PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CHỦNG NẤM GÂY BỆNH ĐỐM VÒNG TRÊN KHOAI LANG Ở VIỆT NAM.Việc lây nhiễm một số các vi sinh vật gây thối củ khoai lang nguyên nhân chính dẫn đến việc giảm sản lượng khoai lang. Bệnh đốm vòng khoai lang làm giảm đáng kể năng suất và chất lượng sản phẩm.
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA CHỦNG NẤM GÂY BỆNH ĐỐM VÒNG TRÊN KHOAI LANG Ở VIỆT NAM Sinh viên: Nguyễn Thị Bích Ngọc Lớp : K63CNSHA Mã sinh viên: 637055 GVHD: ThS Nguyễn Thanh Huyền Hà Nội - 2022 NỘI DUNG MỞ ĐẦU MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ MỞ ĐẦU I INTRODUCTION Khoai lang (Ipomoea batatas (L.) Lam) lương thực quan trọng Việc lây nhiễm số vi sinh vật gây thối củ khoai lang - nguyên nhân dẫn đến việc giảm sản lượng khoai lang Bệnh đốm vòng khoai lang làm giảm đáng kể suất chất lượng sản phẩm Hình 1.1 Khoai lang MỞ ĐẦU Mức độ gây hại tính nghiêm trọng bệnh đốm vịng có thay đổi đáng kể từ ruộng sang ruộng khác từ năm đến năm khác Mầm bệnh đốm vịng tồn nhiều năm đất dạng hạch nấm Hình 1.2 Bệnh đốm vòng khoai lang “Phân lập nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm “Phân lập nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm gây bệnh đốm vòng khoai lang Việt Nam” gây bệnh đốm vòng khoai lang Việt Nam” MỤC ĐÍCH NGHIÊN CỨU Phân lập chủng nấm gây bệnh đốm vòng khoai lang Viêt Nam Nghiên cứu đặc điểm hình thái sinh học chủng nấm tuyển chọn VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.1 Vật liệu • Các mẫu khoai lang bị bệnh đốm vòng chợ Đầu Mối thuộc phường Hoàng Diệu - thành phố Thái Bình - tỉnh Thái Bình chợ Long Biên thuộc quận Long Biên - thành phố Hà Nội • Địa điểm nghiên cứu: Bộ môn công nghệ Vi Sinh, khoa Công nghệ Sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam Hình 3.1 Hình ảnh mẫu khoai nhiễm bệnh thu thập VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.2 Phương pháp nghiên cứu Thu thập mẫu (Paul et al., 2021) Phân lập mẫu bệnh (Burgess et al., 2008; Paul et al., 2021) Tái lây nhiễm (Kim et al., 2013) Đặc điểm hình thái (Diba et al., 2007; Sravani & Chandra, 2020) VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.2 Phương pháp nghiên cứu Ảnh hưởng điều kiện nuôi cấy (môi trường, nhiệt độ) đến khả sinh trưởng nấm (Ayed et al., 2018) Ảnh hưởng pH đến khả sinh trưởng nấm (Sravani & Chandra, 2020) Ảnh hưởng nguồn cacbon đến khả sinh trưởng nấm (Muthukumar et al., 2019) Khả sinh enzyme ngoại bào (Phạm Thị Ngọc Lan, 2012) KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Phân lập nấm bệnh Bảng 4.1 Kết phân lập nấm từ mẫu khoai lang nhiễm bệnh Chủng phân lập Vị trí lấy mẫu Chợ đầu mối Hoàng Diệu Chợ Long Biên N1 N2 N3 + + - + - + Ghi chú: +: Có; -: Khơng N1 N2 N3 Hình 4.1 Hình thái chủng nấm phân lập 4.1 Phân lập nấm bệnh Bảng 4.2 Đặc điểm khuẩn lạc chủng nấm phân lập Đặc điểm khuẩn lạc N1 N2 N3 Dạng Sợi Sợi Sợi Rìa khuẩn lạc Dạng sợi mảnh Dạng sợi mảnh Dạng sợi mảnh Độ cao Nhô lên Nhô lên Nhô lên Bề mặt Màu sắc mặt trước Màu sắc mặt sau Bơng xốp có Hơi xốp, có sợi hạch nấm Trắng Trắng ngắn lên Trắng Trắng Bông xốp Vàng nhạt, hồng Vàng nhạt, hồng 10 4.2 Tái lây nhiễm chủng nấm phân lập • Chủng N1: Sợi nấm chủng N1 ĐC bắt đầu phát triển củ khoai lang N1 sau ủ ngày, lan rộng dần theo thời gian N3 • Chủng N2, N3: Tại vị trí tái nhiễm khơng gây triệu chứng bệnh ĐC N1 N2 Hình 4.2 Hình ảnh tái nhiễm chủng nấm sau ngày Chú thích: - ĐC: Củ khoai lang đối chứng - N1, N2, N3: Củ khoai lang tái lây nhiễm chủng nấm N1, N2 N3 11 4.3 Đặc điểm hình thái chủng N1 24 26 30 Hình 4.3 Hình ảnh hệ sợi chủng nấm N1 kính hiển vi 24 giờ: Hình thành hệ sợi 26 giờ: Hệ sợi phát triển nhiều phân nhánh 30 giờ: Xuất mấu lồi 12 4.4 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng nấm MEA YPG WA SDA PDA Hình 4.4 Sự phát triển chủng N1 môi trường khác sau ngày 13 4.4 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng nấm WA YPG SDA MEA PDA Hình 4.5 Sự phát triển chủng N1 môi trường khác sau ngày 14 4.5 Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng nấm 20oC 25oC 30oC 35oC 40oC 45oC Hình 4.6 Sự phát triển chủng N1 nhiệt độ khác sau ngày 15 4.5 Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng nấm 20oC 25oC 30oC 35oC 40oC 45oC Hình 4.7 Sự phát triển chủng N1 nhiệt độ khác sau ngày 16 4.6 Ảnh hưởng pH môi trường đến sinh trưởng nấm pH pH pH pH pH pH pH 10 Hình 4.8 Sự phát triển chủng N1 pH khác sau ngày 17 4.6 Ảnh hưởng pH môi trường đến sinh trưởng nấm pH pH pH pH pH pH pH 10 Hình 4.9 Sự phát triển chủng N1 pH khác sau ngày 18 4.7 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng nấm D-Glucose Fructose Maltose Sucrose Lactose Dextrin Hình 4.10 Sự phát triển chủng N1 nguồn cacbon khác sau ngày 19 4.7 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng nấm D-Glucose Maltose Fructose Lactose Sucrose Dextrin Hình 4.11 Sự phát triển chủng N1 nguồn cacbon khác sau ngày 20 4.8 Đánh giá khả sinh enzyme ngoại bào ĐC ĐC Protease Pectinase ĐC Amylase ĐC Chitinase ĐC Xylanase ĐC Cellulase Hình 4.12 Khả sinh enzyme ngoại bào chủng N1 Chú thích: ĐC: Đối chứng 21 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận o Phân lập chủng nấm (N1, N2 N3) o Chủng N1 có khả gây bệnh đốm vịng củ khoai lang có đặc điểm hình thái giống với nấm Sclerotium rolfsii o Chủng N1 phát triển tạo thành hạch nấm tốt môi trường PDA, 30 ⁰C, pH 5-6 nguồn cacbon D-glucose o Chủng N1 cho thấy khả sinh loại enzyme cellulase, xylanase, pectinase, chitinase ngoại bào 5.2 Kiến nghị o Tiếp tục nghiên cứu định danh phân tử chủng N1 22 EM XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE! 23 ... ? ?Phân lập nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm ? ?Phân lập nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm gây bệnh đốm vòng khoai lang Việt Nam? ?? gây bệnh đốm vòng khoai lang Việt Nam? ?? MỤC ĐÍCH NGHIÊN... NGHIÊN CỨU Phân lập chủng nấm gây bệnh đốm vòng khoai lang Viêt Nam Nghiên cứu đặc điểm hình thái sinh học chủng nấm tuyển chọn VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 3.1 Vật liệu • Các mẫu khoai lang bị bệnh đốm. .. chú: +: Có; -: Khơng N1 N2 N3 Hình 4.1 Hình thái chủng nấm phân lập 4.1 Phân lập nấm bệnh Bảng 4.2 Đặc điểm khuẩn lạc chủng nấm phân lập Đặc điểm khuẩn lạc N1 N2 N3 Dạng Sợi Sợi Sợi Rìa khuẩn