Bài viết Đánh giá đặc điểm vi mất đoạn AZF và kết quả thu tinh trùng ở nam giới vô sinh tại Bệnh viện Nam học và Hiếm muộn Hà Nội trình bày mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kết quả thụ tinh trùng từ nam giới vô sinh có vi mất đoạn AZF.
TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 ĐÁNH GIÁ ĐẶC ĐIỂM VI MẤT ĐOẠN AZF VÀ KẾT QUẢ THU TINH TRÙNG Ở NAM GIỚI VÔ SINH TẠI BỆNH VIỆN NAM HỌC VÀ HIẾM MUỘN HÀ NỘI Đinh Hữu Việt1, Lê Thị Thu Hiền1, Phạm Thị Mỹ Hạnh1 Trịnh Văn Tam1, Nguyễn Trọng Hoàng Hiệp1 Phạm Minh Ngọc1, Nguyễn Ngọc Nhất2, Trịnh Thế Sơn2 TÓM TẮT Mục tiêu: Mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng kết thu tinh trùng từ nam giới vô sinh có vi đoạn AZF Đối tượng phương pháp: Nghiên cứu hồi cứu mô tả cắt ngang 166 nam giới vô sinh vi đoạn AZF điều trị Bệnh viện Nam học Hiếm muộn Hà Nội từ tháng 12/2016 - 6/2021; 95 bệnh nhân (BN) thu tinh trùng xuất tinh tự nhiên mổ mTESE Kết quả: Thể tích tinh hồn trung bình 8,31 ± 3,86 ml; nồng độ hormone LH FSH cao giới hạn bình thường 9,72 ± 6,28 IU/L 15,6 ± 11,6 IU/L Đột biến đoạn AZFc hay gặp chiếm 93,98% trường hợp có vi đứt đoạn AZF, chủ yếu đoạn AZFc đơn (55,13%) BN nhóm đoạn AZFa vơ tinh, nhóm đột biến đoạn AZFb, AZFc, AZFd có biểu lâm sàng đa dạng từ vô tinh đến thiểu tinh nặng nhẹ 67 BN (70,53%) có tinh trùng tự thân Trong đó, tỷ lệ xuất tinh có đủ tinh trùng 52,63% (50/95 BN), tỷ lệ mTESE có tinh trùng 53,13% (17/32 BN) Tỷ lệ tìm tinh trùng nhóm đoạn AZFc đơn 45/55 (81,8%) Ngược lại, nhóm có đột biến đoạn AZFa khơng tìm tinh trùng Kết luận: Vi đứt đoạn AZFc hay gặp nhất, tỷ lệ thu tinh trùng từ nhóm tốt Vi đứt đoạn AZFa có kiểu hình vơ tinh, loại vi đứt đoạn khác AZFa, AZFb, AZFc biểu kiểu hình đa dạng *Từ khóa: AZF; AZFa; AZFb; AZFc; AZFd vi đứt đoạn; Vô tinh; Nhiễm sắc thể Y Bệnh viện Nam học Hiếm muộn Hà Nội Viện Mô phôi lâm sàng Quân đội, Học viện Quân y Người phản hồi: Đinh Hữu Việt (Vietdh@afhanoi.com) Ngày nhận bài: 11/4/2022 Ngày chấp nhận đăng: 24/4/2022 38 TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 EVALUATION OF CHARACTERISTICS OF AZOOSPERMIA FACTOR MICRODELETIONS AND SPERM RETRIEVAL RESULTS IN MALE INFERTILITY AT THE ANDROLOGY AND FERTILITY HOSPITAL OF HANOI Summary Objectives: To evaluate the clinical and laboratory characteristics and results of sperm retrieved from infertile men with AZF deletions Subjects and methods: A cross-sectional, descriptive and retrospective study on 166 men with infertility caused by AZF deletions treated at Andrology and Infertility Hospital of Hanoi from December 2016 to June 2021 95 patients had sperm collection performed ejaculation or mTESE surgery Results: The mean testicular volume was 8.31 ± 3.86 mL; LH and FSH hormone levels were higher than normal limits, which were 9.72 ± 6.28 IU/L and 15.6 ± 11.6 IU/L, respectively The most common AZFc deletion mutation accounted for 93.98% of the AZF microdeletion cases, which was mainly AZFc deletion alone, accounting for 55.13% The patients in the AZFa deletion group were azoospermia, while the deletion mutant group of AZFb, AZFc, AZFd leads to conditions ranging from azoospermia to severe and mild oligospermia There were 67 patients (70.53%) with autologous sperm The rate of ejaculation with sufficient sperm was 52.63% (50/95), and the rate of mTESE with sperm was 53.13% (17/32) The rate of finding sperm in the group with AZFc deletion alone was 45/55 (81.8%) In contrast, the groups with the AZFa deletion mutation could not find sperm Conclusion: AZFc type was the most common Meanwhile, the sperm collection rate from these patients was quite good AZFa microdeletion has an azoospermia phenotype, while other types of microdeletion such as AZFa, AZFb, AZFc express interchangeable sperm concentrations * Keywords: AZF; AZFa; AZFb; AZFc; AZFd; Microdeletions; Azoospermia; Y chromosome 39 TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 ĐẶT VẤN ĐỀ Vô sinh ảnh hưởng đến khoảng 12% cặp vợ chồng độ tuổi sinh sản, khoảng nửa số liên quan đến yếu tố nam giới [1] Nguyên nhân gây vô sinh nam đa dạng Trong năm gần đây, nhiều nghiên cứu chứng minh số gen nằm vùng Yq11 nhánh dài nhiễm sắc thể Y có vai trị tham gia vào trình sinh tinh Mất gen vùng thường gây bệnh cảnh khơng có tinh trùng tinh dịch, nên vùng gọi yếu tố gây vô tinh (Azoospermia Factor - AZF) Kỹ thuật di truyền phát triển cho phép phân định AZF thành phân vùng AZFa (gần), AZFb (giữa), AZFc (xa) AZFd (nằm AZFb AZFc) Tần số vi đoạn AZF thay đổi từ - 55% toàn giới, hay gặp có ý nghĩa thống kê nhóm thiểu tinh nặng vơ tinh (khoảng 10 - 15%) [2] Mỗi phân vùng chứa gen khác nên mức độ ảnh hưởng tới trình sinh tinh khác nhau, cụ thể: Vi đoạn AZFa liên quan đến hội chứng có tế bào Sertoli (SCO); Vi đoạn AZFb, AZFc biểu nhiều kiểu hình từ vơ sinh thiểu tinh; Vi đoạn AZFd gây thiểu tinh nhẹ số trường hợp có số 40 lượng tinh trùng hồn tồn bình thường [3] Phương pháp điều trị nhằm thu tinh trùng, tiến hành tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (ICSI) Trên giới, vi phẫu thuật thu tinh trùng từ tinh hoàn (micro testticular sperm injection - mTESE) phương pháp mới, an toàn hiệu nhóm BN vơ tinh [4] Tại Việt Nam, báo cáo liên quan đến phân bố loại vi đoạn nhiễm sắc thể Y, bệnh cảnh lâm sàng hiệu thu tinh trùng BN cịn hạn chế Vì vậy, chúng tơi thực nghiên cứu nhằm: Mô tả đặc điểm loại vi đoạn AZF BN vô sinh liên quan vi đoạn đến kết thu tinh trùng ICSI ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Nghiên cứu tiến hành 166 nam giới vô sinh điều trị Bệnh viện Nam học Hiếm muộn Hà Nội từ tháng 12/2016 - 6/2021 * Tiêu chuẩn lựa chọn: Nam giới vô sinh, thiểu tinh vô tinh, xác định có vi đoạn AZF * Tiêu chuẩn loại trừ: Vô tinh tắc, nguyên nhân khác gây vơ tinh (giãn tĩnh mạch tinh, tinh hồn lạc chỗ…) TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 Phương pháp nghiên cứu * Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu hồi cứu, mô tả, cắt ngang * Các bước tiến hành: BN thỏa mãn tiêu chuẩn đưa vào nghiên cứu thu thập thông tin bệnh sử, đặc điểm lâm sàng kết cận lâm sàng theo mẫu bệnh án * Chỉ tiêu nghiên cứu: Đặc điểm tinh dịch, nồng độ nội tiết sinh dục huyết thanh, kích thước tinh hoàn qua siêu âm, nhiễm sắc thể đồ kết thu tinh trùng từ tinh dịch micro-TESE * Xử lý số liệu: Số liệu nhập vào Excel phân tích phần mềm thống kê STATA 16.0 Kết trình bày dạng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn tỷ lệ phần trăm Sử dụng ANOVA test để kiểm định khác giá trị trung bình nhóm, giá trị p < 0,05 coi có ý nghĩa thống kê KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Bảng 1: Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu Đặc điểm ± SD Tuổi BN (năm) 32,5 ± 5,03 Thời gian vô sinh (năm) 3,32 ± 1,34 Nồng độ LH (IU/L) 9,72 ± 6,28 Nồng độ FSH (IU/L) 15,6 ± 11,6 Nồng độ Testosteron (nmol/mL) 17,9 ± 10,19 Thể tích tinh hồn (mL) 8,31 ± 3,86 Tỷ lệ mang đột biến NST kết hợp 25% Tuổi trung bình nam giới thời điểm điều trị 32,5 tuổi, thời gian mong muốn có thai trung bình 3,32 năm Nồng độ hormone hồng thể hóa (LH) hormone kích thích nang trứng (FSH) cao giới hạn bình thường (FSH: - 14 IU/L, LH: 1,7 - 8,6 IU/L) 41 TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 Bảng 2: Phân bố loại vi đoạn AZF mật độ tinh trùng Mật độ tinh trùng Loại vi đoạn Vô tinh Thiểu tinh nặng Thiểu tinh nhẹ n (%) AZF đoạn a 0 (1,8) AZF đoạn a, b, c 0 (1,8) AZF đoạn a, b, c, d 0 (1,2) AZF đoạn b, c 11 14 (8,4) AZF đoạn b, c, d 23 17 44 (26,5) AZF đoạn b, d 1 (0,6) AZF đoạn c 26 39 21 86 (51,8) AZF đoạn c, d (4,2) AZF đoạn d (3,6) Tổng 74 62 30 166 (100) Đột biến đoạn AZFc hay gặp (93,98%), chủ yếu đoạn AZFc đơn (55,13%) BN nhóm có đoạn AZFa vơ tinh, nhóm đột biến đoạn AZFb; AZFc, AZFd dẫn đến tình trạng từ vơ tinh đến thiểu tinh nặng nhẹ Biểu đồ 1: Kết thu tinh trùng để thực hỗ trợ sinh sản BN có đột biến AZF Trong 166 BN nghiên cứu, 95 BN thu tinh trùng tự xuất tinh mTESE 67 BN (70,53%) có tinh trùng tự thân Trong đó, tỷ lệ xuất tinh có đủ tinh trùng 50/95 BN, tỷ lệ mTESE thành công 53,13% (17/32 BN) 42 TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 Bảng 3: Kết thu tình trùng mTESE Đột Kết Đột Đột biến mTESE biến d biến c c,d Đột biến b,d Đột biến b,c Đột biến b,c,d Đột biến a Đột biến a,b,c Đột biến Tổng a,b,c,d Có tinh trùng 0 0 17 Không có tinh trùng 1 15 Tổng 17 10 32 Trong nhóm đột biến vi đoạn AZF, BN nhóm đột biến AZFd đơn xuất tinh có tinh trùng Tỷ lệ tìm tinh trùng nhóm đoạn AZFc đơn 45/55 (81,8%) Ngược lại, nhóm có đột biến đoạn AZFa khơng tìm tinh trùng BÀN LUẬN Trong số BN nghiên cứu, đoạn AZFc chiếm tỷ lệ cao (93,98%) Kết phù hợp với báo cáo trước đột biến đoạn AZFc thường xuyên xảy nam giới có số lượng tinh trùng thấp [5] Đồng thời, kết minh chứng cho vai trò quan trọng vùng gen AZF khả sinh sản nam giới BN nhóm đoạn AZFa vơ tinh, nhóm đột biến đoạn AZFb, AZFc, AZFd có biểu lâm sàng đa dạng từ vô tinh đến thiểu tinh nặng thiểu tinh nhẹ Điều phù hợp với mức độ suy giảm sinh tinh vi đoạn AZF gây ra, cụ thể, mức độ suy giảm sinh tinh lớn trường hợp đoạn gần tâm động (AZFa, sau AZFb, AZFc); riêng nhóm AZFd có tỷ lệ suy giảm gần không đáng kể [6] Kết thu tinh trùng để thực hỗ trợ sinh sản BN có đột biến AZF nghiên cứu khả quan 67/95 BN (70,53%) có tinh trùng tự thân (xuất tinh đủ tinh trùng mTESE đủ tinh trùng) Trong đó, tỷ lệ xuất tinh đủ tinh trùng 50/95 (52,63%) tỷ lệ mTESE thành công 53,13% Theo Golin A.P CS (2021), tỷ lệ thu tinh trùng hai phương pháp tương ứng 60,5% 38,6% [6] Sự khác biệt hiệu mTESE phụ thuộc vào “chất lượng” mơ tinh hồn lấy Ngay 43 TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 kỹ thuật mTESE khác đáng kể trung tâm bác sĩ phẫu thuật, chuyên viên soi tinh trùng Quy trình hồn chỉnh, hội tìm thấy mơ tinh hồn “chất lượng” cao Đồng thời, vị trí xảy vi đứt đoạn AZF NST Y ảnh hưởng rõ rệt đến kết thu tinh trùng Cả BN có AZFd đơn xuất tinh đủ tinh trùng để thực phương pháp tiêm tinh trùng vào bào tương noãn; 45/55 BN (81,8%) có đột biến đoạn AZFc đơn tìm tinh trùng tinh dịch; Các BN đột biến đoạn AZFa khơng tìm tinh trùng Điều phù hợp với đa dạng kiểu hình vi đoạn AZF tạo Những BN có vi đoạn AZFd bị thiểu tinh nhẹ chí số lượng tinh trùng bình thường [3] Đột biến đoạn AZFc làm giảm số lượng, mật độ tinh trùng có liên quan đến loạt đặc điểm kiểu hình khác nhau, từ vơ tinh đến thiểu tinh mức độ nhẹ đến nặng [7] BN có vi đoạn AZFc có hội thu tinh trùng thành cơng cao so với BN có kiểu đoạn khác vùng AZF Yq Tỷ lệ tìm thấy tinh trùng BN đoạn AZFc 32 nghiên cứu dao động 13 - 100% Đối với nhóm có vi đoạn AZFa, nam giới bị đoạn AZFa hoàn toàn vô tinh không 44 lấy tinh trùng phương pháp Nguyên nhân vi đoạn AZFa liên quan đến hội chứng có tế bào Sertoli (SCO), khơng có tế bào mầm ống sinh tinh (SCO I) tế bào mầm diện số ống Những tế bào biệt hóa trưởng thành khơng hoàn toàn tế bào sinh tinh tinh tử, dẫn đến thóai hóa tế bào mầm hầu hết ống (SCO II) [8] Việc đoạn AZFb cho thấy nhiều kiểu hình thay đổi Những BN đoạn AZFb lớn dẫn đến khơng có tinh trùng, phần AZFb biểu nhiều kiểu hình vơ sinh, bao gồm vơ tinh, thiểu tinh nhẹ nặng, tổn thương giải phẫu bệnh thường gặp nhóm BN hội chứng sinh tinh nửa chừng [9] KẾT LUẬN Vi đoạn AZFc hay gặp (93,98%) tổng số loại vi đoạn AZF Mật độ tinh trùng khả thu tinh trùng phụ thuộc vào loại vi đoạn: BN đoạn AZFa vô tinh, nhóm đột biến đoạn AZFb, AZFc, AZFd có biểu lâm sàng đa dạng từ vô tinh đến thiểu tinh Tỷ lệ thu tinh trùng từ BN có đột biến AZF nghiên cứu 67/95 (70,53%) tỷ lệ mổ mTESE có tinh trùng 17/32 (53,13%) TẠP CHÍ Y DƯỢC HỌC QUÂN SỰ SỐ - 2022 TÀI LIỆU THAM KHẢO Vander Borght M., Wyns C (2018) Fertility and infertility: Definition and epidemiology Clin Biochem; 62:2-10 Elsaid H.O.A., Gadkareim T., Abobakr T et al (2021) Detection of AZF microdeletions and reproductive hormonal profile analysis of infertile sudanese men pursuing assisted reproductive approaches BMC Urol; 21:69 Genetic anomalies in patients with severe oligozoospermia and azoospermia in eastern Turkey: A prospective study PubMed , accessed: 14/04/2022 Microdissection testicular sperm extraction (micro-TESE) in men with infertility due to nonobstructive azoospermia: summary of current literature - PubMed , accessed: 14/04/2022 Hofherr S.E., Wiktor A.E., Kipp B.R et al (2011) Clinical diagnostic testing for the cytogenetic and molecular causes of male infertility: The Mayo Clinic experience J Assist Reprod Genet; 28(11):1091-1098 The effects of Y chromosome microdeletions on in vitro fertilization outcomes, health abnormalities in offspring and recurrent pregnancy loss - PubMed , accessed: 14/04/2022 Diverse spermatogenic defects in humans caused by Y chromosome deletions encompassing a novel RNAbinding protein gene - PubMed , accessed: 14/04/2022 Genetics of human male infertility PubMed , accessed: 14/04/2022 Y chromosome microdeletions and alterations of spermatogenesis PubMed , accessed: 14/04/2022 45 ... loại vi đoạn AZF Mật độ tinh trùng khả thu tinh trùng phụ thu? ??c vào loại vi đoạn: BN đoạn AZFa vơ tinh, nhóm đột biến đoạn AZFb, AZFc, AZFd có biểu lâm sàng đa dạng từ vô tinh đến thiểu tinh. .. TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Nghiên cứu tiến hành 166 nam giới vô sinh điều trị Bệnh vi? ??n Nam học Hiếm muộn Hà Nội từ tháng 12/2016 - 6/2021 * Tiêu chuẩn lựa chọn: Nam giới. .. sắc thể Y, bệnh cảnh lâm sàng hiệu thu tinh trùng BN cịn hạn chế Vì vậy, chúng tơi thực nghiên cứu nhằm: Mô tả đặc điểm loại vi đoạn AZF BN vô sinh liên quan vi đoạn đến kết thu tinh trùng ICSI