Nghiên cứu ảnh hưởng của một số chất điều hòa sinh trưởng đến sự phát triển thân, lá và rễ của loài lan sơn thủy tiên(dendrobium chrysotoxum) giai đoạn invitro

TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN - HOÀNG THỊ THÙY LINH NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN THÂN, LÁ VÀ RỄ CỦA LOÀI LAN SƠN THỦY TIÊN (Dendrobium chrysotoxum) GIAI ĐOẠN IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành Sư phạm Sinh học Phú Thọ, 2018 TRƯỜNG ĐẠI HỌC HÙNG VƯƠNG KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN - HOÀNG THỊ THÙY LINH NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN THÂN, LÁ VÀ RỄ CỦA LOÀI LAN SƠN THỦY TIÊN (Dendrobium chrysotoxum) GIAI ĐOẠN IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành Sư phạm Sinh học NGƯỜI HƯỚNG DẪN: TS TRẦN TRUNG KIÊN Phú Thọ, 2018 i LỜI CẢM ƠN Trong thời gian nghiên cứu hồn thành khóa luận, em nhận giúp đỡ ban lãnh đạo trường Đại học Hùng Vương, tồn thể thầy giáo khoa Khoa học tự nhiên tạo điều kiện giúp đỡ để em nghiên cứu thực khóa luận Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo hướng dẫn TS.Trần Trung Kiên tận tình hướng dẫn, quan tâm động viên em hồn thành khóa luận Em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô Trung tâm nghiên cứu công nghệ sinh học, trường Đại học Hùng Vương tận tình giúp đỡ, bảo giúp em hồn thành tốt khóa luận Em xin chân thành cảm ơn! Phú Thọ, tháng năm 2018 Sinh Viên Hồng Thị Thùy Linh ii LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu khóa luận riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày khóa luận trung thực.Mọi giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc phép công bố Phú Thọ, ngày … tháng năm 2018 Sinh viên thực Hoàng Thị Thùy Linh iii MỤC LỤC Trang phụ bìa………………………………………………………………….i Lời cảm ơn……………………………………………………………………ii Lời cam đoan……………………………………………………………… iii Mục lục………………………………………………………………………iv Danh mục bảng………………………………………………………………vi Danh mục hình………………………………………………………………vii Danh mục chữ viết tắt…… …………………………………… ………….iv CHƯƠNG MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài: 1.2 Mục tiêu đề tài: 1.3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn: 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG II NỘI DUNG NGHIÊN CỨU PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nghiên cứu 1.1.1 Tình hình nghiên cứu nước: 1.1.2 Tình hình nghiên cứu giới: 1.2 Đặc điểm sinh học sinh thái học loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chysotoxum): 1.2.1 Nguồn gốc, vị trí phân loại: 1.2.2 Đặc điểm sinh học sinh thái học: 1.3 Môi trường nuôi cấy 1.3.1 Thành phần môi trường: 1.3.2 pH môi trường: 1.4 Các chất điều hòa sinh trưởng: 1.4.1 Nhóm Auxin: iv 1.4.2.Nhóm Cytokinin: PHẦN ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 10 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu: 10 2.2 Nội dung nghiên cứu 10 2.3 Phương pháp nghiên cứu: 11 2.3.1 Phương pháp luận 11 2.3.2 Phương pháp bố thí nghiệm 11 2.3.3 Phương pháp thu thập số liê ̣u 13 2.3.4 Phương pháp phân tích và xử lý số liê ̣u 14 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 15 3.1 Ảnh hưởng môi trường đến sinh trưởng chồi Lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 15 3.2 Ảnh hưởng nồng độ phối hợp cytokinin/auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum ) 17 3.2.1 Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 17 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ Cytokinin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 20 3.2.3 Ảnh hưởng phối hợp Auxin/auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum ) 22 3.2.4 Ảnh hưởng phối hợp cytokinin/auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum ) 25 3.3 Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến khả rễ lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 27 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 33 Kết luận 33 Kiến nghị 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 v DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ phối hợp Cytokinin/Auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên 11 Bảng 2.3 Ảnh hưởng nồng độ phối hợp Auxin đến khả rễ loài lan Sơn thủy tiên……………………… 13 Bảng 3.1 Ảnh hưởng môi trường đến sinh trưởng chồi Lan Sơn thủy tiên (Dendrobiumchrysotoxum)………… 15 Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobiumchrysotoxum)……… 17 Bảng 3.3 Ảnh hưởng nồng độ Cytokinin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobiumchrysotoxum)… 19 Bảng 3.4 Ảnh hưởng phối hợp Auxin/auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên 22 (Dendrobiumchrysotoxum) Bảng 3.5 Ảnh hưởng phối hợp cytokinin/auxin đến phát triển thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium 24 chrysotoxum)…………………………………………………………… Bảng 3.6.Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến khả rễ Lan Sơn thủy tiên (Dendrobium 26 chrysotoxum)…………………… Bảng 3.7.Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến khả rễ Lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum)………………… 27 Bảng 3.8 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 29 vi DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1.1 Hình thái lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum)… Hình 2.1 Các cụm protocom lan Sơn thủy tiên 10 Hình 2.2 Cây lan Sơn thủy tiên chiều cao – cm 10 Hình 3.1 Ảnh hưởng môi trường đến sinh trưởng chồi lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum)……………………… 16 Hình 3.2 Ảnh hưởng loại môi trường đến sinh trưởng chồi lan Sơn thủy tiên……………………………………………………… 17 Hình 3.3 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 18 Hình 3.4 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát triển số loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 18 Hình 3.5 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng TDZ đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 20 Hình 3.6 Ảnh hưởng chất điều hịa sinh trưởng TDZ đến phát triển số loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 21 Hình 3.7 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Hình 3.8 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng 23 TDZ/NAA đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Hình 3.9 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng 23 TDZ/NAA đến phát triển số loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Hình 3.10 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hịa sinh trưởng NAA 27 vii đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 27 Hình 3.11 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 28 Hình 3.12 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát triển số rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 29 Hình 3.13 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 30 Hình 3.14 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 30 Hình 3.15 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) 31 Hình 3.16 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên( Dendrobium chrysotoxum) 32 viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BAP : Benzylamino purine ĐC : Đối chứng IAA : Indole acetic acid KC : Knudson C MS : Murashige & Skoog NAA : Naphthaleneacetic acid TDZ : Thidiazuz n 24 43.82 45 40 35 30.35 28.96 30 26.52 24.22 23.13 25 17.61 20 15 chiều cao 20.1 chiều dài 15.56 13.12 10 ĐC BN1 BN2 BN3 BN4 Hình 3.7 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển chiều dài thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) (mm) 6.23 5.1 4.42 4.12 3.15 ĐC BN1 BN2 BN3 BN4 (Công thức) Hình 3.8 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển số loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Qua bảng 3.4 hình 3.6, hình 3.7, ta thu kết sau: 25 Đối với kết hợp BAP NAA tăng nồng độ BAP từ 1mg/l đến 2,5mg/l kết hợp với NAA nồng độ 0,5mg/l kết có thay đổi tương đối lớn, đạt kết cao nồng độ mg/l BAP + 0,5mg/l NAA với chiều dài thân trung bình 43,82mm, chiều dài trung bình 23,13mm số trung bình 6,23 Sau tăng nồng độ BAP lên đến 1,5mg/l, 2mg/l 2,5mg/l chiều dài thân giảm dần 30,35mm, 28,96mm, 26,52mm, chiều dài xuống 20,10mm, 17,61mm 15,56mm Tương tự số giảm từ 5,10 lá, 4,42 4,12 3.2.4 Ảnh hưởng phối hợp cytokinin/auxin đến phát triển chiều dài thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum ) Trong thí nghiệm này, tơi tiến hành phối hợp BAP NAA theo nồng độ là: 1mg/l TDZ + 0,5mg/lNAA (TN1); 1,5mg/l TDZ + 0,5mg/l NAA (BN2); 2mg/l TDZ + 0,5mg/l NAA (BN3); 2,5mg/l TDZ + 0,5mg/l NAA (BN4) Kết thu sau: Bảng 3.5 Ảnh hưởng phối hợp Cytokinin/auxin đến phát triển chiều dài thân, lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Chiềudài Công thức thân (mm) Chiều dài (mm) Số ĐC 24,22± 0,22 13,12± 0,16 3,15± 0,76 TN1(CT13) 26,19± 0,24 15,11± 0,13 4,08± 0,62 TN2(CT14) 28,37± 0,19 18,23± 0,18 4,56± 0,64 TN3(CT15) 27,12± 0,25 16,89± 0,18 4,34± 0,62 24,90± 0,19 14.12± 0,15 4,07± 0, 68 TN4(CT16) 26 (mm) 28.37 30 25 26.19 27.12 24.9 24.22 18.23 20 16.89 15.11 14.12 13.12 15 Chiều cao Chiều dài 10 ĐC TN1 TN2 TN3 TN4 (Công thức) Hình 3.9 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng TDZ/NAA đến phát triển chiều dài thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên(Dendrobium chrysotoxum) (số lá) 4.56 4.08 4.5 4.34 4.07 3.5 3.15 2.5 1.5 0.5 ĐC TN1 TN2 TN3 TN4 (Cơng thức) Hình 3.10 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng TDZ/NAA đến phát triển số loài lan Sơn thủy tiên ( Dendrobium chrysotoxum) 27 Đối với kết hợp TDZ NAA tăng nồng độ TDZ từ 1mg/l đến 2,5mg/l kết hợp với NAA nồng độ 0,5mg/l kết có thay đổi khơng nhiều Tăng TDZ từ 1mg/l đến 1,5mg/l kết có tăng lên chiều dài trung bình từ 26,19mm lên 28,37mm, chiều dài trung bình từ 15,11mm lên 18,23mm, số trung bình từ 4,08 lên 4,56 Và nồng độ 1,5mg/l TDZ + 0,5 NAA kết đạt cao kết hợp TDZ NAA Khi tăng nồng độ TDZ lên 2mg/l 2,5mg/l kết giảm dần chiều dài thân xuống 27,12mm, 24,90mm, chiều dài xuống 16,89mm, 14,12mm, số giảm xuống 4,34 4,07 3.3 Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến khả rễ Lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Trong thí nghiệm tơi tiến hành cấy lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) vào mơi trường MS có bổ sung chất điều hòa sinh trưởng NAA BAP với nồng độ khác : 0,5mg/l; 1mg/l; 1,5mg/l; 2mg/l Ngồi tơi tiến hành phối hợp chất điều hòa sinh trưởng nồng độ khác là: 0,5mg/l NAA + 0,5mg/l BAP (NB1); 1mg/l NAA + 1mg/l BAP (NB2) Tiến hành theo dõi mẫu cấy, xác định nồng độ Auxin thích hợp để phát triển rễ lan Sơn thủy tiên đạt kết tốt Kết đạt bảng thống kê sau: Bảng 3.6 Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến khả rễ lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Công thức Chiều dài rễ Số rễ ĐC(CT0) 22.38± 0,11 2.34± 0,65 N05(CT1) 24.13± 0,14 2.76± 0,55 N10(CT2) 25.34± 0,17 3.26±0,56 N15(CT3) 33.45± 0,19 3.68± 0,72 N20(CT4) 26.37± 0,22 3.25± 0,57 28 (mm) 33.45 35 30 22.38 25 26.37 25.34 24.13 20 15 10 ĐC N05 N10 N15 N20 ( Cơng thức) Hình 3.11 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng NAA đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên ( Dendrobium chrysotoxum) (số rễ) 3.68 3.26 3.5 2.76 2.5 3.25 2.34 1.5 0.5 ĐC N05 N10 N15 N20 Cơng thức Hình 3.12 Ảnh hưởng chất điều hịa sinh trưởng NAA đến số rễ lồi lan Sơn thủy tiên ( Dendrobium chrysotoxum) Qua bảng 3.6 hình 3.10, hình 3.11, ta nhận thấy tăng nồng độ NAA từ 0,5 mg/l đến mg/l số rễ thay đổi lớn nồng độ NAA 1,5mg/l 29 với giá trị số rễ trung bình 3,68 rễ Khi tăng nồng độ BAP lên 0,5mg/l; 1mg/l; 1,5 mg/l; 2mg/l giá trị số rễ giảm cịn 2,88 rễ, 3,47 rễ, 3,15 rễ 3,25 rễ Các công thức có giá trị cao so với cơng thức đối chứng Tuy nhiên nồng độ số rễ đạt lớn công thức 0,5 NAA + 0,5 BAP với giá trị số rễ trung bình 4,38 Bên cạnh việc phát sinh rễ mới, rễ cịn có tăng lên chiều dài.Khi ta tăng nồng độ NAA lên 0,5mg/l, mg/l ,1,5mg/l chiều dài rễ tăng theo lên 24,13 mm, 25,34mm 33,45 Nhưng tiếp tục tăng nồng độ NAA 2mg/l chiều dài rễ giảm dần cịn 26,37 Bảng 3.7 Ảnh hưởng nồng độ Auxin đến khả rễ Lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Công thức Chiều dài rễ Số rễ CT0 22.38± 0,15 2.34± 0,67 B05(CT5) 24.33± 0,13 2.88± 0,66 B10(CT6) 30.15± 0,16 3.47± 0,58 B15(CT7) 25.56± 0,19 3.15± 0,82 B20(CT8) 24.33± 0,17 2.25± 0,77 (mm) 30 25 22.38 25.56 24.33 24.33 20.15 20 15 10 ĐC B05 B10 B15 B20 (Công thức) Hình 3.13 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên ( Dendrobium chrysotoxum) 30 (mm) 3.47 3.5 3.15 2.88 2.5 2.34 2.25 1.5 0.5 ĐC B05 B10 B15 B20 (Công thức) Hình 3.14 Ảnh hưởng nồng độ chất điều hòa sinh trưởng BAP đến phát triển số rễ loài lan Sơn thủy tiên ( Dendrobium chrysotoxum) Khi ta tăng nồng độ BAP lên 0,5mg/l mg/l chiều dài rễ tăng theo lên24,33 mm 30,15mm Nhưng tiếp tục tăng nồng độ BAP lên 1,5mg/l 2mg/l chiều dài rễ giảm dần cịn 25,56mm 24,33mm Tương tự số rễ tăng lên theo nồng độ BAP 0,5mg/l 2,88 rễ, 1mg/l 3,47 rễ Sau số rễ giảm dần nồng độ 1,5mg/l BAP 3,15 rễ nồng độ 2mg/l BAP 2,25 rễ Bảng 3.8 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Công thức Chiều dài rễ Số rễ CT0 22.38± 0,13 2.34± 0,67 N05B05(CT9) 36.14± 0,17 4.38± 0,66 N10B10(CT10) 30.55± 0,11 3.19± 0,68 31 (mm) 36.14 40 35 30.55 30 22.38 25 20 15 10 ĐC N05B05 N10B10 ( Cơng thức) Hình 3.15 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển chiều dài rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) (mm) 4.38 4.5 3.19 3.5 2.34 2.5 1.5 0.5 ĐC N05B05 N10B10 (Cơng thức) Hình 3.16 Ảnh hưởng phối hợp chất điều hòa sinh trưởng BAP/NAA đến phát triển thân chiều dài loài lan Sơn thủy tiên ( Dendrobium chrysotoxum) 32 Khi có kết hợp 0,5NAA+ 0,5BAP chiều dài rễ đạt giá trị cao (36,14mm), số rễ 4,38 rễ Khi tăng nồng độ lên 1mg/l NAA + 1mg/BAP chiều dài rễ giảm 30,55mm, số rễ 3,19 rễ 33 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Khi so sánh mơi trường khác MS mơi trường thích hợp để ni cấy lồi lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum)có tỉ lệ chồi 100% có đặc điểm màu xanh dài, thân mập, cân đối so với KC ½ MS Nghiên cứu ảnh hưởng riêng rẽ phối hợp chất điều hòa sinh trưởng đến phát triển thân lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum)kết phối hợp BAP mg/l NAA 0,5 mg/l có ảnh hưởng tốt đến phát triển thân loài Khi bổ sung vào mơi trường MS sựphối hợp BAP 0,5 mg/l NAA 0,5 mg/l mơi trường thích hợp cho phát sinh rễ loài lan Sơn thủy tiên (Dendrobium chrysotoxum) Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu giai đoạn để hồn thiện quy trình nhân giống in vitro loài lan 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt [1]Phạm Hoàng Hộ, Cây cỏ Việt Nam ( ), NXB Trẻ [2] Vũ Ngọc Lan, Nguyễn Thị Lý Anh (2013) “Nhân giống in vitro loài lan địa Dendrobium nobile Lindl.”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 11(7), tr 917-925 [3] Nguyễn Văn Linh Nguyễn Hữu Lê, (2007) Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật lên phát sinh chồi rễ Phong lan giả hạt Dendrobium anosmum.Tạp chí khoa học công nghệ tập 47, số 5, 2009 Tr 99 - 100 [4] Nguyễn Văn Minh, Nguyễn Hữu Lễ (2009) “Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật lên phát sinh chồi rễ phong lan giã hạt Dendrobium Anosmum”, Tạp chí Khoa học Công nghệ 47 (05), Tr.45-50 [5] Nguyễn Công Nghiệp (2000) Trồng hoa lan, NXB trẻ, trang 17 – 268 [6] Hoàng Thị Sản, (2011) Phân loại học thực vật, Nhà xuất Giáo dục Việt Nam [7] Vũ Thanh Sắc, Nguyễn Thị Thu Huyền, Lê Thị Lý (2012) “Nghiên cứu nhân giống in vitro lan Hoàng thảo trầm trắng (Dendrobium anosmum var.alba)”, Tạp chí khoa học cơng nghệ, Đại học Thái Nguyên, 93(05), tr 131-135 [8] Nguyễn Thị Sơn, Nguyễn Thị Lý Anh, Vũ Ngọc Lan, Trần Thế Mai, (2012) Nhân giống in vitro loài lan Hoàng thảo long nhãn (Dendrobium fimbriatum hook) Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Tạp chí Khoa học Phát triển 2012: Tập 10, số 2: 263 – 271 [9] Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2013), Công nghệ sinh học, NXB Giáo dục Việt Nam Tài liệu tham khảo tiếng anh 35 [10] Jaime A Teixeira da Silva, Elena A Tsavkelova (2015) Asymbiotic in vitro seed propagation of Dendrobium, Plant Cell Rep 34:1685–1706 [11] Jonojit Roy, Soumi Naha, Madhumita Majumdar (2007) Direct and callus-mediated protocorm-like body induction from shoot-tips of Dendrobium chrysotoxum Lindl (Orchidaceae) Plant Cell, Tissue and Organ Culture Volume 90, PHỤ BIỂU Phụ biểu 1: Môi trường MS (Murashige & Skoog) Dung dịch Hóa chất mẹ MS1 MS2 Hàm Khối lượng cần Nồng độ pha lượng lấy cho 500 ml môi trường (mg/l) dung dịch mẹ (ml/l) NH4NO3 1650 41,25 MgSO4.7H2O 370,6 9,265 KNO3 1900 47,5 CaCl2 439,8 10,99 KH2PO4 170 4,25 NaH2PO4 85 2,125 ZnSO4.7H2O 8,6 0,43 H3BO3 6,2 0,31 MnSO4.2H2O 22,3 1,115 Na2MoO4.2H2O 0,25 0,125 CuSO4.5H2O 0,025 0,0125 CoCl2.2H2O 0,025 0,0125 KI 0,83 0,415 FeSO4.7H2O 27,8 1,39 Na2EDTA 37,26 1,863 Nicotinic acid 0,5 0,025 Pyridoxine (B6) 0,5 0,025 Thiamin- HCl (B1) 0,1 0,005 Glycine 0,1 Myo-inositol 100 10 MS6 MS8 10 10 MS5 MS7 20 20 MS3 MS4 20 10 10 Phụ biểu 2: Môi trường KC (KnudsonC) Dung dịch mẹ K1 K2 K3 K4 (MS6) K5 (MS8) Hóa chất Hàm lượng (mg/l) NH4NO3 600 KNO3 1900 MgSO4.7H2O 146,5 KH2PO4 170 KCl 300 CaCl2.2H2O 453 KI 0,75 H3BO3 MnSO4.4H2O 10 ZnSO4.7H2O Na2H2O 0,25 CuSO4.5H2O 0,025 CoCl2.6H2O 0,025 FeSO4.7H2O 27,8 Na2EDTA 37,26 Myo-inositol 100 Phú Thọ, Ngày… tháng năm 2018 Ý kiến giảng viên hướng dần Sinh viên thực hiện (Kí ghi rõ họ tên) (Kí ghi rõ họ tên) TS Trần Trung Kiên Hoàng Thị Thùy Linh ... HOÀNG THỊ THÙY LINH NGHIÊN CỨU SỰ ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ CHẤT ĐIỀU HÒA SINH TRƯỞNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN THÂN, LÁ VÀ RỄ CỦA LOÀI LAN SƠN THỦY TIÊN (Dendrobium chrysotoxum) GIAI ĐOẠN IN VITRO KHÓA LUẬN... giá ảnh hưởng nồng độ phối hợp chất điều hòa sinh trưởng đến phát sinh thân, in vitro lan Sơn thủy tiên - Đánh giá ảnh hưởng nồng độ phối hợp chất điều hòa sinh trưởng đến khả rễ in vitro lan Sơn. .. giá ảnh hưởng nồng độ phối hợp chất điều hòa sinh trưởng đến phát sinh thân, in vitro lan Sơn thủy tiên - Đánh giá ảnh hưởng nồng độ phối hợp chất điều hòa sinh trưởng đến khả rễ in vitro lan Sơn