BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH ENZYME PHÂN HỦY XÁC THỰC VẬT CỦA NHÓM NẤM SỢI PHÂN LẬP TỪ LÁ CÂY R...

Số — 2009 Di truyền học ứng dụng — Chuyên san Công nghệ sinh học BƯỚC ĐẦU NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG SINH ENZYME PHÂN HỦY XÁC THỰC VAT CUA NHOM NAM SỢI PHÂN LẬP TỪ LÁ CÂY RỤNG Ở VIỆT NAM Lê Thị Hoàng Yến, Nguyễn Thị Phương Thuỷ, Nguyễn Anh Đức, Nguyễn Anh Tuấn, Dương Văn Hợp Viện Vì sinh vật Cơng nghệ sinh học- Đại học Quốc gia Hà Nội Môi trường nuôi cấy: Môi trường khoai tây- -_ MỞ ĐẦU Potato Trong tự nhiên, xác thực vật bị phân hủy qua nhiều giai đoạn, nước ngắm vào chất, thời điểm hợp chất bon dễ hòa tan giải phóng Tiếp đến q trình phân cắt agar Dextrose Japan, môi (NH¿);SOu: 1,4; (PDA)-Nissui, trường LCA [8] Môi trường lên men dịch thể (g/): 10; 0,3; Ưre: 0,3; CaCl;: 0,3; MgSOx.7H;O : KH;PO: thành đoạn nhỏ cách học, tác động C¿ẴH¡;O;: glucose Đường 0,3; Poly peptone : 1,0; Tween 80 : 2,0; *Nguyên tố động vật không xương, vật kí sinh, tring, lam cho bề mặt ngun liệu lớn hơn, điều vi lượng -1,0 ml/1; [13] Những vật liệu khó tan xác thực vật bao ZnSO¿.7H;O : 1,4; MnSO¿.H;O : 1,6; CoC]; : 2,0) (* Nguyên tố vi lượng (g/): FeSO.7HO : 5; giúp cho trình xâm nhập cua vi sinh vat dé dang gồm cellulose (40-50%), hemicellulose Bể sung nguồn chất ( avilcel, CMC, rơm) 1% vào dung dịch để môi trường dịch thể khác (25-40%), lignin (20-35%), thành phần bị phân giải nhờ enzyrne vi sinh vật cách tự nhiên [6] Tùy Môi trường lên men xốp: Cám: Trấu: nước = l : theo tỉ lệ chất có xác thực vật khác mà tốc độ phân hủy chúng thay đổi, điều phụ thuộc vào cấu trúc hóa học chúng Cellulose bị phân hủy exoglucocanaza va enzyme: endoglucocanaza, R- glucosidaza Hemicelluloza (chu yéu 1a xylan) phần lớn bị phân hủy enzym endoxylanaza enzym Đ-xylosidaza Trong đó, lignin enzym laccaza, mangan peroxidaza lignin peroxindaza thủy phân [ó, 9, 11] Trong nghiên cứu này, tiến hành sàng loc hoạt tính enzym cndoglucocanaza, , 1:1 (WANN) Mơi trường thử hoạt tính Lignin peroxindase, Mín peroxindase(ø/J: azure-B:1; KH;PO¿:1; CaH¡;N;Oa: 0.5; MgSO¿.7HạO: 0.5; CaCl;.2H;O: 0.01; cao men: MgSO,.H;O: 0.001; thạch: 20g Mơi trường hoạt thử tính Fe,(SO,4)3: 0.001; tính enzyme hoạt CMCaza, xyÌanaza(g/): chất (CMC, xylan): 1; thạch: 20g 2.2 Phương pháp Phương exoglucocanaza Ñ- glucosidaza, xylanaza, lignin peroxidaza, Mn peroxidaza 109 chủng nấm sợi 0.001; CuSO,4.5H,O: 0.01; CMCaza, pháp xác xylanaza, định lignin hoạt tính peroxidaza enzyme Mn phân lập từ mẫu rụng lấy từ vườn Quốc gia Cúc Phương, Cát Tiên, Phong Nha, Ba Bể Cơ chất sử dụng là: CMC, xylan, azure B, Avicel peroxidaza phương pháp đục lỗ thạch [10,12] nguyên liệu, rơm Glucosidaza, xylanaza cách định lượng đường IIL NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Nguyên liệu Đối tượng nghiên cứu: 109 chủng nấm sợi phân lập từ xác thực vật v Quốc gia Việt Nam vườn Quốc Phương, Phong Nha, Ba Bẻ gia Cát Tiên, Cúc Phương pháp xác định hoạt độ enzyme endogluconaza, exo-gluconaza (Cellobio hydrolaza), B- khử phương pháp DNS Phương pháp dựa vào khả thủy phân (CMC, avicel, salicin, xylan) [4], phản ứng đối chứng sử dụng xylose làm đường khử Một đơn vị hoạt tính enzym tính lượng enzym phân hủy chất tạo ti Toia: Biaraainaloog Institute of Microbiology and Biotechnology, Vietnam National University, Hanoi + 15