BO Y TE
DAI HOC DIEU DUONG NAM ĐỊNH
BAO CAO KET QUA NGHIEN CUU DE TAI CAP CO SO
NGHIEN CUU NONG DO MOT SO HORMON
TUYEN GIAP TRONG MAU NGUOI PHOI NHIEM CHAT DA CAM/DIOXIN TRUONG Dal HOC HEU DƯƠNG NAM ĐỊNH THU VIE sé-NC AM
Chủ nhiệm đề tài: Phạm Văn Sơn
Cấp quản lý: Trường Đại học Điều dưỡng Nam Định
Thời gian thực hiện: Từ tháng 03 năm 2015 đến tháng 10 năm 2015
Tổng kinh phí thực hiện đề tài: 10 triệu đồng
Trong đó: kinh phí SNKH: 10 triệu đồng
Năm 2015
Trang 2
Aa
ese
&
NS
BAO CAO KET QUA NGHIEN CUU DE TAI CAP CO SO
Tên đề tài: “Nghiên cứu nông độ một số hormon tuyến giáp ở người phơi
nhiễm chất da cam/dioxin ”
Chủ nhiệm đề tài: Ths Phạm Văn Sơn, BM Hóa Sinh
Cơ quan chủ trì đề tài: Trường Đại học Điều dưỡng Nam Định Cơ quan quản ly dé tai: Trường Đại học Điều dưỡng Nam Định Phó chủ nhiệm đề tài: Ths Trần Thị Hương, BM Hóa Sinh
Danh sách nghiên cứu viên:
- - CN Đàm Dương Mỹ Ngọc, BM Hóa Sinh - Mai Lệ Quyên, BM Hóa Sinh
Thu ky dé tài: CN Đàm Dương Mỹ Ngoc
._ Thời gian thực hiện đề tài từ tháng 03 năm 2015 đến tháng 10 năm 2015
Trang 3i L MUC LUC Trang Trang phụ bìa Mục lục Danh mục các chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục biểu đỗ Danh mục hình 8€ 10 c7 in 1 1.1 Đóng góp mới của đề tài s+++z+++Yrrrxe+rrYrxxtrrrrksetrttrkkkerttrkkkkrrtkerrrrrke 1 1.2 Két qua na 1 1.3 Higu ch con nh ẽcẽ 2
2 Đánh giá thực hiện đề tài đối chiếu với đề cương nghiên cứu đã được phê duyệt 2 ;my ma .ÔỎÔ 2 2.2 Thực hiện các mục tiêu nghiền cửu ĐỂ Tluaacscsasnsnesosennsssnnsonssneieassreinsttnihedrea 2 2.3 Các sản phẩm tạo ra so với dự kiến trong bản đề CƯƠTØ scseseSseeersesez 2 2.4 Đánh giá việc sử dụng kinh phí -ccccccc++++ttEEEEE22122211111711E1 ,cccrtrrkerrred 2 2.5 Các ý kiến đề xuất: Chủ yếu tập trung vào đề xuất về quản lý - 3
PHÀNB 27v 1ì x ÔỎ 4 2 TNG QUAN TI LIU -âccôesee sececsusecsssuessasanecssssssesseersseessse 6 2.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới về ảnh hưởng dioxin với tuyến giáp 6
2.2 Tình hình nghiên cứu trong nước về ảnh hưởng dioxin với tuyến giáp - 7
3 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . -++++++ 9
Trang 43.2 Đối tượng nghiên CứỨu - 222 ©+xe+22L+2E213322223412722712E7211.127131721721000 9 B3 Phương pháp chọn HiỂHsusennea 5< ceeceeoooieciG8502488002018936806000/30l4059008 10 3.4 Phương pháp thu thập số liệu ccccccccczerrrrre — 10 3.5 Phương pháp phân tích, xử lý số liệu -2+++22++2227++xetrkxrrrrrr rrrree 10
3.5.1.'Trang thiết bị, Wat HEN MHISH Cit ecanenerseerscemeenenserrcnsenerrenevneentnetinns 10
3.5.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 2 2-+z+£22222+++2E+4.E22277AeeErrkerrrrrree 11 3.5.3 Xác định chỉ số nhân trắc và khám lâm sàng . - + ©cs+++eertrxesrrrrke 11
3.5.4 Phương pháp xác định các chỉ tiêu nghiên: CŨ secesessessetineensidanditit0G0 0200 12
3.5.5 Phương pháp xử lý số liệu -. - ee kg001612E060F 16 kà¿ m ,ÔỎ 16 3.7 MG hinh nghién Ctr eessseceseeeeescssscssesesnssessnsssscsesseeseecenesesseseaseseessseseseseeseeseneess 17
A, RPE UTA UTI cece enn cn nn nn cnn oi CS SR EOE 18
4.1 Đặc diém mau nghién ctr .sccscsscssssssssscesseecsseeseneeesueecessseeesssseessssesssssessseecsssneensen 18 4.1.1 Đặc điểm về tuổi đời của các đối tượng nghiên cứu -©cccccee 18 4.1.2 Nghề nghiệp của các đối tượng nghiên cứu -c-2+-cces+trtzrxees.rree 18 4.1.3 Các đặc điểm nhân trắc học của đối tượng nghiên cứu - -. -c‹-««2 19
4.1.4 Huyết áp động mạch -c+«cttxestttEtkderrrtrrrrrrrrrrrrrrreree Tn 20
4.2 Một số chỉ số hóa sinh và huyết học . -+©cvcvcceextrrrkkeerrrrerrkdrrrrrrree 21 4.2.1 Các chỉ số hóa sinh huyết tương -cv++eeeseertrrreesrrrkrrrrtrrrrrrrree 21 4.2.2 Các chỉ số huyết học - xe rrtrrrrririiirr 21 4.3 Nồng độ đioxin trong máu của đối tượng nghiên GỨN, cccceeereeeee weeds 22
4.3.1 Nồng độ đioxin toàn phần (phương pháp DR CALUX) 22
4.3.2 Nồng độ các đồng đăng dioxin (phương pháp GCMS) - 23 4.4 Nồng độ và mối tương quan nồng độ giữa TSH, các hormon tuyến giáp với dioxin
trong máu đối tượng nghiên CU secscaccssescancernvsssoversveceisererennevacsrersteensnsneesnesencensanneneceacnenes 25
Trang 54.4.3 Tương quan nồng độ giữa TSH, hormon tuyến giáp với dioxin 26 44.4, Tương quan giữa nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ các đồng đăng
dioxin ở 51 đối tượng nghiên cứu : c-+c+++ tEEE 12.1 210 tem 27
5 BAN LUẬN 222-7EEEEEEEEEEErrrrrrrrrreee SHSSEE5X451555E88185 33
5.1 Một số đặc điểm chung của đối tượng nghiên cứu +++++rzerrrrrrred 33 5.2 Một số đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng của đối tượng nghiên cứu 34 5.3 Nồng độ dioxin máu ở đối tượng nghiên cứu s c++++t2t2rzerree 37
5.3.1 Nồng độ đioxin toàn (phương pháp DR CALUX) css 37
5.3.2 Định lượng nồng độ dioxin (phương pháp GCMS) -5-c+2 38
5.4 Nẵng độ và mối tương quan giữa nồng độ TSH, các hormon tuyến giáp với nồng độ
Trang 6AhR Arnt BEQ B-TSH BMI CCB CDC DRE DR CALUX F13 FT4 GC-MS HATT HATTr PCB PCDD PCDF POP TEE TEQ T3 T4 TBG TBA TBPA TCDD WHO DANH MỤC CÁC CHỮ VIÉT TẮT
Aryl Hydrocarbon Receptor
Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator Biology Equivalents (Duong luong sinh hoc)
Blood Thyroid-stimulating Hormon (hormon hướng giáp)
Body mass index (chỉ số khối) Cựu chiến binh
Chat diét cd
Dioxin Responsive Element
Dioxin Response Chemically Activated Luciferase gene Expression Free Triiodothyroxine
Free Thyroxine
Gas Chromatography Mass Spectometry (Sac ki khi két hợp khói phd)
Huyết áp tâm thu Huyết áp tâm trương Polychlorinated Biphenyls Policlodibenzo-p-dioxin Policlodibenzofuran
Persistent Organic Pollutants (Chất hữu cơ bền vững)
Toxic equivalency factor (hệ số độc) Toxic Equivalents (Đượng lượng độc) Triiodothyronine
Tetraiodothyronine
Thyroxine Binding Globuline
Thyroxine Binding Albumine Thyroxine Binding Prealbumine 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin
Trang 7DANH MUC BANG
Bang | Tén bang Trang
‘Bang 4.1: Số lượng, giới và các nhóm tuổi ở đối tượng nghiên cứu " SEsxEšSS 18 Bảng 4.2: Phân bố nghề nghiệp hiện tại của các đối tượng - ¿-cccccceecrxee 18
Bảng 4.3: Chiều cao, cân nặng theo nhóm tuổi của đối tượng nghiên cứu 19
Bang 4.4: Chỉ số khối theo nhóm tuổi của các đối tượng nghiên cứu 20
Bảng 4.5: Huyết áp động mạch theo nhóm tuổi của các đối tượng nghiên cứu 20
Bảng 4.6: Chỉ số glucose và sắt huyết tương theo nhóm tuổi . -¿- 2s 21 Bảng 4.7: Các chỉ s6 huyét hoc ctia d6i tong ngién COU eeeesesssesesssseessssessessseseeeeeeeseeeees 21 Bang 4.8: Nồng độ dioxin toàn phần theo giới, nhóm tuổi -£ 22
Bảng 4.9: Nồng độ các đồng đẳng PCDD máu của 51 đối tượng nghiên cứu 23
Bảng 4.10: Nồng độ các đồng đẳng PCDF máu của 51 đối tượng nghiÊn cứu 24
Bảng 4.11: Nồng độ TSH, hormon tuyến giáp của đối tượng nghiên cứu 25
Bảng 4.12: Nồng độ hormon tuyến giáp theo phân nhóm nồng độ dioxin 26
Bảng 4.13: Tương quan nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ dioxin 26 Bảng 4.14 Tương quan giữa nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ các đồng
HN PGGDID, -es‹.250422560055000064648128301760G1381050Đ10NSG100IĐE.4S0I33G0030E01G10100 E0 27 Bảng 4.15 Tương quan giữa nồng độ TSH, homon tuyến giáp với nồng độ các đồng
Trang 8aaa DANH MUC HINH Hình - — Tên hình Trang
Hình 3.1: Hình ảnh máy miễn dịch tự động Immulite 2000XPi -< 10
Hình 3.2: Hình ảnh máy đo tín hiệu quang học Centro LB 960, Berthold 10
Hình 3.3: Nguyên lý kỹ thuật DR CAILUXX 22 ©EE+zet+EEZEztrrrrrtrrercee 12 Hình 3.4: Hình ảnh tế bào H4II sau khi cho tiếp xúc với mẫu dioxin 13
Hình 3.5: Nguyên lý phương pháp miễn dịch hóa phát quang .2 + 15
Hình 4.1: Tương quan giữa nồng độ 13 toàn phần VỚI nồng độ dioxin toàn phan (pg BEQ/g mG) O nib ecscssesssssscssscseccsssssessssccssscssscssceeseseccessussesscecsssscsssssessecssscsteseeceaneeeas 27 Hình 4.2 A: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,4,7,8-HexaCDD ở nữ 28
Hình 4.2 B: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,6,7,8-HexaCDD ở nữ 28
Hình 4.2 C: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,7,8,9-HexaCDD ở nữ 29
Hình 4.2 D: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,4,6,7,8-HexaCDD ở nữ 29
Hình 4.2 E: Tương quan nồng độ TSH với độ độc tổng SỐ Ở nỮ +©ces+cccxescrcceee 30 Hình 4.3: Tương quan nồng độ giữa nồng độ FT3 với 1,2,3,7,8,9-HexaCDD ở nữ 30
Hình 4.4 A: Tương quan giữa nồng độ TSH với nồng d6 2,3,4,7,8 PentaCDF ở nữ 31
Trang 9PHAN A
1 Kết quả nỗi bật của đề tài
1.1 Đóng góp mới của đề tài `
| TCDD 1a mét chat rất độc và hậu quả gây ra đối với sức khỏe con người là rất
nghiêm trọng Sự phơi nhiễm dioxin đã được chứng minh là nguyên nhân của nhiều
bệnh lý nguy hiểm như: ung thư tiểu đường gây rối loạn hệ thống miễn dịch hệ sinh
sản, hệ thần kinh và có nguy cơ rất cao sinh con đị tật
Hiện nay, mặc dù nồng độ dioxin trong những vùng bị phơi nhiễm ở Việt Nam đã giảm rất nhiều do mưa, sói mòn và phân hủy hóa học sau hơn 40 năm, nhưng nồng độ của chúng trong đất và trầm tích vẫn cao hơn những vùng không bị phơi nhiễm, Những
vùng nhiễm nặng nhất là những căn cứ không quân của Mỹ trước đây, nơi mà các chất diệt cỏ được vận chuyền, lưu trữ Sau mỗi đợt phun dải, các phương tiện lại được đưa
về sân bay đề tẩy rửa Đặc biệt, do sự cố kỹ thuật làm một lượng lớn CDC tại các bể
chứa ở sân bay Biên Hòa và Sân bay Đà Nẵng trong chiến dịch Ranch Hand (RH) và
chiến dich Pacer Ivy (PJ) rò ri ra môi trường Điều đó gây nên tinh trạng ô nhiễm nặng nề do các chất diệt cỏ có lẫn đioxin tại các căn cứ không quân này Những khu vực này gọi là “các điểm nóng” về ô nhiém dioxin, trong đó 3 điểm quan trọng nhất là các sân
bay Biên Hòa, Phù Cát và Đà Nẵng
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã định lượng nồng độ dioxin mau cua đối tượng bằng phương pháp DR CALUX, đây là nghiên cứu Dịch tễ học đầu tiên đánh giá được mức độ phơi nhiễm chất da cam/dioxin cho từng đối tượng là những người sống ở “điểm
nóng” ô nhiễm từ đó có những đánh giá chính xác hơn về sự ảnh hưởng của đioxin đối
với sức khỏe con người
1.2 Kết quả cụ thể
Bước đầu tìm ra mối tương quan giữa nồng độ dioxin và nồng độ các hormon tuyến giáp:
Nồng độ T3 ở nữ tương quan thuận với nồng độ dioxin toàn phần
Nồng độ TSH ở nữ có tương quan thuận với các đồng đẳng của dioxin: 1 3253,4,7,8-
Trang 101.3 Hiệu qua vé x4 hoi
"Nghiên cứu tác hại của dioxin là chương trình nghiên cứu Quốc gia, để tìm ra các
băng chứng khoa học về tác hại của nó đối với sức khỏe con người, sự tôn lưu trong tự nhiên, nguồn phơi nhiễm trên cơ sở đó, xây dựng những giải pháp tích cực để bảo vệ
sức khỏe nhân dân
2 Đánh giá thực hiện đề tài đối chiếu với đề cương nghiên cứu đã được phê duyệt 2.1.Tiến độ | - Ding tién dd x - _ Rút ngăn thời gian nghiên cứu Tổng số thời gian rút ngắn tháng - _ Kéo đài thời gian nghiên cứu Tổng số tháng kéo dài tháng Lý do phải kéo đài on z can oan À 2.2 Thực hiện các mục tiêu nghiên cứu đề ra - Thực hiện đây đủ các mục tiêu để ra | x - Thực hiện được các mục tiêu đề ra nhưng khơng hồn chỉnh - Chỉ thực hiện được một sô mục tiêu đê ra - Những mục tiêu không thực hiện được (ghi rõ) 2.3 Các sản phẩm tạo ra so với dự kiến trong bản đề cương - Tạo ra đầy đủ các sản phẩm đã dự kiến trong đề cương - Chất lượng sản phẩm đạt yêu cầu như đã ghi trong đề cương - Tạo ra đầy đủ các sản phẩm nhưng chất lượng có sản phẩm chưa đạt - Tạo ra đầy đủ các sản phẩm nhưng tất cả các sản phẩm đều chưa đạt chất lượng - Tạo ra được một số sản phẩm đạt chất lượng - Những sản phẩm chưa thực hiện được (ghi rõ)
2.4 Đánh giá việc sử dụng kinh phí
- Tổng kinh phí thực hiện dé tai: 7-trigu dong
- Trong đó Kinh phí sự nghiệp khoahọc: triệu đồng
- Kinh phí từ nguồn khác: — triệu đồng
- Trang thiết bị đã được đầu tư từ nguồn kinh phí của đề tài `
Stt | Tén trang thiét bi | Kỹ thuậtsử dụng | Sản phâmtạora | Kinh phí
Toàn bộ kinh phí đã được thanh quyêt toán
Trang 11
+ @ x £ x 2 z
2.5 Các ý kiến đề xuất: Chủ yếu tập trung vào đề xuất về quản lý
2.5.1 Đề xuất về tài chính (nếu có)
Cần ghi rõ những ý kiến đề xuất cụ thể như kinh phí cấp phát chậm hoặc yêu cầu
về thanh quyết toán chứng từ
2.5.2 Đề xuất về quản lý khoa học công nghệ (nêu cỏ)
Can ghi rõ những ý kiến đề xuất cụ thể như: quyết định phê duyệt chậm, cơ chế
quan ly céng kénh, nhiều văn ban giây tờ v.v
2.5.3 Đề xuất liên quan đến đề tài (nễu có) |
Trang 12
PHAN B 1 ĐẶT VẤN ĐÈ
Trong chiến tranh Việt Nam từ 1961 đến 1971, quân đội Mỹ đã sử dụng khoảng 72 triệu lít hóa chất diệt cỏ để tàn phá môi sinh, rừng và phá hủy mùa màng ở các tỉnh niền Nam[15], điện tích rải chất độc hóa học xấp xỉ 10 — 12% điện tích của miền nam Việt Nam Đặc biệt là chất diệt cô được sử dụng từ những năm 1965 và 1970 là chất da
cam, một hỗn hợp 50/50 của 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) va 2,4,5- trichlorophenoxyacetic acid (2,4,5-T) Phần 2,4,5-T của hỗn hợp chất da cam bị tạp nhiễm một chất hóa học cực độc gọi là 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD) [S]
Đây là đồng đẳng độc nhất trong số 17 đồng đăng dioxin/furan
TCDD là một chat rất độc và hậu quả gây ra đối với sức khỏe con người là rất nghiêm trọng Sự phơi nhiễm dioxin đã được chứng minh là nguyên nhân của nhiều
bệnh lý nguy hiểm như: ung thư [10], tiểu đường [12], gây rối loạn hệ thống miễn dịch [18], hệ sinh sản, hệ thần kinh và có nguy cơ rất cao sinh con di tat
Hiện nay, mặc dù nồng 46 dioxin trong những vùng bị phơi nhiễm ở Việt Nam đã giảm rất nhiều do mưa, sói mòn và phân hủy hóa học sau hơn 40 năm, nhưng nồng độ
của chúng trong đất và trầm tích vẫn cao hơn những vùng không bị phơi nhiễm [1 1] Những vùng nhiễm nặng nhất là những căn cứ không quân của Mỹ trước đây, nơi mà
các chất diệt cỏ được vận chuyển, lưu trữ Sau mỗi đợt phun dải, các phương tiện lại
được đưa về sân bay dé tay rửa Đặc biệt, do sự cố kỹ thuật làm một lượng lớn CDC tại
các bề chứa ở sân bay Biên Hòa và Sân bay Đà Nẵng trong chiến dịch Ranch Hand (RH)
và chiến dich Pacer Ivy (PJ) rò rỉ ra môi trường Điều đó gây nên tinh trạng ô nhiễm
nang né do các chất diệt cỏ có lẫn đioxin tại các căn cứ không quân này Những khu vực
này gọi là “các điểm nóng” [16], về ô nhiém dioxin, trong đó 3 điểm quan trọng nhất là
các sân bay Biên Hòa, Phù Cát và Đà Nẵng
Sự ô nhiễm các chất chứa dioxin hiện nay đang là vấn đề toàn cầu, ảnh hưởng trực
tiếp đến sự phát triển bền vững quốc gia Do vậy, nghiên cứu cat tác hại của chúng là
Trang 13đioxin đôi với các tuyến nội tiết trong co thể Song nhìn chung, mặc dù tình trang 6
nhiễm dioxin ở Việt Nam hết sức nặng nẻ, nhưng các nghiên cứu về tác hại của dioxin
đôi với sức khỏe những người sống trong khu vực phơi nhiễm còn nhiêu hạn chê, đặc
`
biệt chưa có nghiên cứu Dịch tễ học nào định lượng nồng độ dioxin cho từng đối tượng,
- để đánh giá mức độ phơi nhiễm chất da cam/dioxin cũng như tác động của nó đối với
tuyến giáp
Để góp phần làm sáng to thêm sự tồn lưu dioxin trong máu và ảnh hưởng của nó đối
với tuyến giáp ở những người sống trong khu vực “điểm nóng” ô nhiễm chất da cam/dioxin Chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: “Wghiên cứu nồng độ một số hormon
tuyến giáp trong máu người phơi nhiễm chất da cam/dioxin”
1 Định lượng nông độ dioxin, TSH và hormon tuyén giáp trong máu những người
cư trú tại phường Bửu Long và phường Trung Dũng thành phố Biên Hòa, nơi được coi là
khu vực “điểm nóng” ô nhiễm chất da cam/dioxin
Trang 14EO
2 TONG QUAN TAI LIEU
2.1 Tình hình nghiên cứu trên thế giới về ảnh hưởng dioxin với tuyến giáp
Hormon tuyén giáp có đặc điểm cấu trúc hoá học vòng thơm giống với dioxin,
do đó sự ảnh hưởng của dioxin lên chức năng tuyến giáp hoặc chuyển hoá của hormon
tuyến giáp ở những đối tượng có nguy cơ phơi nhiễm là vấn đề cần được nghiên cứu
Các hợp chất clo hữu cơ được phân phối rộng rãi trên thế giới và có thể tồn tại
trong môi trường và sinh vật sống Chúng là những hop chat tan trong chất béo và những người thường tiếp xúc với chúng thông qua thực phẩm, hít phải hoặc tiếp xúc qua da -
Chúng được phân loại như POP (persistent organic pollutants: chất gây ô nhiễm hữu cơ bền vững) [22], vì chúng tồn tại trong môi trường trong một thời gian dai và đi chuyển lên thông qua chuỗi thức ăn PCDD, PCDF và PCBs là một trong những POPs khuếch
tán nhất trên toàn thế giới Nghiên cứu thực nghiệm cho thấy rằng một số các hóa chất này có hoạt động gián đoạn nội tiết và đặc biệt là chúng có thể làm thay đổi chức năng tuyến giáp [7]
Trên thế giới, cũng đã có một số công trình nghiên cứu về tác động của dioxin lên tuyến giáp ở động vật thực nghiệm, trẻ em, người làm việc trong nhà máy sản xuất hoá chất, cựu chiến binh trong chiến dich Ranch Hand [19] va ngudi sống trong vùng bị phơi
nhiễm đã được công bố, [3], [7]
Koopman - Esseboom và các cộng sự, nghiên cứu ảnh hưởng của dioxin và các
đồng loại PCBs đối với hormon tuyến giáp ở phụ nữ mang thai và trẻ sơ sinh của họ [14] đã chứng minh rằng lượng PCDD, PCDE và PCB có thể thay đổi trạng thái cân bằng nội tiết tố tuyến giáp
Andrea Baccarelli và các cộng sự (2008), nghiên cứu về chức năng tuyến giáp của
trẻ sơ sinh được sinh ra từ các bà mẹ phơi nhiễm với dioxin, do tai nạn ở Seveso, những
trẻ này được theo dõi 25 năm sau Kết quả cho thấy những người được sinh ra từ các bà mẹ phơi nhiễm dioxin do tai nạn xảy ra khoảng 25 năm trước đó, có nồng độ b-TSH cao hơn so với nồng độ b-TSH của trẻ sơ sinh ở phụ nữ không bị phơi nhiễm [9]
Trang 15PI trong chién tranh Viét Nam, cdc nan nhan vy tai nan 6 Seveso (Ý) trên cơ sở các đối tượng này cũng đã được một số công trình nghiên cứu về tác động của dioxin lên tuyến giáp và tuyến tụy đã được công bố, [3], [7] `
Koopman - Esseboom và các cộng sự nghiên cứu ảnh hưởng của dioxin và các
đồng loại PCBs đối voi hormon tuyến giáp ở phụ nữ mang thai và trẻ sơ sinh của họ
[14] đã chứng minh rằng lượng PCDD, PCDE và PCB có thể thay đổi trạng thái cân
bằng nội tiết tố tuyến giáp
Một nghiên cứu của Zober và CS (1994) tiến hành theo dõi các công nhân phơi
nhiễm 2,3,7,8 - TCDD trong tai nan BASEF trong thời gian 3-5 năm cho thấy tỷ lệ mới
mắc bệnh tuyến giáp tăng hơn một cách có ý nghĩa thống kê so với nhóm chứng
Đảnh giá theo dõi từ tai nạn Seveso, người ta thay tỷ lệ tử vong do đái tháo đường
ở phụ nữ vùng bị ô nhiễm 2,3,7,8 - TCDD tăng một cách có ý nghĩa thống kê (Pasatori
và CS 1998)
2.2 Tình hình nghiên cứu trong nước về ảnh hưởng dioxin với tuyến giáp
Trong chiến tranh Việt Nam, quân đội Mỹ đã rải một lượng lớn các chất diệt cỏ có
chứa dioxin xuống nhiều vùng ở miền Nam Việt Nam Cho đến nay, hậu quả của cuộc
chiến tranh vẫn còn ảnh hưởng nặng nề tới môi trường và sức khỏe con người Việt Nam Ngay từ những năm 70 của thế kỷ vừa qua, khi chiến tranh Việt Nam còn chưa kết thúc, từ thực tiễn chiến trường miền Nam, các nhà y học Việt Nam là Tơn Thất Tùng và Hồng Đình Cầu đã quan tâm nghiên cứu tác hai cua dioxin đối với sức khoẻ con người
Wayne Dwenychuuk, Hoàng Đình Cầu và các cộng sự (2002), sự tồn lưu dioxin
trong ao hỗ, đất, trầm tích ở Miền nam Việt Nam còn rất lớn, do đó nó có thể phơi nhiễm sang các chuỗi thức ăn như cá, rau, gia cẦm, gia sức từ đó, nó sẽ là nguồn ô :
nhiễm rất lớn với con người [21]
Trong một nghiên cứu cắt ngang mô tả nhằm đánh giá ảnh hưởng của chất da
Trang 163 DOI TUQNG VA PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thiết kế nghiên cứu
- Nghiên cứu mô tả cắt ngang, thu thập số liệu 7 3.2 Đối tượng nghiên cứu
Đề tài này là nhánh của đề tài cấp Nhà nước “Nghiên cứu biến đổi nòng độ một số hormon ở người phơi nhiễm chất da cam/dioxin ”mã: KHCN-33.11/11-15 Do đó, các đối
tượng nghiên cứu được lựa chọn theo tiêu chí của dé tai
Đối tượng nghiên cứu gồm 207 người tuổi từ 18 - 70 tuổi, cư trú tại phường Bửu Long và phường Trung Dũng thành phố Biên Hòa hơn 5 năm, nơi được coi là khu vực
“điểm nóng” ô nhiễm chất da cam/dioxin
Cỡ mẫu: Áp dụng công thức tính cỡ mẫu cho nghiên cứu điều tra dịch tễ khảo sát
tiền sử phơi nhiễm với chất da cam/dioxin: p(1-p) a n= 2-02) - Trong đó: n: cỡ mẫu cần biết
Z‹q-⁄2): (hệ số tin cậy với xác suất 95%) = 1,96
p: tỷ lệ nhiễm 16% (p = 16 %) Dựa trên số liệu nghiên cứu của Lê Kế Sơn
d: (mức độ chính xác kỳ vọng) = 0,05; Nên cỡ mẫu tính được xấp xi 1a 207 * Tiêu chuẩn chọn nhóm nghiên cứu:
Những người được xếp vào nhóm phơi nhiễm khi có tiền sử phơi nhiễm mạn tính với dioxin: phơi nhiễm qua đường tiêu hóa, hô hấp, tiếp xúc
+ Độ tuổi 18-70 tuổi
+ Có tiền sử bị phơi nhiễm rõ ràng (trực tiếp hay gián tiếp)
+ Đang sống tại các điểm nóng (thời gian sống > 5 năm)
+ Điều tra phả hệ, xác định các bệnh liên quan đến dioxin của đối tượng nghiên
cứu Đối tượng phơi nhiễm hoặc thành viên gia đình bị một trong các bệnh đặc trưng do
`
dioxin hoặc bị dị tật bam sinh
* Tiêu chuẩn loại trừ:
Trang 1710
+ Những người tạm trú trong khu vực không phải người địa phương, có chỗ ở
không ổn định hoặc không thường xuyên ở nơi cư trú + Đối tượng ngoài độ tuổi nghiên cứu
+ Đối tượng là phụ nữ có thai hoặc cho con bú
+ Đang dùng các thuốc chống ung thư, corticoid 3.3 Phương pháp chọn mẫu
- Các đối tượng nghiên cứu được sàng lọc theo bộ công cụ phỏng van, đề đánh
giá các nguy cơ phơi nhiễm chất da cam/dioxin (phụ lục) 3.4 Phương pháp thu thập số liệu
Nơi thu thập mẫu: phường Bửu Long và phường Trung Dũng thành phố Biên Hòa
- tỉnh Đồng Nai (Dé tai này chúng tôi kế thừa từ đề tài cấp Nhà nước, nên chúng tôi có sử dụng một số thông tin đã được thu thập)
- Các đối tượng được khám lâm sàng - Phong van
- Lay mau dé xét nghiém
3.5 Phương pháp phân tích, xử lý số liệu
3.5.1 Trang thiết bị, vật liệu nghiên cứu
+ Máy miễn dịch tự động Immulite 2000Xpi của hãng Siemens (Đức) + Máy đo tín hiệu quang sau tiếp xúc tế bào Centro XS? LB 960 hãng Berthold
`
Trang 1811
+ Bộ hóa chất sử dung làm tinh sạch dioxin trong huyết thanh: sử dụng bộ hóa chất cua hang Sigma
+ Tế bào gan chuột hãng BDF
+ Hóa chất xét ngiệm — dung dịch kiểm tra (QC) các hormon: - Bộ kít hóa chất của Siemens (Đức)
- QC của Randox
3.5.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu
+ Địa điểm tiến hành xét nghiệm các chỉ tiêu nghiên cứu:
- Định lượng các chỉ tiêu hormon tuyến giáp và tuyến tụy tại Phòng xét nghiệm
Hóa sinh - Đại học Điều đưỡng Nam Định
- Xét nghiệm định lượng dioxin bằng phương pháp DR CALUX tại Trung tâm NC ứng dụng Sỉnh - Y - Dược quân sự - Học viện Quân y
- Xét nghiệm định lượng các đồng đẳng dioxin bằng phương pháp GCMS tại
phòng xét nghiệm của Đại học Y khoa Kanazawa - Nhật Bản
+Thời gian nghiên cứu: Từ 03/2015 đến 10/2015
+ Cách lấy, xử lý và bảo quản mẫu bệnh phẩm xét nghiệm:
- Lấy 20ml máu tĩnh mạch lúc đói vào buổi sáng sớm, tuyp có chống đông làm
xét nghiệm huyết học, còn lại li tâm và tách thành nhiều tuýp để bảo quản
- Vận chuyền: do địa điểm nghiên cứu xa trung tâm xét nghiệm nên phải bảo quản trong tủ đá, khi vận chuyển bảo quản trong thùng xốp chứa gel đá khô bọc kín, vận chuyển
về Trung tâm Nghiên cứu và ứng dụng Sinh— Y — Dược quân sự, Học viện Quan y - Bảo quản: khi về Trung tâm Nghiên cứu Sinh - Y — Dược học Quân sự, Học
viện Quân y, bảo quản trong tủ chuyên dung (- 80°C) 3.5.3 Xác định chỉ số nhân trắc và khám lâm sàng
+ Các đối tượng đều được đo chiều cao, cân nặng
+ Ðo huyết áp động mạch
+ Phỏng vấn các yêu tố liên quan
Trang 1912
3.5.4 Phương pháp xác định các chỉ tiêu nghiên cứu * Các chỉ tiêu xét nghiệm:
+ Chỉ tiêu đioxin
- 207 mẫu được định lượng dioxin bằng phương pháp DR CALUX
-51 mẫu được định lượng các đồng đăng dioxin theo phương pháp GCMS + Các chỉ tiêu tuyến giáp: 207 mẫu được định lượng nồng độ các hormon:
- TSH (Thyroid-stimulating hormon)
- T3 (Triiodothyronin) va FT3 (Free Triiodothyronin) - T4 (Tetraiodothyronin) va FT4 (Free Tetraiodothyronin) * Định lượng dioxin:
+ Định lượng dioxin bằng phương pháp DR CALUX: Là một kỹ thuật dùng tế bào cảm biến sinh học để định lượng dioxin và PCB trong mẫu vật phẩm
- Nguyên lý: Do các chất dioxin, PCB va cac chat giống đioxin có khả năng gắn đặc hiệu vào Aryl Hydrocacbon Receptor (AhR) trên bề mặt tế bào, nên các nhà nghiên cứu đã phát triển dòng tế bào đặc trưng (H4II) để phát hiện đioxin và PCB PCDHxS, 7 t2 0t PCBs, Diouns, ? Getoave eT Peptid mat Ko
Cyt P450 LAL Luciferase
DRE: Dioxin Responsive Element (Phan ta nhạy cảm với dioxin)
ANRT: ADR Nuclear translocator protein (protein vin chuyén dioxin yao nbin té bao)
ADR complex: Ary! hydrocacbon Recepetor Complex (thụ cảm thd)
"322 +: Dioxin va cic chat cé cu tgo gidng dioxin
Hinh 3.3: Nguyén ly ky thuat DR CALUX
Khi dioxin và PCB tiếp xúc với tế bào này, thụ cảm thể AhR trên bề mặt tế bào sẽ
gắn với chúng Phức hợp di chuyện vào trong nhân, gắn đặc hiệu với protein ARNT Phức hợp mới AhR-ARNT tiếp tục gắn đặc hiệu với vùng Dioxin Responsive
Element (DRE) nằm trên chuỗi DNA Đây là vùng nằm ở phía trên, tại vùng khởi động
Trang 2013
Enzym luciferase sé chuyén héa co chat luciferin Phan ung chuyén hóa cơ chât này
phát ra ánh sáng Cường độ ánh sáng sẽ tương ứng với lượng dioxin và PCB tiếp xúc với
tê bào cảm biên
Hình 3.4: Hình ảnh tế bào H4II sau khi cho tiếp xúc với mẫu dioxin
Giá trị cường độ ánh sáng được đo và dùng để tính toán nồng độ dioxin và PCB có trong mẫu, dựa trên đường chuẩn xây dựng từ việc cho tế bào tiếp xúc với TCDD ở các
nồng độ đã biết trước khác nhau - _ Các bước tiến hành:
Xác định nồng độ dioxin toàn phần theo phương pháp DR - CALUX:
v4 Tách chiết dioxin từ mẫu máu v Làm sạch dịch chiết qua cột silica
Chuyển dịch chiết đã làm sạch vào DMSO Nuôi cấy tế bào H4IIE
⁄⁄ Đánh thức tế bào từ trạng thái bảo quản trong nitơ lỏng
v⁄ Cây chuyển tế bào
v Giữ giống tế bào
v⁄ Phân tích hàm lượng dioxin
v⁄ Cho tế bào tiếp xúc với TCDD chuẩn và mẫu cần đo
Chuẩn bị môi trường chứa chất độc được thực hiện theo các bước sau: #4 Ðo nồng độ TCDD trong mẫu
v⁄ Phân tích kết quả nghiên cứu
Sử dụng chương trình tính toán trên Excel file DR CALUX7 - 4.xIs do BDS cung cấp xây dựng đường cong nồng độ chuẩn và tính toán hàm lượng dioxin và các chất
Trang 21
14
+ Định lượng nồng độ các đồng đẳng của dioxin bằng phương pháp GCMS: (Gas Chromatography Mass Spectometry)
- Nguyên lý: GCMS (Gas Chromatography Mass Spectometry - sắc kí khí kết
hợp khối phổ): Mẫu được đưa vào trong máy, dẫn đến buồng phân tích, thường là buồng
ion hóa, nhiệt độ ở cửa tiêm mẫu được nâng lên 300°C để mẫu trở thành dạng khí, 17 đồng phân PCDDs/PCDEs trong mẫu sẽ được phân tách với tốc độ khác nhau, tùy thuộc tính chất bay hơi của chất
Trong buồng ion hoá các điện tử phát ra từ cathode, bay về anode với vận tốc lớn,
các phân tử chất nghiên cứu ở trạng thái hơi sẽ va chạm với điện tử trong buồng ion hoá, có thể nhận năng lượng điện tử và bị ion hoá, khối phổ có thể nhận dạng cấu trúc hóa
học độc nhất của nó, cấu trúc của chất nảy sau đó được so sánh với một thư viện cấu
trúc của các chất đã biết
Các chất đã được phân tích sẽ được chuyển đến đầu dò và sau đó thông tin sẽ được chuyển đến máy tính
Định lượng một chất bằng cách so sánh với mẫu chuẩn, là chất biết trước và đã được định lượng chuẩn bằng GC —- MS Mức phát hiện của phương pháp: 0,01 ppt
- Kỹ thuật định lượng:
Y Tach m6: Qua một loạt các bước sử dụng dung môi hữu co nhu: ethanol, hexan, petroleum, ether, diethyl ether, và các hóa chất như ammonium sulfate, NaCl,
Na2SOa, m6 sé duc tach ra va duoc can do
Y Tinh sach mau: Sau khi xà phòng hóa bằng đung dịch KOH, mỗi mẫu sé di
qua một cột
Tinh sạch được thiết kế bao gồm nhiều lớp silicagel
Dung dịch thu được gồm dioxin và PCB đã được tỉnh sạch, dé phân tách 2 thành phan dioxin va PCB mau được đưa qua cột than hoạt tính và dùng các dung môi khác
nhau để phân tách 2 thành phần trên |
Y Dinh luong dioxin bằng hệ thống GCMS
Trang 2215
Sau khi đã định lượng được nồng độ của các đồng đẳng dioxin và PCB trong
mẫu, độc tính qui đổi của mẫu được tính theo công thức:
TEQ = )`TEF¡ * C¡
Trong do:
TEQ: (Toxic Equivalents): tổng độ độc
TEF: :(Toxic Equivalency factor): hệ số độc qui đôi của đồng đẳng ¡ C¡ là nồng độ của dong dang i
+ Dinh lugng nong dé cdc hormon tuyến giáp trong huyết lương:
- Nguyên lý phương pháp miễn dịch hóa phát quang Khang thé gan enzym danh dau Lưới thủy tỉnh
Hình 3.5: Nguyên lý phương pháp miễn dịch hóa phát quang
- Triiodothyronin (T3): định lượng theo phương pháp miễn dịch hóa phát quang:
kháng thể đơn dòng chuột kháng T3 người và enzym alkalin phosphafase được liên hợp
kháng thể đơn dòng chuột kháng T3 người trong dung dịch đệm
Mẫu sẽ được ủ với thuốc thử cùng với hat bead trong 30 phút Trong thời gian này T3 có trong mẫu sẽ tạo phức theo kiểu kẹp sandwich với kháng thê đơn dòng chuột trên
pha rắn và kháng thể được gắn enzym là kháng thê đơn dòng chuột trên pha lỏng Những
phần còn lại không liên quan phản ứng sẽ được loại bỏ bằng cách ly tâm và rửa Cuối
cùng, các tín hiệu phát quang của enzym alkalin phosphatase sẽ được phát hiện sau khi cho cơ chất
- Free Ttifetfigtfiyrorfa (FT3): được định lượng theo phương pháp miễn dịch hóa phát quang: sử dụng kháng thể đơn dòng chuột kháng T3 người và enzym alkalin -
Trang 23
16
Mẫu sẽ được ủ với thuốc thử cùng với hạt bead trong 30 phút Trong thời gian này
FT3 có trong mẫu sẽ cạnh tranh với T3 (do một số tương tác với kháng thể kháng T3 trên bead), để liên hợp với enzym alkalin phosphatase của thuốc thử Tất cả những chất còn
lại không liên quan phản ứng sẽ được loại bỏ bằng cách ly tâm và rửa Cuối cùng, các tín
hiệu phát quang của enzym alkalin phosphatase sẽ được phát hiện sau khi cho cơ chất - Thyroxin (T4): tương tự T3, sử dụng kháng thể đơn dòng chuột kháng T4 - Free thyroxin T4): tương tự FT3, sử dụng kháng thể đơn dòng chuột kháng T4
- Thyroid stimulating hormon (TSH): tuong ty T3, sir dung khang thé don dong
chuột khang TSH |
- Qui trình xét nghiệm hormon trén may Immulite 2000 XP của hãng Siemens:
Bật máy, khởi động phần mềm Immulite 2000XP
Cài đặt hóa chất vào máy và quét mã vạch trên hộp cho máy cập nhật các thông sé
Chay chuong trinh calibrator
Chay chuong trinh QC đề kiểm tra
Chạy mẫu thường qui theo mã bệnh nhân từ BH001 đến BH207 Kết quả sẽ in trực tiếp trên giấy A4
3.5.5 Phương pháp xử lý số liệu
Được xử lý bằng phần mềm thống kê y học SPSS 20.0: các số liệu sẽ được nhập
vào excel 2013, sau đó sẽ được liên kết và mở trong chương trình SPSS 20.0
+ Trong SPSS 20.0 số liệu sẽ được tạo biến cho phù hợp, tính giá trị trung bình ( X), giá trị lớn nhất (Max)), giá trị nhỏ nhất (Min), độ lệch chuẩn (SD)
+ So sánh 2 giá trị trung bình của các nhóm đối tượng bằng thuật toán J4¿penden/- Samples T test
+ Phân tích mối tương quan giữa nồng độ các hormon với nồng độ dioxin trong máu
đối tượng bằng thuật toán thống kê hai chiéu (2-tailed)- Spearman's rho 3.6 Y Đức
+ Nghiên cứu này được thực hiện với mục đích khoa học, hoàn toàn không có mục
đích gì khác, đã được hội đồng đạo đức y khoa của Học viện Quân Y thông qua
+ Các qui trình kỹ thuật, phương pháp nghiên cứu được tiến hành đúng quy định
nhằm đảm bảo kết quả chính xác và trung thực
Trang 2417
+ Tránh tối đa các tai biến có thé xảy ra, nếu có tai biến xảy ra đối tượng được điêu trị tích cực và miễn phí hoàn toàn
+ Các số liệu cá nhân được bảo mật tuyệt đối 3.7 Mô hình nghiên cứu
LỰA CHỌN ĐÓI TƯỢNG NGHIEN CUU (N=207) y /\i KHAM SỨC KHỎE N XÉT NGHIỆM MÁU { THU THAP THONG TIN t
Trang 25eas At a I RN TES aE Re a ee ne 4 KET QUA NGHIEN CUU 18
Qua diéu tra phong van va kiém tra sức khỏe của các đôi tượng nghiên cứu ở phường ' Bửu Long và phường Trung Dũng thành phố Biên Hòa Kết quả được trình bày như sau:
x eK on ,
4.1 Đặc điểm mẫu nghiên cứu
y ok Re are 2 r Ke ea se
4.1.1 Đặc điểm về tuổi đời của các đối tượng nghiên cứu
Bảng 4.1: Số lượng, giới và các nhóm tudi ở đối tượng nghiên cứu Chỉ số Chung (n=207) | Nam(n=46) | Nữ(n=161) | X#SD - Số lượng vee lượng on lượng ve Min - Max Nhóm tuổi ° ° ° 18-30 34 16,43 | 9 | 19,57} 25 | 15,53 31-45 95 45,89 | 20 | 43,48] 75 | 46,58 = * eo 6 >46 78 37,68 | 17 |36,% | 61 | 37,89 _ Chung, 207 100 | 46 | 100 | 161 | 100
Nhận xét: Từ số liệu thống kê trong bảng 4.1 cho thấy Tuổi trung bình: 41,25 + 9,36 (tudi)
Tuổi thấp nhất là 18 tuổi, cao nhất là 66 tuổi
4.1.2 Nghề nghiệp của các đối trợng nghiên cứu
Trang 26mm
19
Nhận xét: Từ kết quả ở bảng 4.2 cho thấy:
Nghề nghiệp của các đối tượng trong nghiên cứu của chúng tôi rất đa dạng, trong đó ở nam giới, các nghành nghề phổ biến là lao động phổ thông với 29,60 %, công nhân
22%, viên chức 16,5 % Các đối tượng đã nghỉ hưu chỉ chiếm 1,1%
Ở nữ, công việc phổ biến là nội trợ cao nhất chiếm 28;5%, buôn bán 22,9%, công
nhân 19,7%, thấp nhất là nghỉ hưu chiếm 1,3%
4.1.3 Các đặc điểm nhân trắc học của đối tượng nghiên cứu
+ Đặc điểm chiều cao, cân nặng theo nhóm tuôi của đối tượng nghiên cứu: 2 oA A y z Re 9 Ke eA a Bang 4.3: Chiêu cao, cân nặng theo nhóm tuôi của đôi tượng nghiên cứu Chỉ tiêu Nhóm tuổi n | Min | Max X+SD 18-30 34 | 130 | 185 157,97+9,17 Chiều cao 31-45 95 | 130 | 172 155,34 + 7,23 (cm) > 46 73 | 143 | 175 155,73 + 6,80 Chung 207 | 130 | 185 155,92 + 7,45 18-30 34 | 38 | 87 54,15+ 11,21 Gan nine 31-45 | 95 | 36 | 80 53,30 + 7,97 (kg) > 46 78 | 40 | 83 53,21 + 7,57 Chung 207 | 36 | 87 53,40 + 8,40 Nhận xét:
Từ số liệu trong bảng 4.3 cho thấy
Chiều cao trung bình của đối tượng nghiên cứu là 155,92 + 7,45 cm Trong số đối tượng
này, người có chiều cao thấp nhất 130 cm, cao nhất là 185 cm
Cân nặng trung bình đối tượng nghiên cứu là 53,40 + 8,40 kg, cân nặng thấp nhất
Trang 2720 + Chỉ số khối (BMI):
Bảng 4.4: Chỉ số khối theo nhóm tuỗi của các đối tượng nghiên cứu Chỉ tiêu Nhóm tuổi n Min Max X+SD 18-30 34 | 16,89 | 36,09 21,65 + 3,95 31-45 — 95 14,50 | 31,25 22,11 + 3,13 BMI > 46 78 | 15,05 | 34,55 22,02 + 3,36 Céng 207 | 14,50 | 36,09 22,00 + 3,35
Nhận xét: Từ số liệu trong bảng 4.4 cho thấy:
Trang 2821 4.2 Một số chỉ số hóa sinh và huyết học
4.2.1 Các chỉ số hóa sinh huyết tương
Bảng 4.6: Chỉ số glucose và sắt huyết tương theo nhóm tuổi Nam (n = 46) Nữ (n= 161) Chung X+SD X +SD _ Xxzs$D Chỉ số 356+1,09 | 3,78+0,99 3,73 + 1,01 nghiên cứu | Glucose p>0,05 18,074 5,00 | 19,3445,56 19,06 + 5,46 Sat p> 0,05
Nhận xét: Từ các số liệu trong bang 4.6 cho thấy:
Trang 29
22
4.3 Nong d6 dioxin trong máu của đối tượng nghiên cứu 4.3.1 Nồng độ đioxin toàn phần (phương pháp DR CALUX)
Bảng 4.8: Nồng độ dioxin toàn phần theo giới, nhóm tuổi T 150 1.50 T 2.00 T Néng 49 dioxin trong mau (BEQ)
Nhận xét: từ số liệu trong bảng 4.8 cho thấy:
Nồng độ dioxin toàn phần của các đối tượng nghiên cứu: 64,47 + 29,66 (pg
BEQ/g mG)
Biéu dé 4.1: Biéu dé phan bé néng d6 dioxin toan phan
Chisố | Nhóm Nam Nữ Chung
nghiên cứu | tuổi | n |Xx+sbD| n |Xxzsp| P n | X+SD 67,10 67,34 67,24 18-30] 9 + 25 + >0,05| 43 che 31,31 34,71 33,26 ; 81,4 58,42 64,23 Nồngđộ | 31-45 | 20 + 75 + <0,05| 95 + dioxin mau 44,52 18,74 28,94 (pg BEQ/g 72,9 61,72 63,92 mỡ) >46 | 17 + 61 + >0,05| 78 + 26,30 29,61 29,26 74,27 61,67 64,47 Chung | 46 + 161 + < 0,05 | 207 + 32,79 28,20 29,66 oo * ¬
Nồng độ dioxin tồn phần của nam là: 74,27 + 32,79 (pg BEQ/g mỡ)
Nồng độ dioxin toàn phan của nữ là: 61,67 + 28,20 (pg BEQ/g mỡi
Trang 3023
Nồng độ dioxin & nam và nữ khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05)
Theo nhóm tuổi, nồng độ dioxin ở nhóm 31 — 45 tuổi giữa nam và nữ khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05)
Biểu đồ 4.1 cho thấy, sự phân bố nồng độ dioxin theo qui luật chuẩn
4.3.2 Nồng độ các đồng đẳng dioxin (phương pháp GCMS)
+ Nông độ các đồng đẳng PCDD máu theo giới của 51 đối tượng được định lượng
bằng phương pháp GCM6S: trình bày trong bảng 4.9
Bảng 4.9: Nồng độ các đồng đẳng PCDD máu của 51 đối tượng nghiên cứu Đồng đẳng (pggmỡ) | Nam (n=19) | Nữ(n=32) | Chung (n = 51) Đồng đẳng PCDD X+SD X+SD X+SD p 2,3,7,8-TetraCDD 7,2144,22 | 6,12+2,06 | 6,50+2,82 1,2,3,7,8-PentaCDD 635+2/19 | 6372181 | 637+1,94 1,2,3,4,7,8-HexaCDD 4,6841,65 | 4,90+1,83 | 4,8241,76 |>0,05 1,2,3,6,7,8-HexaCDD 12,17+1,98 | 12,4341,86 | 12,34+ 1,89 1,2,3,7,8,9-HexaCDD 6,03+1,92 | 6,71+1,92 | 6,45+1,91 1,2,3,4,6,7,8-HeptaCDD | 22,4841,75 | 38,17#1,55 | 31,34+1,73 | <0,05 OctaCDD 631,22 + 18,20| 652,02 + 16,41| 644,19 + 17,04 Tổng độ độc TEQ 26.33+2.73 | 24.16+1.58 | 24.95+2.02 li Nhận xét:
Thống kê trong bảng 4.9 cho biết
Giá trị trung bình các đồng dang dioxin PCDD, trong đó đồng đăng có hệ số độc cao nhất là 2,3,7,8 TCDD có nồng độ 6,50 + 2,82 (pg/g mỡ)
Đồng đẳng có nồng độ cao nhất là OctaCDD: 644,19 + 17,04 (pg/g mỡ)
So sánh nồng độ các đồng đẳng dioxin nhóm PCDD ở HEH và nữ thấy có đồng
đẳng 1,2,3,4,6,7,8-HeptaCDD khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
Trang 31MiliMN1Ô
24
+ Nồng độ các đồng đẳng PCDF của 51 đối tượng tượng xác định bằng phương pháp GCM6S: được trình bày trong bảng 4.10
Bảng 4.10: Nồng độ các đồng đẳng PCDEF máu của 51 đối tượng nghiên cứu Đồng đẳng (pg/g mỡ) | Chung (n = 51) | Nam (n =19) | Nữ (n =32) Đồng đẳng PCDF X+SD X+SD X+SD p 2,3,7,8-TetraCDE 8,86+1/83 | 8,15+1,85 | 9,31+1,82 1,2,3,7,8-PentaCDF 2,23 1,98 | 1,91+1,71 | 2,4442,12 2,3,4,7,8-PentaCDF 8,854 1,67 | 911 +183 | 8,71 #159 | " 1,2,3,4,7,8-HexaCDF | 13,99+1,61 | 14,06 + 1,64 | 13,95 + 1,61 1,2,3,6,7,8-HexaCDF | 9,20+1,70 | 9,04+1,66 | 9,29 + 1,74 1,2,3,7,8,9-HexaCDF | 2,7141,82 | 2,33+1,78 | 2,97 + 1,82 2,3,4,6,7,8-HexaCDF | 2,8741,97 | 2,22+41,84 | 3,35+1,97 |<0,05 1,2,3,4,6,7,8-HeptaCDF | 13,28 + 1,59 | 11,824 1,49 | 14,24 + 1,63 1,2,3,4,7,8,9-HeptaCDF | 3,1742,03 | 2,57+1,91 | 3,59+2,06 |>0,05 OctaCDE 8,02+2,10 | 6,45+1,84 | 9,13+2,21 Nhận xét:
Thống kê trong bảng 4.10 cho biết:
Giá trị trung bình các đồng đẳng dioxin nhóm PCDF, trong đó đồng đẳng có hệ số độc cao nhất là 2,3,7,8-TetraCDF có nồng độ 8,86 + 1,83 (pg/g mỡ)
So sánh nồng độ các đồng đẳng dioxin thuộc nhóm PCDF ở nam và nữ thấy có
đồng đẳng 2,3,4,6,7,8-HexaCDF khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05 Các đồng
đẳng khác không có sự khác biệt với p > 0,05
Trang 3225
4.4 Nồng độ và mối tương quan nồng độ giữa TSH, các hormon tuyến giáp với dioxin trong máu đối tượng nghiên cứu
4.4.1 Nồng độ TSH và các hormon tuyến giáp của đối tượng nghiên cứu
Bảng 4.11: Nồng độ TSH, hormon tuyến giáp của đối tượng nghiên cứu ` Nam Nữ Chung Nông độ Hormon (n=46) — (n =161) — (n = 207) — XK +SD X+SD X+SD p TSH (wU/m) | 1,41+0,79 1,75 + 1,14 1,72 + 1,06 T3 (ng/dl) 94,24 + 35,46 | 93,09424,72 | 94,24 + 28,58 T4 (ug/dl) 7,17 + 1,98 7,16 + 1,71 7,114£1,94 |>0,05 FT3 (pg/ml) 3,45 + 2,40 3,30 + 0,88 3,30 + 1,37 FT4 (ng/dl) 1,08+0,46 | ‘1,10+0,27 1,10 + 0,41 Nhận xét:
Thống kê trong bảng 4.11 cho thấy:
- Nồng độ các hormon tuyến giáp với: TSH là 1,72 + 1,06 uIU/ml
-T3 toàn phần là: 94,24 + 28,58 ng/dl - T4 toàn phân là: 7,11 + 1,94 wg/dl
- FT3: 3,30 + 1,37 pg/ml - FT4: 1,10 + 0,41 ng/dl
So sánh nồng độ các hormon tuyến giáp ở nam và nữ thấy khác nhau không có ý
Trang 3326
4.4.2 Nong độ TSH và hormon tuyến giáp theo phân nhóm nồng độ đioxin
Nồng độ TSH và các hormon tuyến giáp theo phân nhóm dioxin có nồng độ cao
và thấp, được trình bày trong bảng 4.12
Bảng 4.12: Nồng độ hormon tuyến giáp theo phân nhóm nồng độ dioxin Thấp (< 59 pg BEQ/g mỡ) | Cao (> 59 pg BEQ/g mỡ) a (a= 101) (n= 106) - Min | Max | X+SD | Min | Max| X+SD p TSH (uIU/ml) | 0,12 | 5,77 | 1,684 1,00 | 0,01 | 8,24 | 1,75+1,12 |>0,05 T3 (ng/dl) | 20,00 | 203,00] 91,58+28,95 | 20,00 | 162,00} 96,98+28,08 |<0,05 T4 (ug/ml) | 0,50 | 11,70 | 6,97+1,69 | 0,50 | 16,40 | 7,25 + 2,17 FT3 (pg/ml) | 0,50 | 6,13 | 3,23+1,11 | 0,50 | 16,50 | 3,374 1,60 |>0,05 FT4 (ng/dl) | 0,15 | 2,00 | 1,10+0,40 | 0,15 | 2,00 | 1,09+ 0,42
Nhận xét: Số liệu trong bảng 4.12 cho thấy
So sánh nồng độ các hormon T3 theo phân nhóm dioxin thấy khác biệt có ý nghĩa
thống kê với (p < 0,05)
Nồng độ TSH, FT3, T4, FT4 không khác biệt ở nhóm cao và thấp với p > 0,05 4.4.3 Tương quan nồng độ giữa TSH, hormon tuyến giáp với dioxin
+ Mối tương quan nồng độ giữa TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ dioxin toàn phần theo giới được trình bày trong bảng 4.13
Trang 3427
Nhận xét: Từ số liệu trong bảng 4.13 cho thấy:
Nông độ hormon T3 ở nữ có mối tương quan thuận với nồng độ dioxin với r = 0,21p<0,05 Mối tương ¡_ Nồng độ T3 toàn phần (ng/dL) Hình 4.1: Tương quan quan này cũng thể hiện rõ trên hình 4.1 _ y=0.1785x+81.278 Nữ r=0,21 p<0,05 300 200 9 oO ° 9o o2 ° 20) 100 : Si eo 9 oo ° 0 —————— —— _ — = — - 0 50 100 150 200
Nồng độ dioxin huyết tương (pø BEQ/ g mỡ)
giữa nồng độ T3 toàn phần với nồng độ dioxin toàn phần (pg BEQ/g m6) ở nữ
4.4.4 Tương quan giữa nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ các đồng
đẳng đioxin ở 51 đối tượng nghiên cứu
Trang 3528 Từ số liệu trong bảng 4.14 cho thấy
+ Néng độ của hormon TSH có tương quan thuận với các đồng đẳng sau:
- 1,2,3,4,7,8-HexaCDD ( = 0,43 p < 0,05) Mối tương quan này được thể hiện rõ ở hình 4.2 A: | ¬ (A) y = 1.0264x + 0.7459 2 r=0,43 p<0,05 = B :°I = ị af | J ‹© H fo) 8 | of oe BB — ẽ ị ö @ ơo E2 0 ———O-_— ÐÖ _——-———_—————_~— 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 1,2,3,4,7,8-HexaCDD (pg/g mỡ) - (log)
Trang 3628
Từ số liệu trong bảng 4.14 cho thấy
+ Nồng độ của hormon TSH có tương quan thuận với các đồng đẳng sau:
- 1,2,3,4,7,8-HexaCDD (r = 0,43 p < 0,05) Mỗi tương quan này được thể hiện rõ ở hình 4.2 A: BÀ 3 (A) y = 1.0264x + 0.7459 r=0,43 p<0,05 ễ : 5 6 = ie 4 ° K ‹œ i Q 8 | gS Oot aaa a —= - ớo = 0 —— °S^ Qs mo co TK an 2 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 1,2,3,4,7,8-HexaCDD (pg/g m6) - (log)
Hình 4.2 A: Tương quan nồng độ TSH với nồng độ 1,2,3,4,7,8-HexaCDD ở nữ
Trang 37nee —aEEEOEOEe—e se ee ca BNnesep 29 - 1,2,3,7,8,9-HexaCDD (r =0,42 p < 0,05) Mỗi tương quan này được thé hiện rõ ở hình 4.2 C: (C) y = 0.9711x + 0.6476 r=0,42 p < 0,05 ao £ lai ~ = 4 ° mm = ‹ Q š Ọ s oo” : ° su 2 a So - Q Zz 0 TP G2220) SG ôn Poe 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 _1,2,3,7,8,9-HexaCDD (pg/g mỡ) - (og)
Trang 3931
* Tương quan giữa nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nông độ các đồng đăng PCDE của 51 đối tượng: được trình bày trong bảng 4.15
Bảng 4.15 Tương quan giữa nồng độ TSH, hormon tuyến giáp với nồng độ các đồng đẳng PCDF ; Nam (n= 19) Ni (n= 32) ì ` 9 ì Đẳng đẳng PCDF |TSH| T3 | T4 |FT3| T4 |TSH| T3 | T4 |FI3|FI+ r T T T T T T T T T 2,3,7,8-TetraCDF |-0,10|-0,01 | 0,00 |-0,05| 0,07 |-0,01 |-0,39|-0,12) 0,17 |-0,02 1,2,3,7,8-PentaCDF | 0,07 | 0,17 | 0,20 | 0,07 | 0,34 | 0,18 |-0,26|-0,08) 0,19 | -0,08 2,3,4,7,8-PentaCDF |-0,16| 0,00 |-0,16|-0,23 | 0,06 |0,48"| 0,01 |-0,21 | 0,14 | 0,18 1,2,3,4,7,8-HexaCDF |-0,01 |-0,10|-0,16|-0,10|-0,10} 0,24 | 0,06 |-0,21 | 0,16 |-0,07 1,2,3,6,7,8-HexaCDF |-0,09 |-0,10 |-0,21 |-0,19 |-0,09 | 0,23 |-0;04|-0,23 | 0,22 |-0;01 1,2,3,7,8,9-HexaCDF |-0,33| 0,19 | 0,16 | 0,12 | 0,06 | 0,22 |-0,25|-0,26| 0,20 | 0,00 2,3,4,6,7,8-HexaCDF |-0,04| 0,21 | 0,29 | 0,17 | 0,20 | 0,18 |-0,23|-0,08| 0,10 |-0,08 1,2,3,4,6,7,8-HeptaCDF | 0,04 |-0,32|-0,25 |-0,21 |-0,25 | 0,04 | 0,01 -0,08 | 0,40" | -0,08 1,2,3,4,7,8,9-HeptaCDF |-0,26| 0,19 | 0,31 | 0,21 | 0,11 |-0,21|-0,23 | -0,04) 0,00 |-0.48 OctaCDF -0,26| 0,30 | 0,27 | 0,12 | 0,21 | 0,06 |-0,27}-0,01 | 0,22 |-0,14
Nhận xét: Từ số liệu trong bang 4.15 cho thay:
+ Nồng độ hormon TSH tương quan thuận với 2,3,4,7,8 - PentaCDE có (r=0,48 sóc 428 Re ee p <0,05) Mối tương quan này được thể hiện rõ ở hình 4.4 A y=1.6515x - 0.0714 A r= 0,48 p < 0,05 = 45+ 3 : ï & ° = ị 2 | = Q : ‹© 1.5 ị D ° & 6° Q t i ) b0 08 © a } Q r4 0 ———_—= wa Qe 0 0.5 1 15
Nang 46 2,3,4,7,8 Penta CDF (pe/g m6)-(log)
Hình 4.4 A: Tương quan gitta ndng 6 TSH voi nồng độ 23,4,7.8 PentaCDE ở nữ