CƠ CHẾ VÀ HOẠT ĐỘNG CHỐNG NẤM CỦA TINH DẦU GỪNG CHỐNG LẠI VI KHUẨN Pestalotiopsis microspora ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ QUẢ Ô LIU TRUNG QUỐC

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN Báo cáo học phần thử nghiệm sinh học Chủ đề : Thử nghiệm kháng nấm CƠ CHẾ VÀ HOẠT ĐỘNG CHỐNG NẤM CỦA TINH DẦU GỪNG CHỐNG LẠI VI KHUẨN Pestalotiopsis microspora ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ QUẢ Ô LIU TRUNG QUỐC Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS Trần Thanh Mến Huỳnh Quốc Cường Lê Minh Hiếu Nguyễn Thanh Khiết B1806525 Nguyễn Đoàn Xuân Tiến Nguyễn Thị Mỹ Duyên Cần Thơ, tháng năm 2021 B1806494 B1806511 B1806584 B1806597 NỘI DUNG I GIỚI THIỆU II NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN IV KẾT LUẬN GIỚI THIỆU Olive Trung Quốc Olive bị nấm công Conidia of Pestalotiopsis microspora GIỚI THIỆU Prochloraz Thiophanate methyl GIỚI THIỆU Tinh dầu Gừng (Ginger oleoresin, GO) Có khả ức chế Nguyên liệu an Khảo sáttốttác động phát triểncủa GO in vivo phát triển toàn, thân thiện với nhiều loại nấm gây nấm P.microspora Olive Trung Quốc.môi trường hại người NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Ức chế phát triển Ức chế nảy mầm Xác định MIC & MFC Chuẩn bị hỗn dịch Kháng nấm In vivo Cơ chế kháng nấm CHUẨN BỊ HỖN DỊCH BÀO TỬ Cấy nấm vào môi trường tuyệt trùng Rửa NaCl 0.9% vô trùng, chuyển vào chai hình nón, lắc nhẹ Phân lập P.microspor a (2016) HỖN DỊCH BÀO TỬ XÁC ĐỊNH SỰ ỨC CHẾ PHÁT TRIỂN SỢI NẤM Chuẩn bị đĩa môi trường - GO với nồng độ 2, 4, 6, 8, 10, 12 μL mL propylene glycol - Thêm vào môi trường PDA lỏng hấp tuyệt trùng, làm lạnh => Được môi trường PDA rắn Chuẩn bị khuẩn lạc sợi Tỷ lệ ức chế phát triển XÁC ĐỊNH SỰ ỨC CHẾ NẢY MẦM CỦA BÀO TỬ Nuôi cấy bào tử Quan sát - Quan sát nảy mầm bào tử kính hiển vi - Sự nảy mầm bào tử xác định chiều dài ống mầm vượt đường kính đầu nhỏ bào tử Tỷ lệ ức chế nảy mầm XÁC ĐỊNH MIC VÀ MFC MIC MIC Nồng độ ức chế tối thiểu MFC Nồng độ diệt nấm tối thiểu CƠ CHẾ KHÁNG NẤM CỦA GO Kính hiển vi điện tử quét (SEM) Cấu trúc hình thái sợi nấm Chỉ số acid béo Phân tích GC-MS Sự rò rỉ tế bào GO Thành phần acid béo Protein hòa tan nội bào Đường Nuclein HOẠT ĐỘNG KHÁNG NẤM IN VIVO Chuẩn bị khử trùng mẫu IN VIVO So sánh mẫu Làm tổn thương, cấy bào tử nấm cho GO vào mẫu KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ SỰ PHÁT TRIỂN SỢI NẤM CỦA GO Ảnh 1: Ảnh hưởng GO đến gia tăng đường kính khuẩn lạc KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ SỰ PHÁT TRIỂN SỢI NẤM CỦA GO Tỷ lệ ức chế phát triển sợi nấm KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ SỰ NẢY MẦM CỦA GO Tỷ lệ nảy mầm bào tử Tỷ lệ ức chế nảy mầm bào tử KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN XÁC ĐỊNH MIC VÀ MFC Nồng độ GO/μL mL −1 Hệ sợi nấm phát triển ngày Hệ sợi nấm phát triển ngày + + + + ­10 - + 15 - + 20 - + 25 -­­ + 30 - - 35 - - MIC/Μl mL −1 MFC/μL mL −1 10 Kết nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) nồng độ diệt nấm tối thiểu (MFC) GO P.microspora 30 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ẢNH HƯỞNG CỦA GO ĐỐI VỚI HÌNH THÁI SỢI NẤM KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ẢNH HƯỞNG CỦA GO ĐẾN KHẢ NĂNG THẤM QUA MÀNG Ảnh hưởng nồng độ GO khác đến tính dẫn điện ngoại bào của P microspora  KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ẢNH HƯỞNG CỦA GO ĐẾN SỰ RÒ RỈ TẾ BÀO Ảnh hưởng nồng độ GO khác đến: (A)Hàm lượng protein (B)Sự thất thoát đường  (C)Sự giải phóng nuclein của P microspora  KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ẢNH HƯỞNG CỦA GO ĐỐI VỚI THÀNH PHẦN AXIT BÉO CỦA LIPID MÀNG Ảnh hưởng nồng độ GO khác đến: (A)Thành phần axit béo   (B)Chỉ số axit béo khơng bão hịa  KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN TÁC DỤNG KHÁNG NẤM CỦA GO ĐỐI VỚI SỰ PHÁT TRIỂN BỆNH Ở TRÁI Ô LIU TRUNG QUỐC Ảnh hưởng phương pháp xử lý GO đối với: (A) Đường kính vết bệnh   (B) Sự phát triển vết bệnh của quả liu Trung Quốc nhiễm P.microspora  KẾT LUẬN GO GO ức ức chế chế hiệu hiệu quả sự phát phát triển triển của sợi sợi nấm nấm trong ống ống nghiệm nghiệm và sự nảy nảy mầm mầm của bào bào tử tử P.microspora P.microspora Tạo hoạt tính kháng Tạo Tạothơng ra hoạt hoạt tính tính kháng nấm qua cơkháng chế: nấm thơng qua qua cơ chế: chế: -nấm Phá thông huỷ màng sinh chất Phá huỷ màng sinh chất chất vàPhá hìnhhuỷ tháimàng sinh và hình hình thái thái của P.microspora P.microspora -P.microspora Sự rò rỉ chất nội bào Thất Thất thoát thoát chất chất nội nội - Sự phân huỷcác bào bào hoá axit béo peroxy Sự Sự phân phân huỷ hoặc khơng bão huỷ hồ peroxy peroxy hố hố các axit axit béo béo không không bão bão hoà hoà Ngăn chặn đáng kể phát triển bệnh Olive Trung Quốc thu hoạch bị thương cấy vi khuẩn P.microspora GO giải pháp thay có hiệu quả, tiềm cho loại thuốc diệt nấm truyền thống chống lại nấm gây bệnh sau thu hoạch trái rau LOGO CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC BẠN ĐÃ CHÚ Ý THEO DÕI ... gia tăng đường kính khuẩn lạc KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ SỰ PHÁT TRIỂN SỢI NẤM CỦA GO Tỷ lệ ức chế phát triển sợi nấm KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN TÁC ĐỘNG ỨC CHẾ SỰ NẢY MẦM CỦA GO Tỷ lệ nảy mầm... KHÁNG NẤM CỦA GO ĐỐI VỚI SỰ PHÁT TRIỂN BỆNH Ở TRÁI Ô LIU TRUNG QUỐC Ảnh hưởng phương pháp xử lý GO đối với: (A) Đường kính vết bệnh   (B) Sự phát triển vết bệnh? ?của? ?quả ô liu Trung Quốc nhiễm P .microspora? ?... Tạothơng ra hoạt hoạt tính tính kháng nấm qua cơkháng chế: nấm thơng qua qua cơ chế: chế: -nấm Phá thông huỷ màng sinh chất Phá huỷ màng sinh chất chất vàPhá hìnhhuỷ tháimàng sinh và hình hình