Cả hai chủng Đ2 và VP2 đều mang hình thái của Trichoderma sp. Cả hai chủng đều sinh trưởng tốt ở nhiệt độ 30oC, sinh trưởng tốt nhất trên môi trường PDA và phát triển tốt từ pH5 đến pH6. Tuy nhiên chủng nấm VP2 có khả năng sinh trưởng mạnh hơn cũng như khả năng ức chế cao nhất trong các chủng nấm phân lập được từ đất trồng lạc.
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: PHÂN LẬP, TUYỂN CHỌN CÁC CHỦNG VI NẤM CÓ KHẢ NĂNG ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM SCLEROTIUM ROLFSII GÂY BỆNH THỐI GỐC LẠC Sinh viên thực hiện: Vũ Thị Huế MSV : 637029 GV hướng dẫn : PGS TS Nguyễn Xuân Cảnh NỘI DUNG Phần 1: MỞ ĐẦU Phần 2: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP Phần 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Phần 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 2 MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Hình 1.1 Một số hình ảnh bệnh thối gốc lạc nấm Sclerotium rolfsii gây 3 MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Lạc trồng mang lại hiệu kinh tế cao Dùng thuốc hóa học gây ảnh hưởng đến mơi trương có khả làm xuất chủng kháng thuốc Nấm Sclerotium rolfsii nấm đặc trưng gây bệnh thối gốc Bệnh thối gốc lạc gây ảnh hưởng lớn đến suất lạc Kiểm soát sinh học biện pháp thân thiện với mơi trường bền vững Do đó, tiến hành đề tài: “Phân lập, tuyển chọn chủng vi nấm có khả đối kháng nấm Sclerotium rolfsii gây bệnh thối gốc lạc” 4 MỞ ĐẦU 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài Mục tiêu: Phân lập tuyển chọn chủng vi nấm đối kháng với nấm gây bệnh thối gốc lạc Yêu cầu: - Phân lập chủng vi nấm từ mẫu đất trồng lạc - Tuyển chọn chủng vi nấm đối kháng nấm S rolfsii gây bệnh thối gốc lạc VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Các mẫu đất trồng lạc thu thập Gia Lâm, Hà Nội Vĩnh Phúc - Chủng nấm Sclerotium rolfsii gây bệnh thối gốc lạc lưu giữ bảo quản phịng thí nghiệm Bộ môn Công nghệ vi sinh 2.2 Địa điểm thời gian thực Nghiên cứu bắt đầu tiến hành thực từ tháng 12 năm 2021 đến tháng năm 2022 Bộ môn Công nghệ vi sinh, khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông Nghiệp Việt Nam 6 VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp phân lập vi nấm từ mẫu đất trồng lạc (Kumar et al (2012)) 2.3.3 Xác định đặc tính sinh học chủng vi nấm tuyển chọn 2.3.5 2.3.2 Xác định khả kháng nấm S rolfsii chủng vi nấm phân lập (Imtiaj Le (2008); Sallam cs (2009) 2.3.4 Xác định khả sinh enzyme ngoại bào chủng vi nấm tuyển chọn Ảnh hưởng số yếu tố đến sinh trưởng phát triển chủng nấm tuyển chọn KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân lập vi nấm từ đất trồng lạc Phân lập 12 chủng vi nấm thu thấp từ mẫu đất trồng lạc Gia Lâm (gồm: Học viện Nông Nghiệp Việt Nam, Đặng Xá) Vĩnh Phúc 8 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2 Tuyển chọn chủng vi nấm có khả kháng nấm S rolfsii gây bệnh thối gốc lạc A B C Hình 3.1 Hình ảnh đối kháng chủng Đ2-B; VP2-C với S rolfsii sau ngày nuôi cấy; A-ĐC Trong 12 mẫu vi nấm phân lập từ mẫu đất trồng lạc phương pháp đồng nuôi cấy môi trường PDA 30oC Kết cho thấy chủng (Đ2, VP2) thể khả đối kháng với nấm S rolfsii 9 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Hình 3.2 Hình ảnh đối kháng chủng Đ2-C; VP2-B với S rolfsii sau ngày nuôi cấy; A-ĐC Tuy nhiên sau ngày nuôi cấy mơi trường PDA 30 oC thí nghiệm, sợi nấm bệnh mọc đè lên nấm đối kháng hai chủng; đĩa thí nghiệm chủng Đ2 lại có sợi nấm đè lên, thời gian ức chế nấm bệnh chủng DD2 dài so với chủng VP2 10 10 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.3 Đặc điểm sinh học chủng vi nấm tuyển chọn a b c d Hình 3.3 Hình thái tản nấm (a), sợi nấm (b), bào tử (c) cuống sinh bào tử (d) chủng Đ2 a b c b c d d Hình 3.4 Hình thái tản nấm (a), sợi nấm (b), bào tử (c) cuống sinh bào tử (d) chủng VP2 11 11 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.3 Khả sinh enzyme ngoại bào chủng vi nấm tuyển chọn Đ2 ĐC ĐC VP2 Hình 3.5 Khả sinh cellulase chủng nấm Đ2-A; VP2-B 12 12 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.3 Khả sinh enzyme ngoại bào chủng vi nấm tuyển chọn ĐC Đ2 ĐC VP2 Hình 3.6 Khả sinh chitinase chủng nấm Đ2-B; VP2-A 13 13 3.4 Ảnh hưởng môiQUẢ trường cấy đến sinh trưởng KẾT VÀ nuôi THẢO LUẬN phát triển chủng Đ2, VP2 sau ngày ni cấy PCA WA PDA Czapkes Hình 3.7 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến chủng Đ2 30oC 14 Hình 3.8 Ảnh hưởng mơi trường ni cấy đến chủng VP2 30 oC 14 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.4 Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng phát triển chủng Đ2, VP2 mơi trường PDA sau ngày ni cấy Hình 3.9 Ảnh hưởng nhiệt độ đến chủng Đ2 đĩa PDA sau ngày ni cấy 15 Hình 3.10 Ảnh hưởng nhiệt độ đến chủng VP2 đĩa PDA sau ngày nuôi cấy 15 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.4 Ảnh hưởng yếu tố pH đến sinh trưởng phát triển chủng Đ2, VP2 sau ngày ni cấy mơi trường PDA Hình 3.11 Ảnh hưởng yếu tố pH đến chủng nấm Đ2 16 Hình 3.12 Ảnh hưởng yếu tố pH đến chủng nấm VP2 16 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.1 Kết luận Cả hai chủng Đ2 VP2 mang hình thái Trichoderma sp Cả hai chủng sinh trưởng tốt nhiệt độ 30 oC, sinh trưởng tốt môi trường PDA phát triển tốt từ pH5 đến pH6 Tuy nhiên chủng nấm VP2 có khả sinh trưởng mạnh khả ức chế cao chủng nấm phân lập từ đất trồng lạc 17 17 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 4.2 Kiến nghị Định danh phương pháp phân tử chủng nấm Đ2 VP2 Xác định khả đối kháng chủng nấm Đ2 VP2 trực tiếp lạc 18 18 Cám ơn thầy cô bạn ý lắng nghe! 19 19 ... lập, tuyển chọn chủng vi nấm có khả đối kháng nấm Sclerotium rolfsii gây bệnh thối gốc lạc? ?? 4 MỞ ĐẦU 1.2 Mục tiêu yêu cầu đề tài Mục tiêu: Phân lập tuyển chọn chủng vi nấm đối kháng với nấm gây. .. nấm đối kháng với nấm gây bệnh thối gốc lạc Yêu cầu: - Phân lập chủng vi nấm từ mẫu đất trồng lạc - Tuyển chọn chủng vi nấm đối kháng nấm S rolfsii gây bệnh thối gốc lạc VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ... 3.2 Tuyển chọn chủng vi nấm có khả kháng nấm S rolfsii gây bệnh thối gốc lạc A B C Hình 3.1 Hình ảnh đối kháng chủng Đ2-B; VP2-C với S rolfsii sau ngày nuôi cấy; A-ĐC Trong 12 mẫu vi nấm phân