Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.

Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.Nghiên cứu đa dạng loài giun đất ở vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào dữ liệu hình thái và sinh học phân tử.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN QUỐC NAM NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG LOÀI GIUN ĐẤT Ở VÙNG ĐÔNG NAM BỘ (VIỆT NAM) DỰA VÀO DỮ LIỆU HÌNH THÁI VÀ SINH HỌC PHÂN TỬ LUẬN ÁN TIẾN SĨ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC MÃ SỐ 62420201 NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN QUỐC NAM MÃ SỐ NCS: P0916008 NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG LOÀI GIUN ĐẤT Ở VÙNG ĐÔNG NAM BỘ (VIỆT NAM) DỰA VÀO DỮ LIỆU HÌNH THÁI VÀ SINH HỌC PHÂN TỬ LUẬN ÁN TIẾN SĨ CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC MÃ SỐ 62420201 NGƯỜI HƯỚNG DẪN PGS.TS NGUYỄN THANH TÙNG TS NGUYỄN ĐỨC ANH CHẤP THUẬN CỦA HỘI ĐỒNG Luận án với tựa đề “Nghiên cứu đa dạng loài giun đất vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào liệu hình thái sinh học phân tử” nghiên cứu sinh Nguyễn Quốc Nam thực theo hướng dẫn PGS.TS Nguyễn Thanh Tùng TS Nguyễn Đức Anh Luận án báo cáo Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ thông qua ngày: … /… /2022 Luận án chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng đánh giá luận án xem lại Thư ký Ủy viên Ủy viên Phản biện Phản biện Phản biện Người hướng dẫn Chủ tịch Hội đồng PGS.TS Nguyễn Thanh Tùng Người hướng dẫn phụ TS Nguyễn Đức Anh i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án này, tơi nhận giúp đỡ nhiều tổ chức cá nhân Xin chân thành gửi lời cảm ơn sâu sắc đến: - Ban Giám đốc Sở Giáo dục Đào tạo TP Cần Thơ, Ban Giám hiệu trường THPT Lưu Hữu Phước thuận cho tham dự lớp đào tạo trình độ tiến sĩ - Ban Giám hiệu trường Đại học Cần Thơ, Ban lãnh đạo quý thầy cô Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, quý thầy cô Bộ môn Sư phạm Sinh học tạo điều kiện thuận lợi cho học tập thực luận án, tham gia nhiều hoạt động giảng dạy nghiên cứu khoa học - Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) tài trợ nghiên cứu với đề tài mã số 106.05-2018.04 - PGS.TS Nguyễn Thanh Tùng TS Nguyễn Đức Anh định hướng cho đề tài, nhiệt tình hướng dẫn tơi suốt thời gian nghiên cứu khoa học, đôn đốc động viên, tạo điều kiện thuận lợi để thực thí nghiệm phịng thí nghiệm động vật (Bộ mơn Sư phạm Sinh học, Đại học Cần Thơ) phòng Sinh thái môi trường đất (Viện Sinh thái Tài nguyên Sinh vật, Hà Nội) PGS.TS Trương Trọng Ngôn hướng dẫn thực đề cương luận án - TS Nguyễn Trọng Hồng Phúc, ThS Lâm Hải Đăng học viên cao học chuyên ngành Sinh thái khóa 22, 23 24: Nguyễn Phúc Hậu, Trương Thúy Ái, Đinh So Na, Lương Thị Huỳnh Tiên, Lâm Hùng Khánh hỗ trợ thu mẫu thực địa TS Trần Thanh Mến hỗ trợ thực khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa độ đạm tổng số từ giun đất NCS Lê Thành Nghề hỗ trợ vẽ đồ cho đề tài ThS Dương Chí Trọng, ThS Nguyễn Văn Thẳng, ThS Lê Văn Nhãn ThS Nguyễn Thị Ngọc Nhi cung cấp mẫu giun đất thu từ năm 2012 - 2014 Đồng Nai Bình Dương (H Dầu Tiếng H Phú Giáo) phục vụ cho công tác kiểm tra xây dựng mẫu giun đất Đông Nam Bộ TS Trương Thị Bích Vân giúp đỡ thủ tục hành suốt khóa học Đặc biệt, xin chân thành cảm ơn đến thành viên gia đình tạo điều kiện thuận lợi vật chất tinh thần cho tơi suốt q trình học tập Xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, ngày tháng năm 2022 Nguyễn Quốc Nam TÓM TẮT Tên đề tài: Nghiên cứu đa dạng lồi giun đất vùng Đơng Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào liệu hình thái sinh học phân tử Phân loại học giun đất dựa vào đặc điểm hình thái cịn nhiều bất ổn, họ Megascolecidae – họ giun đất chiếm ưu Việt Nam Việc ứng dụng sinh học phân tử vào phân loại học giun đất Việt Nam hạn chế khu hệ giun đất Đông Nam Bộ chưa nghiên cứu tổng thể Vì vậy, nghiên cứu thực nhằm làm rõ mức đa dạng loài giun đất mối quan hệ phát sinh họ Megascolecidae Đông Nam Bộ dựa sở liệu hình thái sinh học phân tử gen COI 16S rRNA Ngoài ra, đề tài nguồn cung cấp thêm thông tin phân bố (địa hình, nhóm đất sinh cảnh) tiềm sử dụng giun đất (hoạt tính kháng oxy hóa, độ đạm tổng số) khu vực nghiên cứu Tổng 8.114 cá thể giun đất thu từ 263 điểm thu mẫu giun đất từ năm 2016 đến năm 2019 để phục vụ nghiên cứu Kết nghiên cứu cho thấy, ghi nhận 44 loài giun đất thuộc 12 giống xếp họ Đơng Nam Bộ; bổ sung 26 loài giun đất cho khu hệ, bao gồm 15 lồi cơng bố cho khoa học Cơ sở liệu phân tử bao gồm 100 trình tự COI 76 trình tự 16S rRNA 32 loài giun đất họ Megascolecidae xây dựng Qua phân tích sinh học phân tử cho thấy có mối quan hệ chưa rõ ràng giống Amynthas Metaphire, loài M pacseana khơng xếp vào nhóm peguana, M cf campanulata tên đồng vật M houlleti Về phân bố giun đất, độ đa dạng loài giảm dần từ đồi núi xuống đồng bằng; từ đất đỏ vàng, đến đất xám đất phù sa; từ đất trồng lâu năm, đến bãi hoang, rừng đất trồng ngắn ngày Về tiềm ứng dụng, ghi nhận M posthuma có hoạt tính kháng oxy hóa tốt ổn định phương pháp khảo sát (DPPH, ABTS, phosphomolybdenum RP) loài giun đất khảo sát có độ đạm tổng số từ 10,39% đến 13,29% Từ khóa: 16S rRNA, COI, đa dạng lồi, Đơng Nam Bộ, giun đất, quan hệ di truyền ABSTRACT Title: Research on the species diversity of earthworms in the Southeastern Vietnam using morphological and molecular data Traditional taxonomy of earthworms has been still questionable because of the instability of morphological characteristics, especially in the family Megascolecidae, which is the dominant family in Vietnam To solve this problem, the DNA data has been strongly recommended to use additionally, but the application of molecular characteristics for earthworm taxonomy is very limited in Vietnam Therefore, this study aims to clarify the species diversity of earthworms and the phylogenetic relationship in the family Megascolecidae in the Southeastern Vietnam using both morphological and molecular data (COI and 16S rRNA genes) Moreover, the study also provides additional information on the distribution (topography, soil groups and habitats) and potential use of earthworms (antioxidant activity, total nitrogen) in the southeastern Vietnam A total of 8,114 earthworm individuals were collected from 263 sampling points from 2016 to 2019 As a result, 44 species belonging to 12 genera in families were recorded in the southeastern Vietnam; of which 26 species were newly recorded to the fauna including 15 new species A molecular library of 100 COI sequences and 76 16S rRNA sequences from 32 megascolecid species was built up Molecular analysis showed that the relationship between two genera Amynthas and Metaphire was unclear, M pacseana should not be assigned to the peguana group Regarding the distribution of earthworms, the species diversity gradually decreases from hills to plains; from red and yellow soils to gray soils and alluvial soils; from long-term tree plantations to wastelands, forests and short-term tree plantations In terms of potential applications, M posthuma had good and stable antioxidant activity in survey methods (DPPH, ABTS, phosphomolybdenum and RP) and species has high total protein (10.39% to 13.29%) Keywords: 16S rRNA, COI, earthworms, genetic relationship, Southeastern, species diversity CAM ĐOAN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Tôi xin cam đoan luận án cơng trình nghiên cứu thực cá nhân, thực sở nghiên cứu thực địa phần đất liền Đông Nam Bộ (Việt Nam) hướng dẫn khoa học PGS.TS Nguyễn Thanh Tùng TS Nguyễn Đức Anh Các số liệu kết cơng trình trung thực, khách quan chưa dùng cho luận án cấp khác Kinh phí để thực nghiên cứu tài trợ Quỹ Phát triển Khoa học Công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106.05-2018.04 MỤC LỤC CHẤP THUẬN CỦA HỘI ĐỒNG i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii ABSTRACT iv CAM ĐOAN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU v MỤC LỤC vi DANH SÁCH BẢNG viii DANH SÁCH HÌNH x DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT xiii CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 1.4 Nội dung nghiên cứu 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.6 Những đóng góp đề tài CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình nghiên cứu đa dạng giun đất 2.1.1 Trên giới 2.1.2 Ở Việt Nam 2.1.3 Ở Đông Nam Bộ 10 2.2 Khái quát phân loại học hình thái giun đất 11 2.3 Khái quát sử dụng sinh học phân tử phân loại học giun đất 16 2.3.1 Trên giới 16 2.3.2 Ở Việt Nam 22 2.4 Tình hình nghiên cứu ứng dụng đối tượng giun đất 23 2.5 Khái quát điều kiện tự nhiên vùng Đông Nam Bộ 25 2.5.1 Vị trí địa lý địa hình 25 2.5.2 Đất đai 27 2.5.3 Khí hậu 29 2.5.4 Chế độ thủy văn 30 2.5.5 Tài nguyên sinh vật 30 CHƯƠNG 3: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 3.1 Phương tiện nghiên cứu 31 3.1.1 Dụng cụ, thiết bị hoá chất 31 3.1.2 Mẫu vật 32 3.2 Phương pháp nghiên cứu 32 3.2.1 Phương pháp thu mẫu xử lý mẫu 32 3.2.2 Phương pháp định loại dẫn liệu hình thái 35 3.2.3 Phương pháp định loại dẫn liệu sinh học phân tử 37 3.2.4 Phương pháp xây dựng khoá định loại danh lục 39 3.2.5 Phương pháp khảo sát hoạt tính kháng oxy hố 40 3.2.6 Phương pháp xác định độ đạm tổng số 42 3.3 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 43 3.3.1 Phân tích số liệu sinh học phân tử 43 3.3.2 Xử lý số liệu sinh thái học 44 3.3.3 Xử lý số liệu kháng oxy hoá độ đạm tổng số 45 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 46 4.1 Đa dạng lồi giun đất vùng Đơng Nam Bộ 46 4.1.1 Kết định loại 46 4.1.2 Cấu trúc thành phần lồi giun đất Đơng Nam Bộ 96 4.1.3 Khoá định loại giun đất Đông Nam Bộ 98 4.1.4 Danh lục loài giun đất thuộc họ Megascolecidae Đông Nam Bộ 101 4.2 Mối quan hệ phát sinh giống họ Megascolecidae Đông Nam Bộ .131 4.3 Đặc điểm phân bố giun đất vùng Đông Nam Bộ 133 4.4 Tiềm sử dụng giun đất vùng Đông Nam Bộ 140 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 143 5.1 Kết luận 143 5.2 Đề xuất 143 TÀI LIỆU THAM KHẢO 144 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 165 PHỤ LỤC DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1: Số lượng lồi, giống, họ giun đất cơng bố địa động vật phương Đông Bảng 2.2: Công trình nghiên cứu giun đất tác giả theo vùng Việt Nam Bảng 2.3: Số lượng loài phân loài giống họ giun đất Việt Nam9 Bảng 2.4: Danh sách lồi giun đất ghi nhận vùng Đơng Nam Bộ 11 Bảng 3.1: Quy trình thực tiêu cố định lát cắt ngang thể giun đất (Lý ctv., 2010) 36 Bảng 3.2: Các thành phần tham gia chu trình nhiệt PCR 38 Bảng 4.1: Mức tương đồng trình tự gen COI giun đất xác định tên diện Đông Nam Bộ so với mẫu lồi có NCBI 47 Bảng 4.2: Khoảng cách di truyền K2P đoạn gen COI loài giống giống họ Megascolecidae thuộc khu hệ giun đất Đông Nam Bộ 52 Bảng 4.3: So sánh đặc điểm hình thái Metaphire grandiverticulata Nguyen & Lam, 2017, Metaphire bucculenta (Gates, 1935), Metaphire neoexilis (Thai & Samphon, 1988) Metaphire varellana (Michaelsen, 1934) 66 Bảng 4.4: So sánh đặc điểm hình thái Metaphire xuanlocensis Nguyen & Lam, 2017, Metaphire phaluongana (Do & Huynh, 1992), Metaphire dacnomontis (Thai & Huynh, 1992) Metaphire arrobustoides (Thai, 1984) 73 Bảng 4.5: So sánh đặc điểm hình thái Metaphire iranomala Nguyen, Nguyen & Nguyen, 2021 Metaphire anomala (Michaelsen, 1907) từ Thái Lan mô tả gốc .83 Bảng 4.6: So sánh đặc điểm hình thái Metaphire iranomala Nguyen, Nguyen & Nguyen, 2021, Metaphire megascolidioides (Cognetti, 1908) Metaphire isselii (Goto & Hatai, 1899) 84 Bảng 4.7: So sánh đặc điểm chẩn loại Pheretima vungtauensis Nguyen, Nguyen & Nguyen, 2018 tương đồng với lồi nhóm dubia 92 Bảng 4.8: Khoảng cách di truyền K2P đoạn gen COI nhóm lồi houlleti 94 Bảng 4.9: Thành phần lồi giun đất, số lượng trình tự gen COI 16S rRNA thu loài họ Megascolecidae vùng Đông Nam Bộ 95 Bảng 4.10: Số lượng taxon bậc loài giống họ giun đất Đông Nam Bộ .97 Bảng 4.11: Các số đa dạng sinh học giun đất vùng Đông Nam Bộ 133 Bảng 4.12: Thành phần loài, độ phong phú (n%, p%) tần số xuất (C) loài giun đất theo địa hình Đơng Nam Bộ 134 Bảng 4.13: Thành phần loài, độ phong phú (n%, p%) tần số xuất (C) loài giun đất theo loại đất Đông Nam Bộ 136 44 Tuyến phụ SD vùng đực 45 Đặc điểm đặc biệt Khơng Có Có Có Nhú phụ sin dĩa có lỗ đổ Bảng 5: Đặc điểm loài giun đất thuộc giống Metaphire họ Megascolecidae (tt) Loài STT M posthuma (28) M setosa (29) M songbeensis (30) 10 67 - 101 4,00 - 4,80 0,50 - 1,40 98 - 119 Đồng 12/13 Pro Kín xiv - xvi Perichaetine >1 aa > ab zz > zy 5/6/7/8/9 Bên bụng Không đơn xiv xviii Không Có 10 57 - 73,5 1,60 - 3,20 0,53 - 1,65 94 - 121 Đồng 13/14 Không phát triển Hở xiv - xvi Perichaetine >1 aa = ab zz = zy 6/7/8/9 Bên lưng Không đơn xiv xix Khơng Có 21 Nhú phụ SD vùng đực đôi xvii xix đôi xvi - xviii xx - xxi 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 Bithecal Gốc cuống Không Dày Tiêu giảm viii - x xv Đơn giản xiii 4/5/6 Không Dạng 8,00 Không thông Dưới hầu Holandric xi xii 12/13 Không xvii - xx Bithecal Gốc cuống Không Dày Tiêu giảm viii - x xv Đơn giản xiii 5/6/7 Không Dạng 10,60 Thông Dưới hầu Holandric xi xii 12/13 Không xviii - xx 10 91 - 133 3,40 - 6,40 1,40 - 2,10 206 - 236 Khác biệt 9/10 Epi (1/3) Kín xiv - xvi Perichaetine >1 aa = ab zz = zy 5/6/7/8/9 Bên lưng Không đơn xiv xviii Khơng Có 4-8 đơi xvii từ xix sau Bithecal Gốc cuống Không Dày Mỏng viii - x xv Đơn giản xiii 5/6/7 Không Dạng 15,90 Thông Dưới hầu Holandric xi xii 12/13 Không xvii - xx 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Đặc điểm Số mẫu phân tích Chiều dài (mm) Đường kính (mm) Trọng lượng (g) Số đốt Màu sắc Lỗ lưng Kiểu môi Kiểu đai sinh dục Vị trí đai sinh dục Kiểu tơ Tỉ lệ tơ trước sau đai Khoảng cách tơ aa/ab Khoảng cách tơ zz/zy Vị trí lỗ nhận tinh Vị trí lỗ nhận tinh đốt Nhú phụ SD vùng nhận tinh Vị trí lỗ sinh dục Vị trí lỗ sinh dục đực Tơ giao phối Buồng giao phối Kiểu túi nhận tinh Số lượng diverticulum/túi Kiểu đổ diverticulum Tuyến phụ SD vùng nhận tinh Trạng thái vách 8/9 Trạng thái vách 9/10 Vị trí dày Ruột mở rộng Manh tràng Vị trí tim bên cuối Vi thận hầu Tuyến lympho Rãnh ruột (T%) Túi tinh hồn Vị trí túi tinh hồn so với hầu Hệ sinh dục đực Tinh nang Vị trí tuyến trứng Vị trí túi trứng Vị trí tuyến tiền liệt 43 Hình dạng tuyến tiền liệt 44 Tuyến phụ SD vùng đực 45 Đặc điểm đặc biệt Xẻ thùy thơ Có Xẻ thùy sâu Có Vành tơ kiểu zigzag Xẻ thùy sâu Có Bảng 6: Đặc điểm lồi giun đất thuộc giống Polypheretima Pheretima họ Megascolecidae (tt) STT Đặc điểm 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 Lồi Số mẫu phân tích Chiều dài (mm) Đường kính (mm) Trọng lượng (g) Số đốt Màu sắc Lỗ lưng Kiểu môi Kiểu đai sinh dục Vị trí đai sinh dục Kiểu tơ Tỉ lệ tơ trước sau đai Khoảng cách tơ aa/ab Khoảng cách tơ zz/zy Vị trí lỗ nhận tinh Vị trí lỗ nhận tinh đốt Nhú phụ SD vùng nhận tinh Vị trí lỗ sinh dục Vị trí lỗ sinh dục đực Tơ giao phối Buồng giao phối Nhú phụ SD vùng đực Kiểu túi nhận tinh Số lượng diverticulum/túi Kiểu đổ diverticulum Tuyến phụ SD vùng nhận tinh Trạng thái vách 8/9 Trạng thái vách 9/10 Vị trí dày Ruột mở rộng Manh tràng Vị trí tim bên cuối Vi thận hầu Tuyến lympho Rãnh ruột (T%) Túi tinh hồn Vị trí túi tinh hoàn so với hầu Hệ sinh dục đực Tinh nang Vị trí tuyến trứng Vị trí túi trứng Vị trí tuyến tiền liệt Hình dạng tuyến tiền liệt Po cattienensis (33) Po cordata (34) Po elongata (35) 10 115 - 147 6,41 - 8,63 2,82 - 4,28 132 - 189 Đồng 12/13 Epi (2/3) Kín xiv - xvi Perichaetine =1 aa > ab zz > zy 5/6/7 Bên bụng Khơng đơn xiv xviii Khơng Có Khơng Polythecal Gốc cuống Không Tiêu giảm Tiêu giảm ix - x xv Khơng xiii 4/5/6 Khơng có xv - xx Dạng 6,40 Thông Dưới hầu Holandric xi xii 12/13 xiii xvii - xix Xẻ thùy sâu 10 98 - 168 3,17 - 3,99 0,76 - 1,63 110 - 154 Đồng 12/13 Pro Kín xiv - xvi Perichaetine =1 aa = ab zz = zy 5/6/7 Bụng Không đơn xiv xviii Không Có Khơng Inermediate Gốc cuống Có Tiêu giảm Tiêu giảm viii - ix xv Không xiii 4/5/6 Không Dạng 8,00 Không thông Dưới hầu Holandric xi - xii 12/13 Không xvii - xix Xẻ thùy sâu 166 - 221 4,05 – 4,73 1,16 – 2,15 196 - 242 Đồng 12/13 Pro Kín xiv - xvi Perichaetine >1 aa > ab zz > zy Không quan sát thấy Khơng đơn xiv xviii Khơng Có đôi xix - xxi Inermediate Gốc cuống Không Tiêu giảm Tiêu giảm viii - ix xv Không xiii 5/6/7 Không Dạng 8,00 Không thông Quanh hầu Holandric xi - xii 12/13 13/14 xvi - xix Xẻ thùy sâu 44 Tuyến phụ SD vùng đực 45 Đặc điểm đặc biệt Khơng - Có buồng nhận tinh - Miệng buồng giao phối hình liềm Khơng Khơng Khoảng cách tơ aa xếp thẳng hàng đốt sau đai sinh dục Bảng 7: Đặc điểm loài giun đất không thuộc họ Megascolecidae diện Đông Nam Bộ STT Đặc điểm Loài Số mẫu phân tích Chiều dài (mm) Đường kính (mm) Trọng lượng (g) Số đốt Màu sắc Lỗ lưng 10 11 12 13 14 15 Kiểu mơi Kiểu đai sinh dục Vị trí đai sinh dục Kiểu tơ Tỉ lệ tơ trước sau đai Khoảng cách tơ aa/ab Khoảng cách tơ zz/zy Vị trí lỗ nhận tinh Vị trí lỗ nhận tinh đốt 16 Nhú phụ SD vùng nhận tinh 17 Vị trí lỗ sinh dục 18 Vị trí lỗ sinh dục đực Gly papillatus (38) Pont corethrurus (39) Dra beddardi (40) Dra sp (41) 114 – 133 2,68 – 3,13 0,33 – 0,50 164 – 253 Đồng 10 61 – 86 3,10 – 4,05 0,34 – 0,58 136 - 176 Đồng 10 87 – 126 3,60 – 4,30 1,12 – 1,76 168 - 248 Khác biệt Khơng có lỗ lưng Khơng có lỗ lưng Khơng có lỗ lưng Pro Hở xiii - xxxvi Lumbricine =1 aa > ab bc > cd Không thấy Không thấy Nhú phụ sinh dục kép xiii xiv; nhú phụ sinh dục đơn xviii xxiii Không thấy Không phát triển Hở xv - xxi Lumbricine =1 aa > ab bc > cd 6/7/8/9 Bên bụng Pro Kín x - xiii Lumbricine =1 aa > ab bc > cd 7/8 Bên bụng 10 88 – 123 3,30 – 3,90 0,84 – 1,43 101 – 217 Khác biệt Khơng có lỗ lưng Khơng phát tr Kín x - xiii Lumbricine =1 aa > ab bc > cd 7/8 Bên bụng Không đôi viii, nhú – đôi vii ix đôi xi ix 14/15 đôi 11/12 đôi 11/12 19/20 20/21 10/11 10/11 Không Không Không Không Không Không Không Không đôi sát lỗ sinh dục đực, nhú phụ sin dục x-xiii Bithecal Bithecal Bithecal Không Không Không Dày Dày Không Không Không Dày Mỏng Không Không đôi viii Dày Mỏng 19 Tơ giao phối 20 Buồng giao phối Không thấy Không Không 21 Nhú phụ SD vùng đực đôi xxxv 22 23 24 25 26 27 Nhiều túi, từ 12/13 – 18/19 (5-10 túi 12/13, 20-28 túi 13/14, 23-25 túi Kiểu túi nhận tinh 14/15, 26-32 túi 15/16, 25-29 túi 16/17, 20-27 túi 17/18 13-23 túi 18/19) Số lượng diverticulum/túi Không Kiểu đổ diverticulum Không Tuyến phụ SD vùng nhận tinh Không Trạng thái vách 8/9 Dày Trạng thái vách 9/10 Dày 28 Vị trí dày vii - viii vi dày xii - xiv 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 xv Không xi xiv Không Tiêu giảm Không Không Không Holandric ix - xii 12/13/14 Không xv Không xiii Xếp thành đôi/đốt Không Tiêu giảm Không Không Không Holandric xv - xvii Không Không xvi Không ix iv 23/24 Tiêu giảm Không đôi Trên hầu Holandric ? 10/11 xi - xiv – dày xiii - xvi xvi xvii Không ix iv 23/24 Tiêu giảm Không đôi Dưới hầu Holandric ? 11/12 xii - xvii 42 Vị trí tuyến tiền liệt Khơng Khơng Tiêu giảm Tiêu giảm 43 Hình dạng tuyến tiền liệt 44 Tuyến phụ SD vùng đực Không Không Không Tiêu giảm Khơng Khơng Tơ sau dài xếp Có vây bên vùng đai xen kẽ đốt tạo từ xxiv – xxxiii nên vòng xoắn theo xxiii - xxx chiều dọc thể Tiêu giảm Có Ruột mở rộng Manh tràng Vị trí tim bên cuối Vi thận hầu Tuyến lympho Rãnh ruột (T%) Túi tinh hoàn Vị trí túi tinh hồn so với hầu Hệ sinh dục đực Tinh nang Vị trí tuyến trứng Vị trí túi trứng 45 Đặc điểm đặc biệt Phụ lục 7: Cơ sở liệu sinh học phân tử trình tự gen COI 16S rRNA thực sử dụng từ NCBI Bảng 1: Mã số 21 trình tự gen COI loài giun đất họ Megascolecidae lấy từ ngân hàng gen NCBI STT Loài Mã số GenBank KU565251 KU565252 Metaphire anomala (Michaelsen, 1907) KU565253 KU565254 KT626598 Metaphire bahli (Gates, 1945) KC404844 KT626594 KX832076 KX832075 KX832074 KU565274 Metaphire houlleti (Perrier, 1872) KU565268 KU565269 KU565267 KU565272 KU565273 KU565288 Metaphire peguana peguana (Rosa, 1890) KC404831 KU565289 KU565290 Metaphire posthuma (Vaillant, 1868) KU565291 Tổng 21 Bảng 2: Mã số trình tự gen 16S rRNA Lampito mauritii lấy từ ngân hàng gen NCBI STT Loài Mã số GenBank JX157596 Lampito mauritii Kinberg, 1867 Tổng 29 Phụ lục 8: Khoảng cách di truyền K2P đoạn gen COI loài giun đất mẫu phân tích STT Lồi L mauritii (1) M bahli (2) M planata (3) M houlleti (4) A polychaetiferus (5) (1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12) 0,223 0,263 0,195 0,225 0,203 0,204 0,231 0,222 0,199 0,212 10 11 12 13 14 15 16 17 M peguana peguana (6) M posthuma (7) M easupana (8) A sp (9) M cf campanulata (10) M iranomala (11) M anomala (12) Po elongata (13) Po cattienensis (14) Po militium (15) Po cordata (16) A exiguus austrinus (17) 0,230 0,223 0,229 0,233 0,231 0,216 0,212 0,229 0,233 0,210 0,198 0,222 0,170 0,206 0,204 0,195 0,212 0,190 0,177 0,177 0,188 0,206 0,214 0,208 0,206 0,186 0,202 0,186 0,210 0,207 0,197 0,179 0,197 0,213 0,225 0,200 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 M pacseana (18) 0,229 M malayanoides (19) 0,198 M neoxilis (20) 0,218 M xuanlocensis (21) 0,222 A longiprostaticus (22) 0,238 M grandiverticulata (23) 0,225 Ph vungtauensis (24) 0,256 A ocularius (25) 0,206 A minhdam (26) 0,218 M bariaensis (27) 0,224 M haui (28) 0,219 A dorsomorrioides (29) 0,219 M songbeensis (30) 0,190 M setosa (31) 0,252 M houlletoides (32) 0,251 M sp (33) 0,231 0,209 0,187 0,177 0,219 0,212 0,210 0,212 0,182 0,202 0,216 0,183 0,183 0,160 0,197 0,226 0,202 0,205 0,197 0,183 0,223 0,180 0,207 0,250 0,191 0,185 0,214 0,209 0,177 0,185 0,218 0,203 0,177 (13) (14) 0,213 0,201 0,203 0,194 0,177 0,182 0,178 0,195 0,217 0,200 0,207 0,187 0,207 0,194 0,215 0,199 0,206 0,207 0,199 0,197 0,217 0,202 0,195 0,195 0,184 0,200 0,214 0,207 0,187 0,192 0,182 0,216 0,194 0,214 0,215 0,198 0,169 0,202 0,170 0,168 0,178 0,215 0,192 0,202 0,192 0,192 0,199 0,186 0,187 0,199 0,216 0,201 0,212 0,192 0,195 0,171 0,155 0,190 0,205 0,184 0,199 0,194 0,188 0,174 0,193 0,189 0,211 0,218 0,182 0,130 0,182 0,221 0,175 0,192 0,179 0,173 0,209 0,164 0,179 0,180 0,177 0,179 0,186 0,195 0,218 0,185 0,186 0,227 0,201 0,204 0,205 0,199 0,199 0,223 0,192 0,209 0,178 0,186 0,183 0,203 0,189 0,176 0,185 0,222 0,169 0,185 0,206 0,186 0,191 0,207 0,199 0,207 0,214 0,191 0,195 0,203 0,212 0,180 0,191 0,210 0,217 0,205 0,200 0,180 0,190 0,236 0,198 0,235 0,240 0,192 0,201 0,210 0,185 0,173 0,197 0,213 0,225 0,200 0,191 0,188 0,167 0,189 0,186 0,217 0,202 0,186 0,176 0,192 0,189 0,162 0,180 0,196 0,199 0,190 0,195 0,190 0,191 0,197 0,191 0,221 0,220 0,187 0,181 0,205 0,188 0,167 0,197 0,198 0,210 0,212 0,187 0,176 0,162 0,184 0,183 0,221 0,223 0,180 0,184 0,187 0,187 0,163 0,158 0,181 0,198 0,212 0,202 0,198 0,186 0,216 0,198 0,206 0,199 0,207 0,188 0,198 0,194 0,163 0,186 0,218 0,158 0,173 0,191 0,171 0,171 0,203 0,169 0,208 0,195 0,165 0,178 0,200 0,158 0,150 0,182 0,196 0,179 0,203 0,176 0,161 0,157 0,189 0,185 0,208 0,211 0,177 0,167 0,190 0,169 0,141 0,143 0,189 0,179 0,205 0,196 0,183 0,175 0,208 0,198 0,190 0,222 0,182 0,169 0,189 0,198 0,169 0,180 0,185 0,212 0,198 0,210 0,198 0,197 0,207 0,234 0,200 0,251 0,195 0,208 0,206 0,233 0,203 0,204 0,213 0,227 0,222 (15) 0,194 0,184 0,188 0,217 0,183 0,200 0,238 0,161 0,185 0,176 0,187 0,196 0,185 0,206 0,214 0,197 30 (16) 0,204 0,200 0,192 0,216 0,192 0,216 0,216 0,199 0,190 0,196 0,203 0,176 0,202 0,223 0,201 0,227 (17) (18) (19) (20) (21) (22) (23) (24) (25) (26) (27) (28) 0,218 0,188 0,179 0,194 0,200 0,202 0,190 0,172 0,170 0,199 0,182 0,165 0,173 0,197 0,171 0,179 0,189 0,188 0,208 0,206 0,214 0,208 0,182 0,192 0,205 0,193 0,173 0,191 0,194 0,213 0,210 0,168 0,186 0,178 0,218 0,223 0,180 0,176 0,201 0,193 0,161 0,174 0,186 0,186 0,186 0,203 0,190 0,194 0,209 0,175 0,174 0,192 0,177 0,162 0,144 0,164 0,211 0,189 0,196 0,206 0,223 0,207 0,191 0,195 0,206 0,167 0,192 0,197 0,214 0,222 0,198 0,230 0,180 0,195 0,203 0,192 0,153 0,178 0,204 0,194 0,194 0,224 0,204 0,192 0,186 0,204 0,192 0,195 0,219 0,207 0,208 0,210 0,217 0,216 0,209 0,185 0,209 0,215 0,156 0,190 0,189 0,190 0,173 0,165 0,177 0,177 0,192 0,177 0,207 0,154 0,139 0,179 0,206 0,171 0,194 0,190 0,180 0,179 0,205 0,202 0,196 0,172 0,146 0,182 0,215 0,187 (29) (30) (31) (32) (33) 0,147 0,185 0,174 0,154 0,183 0,215 0,181 0,184 0,221 0,196 Phụ lục 9: Các bảng số liệu đặc điểm phân bố giun đất Đông Nam Bộ Bảng 1: Tổng số cá thể (n – con), sinh khối (p – gam) số điểm thu mẫu (ai) lồi giun đất theo địa hình Đông Nam Bộ Đồi núi (191)* n p Pont corethrurus 1116 463,69 105 M cf campanulata 876 2009,16 100 A polychaetiferus 643 3126,34 91 M houlleti 653 406,47 79 M bahli 672 946,03 57 M planata 232 295,29 44 L mauritii 164 89,66 20 Dra sp 232 198,06 23 M iranomala 131 339,75 30 10 M easupana 187 235,64 20 11 M peguana 33 89,05 12 M sp 58 73,97 14 13 Dic bolaui 39 1,89 14 M pacseana 27 342,12 15 M malayanoides 140 226,19 12 16 Euk saltensis 48 2,53 17 M xuanlocensis 62 50,28 18 M neoexilis 3,02 19 M songbeensis 47 46,45 20 Dic affinis 0,03 21 Pe excavatus 0,34 22 M posthuma 23 27,20 23 M grandiverticulata 10,00 24 A sp 0,97 25 M haui 10 16,23 26 Dra beddardi 8,24 27 M mangophiloides 0,28 28 Po cordata 79 82,19 23 29 A exiguus austrinus 69 39,01 15 30 Ph vungtauensis 14 15,62 31 A dorsoquadrithecus 82 26,46 32 Po militium 22 25,71 33 M setosa 3,50 34 M bariaensis 4,41 35 A longiprostaticus 53 18,19 36 Po cattienensis 26,88 37 M houlletoides 0,71 38 A ocularius 0,56 39 M planatoides 0,56 40 A minhdam 0,40 41 Gly papillatus 42 Po elongata 5771 9253,08 Tổng *: số điểm thu mẫu địa hình; -: chưa ghi nhận STT Taxon 31 Đồng (72)* n p 412 151,34 36 116 276,30 19 66 478,37 15 110 70,85 18 393 503,92 36 299 319,86 27 273 136,87 28 99 65,53 10 11,46 7,43 209 391,37 14 12 21,78 19 0,66 12 125,01 5,08 58 1,77 13 11,44 38 47,19 10 13,14 18 0,73 11 1,93 43 68,69 47 12,92 2,35 4,77 1 0,26 2,40 52 14,72 4,53 2343 2752,67 Tổng chung (263)* n p 1528 615,03 141 992 2285,46 119 709 3604,71 106 763 477,32 97 1065 1449,95 93 531 615,15 71 437 226,53 48 331 263,59 33 135 351,21 31 195 243,07 22 242 480,42 21 70 95,75 19 58 2,55 15 39 467,13 14 143 231,27 13 106 4,30 13 75 61,72 10 40 50,21 57 59,59 19 0,76 14 2,27 66 95,89 56 22,92 11 3,32 12 21,00 8,50 2,68 79 82,19 23 69 39,01 15 14 15,62 82 26,46 22 25,71 3,50 4,41 53 18,19 26,88 0,71 0,56 0,56 0,40 52 14,72 4,53 8114 12005,75 Bảng 2: Tổng số cá thể (n – con), sinh khối (p – gam) số điểm thu mẫu (ai) loài giun đất theo loại đất Đông Nam Bộ Đất đỏ vàng (117)* n p Pont corethrurus 625 252,38 60 M cf campanulata 638 1466,62 76 A polychaetiferus 318 1562,72 59 M houlleti 462 273,04 56 M bahli 457 627,88 32 M planata 99 132,30 16 L mauritii 42 21,31 M iranomala 88 208,98 22 M easupana 165 192,23 17 10 M peguana peguana 14 47,13 11 M sp 22 29,34 12 Dic bolaui 33 1,78 13 M pacseana 19 178,25 14 M malayanoides 69 116,72 15 Euk saltensis 48 2,53 16 M xuanlocensis 42 17,76 17 M neoexilis 3,02 18 Dic affinis 0,03 19 Pe excavatus 0,17 20 M grandiverticulata 10,00 21 M haui 4,77 22 Ph vungtauensis 10,10 23 A dorsoquadrithecus 1,27 24 Po militium 14 9,95 25 Dra sp 66 70,29 26 Po cordata 71 71,11 21 27 A exiguus austrinus 55 26,44 12 28 A sp 0,97 29 M mangophiloides 0,28 30 M bariaensis 3,56 31 M posthuma 32 Gly papillatus 33 A longiprostaticus 53 18,19 34 A ocularius 0,56 35 A minhdam 0,40 36 M planatoides 0,56 37 M houlletoides 0,71 38 M songbeensis 39 M setosa 40 Po cattienensis 41 Dra beddardi 42 Po elongata 3442 Tổng 5363,35 *: số điểm thu mẫu loại đất; -: chưa ghi nhận STT Taxon Đất xám (100)* n p 682 272,73 282 638,90 321 1533,02 219 147,69 330 433,58 344 374,38 223 113,95 35 101,86 3,09 44 104,42 45 60,28 0,17 19 257,33 42 59,31 14 0,97 23 35,89 30 36,19 0,11 0,17 24 5,04 2,28 3,58 77 24,83 15,06 223 164,67 11,08 14 12,57 2,35 23 27,20 22 6,25 57 59,59 3,50 26,88 8,50 3167 4547,42 58 29 35 29 39 46 22 11 8 4 1 1 21 - Đất phù sa (46)* n p 221 89,92 23 72 179,94 14 70 508,97 12 82 56,59 12 278 388,49 22 88 108,47 172 91,27 17 12 40,37 27 47,75 184 328,87 6,13 17 0,60 31,55 32 55,24 44 0,80 10 8,07 11,00 16 0,62 11 1,93 23 7,88 13,95 1 1,94 0,36 0,70 42 28,63 2,40 0,85 43 68,69 30 8,47 4,53 1505 2094,98 Bảng 3: Tổng số cá thể (n – con), sinh khối (p – gam) số điểm thu mẫu (ai) loài giun đất theo sinh cảnh Đông Nam Bộ Bãi hoang (75)* ĐTCNN (25)* ĐTCLN (139)* Rừng (24)* n p n p n p n p Pont corethrurus 254 112,14 26 37 13,00 1171 463,12 97 66 26,77 11 M cf campanulata 147 420,34 20 40 119,99 10 704 1560,84 79 101 184,29 10 A polychaetiferus 127 811,4 24 66 279,51 10 509 2484,70 67 29,10 M houlleti 149 87,02 19 69 31,91 449 292,14 60 96 66,25 M bahli 444 673,45 36 51 51,56 539 678,99 45 31 45,95 L mauritii 335 173,58 31 46 23,66 46 24,36 12 10 4,93 Dra sp 71 51,08 28 11,88 214 179,98 19 18 20,65 M iranomala 21 67,80 14 25,39 78 204,5 18 22 53,52 Po cordata 8,77 6,22 46 46,37 14 18 20,83 10 M sp 3,77 2,53 63 86,19 14 3,26 11 A exiguus austrinus 0,51 10 19,62 15 5,70 42 13,18 12 Dic bolaui 21 0,88 0,10 0,10 28 1,47 13 Euk saltensis 31 1,81 26 0,49 29 0,95 20 1,05 14 Ph vungtauensis 3,72 6,28 4,22 1,40 15 M planata 255 245,52 24 33 56,97 243 312,66 39 16 M peguana 56 101,04 1,85 185 377,53 16 17 M xuanlocensis 0,36 1,58 70 59,78 18 M neoexilis 10 15,89 1,60 29 32,72 19 Gly papillatus 17 4,77 12 3,69 23 6,26 20 Pe excavatus 11 1,88 0,22 0,17 21 M posthuma 3,44 32 44,64 32 47,81 22 M easupana 23 43,01 46 58,97 10 126 141,09 10 23 M pacseana 28,94 33 385,46 11 52,73 24 Dic affinis 16 0,62 0,11 1 0,03 25 M grandiverticulata 24 5,04 23 7,88 10,00 26 M malayanoides - 34 46,32 89 156,05 20 28,90 27 M songbeensis 10 13,22 47 46,37 28 M haui 18,72 2,28 29 Dra beddardi 0,26 8,24 30 M setosa 3,15 1 0,35 31 Po elongata 0,94 3,59 32 A dorsoquadrithecus 0,36 - 80 26,10 33 M bariaensis 0,85 - 3,56 34 A sp 2,35 0,97 35 M mangophiloides 2,40 0,28 36 Po militium 22 25,71 37 A longiprostaticus 53 18,19 38 Po cattienensis - 26,88 39 M houlletoides - 0,71 40 A ocularius - 0,56 41 M planatoides - 0,56 42 A minhdam - 0,40 2065 2904,28 519 749,01 4802 7587,04 728 765,42 Tổng *: số điểm thu mẫu sinh cảnh; -: chưa ghi nhận STT Taxon Phụ lục 10: Phiếu phân tích mẫu định tính giun đất Địa điểm thu mẫu:………………………………2 Thời gian:………………… Tọa độ:…………………E…………………….N Độ cao:………………… Sinh cảnh:…………… Địa hình:………………… Loại đất:…………… STT Tên loài Số lượng A C Khối lượng A C 10 11 12 13 14 15 Tổng cộng A (Aclitellate specimen): cá thể non; C (Clitellate specimen): cá thể trưởng thành Người phân tích Ghi Phụ lục 11: Phiếu phân tích hình thái giun đất Phụ lục 12: Giá trị EC50 cao chiết giun đất khảo sát Bảng 1: Giá trị EC50 cao chiết giun đất khảo sát phương pháp DDPH STT Giá trị EC50 (µg/mL) 9f±0 1533e±28 Cao chiết giun đất Axit ascorbic M posthuma Phương trình hồi quy y = 5,4269x +1,9884 (R2 = 0,9914) y = 0,0304x + 3,4819 (R2 = 0,9869) M bahli M pacseana y = 0,0087x + 7,0699 (R2 = 0,9778) y = 0,0057x + 0,87401 (R2 = 0,9967) 4934d±77 8623c±257 M easupana A polychaetiferus y = 0,0043x + 3,9358 (R2 = 0,9785) y = 0,0042x + 3,8234 (R2 = 0.9913) 10797b±178 11078b±115 L mauritii y = 0,0034x + 1,3512 (R2 = 0,9933) 14327a±252 Bảng 2: Giá trị EC50 cao chiết giun đất khảo sát phương pháp ABTS•+ STT Cao chiết giun đất Phương trình hồi quy Giá trị EC50 (µg/mL) 2 Axit ascorbic M posthuma y = 21,706x - 3,2871 (R = 0,9928) y = 0,1525x - 0,0776 (R2 = 0,9884) 2,5g±0 328,5f ±8,1 M bahli y = 0,1016x + 2,983 (R2 = 0,9901) 462,9e±5,8 L mauritii y = 0,0862x - 3,4752 (R2 = 0,9812) 620,5d±9,4 M pacseana y = 0,0738x + 0,6117 (R2 = 0,9915) 669,5c±6,3 M easupana y = 0,0613x - 0,2514 (R2 = 0,9908) 820,8b±7,2 A polychaetiferus y = 0.0377x + 0,1466 (R2 = 0,9752) 1321,8a±37,5 Bảng 3: Giá trị Abs0.5 cao chiết giun đất STT Cao chiết giun đất Phương trình hồi quy Giá trị Abs0,5 (µg/mL) Axit gallic M posthuma y = 0,015x + 0,1206 (R2 = 0,9863) y = 0,0007x + 0,127 (R2 = 0,9715) 25,34g±0,2 529,95f±8,26 M easupana y = 0,0007x + 0,092 (R2 = 0,9706) 582,95e±12,85 M bahli y = 0,0007x + 0,0353 (R2 = 0,9933) 663,86d±1,12 M pacseana y = 0,0005x - 0,005 (R2 = 0,9997) A polychaetiferus y = 0,0004x + 0,0569 (R2 = 0,9823) 1107,83b±13,99 L mauritii y = 0,0002x + 0,0356 (R2 = 0,9806) 2322,17a±6,83 1010,07c±6,72 Bảng 4: Giá trị EC50 cao chiết giun đất phương pháp khử sắt STT Cao chiết giun đất Giá trị EC50 (µg/mL) Phương trình hồi quy 2 Axit gallic M pacseana y = 70, 972x - 0,4016 (R = 0,991) y = 0,5028x - 2,7625 (R2 = 0,9975) 0,71f±0,06 104,91e±4,15 M posthuma y = 0,3688x + 2,9192 (R2 = 0,9909) 127,82de±5,68 M bahli y = 0,3123x - 1,4176 (R2 = 0,9984) 164,83cd±7,99 A polychaetiferus y = 0,2741x - 1,8398 (R2 = 0,9844) 189,13bc±2,19 M easupana y = 0,238x - 2,1037 (R2 = 0,9922) 220,28b±22,27 L mauritii y = 0,126x + 0,1985 (R2 = 0,9849) 395,69a±46,16 Ghi chú: Các chữ giống cột biểu diễn khác biệt không ý nghĩa 5% phép thử Tukey phần mềm Minitab 16 ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN QUỐC NAM MÃ SỐ NCS: P0916008 NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG LỒI GIUN ĐẤT Ở VÙNG ĐƠNG NAM BỘ (VIỆT NAM) DỰA VÀO DỮ LIỆU HÌNH THÁI VÀ SINH HỌC PHÂN TỬ... đặc điểm phân bố đánh giá tiềm sử dụng giun đất vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) 1.3 Đối tượng phạm vi nghiên cứu Độ đa dạng giun đất vùng Đông Nam Bộ (Việt Nam) đánh giá dựa tất loài giun đất thu... để nghiên cứu đa dạng di truyền A rodericensis A modigliani Từ vấn đề trên, đề tài “Nghiên cứu đa dạng lồi giun đất vùng Đơng Nam Bộ (Việt Nam) dựa vào liệu hình thái sinh học phân tử? ?? đề xuất