BÁO cáo THÍ NGHIỆM hóa SINH tên bài ĐỊNH TÍNH KHẢO sát GLUCIDE

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÔN ĐỨC THẮNG KHOA KHOA HỌC ỨNG DỤNG – Bm Công nghệ Sinh học o_oOo_o BÁO CÁO THÍ NGHIỆM HĨA SINH GVBM: Lê Văn Bình Nhóm Tên Sv Heng Tuệ Minh Gwendoline Ngô Bảo Ngân Vũ Thanh Tâm MSSV 61703101 61703151 61703199 ĐIỂM Bài số: Tên bài: ĐỊNH TÍNH & KHẢO SÁT GLUCIDE Ngày thí nghiệm: 25/08/2018 I Xác định tính khử đường đơn phản ứng Fehling Nguyên tắc: - Vì phân tử monosaccrit glucose, fructose có nhóm chức –CHO,-C=O mang tính khử nên ta sử dụng chất chứa ion kim loại Cu, Fe để xác định tính khử chúng - Sử dụng hỗn hợp Fehling để xác định tính khử đường đơn Khi đó, dung dịch cho kết tủa màu đỏ Cu2+ bị khử thành Cu1+ - Trong dung dịch Fehling gồm có Fehling A Fehling B: + Fehling A chứa CuSO4 + Fehling B chứa hỗn hợp NaOH muối Kali natri tartrate Đây phương pháp tạo dung dịch Fehling, từ có Cu2+ phức hợp màu xanh Khi đun hỗn hợp có Cu2+ với chất có tính khử mạnh monosaccarit xuất tủa màu đỏ Dưới phương trình rút gọn cho trình: Các bước tiến hành: Ống nghiệm Glucose 1% 2ml Fructose 1% 2ml Fehling A Fehling B Gia nhiệt 1ml 1ml 1ml 1ml Đun cách thủy cho xuất kết tủa Kết thí nghiệm: Cả ống nghiệm xuất kết tủa đỏ gạch đáy ống nghiệm ống nghiệm chứa fructose đậm màu ống nghiệm chứa glucose Dung dịch trước đun cách thủy Dung dịch sau đun cách thủy (Ống nghiệm bên trái chứa Glucose, Ống nghiệm bên phải chứa Fructose) Giải thích so sánh với lý thuyết: Thuốc thử Fehling A dd CuSO4 Fehling B dd muối natri kali tartrat Có thể thấy muối phức hợp chất không bền nên cho chúng tác dụng với ta thu ion Cu2+ Kết tủa đỏ gạch đáy ống nghiệm kết phản ứng nhóm chức – CHO –CO với Cu2+ dung dịch Fehling cho sản phẩm Cu2O Nhưng ống nghiệm số có kết tủa đậm tính khử fructose mạnh glucose II Xác định tính khử đường đơi phản ứng Fehling Nguyên tắc Disaccarit phân tử đường đôi tạo nên từ phân tử đường đơn monosaccarit Ta sử dụng dung dịch Fehling để xác định tính khử disaccarit nhờ vào liên kết nhóm OH glucozit monosaccarit thứ với nhóm OH ancol monosaccarit thứ Cách tiến hành: Ống Maltose nghiệm 2% Lactose 2% Saccarose 2% 2ml 2ml 2ml Fehling Fehling Gia A B nhiệt 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml Hiện tượng Có kết tủa Đun cách thủy Có kết tủa Không kết tủa,dung dịch trạng thái suốt Kết quả: Ở ống ống thấy xuất kết tủa sau khoảng thời gian đun Sau thấy kết tủa ống đun thêm thời gian ngắn ống không thấy xuất kết tủa Dung dịch trước đun cách thủy Dung dịch sau đun cách thủy ( Từ trái qua phải, ống nghiệm Maltose, ống nghiệm Lactose, ống nghiệm Saccarose) Nhận xét so sánh với lý thuyết Có thể nhận thấy đường đơi maltose lactose có nhóm OH glucozit(monosaccarit 1) liên kết với nhóm OH alcol(monosaccarit 2) cịn để lại nhóm andehit tự phân tử đường cịn lại Ở đường saccarose có liên kết 1-2 glucozit, nhóm andehit tự bị khóa lại Khi khơng cịn nhóm OH hemiaxetal tự khơng chuyển thành dạng mạch hở chứa anđehit làm đường saccarose tính khử III Chiết xuất glycogen Nguyên tắc Chiết xuất glycogen từ gan động vật cách lọc hết chất lại có gan protein,lipit,… Sử dụng dung dịch kiềm,cồn nước để tiến hành chiết xuất Cách tiến hành: B1:5g gan tươi( nghiền sẵn)+20ml KOH 30% đun nóng B2:Cho vào cốc thủy tinh Đun khuấy liên tục đến gan tan hết B3:Để nguội, thêm 2ml Na2SO4 10% + 50ml cồn 96% B5:Hòa vào dung dịch 1-2ml nước cất+ 20ml cồn 960 B4:Khuấy để chất tác dụng nhanh hình thành tủa Để tủa lắng gạt bỏ nước,thu tủa lần B6:Khuấy cho dung dịch hịa tan sau để lắng, gạn bỏ phần dịch bên B7:Thu tủa, đem sấy khô Kết Thu khối lượng kết tủa rắn màu vàng sau sấy khô glycogen đuợc chiết xuất Dung dịch gan tươi đun nóng Dung dịch sau để nguội, thêm 2ml Na2SO4 10% + 50ml cồn 96% Glycogen chiết xuất Các lưu ý học rút ra: a)Tại không sử dụng HCl thay KOH bước 1, KOH có tác dụng ? Trả lời: Chúng ta sử dụng KOH bước để tạo môi trường kiềm mạnh nhằm phá hủy mơ gan, thứ khơng cần thí nghiệm Khơng sử dụng HCl trường hợp HCl acid mạnh, khơng phá hủy mơ gan mà phá hủy glycogen, thứ cần chiết xuất b) Tại lại cần sử dụng muối Na2SO4 cồn bước ? Trả lời: c) Tại phải lặp lại bước đến lần ? Cơng dụng nước cồn thí nghiệm ? IV Thủy phân tinh bột Nguyên tắc: Sử dụng acid nhiệt độ để phân giải tinh bột Từ tính tốn thời gian phân giải sản phẩm có qua giai đoạn phân giải Sản phẩm cuối phân giải hoàn toàn tinh bột maltose glucose Việc sử dụng iod thí nghiệm dùng để xác định sản phẩm xuất trình phân giải tinh bột sản phẩm có tác dụng tạo nên màu khác với iod Cách tiến hành Gồm phần: Phần 1: Thủy phân tinh bột - Bước 1: Cho vào cốc thủy tinh 10ml tinh bột 1% 5ml HCl 10%, - Bước 2: Đun cách thủy khoảng 7- 10 phút, đậy nắp miệng cốc( Chú ý: Khi đun có khí HCl độc ra, nên cẩn thận đun) Phần 2: Kiểm tra dịch thủy phân để xem phân giải tinh bột đến giai đoạn Ống nghiệm Dịch thủy phân 1ml 1ml Dung dịch I2/KI giọt Fehling A Fehling B Gia nhiệt 0,5ml 1,5ml Đun cách thủy Kết quả: Ở ống ta thấy xuất dung dịch màu vàng nhạt Ở ống sau đun phút 15s, ta thấy xuất kết tủa đỏ gạch,sau đun thêm thời gian kết tủa giữ nguyên Tinh bột sau thủy phân 10 Ống nghiệm bên trái chứa dịch thủy phân Fehling A+B, ống nghiệm bên phải chứa dịch thủy phân I2/KI Dung dịch sau đun ống nghiệm chứa dịch thủy phân Fehling A+B (bên phải) Nhận xét so sánh với lý thuyết Ở kết luận màu vàng nhạt ống màu dung dịch iod tinh bột phân giải hoàn toàn Có thể khẳng định điều ống 2, lượng dịch thủy phân tác dụng với thuốc thử hỗn hợp Fehling cho kết tủa màu đỏ gach, tượng xảy có chất có tính khử mạnh nhờ nhóm andehit maltose glucose Lưa ý: Khi thấy ống nghiệm xuất màu vàng nhạt 11 không nên vội kết luận tinh bột bị phân hủy hoàn toàn, cần phải thử thêm xem ống nghiệm thứ có kêt tủa đỏ gạch hay chưa Nếu chưa tinh bột dạng trung gian sản phẩm trung gian dextrin tác dụng với dung dịch iod cho màu vàng nhạt Thứ tự sản phẩm xuất phân giải tinh bột:  Amylodextrin  Erythrodextrin  Achrodextrin  Malto dexttrin  Maltose glucose 12 ...ĐIỂM Bài số: Tên bài: ĐỊNH TÍNH & KHẢO SÁT GLUCIDE Ngày thí nghiệm: 25/08/2018 I Xác định tính khử đường đơn phản ứng Fehling Nguyên tắc: - Vì... Kết thí nghiệm: Cả ống nghiệm xuất kết tủa đỏ gạch đáy ống nghiệm ống nghiệm chứa fructose đậm màu ống nghiệm chứa glucose Dung dịch trước đun cách thủy Dung dịch sau đun cách thủy (Ống nghiệm. .. fructose có nhóm chức –CHO,-C=O mang tính khử nên ta sử dụng chất chứa ion kim loại Cu, Fe để xác định tính khử chúng - Sử dụng hỗn hợp Fehling để xác định tính khử đường đơn Khi đó, dung dịch