Phân Tích Vi Sinh Thực Phẩm Đề tài Định lượng Coliforms và E. Coli bằng phương pháp đếm khuẩn lạc.

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TPHCM Phân Tích Vi Sinh Thực Phẩm GVHD: Hồng Xn Thế Đề tài Định lượng Coliforms E Coli phương pháp đếm khuẩn lạc Nhóm Phạm Thị Thu Hiền 2005190196 Phan Thị Thu Hoài 2005190203 Nguyễn Kim Mỹ Hiền 2005190193 Phan Đặng Diệu Hòa 2005191534 Lưu Thu Hiền 2005190192 NỘI DUNG Nội dung 01 Tình hình nhiễm vi sinh vật Nội dung 02 Đặc điểm sinh học Coliforms Nội dung 03 Đặc điểm sinh học E.coli Nội dung 04 Cơ sở phân tích Nội dung 05 Quy trình định lượng Coliforms E.coli phương pháp đến khuẩn lạc Nội dung 06 Dụng cụ môi trường, thiết bị Nội dung 07 An tồn phân tích LỜI MỞ ĐẦU Ơ nhiễm môi trường nước ảnh hưởng xấu đến sức khỏe người hệ sinh thái Do chất thải người, khu xí nghiệp, khai thác khống sản, dầu mỏ, dầu khí,… khiến nguồn nước bị ô nhiễm nghiêm trọng, ảnh hưởng trực tiếp đến nhiều vấn đề sức khỏe sống người Kể chất thải khu chế biến thủy sản, khu giết mổ, chế biến thực phẩm hoạt động lưu thơng với khí thải hóa chất cặn sau sử dụng tác nhân gây ô nhiễm nguồn nước Ngoài ra, vi khuẩn Coliforms vi khuẩn E.coli loại vi khuẩn sinh sống nhiều mơi trường khác đất, nước hệ tiêu hóa người Đây thủ phạm gây nhiều bệnh nguy hiểm hệ tiêu hóa tiêu chảy, nước dẫn tới suy thận, chí tử vong Tuy nhiên để làm rõ hơn, nhóm chúng em xin trình bày đề tài: “Định lượng Coliforms E.coli phương pháp đếm khuẩn lạc” 01 Tình Hình Ơ Nhiễm Vi Sinh Vật Tình Hình Ơ Nhiễm Vi Sinh Vật Ơ nhiễm nguồn nước: • E.coli Coliforms sử dụng làm thị vi sinh vật cho nghiên cứu ô nhiễm nguồn nước ăn uống nước sinh hoạt.  • Mật độ E coli Coliforms tiêu quan trọng để đánh giá chất lượng nước • Do vậy, kiểm tra có mặt vi khuẩn nước cần quan tâm thực Nguồn nước bị ô nhiễm Coliforms Escherichia Coli Nguyên nhân:  Xử lý chất thải sinh hoạt, chất thải công nghiệp phân động vật khơng cách, khơng quy trình dẫn đến vi khuẩn ngấm vào lòng đất, thấm vào mạch nước ngầm khiến nguồn nước bị nhiễm khuẩn  Các nhà máy xử lý nước sinh hoạt chưa xử lý triệt để  Nguồn nước giếng chưa xử lý nguồn cung cấp nước giếng mạch nước ngầm bị ngấm vi khuẩn  Nước máy nhiễm khuẩn chảy qua đường ống cũ, bị gỉ sét thời gian sử dụng dài  Nước mưa chưa qua xử lý Nguồn nước bị ô nhiễm Coliforms Escherichia Coli Nguy ô nhiễm vi khuẩn:  Là bệnh truyền nhiễm lây truyền qua đường phân, tay, miệng Chúng ta bị lây nhiễm qua vật trung gian bàn tay, vật dụng, thức ăn, nước uống,…  Có thể nhiễm khuẩn qua tắm sông Nếu nước bị nhiễm khuẩn hay nước chưa khử trùng chlorine  Thực phẩm nước bị nhiễm khuẩn khó bị phát Vì mùi vị màu sắc khơng có thay đổi  Cách phịng ngừa: ăn chín, uống nước tiệt trùng Vệ sinh mơi trường, rửa tay sau vệ sinh Dùng nước qua xử lý để nấu nước uống nấu ăn Tác hại vi khuẩn thể bị nhiễm Biểu người:  Gây rối loạn hệ tiêu hóa: thời gian để vi khuẩn Coliform ủ bệnh từ – ngày, sau xuất triệu chứng đau quặn bụng dội  Mắc bệnh đường ruột như: bệnh lị, tiêu chảy, phân lỏng, … chí xuất huyết đường ruột  Đi ngồi máu khơng máu tùy vào diễn biến nặng nhẹ bệnh  Người  Gây bệnh bị sốt cao, co giật,… nhiễm khuẩn nặng nên tình trạng thể mệt mỏi đổ mồ hôi nhiều  Khi tiểu bị máu nhiều ngày, bị đau rát, gây nước trầm trọng cho thể  Hội chứng tan máu suy thận cấp thiếu tế bào tiểu cầu, dẫn đến tử vong  Rối loạn hệ thống thần kinh  Một số biểu khác như: da xanh xao, tay chân khơng có sức  Tăng nguy lây nhiễm khuẩn từ người sang người, dễ gây bệnh dịch tràn lan Nguồn nước bị ô nhiễm Coliforms Escherichia Coli Cách xử lý nước bị nhiễm khuẩn  Khử trùng Clo  Khử trùng Ozone  Khử trùng tia cực tím  Chưng cất nước KẾT LUẬN  Các tiêu cho mẫu sữa tươi tiệt trùng theo pp Pasteur Quy định BYT 4/1998 Kết kiểm tra Coliforms (trong 1ml) 10 2,1x102 E.Coli (trong 1ml) 70 (Theo Bảng 1.2 Tiêu chuẩn vi sinh cho phép thực phẩm, BYT 4/1998 , trang 23 Trần Linh Thước) Chỉ tiêu Coliforms E.coli mẫu sữa tươi không nằm giới hạn cho phép BYT 4/1998 đặt Vì phải tiến hành tiệt trùng lại loại mẫu để đảm bảo VSATTP 06 Dụng cụ - Môi Trường - Thiết Bị Dụng cụ – Mơi trường – Thiết bị Phân tích Coliforms Thiết bị dụng cụ phân tích Coliforms Phân tích E.coli Dụng cụ – Mơi trường – Thiết bị Thiết bị - Dụng cụ phân tích E.coli Phân tích Colifomrs E coli đĩa Thuốc thử - Mơi trường phân tích Coliforms E.coli Thiết bị - Dụng cụ phân tích Coliforms E.coli 07 An tồn phân tích An tồn phân tích  Vệ sinh cá nhân nguyên tắc làm việc: Khi làm việc phịng thí nghiệm vi sinh học phải tuyệt đối vệ sinh, tôn trọng tính ngăn nắp trật tự phịng thí nghiệm Mỗi cá nhân, nhóm làm thí nghiệm với dụng cụ riêng, thiếu phải hỏi cán PTN, không tự động sử dụng dụng cụ người khác Phải mặc áo bluose Khơng nói chuyện, không ăn uống, không hút thuốc lá, không lại lộn xộn PTN An toàn phân tích Khơng để vật phẩm, canh trường vi sinh vật môi trường nuôi cấy vi sinh vật gây bẩn bàn ghế, sách honặc quần áo Trường hợp gây bẩn phải vệ sinh Sau làm xong, phải vệ sinh nơi làm việc mình, vệ sinh dụng cụ, máy móc thí nghiệm Rửa tay lấy cồn sát khuẩn trước khỏi PTN Khi tiến hành thí nghiệm phải có sổ ghi chép cơng việc thí nghiệm Trong sổ ghi chép điều kiện liên qua đến thí nghiệm Phải ghi chép đầy đủ, cẩn thận, rõ ràng An tồn phân tích Để có số khuẩn lạc đĩa phù hợp, mẫu thường pha loãng, thường nồng độ pha loãng thập phân (1/10, 1/100, 1/1000…) Với phương pháp đếm khuẩn lạc, điều quan trọng số khuẩn lạc mọc đĩa không lớn Cũng cần thiết để số khuẩn lạc đĩa không nhỏ (khiến giá trị thống kê khơng có q thấp) Để pha lỗng mẫu, tốt dùng môi trường nuôi cấy lỏng cần ý dùng pipet vô trùng riêng cho nồng độ pha lỗng Trong thí nghiệm: Cần ý Số khuẩn lạc đếm đĩa phụ thuộc không vào lượng mẫu cấy mà vào thích hợp môi trường điều kiện thời gian ủ Ngồi ra, kích thước khuẩn lạc thường biến động, vài khuẩn lạc nhỏ bị bỏ qua đếm Thông thường người ta xác định điều kiện ủ (môi trường, nhiệt độ, thời gian) cho số khuẩn lạc tối đa, sau áp dụng điều kiện KẾT LUẬN Cùng với mục đích mang thơng tin mơi trường nước nhiễm Coliforms E.coli, chúng em mong người hiểu biết ý nguồn nước sử dụng hàng ngày đời sống, bên cạnh nhóm em mong phần giúp cho mơi trường nước sạch, an tồn cho người sử dụng Và qua nghiên cứu này, nhóm chúng em hiểu tình hình ô nhiễm môi trường nước nay, vi khuẩn có mặt quy trình, phương pháp xác định chúng môi trường nước nào, ngồi chúng em cịn có ý thức việc bảo vệ môi trường nước, giữ nguồn nước sạch, an toàn cho cộng đồng ... bày đề tài: ? ?Định lượng Coliforms E .coli phương pháp đếm khuẩn lạc” 01 Tình Hình Ơ Nhiễm Vi Sinh Vật Tình Hình Ơ Nhiễm Vi Sinh Vật Ô nhiễm nguồn nước: • E .coli Coliforms sử dụng làm thị vi sinh. .. trình định lượng Coliforms E .coli phương pháp đếm khuẩn lạc Quy trình định lượng Coliforms E .coli phương pháp đếm khuẩn lạc Định lượng E .coli Định lượng E .coli Kỹ thuật pha mẫu Bước 1: Chuẩn bị... nhiễm vi sinh vật Nội dung 02 Đặc điểm sinh học Coliforms Nội dung 03 Đặc điểm sinh học E .coli Nội dung 04 Cơ sở phân tích Nội dung 05 Quy trình định lượng Coliforms E .coli phương pháp đến khuẩn