P., "Phytochemical screening, gc-ms analysis and enzyme inhibitory activity of Passiflora foetida L", 4(2231), pp.9 39 43 Pongpan N., Luanratana O., Suntornsuk L (2007), "Rapid reversed-phase high performance liquid chromatography for vitexin analysis and fingerprint of Passiflora foetida", Current Science, 93, pp.378–382 44 Quílez A., Berenguer B., Gilardoni G., et al (2010), "Anti-secretory, antiinflammatory and anti-Helicobacter pylori activities of several fractions isolated from Piper carpunya Ruiz & Pav", Journal of Ethnopharmacology, 128(3), pp.583–589 45 Rahman M., Hossain M., Hasan M., et al (2011), "Antinociceptive, antidiarrhoeal and cytotoxic activities of Passiflora foetida Linn", Pharmacologyonline, 1, pp.228–236 46 Ranganatha N (2013), "Study of Anti-Hypertension Activity of Aerial Parts of Passiflora foetida Linn", 1, pp.1-12 47 Saravanan S., Parimelazhagan T (2014), "In vitro antioxidant, antimicrobial and anti-diabetic properties of polyphenols of Passiflora ligularis Juss fruit pulp", Food Science and Human Wellness, 3(2), pp.56–64 48 Sasikala V., Saravanan S., and Thangaraj P (2011), "Analgesic and antiinflammatory activities of Passiflora foetida L", Asian Pacific journal of tropical medicine, 4, pp.600–603 49 Sulong N.A.Y (2014), Bioflavonoids from the leaves of ficus deltoidea jack with a-glucosidase inhibition, Universiti Teknologi MARA 50 Tabart J., Kevers C., Sipel A., et al (2007), "Optimisation of extraction of phenolics and antioxidants from black currant leaves and buds and of stability during storage", Food Chemistry, 105(3), pp.1268–1275 51 Vijayalaxmi S., Bhosale U (2013), "Screening of Passiflora foetida extracts as anticancer agents on MCF cell lin", Bioinfolet, 10(3a), pp.808-810 52 Wang H., Zhao M., Yang B., et al (2008), "Identification of polyphenols in tobacco leaf and their antioxidant and antimicrobial activities", Food Chemistry, 107(4), pp.1399–1406 53 Yang S.H., Liao P.H., Pan Y.F., et al (2013), "The Novel p53-Dependent Metastatic and Apoptotic Pathway Induced by Vitexin in Human Oral Cancer 40 OC2 Cells", Phytotherapy Research, 27(8), pp.1154–1161 54 Yao Y., Cheng X., Wang L., et al (2011), "A Determination of Potential αGlucosidase Inhibitors from Azuki Beans (Vigna angularis)", International Journal of Molecular Sciences, 12(10), pp.6445–6451 55 Zhang W., Zhou L., Liu G (2020), "Vitexin inhibited the invasion, metastasis, and progression of human melanoma cells by targeting STAT3 signaling pathway", BioRxiv 41 PHỤ LỤC Sắc ký đồ độ phù hợp hệ thống Lần Lần Lần Lần Lần Lần 42 Sắc ký đồ đường chuẩn 12,96 ppm 2,16 ppm 5,4 ppm 16,2 ppm 8,65 ppm 21,6 ppm 10,8 ppm 27 ppm 43 Sắc ký đồ độ 44 Sắc ký đồ độ lặp lại 45 Sắc ký đồ chương trình đẳng dịng 15% ACN vitexin Sắc ký đồ chương trình đẳng dịng 19% ACN vitexin Sắc ký đồ chương trình đẳng dịng 17% ACN vitexin 46 Sắc ký đồ khảo sát tốc độ dịng thể tích tiêm 1,2 ml/phút; 20 µl 1,3 ml/phút; 20 µl 1,3 ml/phút; 15 µl 1,4 ml/phút; 20 µl 47 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN THỊ TƯƠI ĐỊNH LƯỢNG VITEXIN TRONG CHẾ PHẨM TỪ DƯỢC LIỆU CHỨA LẠC TIÊN BẰNG HPLC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2021 ...BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN THỊ TƯƠI MÃ SINH VIÊN: 1601858 ĐỊNH LƯỢNG VITEXIN TRONG CHẾ PHẨM TỪ DƯỢC LIỆU CHỨA LẠC TIÊN BẰNG HPLC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: ThS... chế phẩm Áp dụng phương pháp định lượng vitexin mẫu chế phẩm từ dược liệu chứa lạc tiên thị trường Viên ngủ Nightcare (500 mg lạc tiên) (Công ty TNHH Dược Nanocare Việt Nam, số lô 011119, hạn... chế phẩm Áp dụng phương pháp định lượng vitexin mẫu chế phẩm từ dược liệu chứa lạc tiên thị trường Viên ngủ Nightcare (500 mg lạc tiên) (Công ty TNHH Dược Nanocare Việt Nam, số lô 011119, hạn