Bệnh sốt rét và kí sinh trùng sốt rét, cách điều trị trong dân gian sử dụng artemisinin và dẫn chất

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI BỘ MƠN HĨA DƯỢC BÀI THU HOẠCH SEMINAR ARTEMISININ HÀ NỘI - 2022 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .4 SƠ LƯỢC VỀ BỆNH SỐT RÉT VÀ KÝ SINH TRÙNG SỐT RÉT VÀ CÁCH ĐIỀU TRỊ SỐT RÉT TRONG DÂN GIAN(1) I Ký sinh trùng sốt rét II Tổng quan bệnh sốt rét ARTEMISININ 15 I Nguồn gốc(2) 15 II Cấu trúc 15 III Liên quan cấu trúc tác dụng (3) 16 IV Cơ chế tác dụng(4) 17 V Tính chất lý hóa artemisinin(5) 17 VI Chuyên luận kiểm nghiệm artemisinin(6)(7)(8) 19 VII.Công dụng(3) 28 VIII.Tác dụng không mong muốn(9) .29 DẪN CHẤT CỦA ARTEMISININ(5) 29 I DIHYDROARTEMISININ 29 II ARTEMETHER .30 III ARTEETHER( artermotil) .31 VI ARTESUNAT 31 VI ACID ARTELINIC ( Artelinate) 33 KẾT LUẬN BÁO CÁO .34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 ĐẶT VẤN ĐỀ Sốt rét bệnh truyền nhiễm nguy hiểm bùng phả thành dịch gây tử vong không điều trị kịp thời Hiện nay, bệnh sốt rét vấn đề sức khỏe cộng đồng lớn giới nói chung Việt Nam ta nói riêng Theo báo cáo Tổ chức Di dân giới Tổ Y tế giới sốt rét bệnh có ganh nặng bệnh tật hàng đầu ảnh hưởng lớn đến sức khỏe cộng đồng nguyên nhân gây tử vong đứng thứ giới Tại châu Phi sốt rét nguyên nhân gây tử vong xếp hàng thứ cho cộng đồng dân di biến động Hiện nay, xu hướng tồn cầu hóa dẫn đến tình trạng dân di cư từ khu vực sang khu vực khác Thế giới có khoảng 214 triệu người di cư Quốc tế khoảng 740 triệu người di cư hàng năm Quốc gia Sự phát triển đa dạng kinh tế, phát triển mạnh mẽ thông tin dẫn đến giao lưu di chuyển dân cư khu vực ngày gia tăng làm ảnh hưởng lớn đến sức khỏe cộng đồng trình di dân đồng thời phải đối mặt với khó khăn q trình tiếp cận với dịch vụ chăm sóc sức khỏe Tại số vùng, dân di cư thường có tính chất theo mùa, theo thời vụ, di chuyển từ nơi lưu hành sốt rét nhẹ dến khu vực có lưu hành sốt rét nặng thường nhạy cảm với bệnh sốt rét Việc mang mầm bệnh từ vùng sốt rét lưu hành sang vùng khác, đặc biệt mang theo kí sinh trùng mang gen kháng thuốc gây khó khăn việc phòng loại trừ bệnh sốt rét Cho đến nay, nói đến kí sinh trùng sốt rét kháng thuốc nói đến P.flaciparum kháng thuốc sốt rét Kí sinh trùng sốt rét kháng thuốc xảy vùng sốt rét giới khó khăn kĩ thuật lớn ảnh hưởng đến chương trình phịng chống sốt rét tồn cầu Tuy nhiên tình hình kí sinh trùng sốt rét kháng thuốc có biến đổi theo thời gian khơng gian phân bố lồi kí sinh trùng sốt rét khả phịng chống thời điểm, khu vực khác Sự xuất kí sinh trùng sốt rét kháng thuốc có mối liên quan chặt chẽ với trình phát triển thuốc điều trị sốt rét Để khắc phục tình trạng đa kháng lan tràn P.falciparum, loạt thuốc thử nghiệm thành cơng lâm sàng thức đưa vào sử dụng Nhằm cho người có nhìn rõ nét sốt rét nói chung thuốc điều trị sốt rét nói riêng, nhóm chúng tơi nghiên cứu đối tượng trình bày thu hoạch với nội dung: Sơ lược bệnh sốt rét kí sinh trùng sốt rét Cách điều trị dân gian Artemisinin dẫn chất SƠ LƯỢC VỀ BỆNH SỐT RÉT VÀ KÝ SINH TRÙNG SỐT RÉT VÀ CÁCH ĐIỀU TRỊ SỐT RÉT TRONG DÂN GIAN(1) I Ký sinh trùng sốt rét Tổng quan KST sốt rét Thuộc chi Plasmodium, với chủng ký sinh bao gồm o Plasmodium falciparum: Đây loại gây bệnh chủ yếu với khoảng 70 - 80% số ca mắc sốt rét Việt Nam Ký sinh trùng sốt rét Plasmodium falciparum sinh trưởng tốt vùng khí hậu nóng ẩm o Plasmodium vivax: Ít phổ biến hơn, với khoảng 20 - 30% số ca mắc, thường phát nhiều nơi có khí hậu lạnh o Ngồi ra, cịn có chủng Plasmodium malariae (hiếm gặp châu Á, đặc tính sinh trưởng mơi trường nóng ẩm), Plasmodium ovale (loại chưa phát Việt Nam), Plasmodium knowlesi (loài mới, chủng có khả gây bệnh cho người) - Q trình phát triển gây bệnh ký sinh trùng sốt rét chủ yếu liên quan đến ký chủ người muỗi gồm thể: o Thể tư dưỡng (Trophozoite): Hình nhẫn, đường kính khoảng 1/5 - 1/3 đường kính hồng cầu, nhân màu đỏ, tế bào chất màu xanh da trời, không bào to, chiếm phần lớn tế bào chất o Thể phân liệt (Schizonte): Nhân tế bào chất phân chia Thể phân liệt già: mảnh nhân mảnh tế bào chất bao quanh (mảnh trùng merozoite) Số lượng mảnh trùng tùy thuộc vào loài Plasmodium o Thể giao bào (Gametocyte): Là thể hữu tính, hình dạng khác tùy theo lồi a  Vịng đời KST sốt rét Chu kì phát triển thể người: KST sốt rét sinh sản vơ tính Giai đoạn sinh sản vơ tính tế bào gan: Muỗi mang thoa trùng tuyến nước bọt → Đốt người → Thoa trùng vào máu, lưu thông máu khoảng 30 phút → Gan → Sinh sản vơ tính → Thể phân liệt → Phá vỡ tế bào gan → Mảnh trùng → Máu → Giai đoạn gọi giai đoạn tiền hồng cầu KST giai đoạn chưa gây phá hủy hồng cầu  Giai đoạn sinh sản vơ tính hồng cầu: Mảnh trùng → Máu → Hồng cầu → Thể tư dưỡng non, nhân lên → Thể tư dưỡng già, phân chia → Thể phân liệt, bắt cặp (1 mảnh nhân – mảnh nguyên sinh chất) → Thể phân liệt già, phá vỡ hồng cầu → Mảnh trùngđược giải phóng → Máu: + Đa số, tiếp tục chu kì sinh sản vơ tính hồng cầu + Một số, biệt hóa → Thể giao bào (hữu tính) b Chu kì phát triển thể muỗi: KST sốt rét sinh sản hữu tính - Muỗi sốt rét hút máu bệnh nhân sốt rét, giao bào chủ động chui qua vòi muỗi vào dày muỗi phát triểnthành giao tử: o Một giao bào phát triển thành giao tử o Một giao bào đực phát triển, sinh roi, thoát roi thành nhiều giao tử đực Một giao tử đực + giao tử → Hợp tử di động → Trứng di động, chui qua kẽ gian bào mặt dạdày muỗi → Trứng nang → Trứng nang già chứa khoảng 10.000 thoa trùng → Phá vỡ nang trứng, di chuyểnđến tuyến nước bọt chờ hội muỗi đốt người → Người - Chu kì KST sốt rét phát triển muỗi phụ thuộc vào nhiệt độ mơi trường c Thể ngồi hồng cầu: tồn dạng thể ngủ gan, sau vài tháng (tùy loại chủng) vài thể ngủ phát triển muộn (GĐ ngoại HC)→ Thể phânliệt → Mảnh trùng → Máu => Gây sốt rét II Tổng quan bệnh sốt rét Bệnh sốt rét bệnh truyền nhiễm phổ biến vấn đề nghiêm trọng sức khỏe cộng đồng Bệnh gây ký sinh trùng Plasmodium, lây truyền từ người sang người khác người bị muỗi đốt Bệnh phổ biến khu vực nhiệt đới cận nhiệt đới châu Mỹ, châu Á châu Phi Mọi người nhiễm bệnh sốt rét Khả miễn dịch với sốt rét không đầy đủ ngắn bị tái nhiễm Khơng có miễn dịch chéo nên người nhiễm đồng thời hai ba loại ký sinh trùng sốt rét Nguyên nhân bệnh Sốt rét Tác nhân gây bệnh: ký sinh trùng sốt rét thuộc chi Plasmodium Ở người, bệnh sốt rét gây loài: Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale, Plasmodium vivax Plasmodium knowlesi Trung gian truyền bệnh: muỗi Anopheles Bệnh sốt rét phát triển quanh năm, tỉnh rừng núi phía Bắc sốt rét phát triển cao vào đầu cuối mùa mưa Ở tỉnh miền Trung, Tây Nguyên Đông Nam Bộ, sốt rét phát triển cao suốt mùa mưa Ổ chứa: người ổ chứa ký sinh trùng sốt rét Thời kỳ lây truyền: Thời gian từ sốt đến xuất giao bào máu 2-3 ngày Plasmodium vivax, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale từ 7-10 ngày với Plasmodium falciparum Bệnh nhân nguồn lây giao bào máu Những bệnh nhân không điều trị điều trị khơng triệt để nguồn lây cho muỗi tới năm Plasmodium malariae, năm Plasmodium vivax năm Plasmodium falciparum Máu dự trữ nhiễm ký sinh trùng sốt rét truyền bệnh tháng Triệu chứng bệnh sốt rét Thời gian ủ bệnh kể từ bị muỗi nhiễm ký sinh trùng sốt rét đốt đến có biểu lâm sàng tuỳ thuộc loại ký sinh trùng: nhiễm Plasmodium falciparum từ 14 ngày, trung bình 12 ngày, nhiễm Plasmodium vivax từ 12 - 17 ngày, trung bình 14 ngày, nhiễm Plasmodium malariae từ 20 ngày đến nhiều tháng, nhiễm Plasmodium ovale từ 11 ngày đến 10 tháng Nhiễm sốt rét truyền máu thời gian ủ bệnh phụ thuộc vào số lượng ký sinh trùng máu truyền vào nói chung thời gian ủ bệnh ngắn khoảng vài ngày Theo sở phân loại bệnh sốt rét Tổ chức Y tế Thế giới, bệnh sốt rét Việt Nam phân chia theo mức độ lâm sàng:  Sốt rét thông thường sốt rét chưa có biến chứng  Sốt rét ác tính sốt rét có biến chứng Dấu hiệu bệnh sốt rét khác tùy theo thể lâm sàng Dấu hiệu sốt rét thông thường:  Cơn sốt sơ nhiễm: sốt thường khơng điển hình, sốt cao liên tục vài ngày  Cơn sốt điển hình: sốt rét điển hình qua giai đoạn sau: Giai đoạn rét run: rét run toàn thân, môi tái, da gà Giai đoạn rét run kéo dài khoảng 30 phút - Giai đoạn sốt nóng: rét run giảm, bệnh nhân thấy nóng dần, thân nhiệt tới 400 C – 410C, mặt đỏ, da khơ nóng, mạch nhanh, thở nhanh, đau đầu, khát nước, đau tức vùng gan lách Giai đoạn sốt nóng kéo dài khoảng 1-3 Giai đoạn vã mồ hôi: thân nhiệt giảm nhanh, vã mồ hôi, khát nước, giảm nhức đầu, mạch bình thường, bệnh nhân cảm thấy dễ chịu  Cơn sốt thể cụt: sốt không thành cơn, thấy rét run, kéo dài khoảng 1-2 Thể sốt hay gặp bệnh nhân nhiễm sốt rét nhiều năm  Thể ký sinh trùng lạnh (người lành mang trùng): xét nghiệm máu có ký sinh trùng khơng bị sốt, sinh hoạt lao động bình thường Thể thường gặp vùng sốt rét lưu hành nặng  Chu kỳ sốt khác tùy loại ký sinh trùng Sốt Plasmodium falciparum: sốt hàng ngày, tính chất sốt nặng, hay gây sốt rét ác tính tử vong không điều trị kịp thời Sốt Plasmodium vivax: thường sốt cách nhật (cách ngày sốt cơn) Sốt Plasmodium malariae Plasmodium ovale: sốt cách nhật sốt ngày Dấu hiệu sốt rét ác tính:   -  Thể não (chiếm 80-95% sốt rét ác tính): Dấu hiệu tiền ác tính bật có rối loạn ý thức (li bì vật vã, mê sảng, nói nhảm), sốt cao liên tục, ngủ nhiều, nhức đầu dội, nôn tiêu chảy nhiều Hội chứng tâm thần: hôn mê đột ngột từ từ, hôn mê sâu dần Co giật kiểu động kinh Rối loạn vòng, đồng tử dãn Các dấu hiệu khác: rối loạn hô hấp suy hô hấp phù não Huyết áp giảm nước, tăng huyết áp phù não Nôn tiêu chảy Có thể gặp suy thận, tiểu vô niệu, urê huyết cao, tiểu huyết sắc tố tán huyết ạt Tỷ lệ tử vong sốt rét ác tính thể não từ 20 - 50% Thể tiểu huyết sắc tố: Là thể diễn biến nặng tán huyết ạt, trụy tim mạch, suy thận Sốt thành dội, nôn khan dịch màu vàng, đau lưng Vàng da, niêm mạc tán huyết Tiểu huyết sắc tố, nước tiểu màu đỏ nâu sau chuyển sang màu cà phê màu nước vối đặc, lượng nước tiểu giảm dần chí dẫn đến vô niệu Thiếu máu thiếu oxy cấp Hồng cầu huyết sắc tố giảm mạnh Thể giá lạnh Toàn thân lạnh, huyết áp tụt, da xanh tái, nhiều mồ hơi, đau đầu  Thể phổi Khó thở, thở nhanh, tím tái, khạc bọt màu hồng Đáy phổi có nhiều ran ẩm, ran ngáy  Thể gan mật Vàng da vàng mắt, buồn nôn nơn Phân màu vàng, nước tiểu màu vàng có nhiều muối mật Hơn mê  Thể tiêu hóa Đau bụng, nôn, tiêu chảy cấp, hạ thân nhiệt  Sốt rét phụ nữ có thai Phụ nữ có thai mắc bệnh sốt rét dễ bị sốt rét ác tính sảy thai, thai chết lưu sinh non  Sốt rét bẩm sinh (hiếm gặp) Mẹ mang thai nhiễm sốt rét có tổn thương tế bào thai ngăn cách máu mẹ Bệnh xuất sớm sau sinh, trẻ quấy khóc, sốt, vàng da, gan lách to  Sốt rét trẻ em Trẻ tháng tuổi dễ mắc sốt rét khơng cịn miễn dịch từ mẹ Trẻ mắc bệnh sốt rét thường sốt cao liên tục dao động, nôn, tiêu chảy, bụng chướng, gan lách to, có dấu hiệu màng não co giật Tỷ lệ tử vong cao Đường lây truyền bệnh sốt rét Bệnh sốt rét lây truyền qua đường máu Có phương thức lây truyền bao gồm: 10 Do muỗi truyền: phương thức chủ yếu  Do truyền máu có nhiễm ký sinh trùng sốt rét  Do mẹ truyền sang qua thai bị tổn thương (hiếm gặp)  Do tiêm chích: dùng chung bơm kim tiêm dính máu có ký sinh trùng sốt rét Đối tượng nguy bệnh sốt rét Các yếu tố nguy bệnh sốt rét bao gồm:          - Trình độ dân trí điều kiện kinh tế xã hội thấp Các phong tục tập quán lạc hậu, tập quán canh tác làm nương rẫy ngủ qua đêm nương rẫy, rừng Dân di cư tự vào vùng sốt rét Phòng ngừa bệnh sốt rét Tuyên truyền giáo dục phòng chống sốt rét, bị sốt người bệnh cần đến sở y tế để khám điều trị Ngủ kể nhà, nương rẫy ngủ rừng Phòng chống muỗi truyền bệnh coi biện pháp hữu hiệu nhất: - Diệt muỗi phun tồn lưu mặt tường vách tẩm hóa chất diệt muỗi năm lần vào trước mùa mưa - Xoa kem xua muỗi - Phát quang bụi rậm, khơi thông cống rãnh quanh nhà, làm nhà xa rừng xa nguồn nước, mặc quần áo dài vào buổi tối - Hạn chế bọ gậy: khơi thơng dịng chảy, vớt rong rêu làm thống mặt nước Uống thuốc dự phịng: nước sốt rét lưu hành nặng có chủ trương uống thuốc dự phòng cho người vào vùng sốt rét ngắn ngày, phụ nữ có thai vùng sốt rét, người đến định cư vùng sốt rét Ở nước ta nay, bệnh sốt rét giảm mạnh nên khơng uống thuốc dự phịng mà cấp thuốc cho đối tượng để tự điều trị mắc bệnh sốt rét An toàn truyền máu, đặc biệt với người có tiền sử sốt rét sống vùng sốt rét Cách điều trị sốt rét dân gian Điều trị sốt rét chanh tươi o Đây mẹo chữa sốt rét nhà cực đơn giản Người bệnh cần lấy chanh tươi thái lát mỏng chà lên khuỷu tay, trán dọc sống lưng Cần ý vùng da bị xước để tránh làm xót da viêm da o Nên áp dụng phương pháp phút ngày thực lần khỏi hẳn - Điều trị sốt rét nước ấm o Cách làm đơn giản, người bệnh thực nhà cách cởi bỏ quần áo khơ thống Sau dùng khăn ngâm nước ấm, vắt khô 11 B The infrared absorption spectrum is concordant with the reference spectrum (IR Album No 220).( Dược điển Trung Quốc 2015) Carry out the examination as described under “Spectrophotometry in the infrared region” (Vol 1, p 40) The infrared absorption spectrum is concordant with the spectrum obtained from artemisinin RS or with the reference spectrum of artemisinin.( Dược điển Quốc tế 2003) Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4) Bản mỏng: Silicagel G Dung môi khai triển: Ether dầu hỏa (40°C đến 60°C) - ether (1 : 1) Dung dịch thử: Chứa 0,10 mg chế phẩm ml toluen (TT) Dung dịch đối chiếu: Chứa 0,10 mg artemisinin chuẩn ml toluen (TT) Cách tiến hành: Chấm riêng biệt lên mỏng 10 µl dung dịch Triển khai sắc ký đến dung môi 15 cm, lấy mỏng để khơ ngồi khơng khí làm khơ dịng khí mát, phun lên mỏng dung dịch anisaldehvd acid sulfuric (TT) sấy mỏng 105°C Quan sát sắc ký đồ ánh sáng ban ngày Vết thu sắc ký đồ dung dịch thử phải phù hợp vị trí, kích thước màu sắc với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu C The retention time of the principal peak of the substance being examined in the chromatogram obtained in the Assay is identical with that of artemisinin CRS in the chromatogram of the reference solution ( Dược điển Trung Quốc 2015) See the test described below under “Related substances test B” The principal spot obtained with solution D corresponds in position, appearance, and intensity with that obtained with solution E (Dược điển Quốc tế 2003) Hòa tan mg chế phẩm 0,5 ml ethanol (TT), thêm 0,5 ml dung dịch hydroxylamin hydroclorid (TT) 0,25 ml dung dịch natri hydroxyd % Đun hỗn hợp thu cách thủy đến sôi, để nguội, thêm giọt dung dịch acid hydrocloric M (TT) giọt dung dịch sắt (III) clorid % (TT), màu tím đậm xuất Dissolve about mg in 0.5 ml of dehydrated ethanol, add 0.5 ml of hydroxylamine hydrochloride TS and 0.25 ml of sodium hydroxide TS, heat gently in a water bath to boiling, cool, add drops of hydrochloric 18 acid and drop of ferric chloride TS, a deep violet-red colour is immediately produced Dược điển Trung Quốc 2015 Dissolve 5mg in about 0.5ml of dehydrated ethanol R, add about 0.5ml of hydroxylamine hydrochloride TS2 and 0.25ml of sodium hydroxide (~80g/l) TS Heat the mixture in a water-bath to boiling, cool, add drops of hydrochloric acid (~70g/l) TS and drops of ferric chloride (50g/l) TS; a deep violet colour is immediately produced Dược điển Quốc tế 2003 D Hòa tan mg chế phẩm khoảng 0,5 ml ethanol (TT), thêm 1,0 ml dung dịch kali iodid %, 2,5 ml dung dịch acid sulfuric 10 % (TT) để yên giọt dung dịch hồ tinh bột (TT); màu tím xuất Dissolve about mg in 0.5 ml of dehydrated ethanol, add 0.4 ml of potassium iodide TS, 2.5 ml of dilute sulfuric acid and drops of starch IS, a violet colour is produced immediately Dược điển Trung Quốc 2015 Dissolve 5mg in about 0.5ml of dehydrated ethanol R, add 1.0ml of potassium iodide (80g/l) TS, 2.5ml of sulfuric acid (~100g/l) TS and drops of starch TS; a violet colour is immediately produced Dược điển Quốc tế 2003 Góc quay cực riêng Từ +75° đến +78°, tính theo chế phẩm làm khô (Phụ lục 6.4) Dùng dung dịch chế phẩm 1,0 % ethanol (TT) để đo Specific optical rotation +75° to +78°, in a solution of 10 mg per ml in dehydrated ethanol Dược điển Trung Quốc 2015 Specific optical rotation Use a 10mg/ml solution in dehydrated ethanol R; [α]D20o C = +75° to +78° Dược điển Quốc tế 2003 Tạp chất liên quan 19 Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Pha động: Acetonitril - nước (50 : 50) Dung dịch thử: Hòa tan 50 mg chế phẩm 10,0 ml pha động Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 50 mg artemisinin chuẩn (chứa artemisinin tạp chất A) 10,0 ml pha động Dung dịch đối chiếu (2): Pha loãng ml dung dịch thử thành 100 ml pha động Điều kiện sắc ký: Cột kích thước (15 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh C (5 µm) Detector quang phổ tử ngoại đặt bước sóng 210 nm Tốc độ dịng: 1,0 ml/min Thể tích tiêm: 20 µl Cách tiến hành: Tiến hành sắc ký với thời gian gấp 1,5 lần thời gian lưu artemisinin Trên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1), thời gian lưu tương đối so với artemisinin (thời gian lưu khoảng 10 min) tạp chất A khoảng 0,79 Trên sắc ký đồ dung dịch thừ, thời gian lưu tương đối so với artemisinin (thời gian lưu khoảng 10 min) tạp chất B khoảng 0,85 Kiểm tra tính phù hợp hệ thống: Trên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1), độ phân giải pic artemisinin với pic tạp chất A Giới hạn: Hệ số hiệu chỉnh: Để tính hàm lượng, nhân diện tích pic tạp chất A với 0,027 Tap chất A: Diện tích pic tạp chất A hiệu chỉnh không lớn 0,15 lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) (0,15 %) Tạp chất B: Diện tích pic tạp chất B không lớn 0,3 lần diện tích pic sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) (0,3%) Related substances Dissolve a quantity of substance being examined in acetone to produce a solution of 15 mg per ml as the test solution, measure accurately 0.5 ml of the test solution into a 100 ml volumetric flask and dilute to volume with acetone as the 20 reference solution (1), measure accurately ml of the reference solution (1) into a 10 ml volumetric flask and dilute to volume with acetone as the reference solution (2) Dissolve artemisinin CRS and dihydroartemisinin CRS in acetone to produce a mix solution containing 10 mg of artemisinin per ml and 0.1 mg of dihydroartemisinin per ml as the system suitability solution Carry out the method for thin-layer chromatography (0502, using silica gel G as the coating substance and a mixture of petroleum ether (60-90°C) -acetone-glacial acetic acid (8: : 0.1) as the mobile phase Apply separately to the plate 10 ml each of four solutions, after developing over a path of 15 cm and removal of the plate, dry it in air and spray with a solution of 2% vanillin in a ethanolic solution of 20% sulfuric acid, heat the plate at 85°C for 10-20 minutes till the spots appear clearly In the chromatogram obtained with the test solution, any secondary spot is not more intense than the principal spot obtained with the reference solution (1) (0.5%), and not more than one secondary spot is more intense than the principal spot obtained with the reference solution (2) (0.25%) The test is not valid unless the chromatogram obtained with the system suitability solution shows two clearly separated spots Dược điển Trung Quốc 2015 Related substances • Either test A or test B may be applied A.Carry out the test as described under “High-performance liquid chromatography” (p 257), using a stainless steel column (10cm x 4.6mm) packed with stationary phase A (3µm) The mobile phases for gradient elution consist of a mixture of acetonitrile and water, using the conditions shown in the following table: Time (min) 0-17 Mobile phase A (% v/v of acetonitrile) 60 Mobile phase B Comment (% v/v of water) 40 21 Isocratic 17-30 60 => 100 40 => Linear gradient 30-35 100 => 60 => 40 60 40 Return to initial conditions 35-45 Isocratic – reequilibration Prepare the following solutions For solution (A) use 10mg of Artemisinin per ml in a mixture of volumes of acetonitrile R and volumes of water, and for solution (B) use 50mg of Artemisinin per ml in a mixture of volumes of acetonitrile R and volumes of water For the system suitability test prepare solution (C) containing 1mg of artemisinin RS per ml and 1mg of artenimol RS per ml in a mixture of volumes of acetonitrile R and volumes of water Operate with a flow rate of 0.6ml per minute As a detector use an ultraviolet spectrophotometer set at a wavelength of about 216nm Inject alternately 20ml each of solutions A, B, and C Measure the areas of the peak responses obtained in the chromatograms from solutions A and B, and calculate the content of the related substances as a percentage In the chromatogram obtained with solution A, the area of any peak, other than the principal peak, is not greater than that obtained with solution B (0.5%) Not more than one peak is greater than half the area of the principal peak obtained with solution B (0.25%) The sum of the areas of all peaks, other than the principal peak, is not greater than twice the area of the principal peak obtained with solution B (1.0%) Disregard any peak with an area less than 0.1 times the area of the principal peak in the chromatogram obtained with solution B The test is not valid unless the relative retention of α-artenimol compared with artemisinin is about 0.6, and the resolution between the peaks is not less than 2.0 B Carry out the test as described under “Thin-layer chromatography” (Vol 1, p 83), using silica gel R1 as the coating substance and a mixture of equal volumes of light petroleum R1 and ether R as the mobile phase Apply separately to the plate 10ml of each of the following solutions in toluene R containing (A) 10mg of Artemisinin per 22 ml, (B) 0.05mg of Artemisinin per ml, (C) 0.025mg of Artemisinin per ml, (D) 0.10mg of Artemisinin per ml, and (E) 0.10mg of artemisinin RS per ml After removing the plate from the chromatographic chamber, allow it to dry in air, spray with anisaldehyde/sulfuric acid TS, and heat the plate to 105°C for minutes Examine the chromatogram in daylight Any spot obtained with solution A, other than the principal spot, is not more intense than that obtained with solution B (0.5%) Furthermore, not more than one such spot is more intense than that obtained with solution C (0.25%) Dược điển Quốc tế 2003 Mất khối lượng làm khô Không 0,5 % (Phụ lục 9.6) (1,000 g; 80 °C) Loss on drying When dried to constant weight at 80°C , loses not more than 0.5% of its weight Dược điển Trung Quốc 2015 Loss on drying Dry to constant mass at 80°C; it loses not more than 5.0mg/g Dược điển Quốc tế 2003 Tro sulfat Không 0,1 % (Phụ lục 9.9, phương pháp 1) Dùng 1,0 g chế phẩm Residue on ignition Not more than 0.1% Dược điển Trung Quốc 2015 Sulfated ash Not more than 1.0mg/g Dược điển Quốc tế 2003 Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng (Phụ lục 5.3) Điều kiện sắc ký mô tả phần Tạp chất liên quan Tiên hành sắc ký với dung dịch thử dung dịch đối chiếu (1) Trên sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) thời gian lưu tương đối so với artemisinin (thời gian lưu khoảng 10 phút) tạp chất A khoảng 0,79 Kiểm tra tính phù hợp hệ thống: Trên sắc ký đồ dung dịch đổi chiếu (1), độ phân giải pic artemisinin với pic tạp chất A 23 Tính hàm lượng phần trăm C15H22O5 chế phẩm dựa vào diện tích pic thu sắc ký đổ dung dịch thử, dung dịch đối chiếu (1) hàm lượng C15H22O5 artemisinin chuẩn ● Dược điển Trung Quốc 2015 Carry out the method for high performance liquid chromatography , using a column packed with octadecylsilane bonded silica gel and a mixture of acetonitrile water (60 : 40) as the mobile phase Detection wavelength is 210 nm Dissolve a quantity of the substance being examined and dihydroartemisinin CRS in methanol to produce a mix solution containing each of mg per ml as the system suitability solution Inject 20 ul of the system suitability solution onto the column, dihydroartemisinin shows two peaks, the resolution factor between the peaks of artemisinin and adjacent peaks of dihydroartemisinin is not less than 2.0 The number of the theoretical plates of the column is not less than 3000, calculated with reference to the peak of artemisinin ● Dược điển Quốc tế 2003 A Determine by “High-performance liquid chromatography” (p 257), using a stainless steel column (10cm x 4.6mm) packed with stationary phase A (3mm) As the mobile phase, use a mixture of volumes of acetonitrile R and volumes of water Prepare the following solutions in the mobile phase: solution (A) 1.0mg of Artemisinin per ml; and solution (B) 1.0mg of artemisinin RS per ml For the system suitability test prepare solution (C) containing 1mg of artemisinin RS per ml and 1mg of artenimol RS per ml in a mixture of volumes of acetonitrile R and volumes of water Operate with a flow rate of 0.6ml per minute As a detector use an ultraviolet spectrophotometer set at a wavelength of about 216nm Inject alternately 20ml each of solutions A, B, and C The test is not valid unless the relative retention of α-artenimol compared with artemisinin is about 0.6, and the resolution between the peaks is not less than 2.0 Measure the areas of the peak responses obtained in the chromatograms from solutions A and B, and calculate the percentage content of C15H22O5 with reference to the dried substance B Dissolve about 0.05g of Artemisinin, accurately weighed, in sufficient ethanol (~750g/l) TS to produce 100ml, and dilute 10ml to 100ml with the same solvent Accurately transfer 10ml to a 50-ml volumetric flask, dilute to volume with sodium hydroxide (0.05mol/l) VS, mix thoroughly, and warm to 50°C in a water-bath for 30 minutes Cool to room temperature 24 Measure the absorbance of a 1-cm layer at the maximum at about 292nm against a solvent cell containing a blank prepared with 10ml of ethanol (~750g/l) TS diluted with sufficient sodium hydroxide (0.05mol/l) VS to produce 50ml Calculate the percentage content of C15H22O5 in the substance being tested by comparison with artemisinin RS, similarly and concurrently examined, and with reference to the dried substance Nhiệt độ nóng chảy : ● Dược điển Trung Quốc 2015: 150-153 °C ● Dược điển Quốc tế 2003:151–154°C So sánh dược điển : Dược điển Việt Nam Chinese Pharmacopoeia The International Pharmacopoeia Định tính Có phương pháp Có phương pháp cách làm tương tự Việt Nam Có phương pháp, phương pháp sắc ký lớp mỏng có nhiều dung dịch chấm mỏng Góc quay cực [α]D20o C = +75° đến +78° Giống Dược điển Việt Nam Giống Dược điển Việt Nam Tạp chất liên quan Sắc ký lỏng Sắc ký lớp mỏng Sắc ký lỏng hiệu cao sắc ký lớp mỏng Giống Dược điển Việt Nam Giống Dược điển Việt Nam Giống Dược điển Việt Nam Giống Dược điển Việt Nam Mất khối lượng làm khô Tro sulfat Không 0,5 % (1,000 g; 80 °C) Không 0,1 % Dùng 1,0 g chế phẩm 25 Định lượng Sắc ký lỏng Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Nhiệt độ nóng chảy Khơng đề cập 150–153°C 151–154°C VII Cơng dụng(3) - Có tác dụng diệt thể phân liệt máu tất loại ký sinh trùng sốt rét, kể loại kháng cloroquin thuốc chống sốt rét khác; thực tế thuốc tác dụng thể ngoại hồng cầu, thể thoa trùng thể giao tử - Artemisinin qua hàng rào máu não nên có tác dụng tốt sốt rét não - Do tỷ lệ tái phát cao dùng artemisinin dẫn chất nên nay, để điều trị sốt rét, thường phối hợp artemisinin dẫn chất vối thuốc chống sốt rét khác - Một số nghiên cứu cho thấy, artemisinin có tác dụng diệt tế bào ung thư hầu hết loại ung thư: nhiên, tác dụng chưa ứng dụng điểu trị VIII - Tác dụng không mong muốn(9) Hàng triệu người dùng artemisinin, chưa thấy có khuyến cáo phản ứng có hại nghiêm trọng - Các tác dụng có hại thường nhẹ thống qua, gồm tác hại hệ tiêu hóa (như buồn nơn, nơn, đau bụng, tiêu chảy), nhức đầu, chóng mặt, hoa mắt, giảm hồng cầu lưới, giảm bạch cầu, tăng men gan, đặc biệt sau uống Những sốt ngắn thuốc báo cáo vài nghiên cứu Dùng đường hậu mơn, người bệnh bị đau mót, đau bụng tiêu chảy Hướng dẫn cách xử trí ADR: Điều trị triệu chứng thấy cần thiết DẪN CHẤT CỦA ARTEMISININ(5) Để khắc phục nhược điểm artemisinin hòa tan nước lẫn dầu làm giảm khả tái phát tăng hiệu điều trị người ta bán tổng hợp hàng loạt dẫn chất khác mang nhóm háo nước, háo dầu từ artemisinin 26 I DIHYDROARTEMISININ Nguồn gốc: dẫn xuất bán tổng hợp artemisinin Tính chất vật lý, hóa lý - Nhóm chức peroxyd, lacton: giống với artemisinin - Nhóm chức OH: o Tăng độ tan, vào thể liên hợp với acid glucouronic để đào thải khỏi thể =>DHA tác dụng mạnh artemisinin dễ bị chuyển hóa pha nên giảm thời gian tác dụng o Phản ứng ete, ester hóa: tạo dẫn chất artemisinin artemether, artesunat, arteether => tăng tính thân dầu tức có tác dụng kéo dài artemisinin II ARTEMETHER Nguồn gốc :Artemether (C16H26O5Mr = 298.4 g / mol) metyl ether dervate artemisinin sesquiterpene từ ngải cứu hàng năm ,một thuốc sử dụng y học cổ truyền Trung Quốc 27 Tính chất : Artemether tồn dạng tinh thể màu trắng bột thực tế khơng hịa tan nước Nó tiền chất chất chuyển hóa có hoạt tính dihydroartemisinin Artemether thuộc loại hữu peroxit Tinh thể màu trắng bột kết tinh màu trắng Dễ tan ethyl acetat ethanol, tan dicloro-methan aceton, thực tế không tan nước Khoảng nóng chảy Từ 86,0 °C đến 90,0 °C Góc quay cực riêng Từ +166° đến +173°, tính theo chế phẩm làm khơ Dùng dung dịch chế phẩm có nồng độ 10 mg/ml ethanol (TT) Đặc điểm khác biệt: Do ether hóa nên artemether thân dầu hay có tác dụng dài so với artemisinin (vào thể artemether phải chuyển hóa thành artemisinin có tác dụng) III ARTEETHER( artermotil) Nguồn gốc :Artemotil, gọi β-arteether, dẫn xuất bán tổng hợp artemisinin chất diệt phân liệt máu tác dụng nhanh định đặc biệt để điều trị bệnh sốt rét Plasmodium falciparum kháng chloroquine trường hợp sốt rét thể não Tính chất Ether hóa =>Thân dầu, khó tan nước, tan dầu tốt artemisinin ,tác dụng kéo dài mạnh artemisinin Dẫn xuất ete etylic dihydroartemisinin : sản phẩm chuyển hóa thành etanol => độc hại Artemether 28 VI ARTESUNAT Nguồn gốc: dẫn xuất bán tổng hợp artemisinin Tính chất vật lý,hóa lý: - Nhóm chức peroxyd, lacton: giống với artemisinin Chức ester: o Không bền, không bào chế dạng dung dịch pha sẵn o Tăng tính thân dầu => thời gian tác dụng dài so với artemisinin o Thủy phân nhẹ NaOH lỗng t phịng thể chuyển hóa thành DHA DHA có tác dụng diệt KST sốt rét lớn gấp lần artemisinin =>Artesunat có hiệu điều trị tốt artemisinin - Chức acid: o Dẫn chất acid succinic =>tính acid => dễ tan kiềm loãng =>bào chế dạng bột đông khô pha tiêm kèm dung môi NaHCO3 5% =>tạo muối dễ tan với Na làm tăng độ tan =>Artesunat có khả tan nước nhiều artemisinin o Định lượng phương pháp trung hòa -> Là chất tan nước -> sử dụng đường tan nước đường uống 29 VI ACID ARTELINIC ( Artelinate) Nguồn gốc: dẫn xuất bán tổng hợp artemisinin Tính chất: Ether hóa -> thân dầu -> có tác dụng kéo dài so với artemisinin Nhóm phenol-> thân dầu Kết hợp với nhóm carboxylic -> khó tan nước chuyển nhóm OH sang dạng Na (tạo muối tan nước) -> trở thành chất tan nước -> cải thiện độ tan so với artemisinin bền nước so với artesunat (có thể làm thuốc tiêm) Kết luận: dẫn chất DHA artemether, arteether có tác dụng mạnh artemisinin không tan nước, tan dầu tốt artemisinin Trong tất dẫn chất artemisinin điều chế có Na dihydroartemisinin hemisuccinat sử dụng dùng làm thuốc chất tan nước 30 KẾT LUẬN BÁO CÁO - Sơ lược bệnh sốt rét kí sinh trùng sốt rét Bệnh sốt rét chủ yếu muỗi truyền, giới có khoảng 422 lồi Anophen (Anopheles) có khoảng 70 lồi truyền bệnh sốt rét, khoảng 40 lồi muỗi truyền bệnh Tác nhân gây bệnh: ký sinh trùng sốt rét (Plasmodium) Có loại ký sinh trùng gây cho người là: Plasmodium falciparum, Plasmodium malariae, Plasmodium ovale, Plasmodium vivax Plasmodium knowlesi Sau muỗi truyền bệnh đốt hút máu người bệnh có giao bào, giao bào đực kết hợp dày muỗi thành noãn (ookinet), noãn chui qua thành dày tạo thành kén (oocyst) mặt dày, ký sinh trùng phát triển tạo thành hàng nghìn ký sinh trùng non gọi thoa trùng (sporozoite), kén vỡ giải phóng thoa trùng, thoa trùng di chuyển lên tập trung tuyến nước bọt muỗi Ở nhiệt độ môi trường từ 20-300C, sau 10 ngày, ký sinh trùng hồn thành chu kỳ phát triển hữu tính thể muỗi truyền bệnh đến muỗi chết Ở nhiệt độ này, muỗi sống tuần Tùy vào loại ký sinh trùng mà bệnh có thời gian ủ bệnh khác nhau, mức độ nguy hiểm triệu chứng khác Bệnh sốt rét chia thành mức độ sốt rét thông thường sốt rét ác tính với biểu bệnh khác Sốt rét bệnh lý nguy hiểm, không gây nhiều triệu chứng khó chịu, ảnh hưởng đến sống, sức khỏe người bệnh mà tỷ lệ tử vong bệnh cao Hơn nữa, bệnh dễ lây lan thành dịch bệnh khó kiểm sốt Vì thế, cần áp dụng biện pháp phòng ngừa để bảo vệ sức khỏe Hiện nay, có nhiều biện pháp điều trị sốt rét dân gian dung nước ấm, chanh tươi, khoai tây, na, tỏi, me đất, nhọ nồi Artemisinin dẫn chất a Artemisinin Artemisinin loại thuốc có khả chống sốt rét, loại thuốc phân lập từ Thanh hoa hoa vàng hay gọi với tên khác Asteriaceae Thuốc có hiệu cao, đáng ý thuốc có khả làm kiểm sốt phát triển loại ký sinh trùng sốt rét Plasmodium falciparum Khác với loại thuốc chống sốt rét khác, artemisinin loại sesquiterpen lacton có cầu nối endoperoxid Cầu nối quan trọng việc chống sốt rét Artemisinin có tác dụng có tác dụng mạnh diệt thể phân liệt, nhiên thực tế khơng có tác dụng hồng cầu, thể giao tử thể thoa trùng Theo đó, tùy vào đối tượng khác bác sĩ định lượng thuốc dùng cho phù hợp bệnh nhân 31 b Dẫn chất artemisinin Khắc phục nhược điểm Artemisinin, người ta nghiên cứu dẫn chất giúp giảm khả tái phát tang khả điều trị Dihydroartemisinin dẫn chất bán tổng hợp từ Artemisinin, thay nhóm chức ceton C10 nhóm chức alcol, tang độ tan, giảm thời gian tác dụng Artemether dẫn chất bán tổng hợp artemisinin, chế tạo cách khử artemisinin, ether hóa lactol thu Artemether tan dầu tốt artemisinin artesunat Artemether chủ yếu có tác dụng diệt thể phân liệt máu Artemotil: gọi β-arteether, dẫn xuất bán tổng hợp artemisinin, tan dầu tốt artemisinin ,tác dụng kéo dài mạnh artemisinin, độc hại Artemether Artesunat dẫn chất bán tổng hợp từ Artemisinin, tác dụng dài hiệu điều trị tốt Artemisinin Artelinate dẫn chất bán tổng hợp Artemisinin, tác dụng kéo dài cải thiện độ tan so với Artemisinin, bền nước so với Artesunat TÀI LIỆU THAM KHẢO (1) Giáo trình vi sinh ký sinh trùng đại học Dược Hà Nội (2) https://vi.wikipedia.org/wiki/S%E1%BB%91t_r%C3%A9t#L%E1%BB%8Bch_s %E1%BB%AD (3) https://www.slideshare.net/drasra1/antimalarial-drugs-68284886 (4) https://123docz.net/document/4140485-nghien-cuu-tong-hop-bat-doi-xung-cac-danxuat-artemisinin-tren-he-xuc-tac-phuc-kim-loai-chuyen-tiep.htm (5) Giáo trình thực tập Hóa Dược đại học Dược Hà Nội (6) Dược điển Việt Nam V (7) Dược điển Trung Quốc 2015 (8) The International Pharmacopoeia 2003 (9) Dược thư quốc gia 2018 32 ... LƯỢC VỀ BỆNH SỐT RÉT VÀ KÝ SINH TRÙNG SỐT RÉT VÀ CÁCH ĐIỀU TRỊ SỐT RÉT TRONG DÂN GIAN( 1) I Ký sinh trùng sốt rét II Tổng quan bệnh sốt rét ARTEMISININ. .. SƠ LƯỢC VỀ BỆNH SỐT RÉT VÀ KÝ SINH TRÙNG SỐT RÉT VÀ CÁCH ĐIỀU TRỊ SỐT RÉT TRONG DÂN GIAN( 1) I Ký sinh trùng sốt rét Tổng quan KST sốt rét Thuộc chi Plasmodium, với chủng ký sinh bao gồm o Plasmodium... sốt rét nói riêng, nhóm chúng tơi nghiên cứu đối tượng trình bày thu hoạch với nội dung: Sơ lược bệnh sốt rét kí sinh trùng sốt rét Cách điều trị dân gian Artemisinin dẫn chất SƠ LƯỢC VỀ BỆNH SỐT