DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - XÁC ĐỊNH CÁC HYDROCACBON THƠM ĐA VÒNGAnimal and vegetable fats and oils - Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons

Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN 9531:2012 ISO 15753:2006 WITH AMENDMENT 1:2011 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - XÁC ĐỊNH CÁC HYDROCACBON THƠM ĐA VÒNG Animal and vegetable fats and oils - Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons Lời nói đầu TCVN 9531:2012 hồn toàn tương đương với ISO 15753:2006 Sửa đổi 1:2011 TCVN 9531:2012 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn quốc gia TCVN/TC/F13 Phương pháp phân tích lấy mẫu biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị Bộ Khoa học Công nghệ công bố DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - XÁC ĐỊNH CÁC HYDROCACBON THƠM ĐA VÒNG Animal and vegetable fats and oils - Determination of polycyclic aromatic hydrocarbons Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định hai phương pháp xác định 15 hydrocacbon thơm đa vòng (PAH) dầu mỡ động vật thực vật gồm: - phương pháp chung; - phương pháp riêng đối dầu dừa dầu thực vật có axit béo mạch ngắn Các phương pháp không áp dụng để định lượng hợp chất dễ bay naphtalen, axenaphten floren Do phương pháp gây nhiễu nền, nên dầu cọ bã dầu oliu khơng thể phân tích phương pháp Giới hạn định lượng hầu hết hợp chất phân tích 0,2 g/kg, ngoại trừ floranten benzo(g,h,i)perylen có giới hạn định lượng 0,3 g/kg indeno(1,2,3-c,d)pyren có giới hạn định lượng g/kg CHÚ THÍCH: Các kết bã dầu oliu Phụ lục B phương pháp không áp dụng cho loại dầu Dữ liệu độ chụm xác định thấp Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi, bổ sung (nếu có) TCVN 6128 (ISO 661), Dầu mỡ động vật thực vật - Chuẩn bị mẫu thử Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn áp dụng thuật ngữ định nghĩa sau: 3.1 Hydrocacbon thơm đa vòng (polycyclic aromatic hydrocarbon) (PAH) Hợp chất có chứa hai nhiều hai vịng hydrocacbon thơm ngưng tụ (dung hợp) xác định hàm lượng theo phương pháp quy định tiêu chuẩn CHÚ THÍCH 1: Hàm lượng hydrocacbon thơm đa vịng tính microgam kilogam CHÚ THÍCH 2: Thơng thường, PAH chia thành PAH nhẹ có từ hai đến bốn vịng thơm PAH nặng có năm nhiều năm vịng thơm VÍ DỤ PAH nhẹ gồm có: LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Naphatalen (CAS RN [91-20-3]), axenaphten (CAS RN [83-32-9]), axenaphtylen (CAS RN [208-96-8]), floren (CAS RN [86-73- 7]) antraxen (CAS RN [120-12-7]) phenantren (CAS RN [85-01-8]), floranten (CAS RN [206-44-0]), crysen (CAS RN [218-01- 9]), benz(a)antraxen (CAS RN [56-55-3]), pyren (CAS RN [129-00-0]) PAH nặng gồm có: Benzo(a)pyren (CAS RN [50-32-8)), benzo(b)florenten (CAS RN (205-99-2]), benzo(k)floranten(CAS RN [207-08-9]), benzo(g,h,i)perylen (CAS RN [191-24-2]), dibenz(a,h)antraxen (CAS RN [53-70-3]), indeno (1,2,3-c,d)pyrene (CAS RN [193-39-5]) Nguyên tắc Các hydrocacbon thơm đa vòng chiết hỗn hợp axetonitril/axeton, tinh cột pha đảo C18, sau làm cột chiết liên kết Florisil Xác định hàm lượng hydrocacbon thơm đa vòng sau tách sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) đo huỳnh quang bước sóng kích thích bước sóng phát xạ Thuốc thử vật liệu thử CẢNH BÁO - Chú ý quy định việc xử lý chất độc hại trách nhiệm người thực Cần tuân thủ biện pháp an toàn tổ chức cá nhân Chỉ sử dụng loại thuốc thử tinh khiết phân tích, trừ có quy định khác Kiểm tra chất lượng dung môi trước sử dụng cách cho bay để cô đặc dung mơi khoảng 000 lần, phân tích dịch đặc HPLC (từ 300 ml thành 300 l) Sắc đồ phải khơng có pic vùng rửa giải PAH 5.1 Metanol loai siêu tinh khiết phân tích1) 5.2 Hexan, loại dùng cho HPLC1) 5.3 Axetonitril, loại dùng cho HPLC1) 5.4 Axeton, loại dùng cho HPLC1) 5.5 Diclometan, loại dùng cho HPLC1) 5.6 Toluen, loại dùng cho HPLC1) 5.7 Nước, loại dùng cho HPLC1) 5.8 Tetrahydrofuran, loại dùng cho HPLC1) 5.9 Hỗn hợp dung môi 1: axetonitril/axeton (60 % / 40 % thể tích) Lượng dung mơi sử dụng cho mẫu: 41 ml cho phương pháp chung, 36 ml cho phương pháp riêng dầu dừa 5.10 Hỗn hợp dung môi 2: axetonitril/axeton (80 % / 20 % thể tích) Lượng dung mơi sử dụng cho mẫu: x 11 ml cho phương pháp riêng dầu dừa 5.11 Hỗn hợp dung môi 3: hexan/diclometan (75 % / 25 % thể tích) Lượng dung môi sử dụng cho mẫu: ml cho phương pháp chung, x7 ml cho phương pháp riêng dầu dừa 5.12 Hỗn họp tetrahydrofuran/metanol (50 % / 50 % thể tích) 5.13 Dung dịch chuẩn có 16 PAH toluen EPA chứng nhận2), nồng độ 100 g/ml (100 mg/l) gồm có: naphatalen, axenaphtylen, axenaphten, floren, phenantren, antraxen, floranten, pyren, benz(a)antraxen, chrysen, benzo(b)floranten, benzo(k)floranten, benzo(a)pyren, dibenz(a)antraxen, benzo(g,h,i)perylen, indeno(1,2,3-c,d)pyren Dung dịch bảo quản nhiệt độ - 20 oC Trước sử dụng, làm ấm dung dịch đến nhiệt độ mơi trường h 1) Các thuốc thử có từ, ví dụ Baker Thơng tin đưa tạo thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn, tiêu chuẩn không ấn định phải sử dụng chúng Có thể sử dụng sản phẩm tương tự chúng cho kết tương đương 2) Dung dịch có từ, ví dụ Promochem LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Kh www.luatminhkhue.vn CHÚ THÍCH Axenaphtylen khơng phải chất huỳnh quang, khơng thể xác định phương pháp 5.14 Dung dịch chuẩn gốc, nồng độ 200 ng/ml (200 g/l) Dùng microxyranh 250 l (6.11), lấy 100 l dung dịch chuẩn (5 13) cho vào bình định mức 50 ml (6.20) pha lỗng đến vạch axetonitril 5.15 Dung dịch chuẩn làm việc, nồng độ 50 ng/ml (50 g/l) Dùng microxyranh 250 l (6.11), lấy 250 l dung dịch chuẩn gốc (5.14) cho vào 750 l hỗn hợp THF/metanol (5.12) axetonitril (5.3) 5.16 Cột chiết liên kết C183), pha g, dung tích 12 ml 5.17 Cột chiết liên kết Florisil3),1 pha 500 mg, dung tích ml 5.18 Dịng khí nitơ, áp suất quy định 34,5 kPa (5 psi, khoảng 1,5 l/min) Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị, dụng cụ phịng thử nghiệm thơng thường thiết bị, dụng cụ cụ thể sau: Có thể sử dụng ống nghiệm thủy tinh dùng lần Việc sử dụng ống thủy tinh cần thiết ống chất dẻo chứa PAH 6.1 Máy ly tâm, có khả đạt tốc độ li tâm thấp 000 min-1, thích hợp cho ống 100 ml 10 ml 6.2 Hệ thống HPLC có rửa giải gradient hai kênh, có bình chứa dung mơi dung tích lít, lọc màng pha động, bơm, lấy mẫu tự động, cột điều chỉnh nhiệt độ cài đặt 25 oC, có detector huỳnh quang lập trình theo thời gian bước sóng kích thích bước sóng phát xạ khác nhau, máy tính để thu nhận xử lý liệu 6.3 Cột pha đảo C184), dài 250 mm, đường kính 4,6 mm, cỡ hạt m, thích hợp để phân tích PAH 6.4 Máy trộn Vortex 6.5 Bộ cô quay tự động5), dùng cho ống nghiệm 10 ml (tùy chọn) nồi cách thủy (6.6) Các điều kiện vận hành khuyến cáo: - nhiệt độ nồi cách thủy 35 oC - áp suất khí nitơ 34,5 kPa 6.6 Nồi cách thủy, điều chỉnh nhiệt độ 35 oC 6.7 Cân, đọc xác đến 0,1 mg 6.8 Ống ly tâm, dung tích 100 ml (mỗi mẫu cho vào ống) 6.9 Ống ly tâm hình nón, dung tích 11 ml (mỗi mẫu cho vào ba ống), có vách ngăn PTFE đậy nắp vặn (mỗi mẫu nắp vặn) 6.10 Ống đong chia độ, loại A quy định TCVN 8488 (ISO 4788)6) 6.11 Microxyranh, dung tích 250 l 6.12 Xyranh, dung tích 000 l 6.13 Pipet chia độ, loại A quy định TCVN 7150 (ISO 835)[4], dung tích ml 3) Vật liệu có từ, ví dụ Varian Thơng tin đưa để tạo thuận lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn, tiêu chuẩn khơng ấn định phải sử dụng chúng Có thể sử dụng sản phẩm tương tự chúng cho kết tương đương 4) Thiết bị có từ, ví dụ Vydac, ref 201 TP54 5) Thiết bị có từ, ví dụ Zymark, Zymark TurboVap LV evaporator 6) Dụng cụ cỏ từ, vi dụ Zymark, Zymark Rapid Trace Thông tin đưa tạo thuận tiện cho ngưởi sử dụng tiêu chuẩn, tiêu chuẩn khơng ấn định phải sử dụng chúng Có thể sử dụng sản phẩm tương tự chúng cho kết tương đương LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn 6.14 Xyranh, dung tích ml, trang bị đầu nối dùng cho cột SPE 6.15 Lọ (vial) dùng cho lấy mẫu tự động 6.16 Lọ micro (microvial), dung tích 250 l, thích hợp để dùng cho hệ thống HPLC 6.17 Bể siêu âm, có nhiệt độ nước không lớn 40 oC 6.18 Pipet pasteur, quy định TCVN 7152 (ISO 7712)[7], có nút bơng đầu để tránh bị nhiễm bẩn 6.19 Dụng cụ gồm có giá đỡ kẹp6), để giữ cột SPE cố định vị trí làm việc SPE tự động, thích hợp CHÚ THÍCH: Tùy thuộc vào cách xử lý mẫu SPE sử dụng mà phương pháp chiết đưa có thay đổi chút (thời gian, áp suất, thể tích) 6.20 Bình định mức vạch, loại A, quy định TCVN 7153 (ISO 1042)[5], dung tích 50 ml Lấy mẫu Mẫu gửi đến phòng thử nghiệm phải mẫu đại diện Mẫu không bị hư hỏng biến đổi suốt trình vận chuyển bảo quản Việc lấy mẫu không quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 2625 (ISO 5555) Chuẩn bị mẫu thử Chuẩn bị mẫu thử theo TCVN 6128 (ISO 661) Trước lấy mẫu, mẫu dạng lỏng phải nhiệt độ phòng đồng hóa khuấy từ Lấy mẫu dạng rắn cách làm nóng chảy tồn mẫu làm nóng chảy đồng hóa vài mẫu tâm Quy trình để xác định PAH từ dầu mỡ: Phương pháp chung 9.1 Các lưu ý ban đầu Để thu kết lặp lại, nhiệt độ mơi trường phịng thử nghiệm phải điều chỉnh (< 20 °C) Việc điều chỉnh nhiệt độ điều kiện quan trọng để chiết PAH khỏi dầu dừa (hoặc dầu thực vật có chứa axit béo mạch ngắn) Các loại dầu có chứa axit béo mạch ngắn mạch dài; nhiệt độ mơi trường cao 20 oC độ hịa tan axit béo mạch ngắn tăng Trước sử dụng, rửa tồn bình ba lần hexan (5.2) Mỗi dãy mẫu phải gồm có mẫu trắng (9.2) dung dịch chuẩn chiết điều kiện với mẫu để tính giá trị độ thu hồi trình chiết (9.3) Các giá trị độ thu hồi phải nằm dải từ 70 % đến 110 % Các giá trị trung bình độ thu hồi nêu Bảng A.1 Đổi với phép phân tích định lượng, phải chiết phân tích riêng hai phần mẫu thử, kết cuối giá trị trung bình kết hai mẫu Nếu khơng thể kết thúc phép phân tích ngày bảo quản dịch chiết mẫu qua đêm điều kiện đơng lạnh sâu nhiệt độ - 18 °C: - ngày thứ nhất: bước 1, bước bước tinh cột C18 (xem Hình A.1) - ngày thứ hai: bước 3, tinh cột Florisil chuẩn bị hệ thống HPLC để phân tích mẫu (xem Hình A.1) - ngày đêm tiếp theo: phân tích mẫu (xem Bảng A.2) 9.2 Mẫu trắng Để đảm bảo dung môi cột khơng có chất nhiễm bẩn, trước hết tiến hành quy trình tinh (theo 9.5, 9.6 Điều 11) mẫu trắng (mẫu có hỗn hợp dung mơi khơng có dầu), sắc đồ thu phải khơng chứa hợp chất có liên quan Nếu sắc đồ thu có chất gây nhiễu, phải xác định loại bỏ nguồn gây nhiễu Các giá trị mẫu trắng không sử dụng để hiệu chỉnh giá trị mẫu thử giá trị mẫu trắng thường không đồng (độ lặp lại) 9.3 Xác định giá trị độ thu hồi (khơng có nền) Tiến hành phép thử với dung dịch chuẩn để đánh giá hiệu chiết cột Dùng xyranh dung tích 250 l (6.11), pha 750 l hỗn hợp dung môi (5.9) với 250 l dung dịch chuẩn làm việc (5.15) Chuyển hỗn hợp vào cột C18 xử lý theo quy định 9.5, 9.6 Điều 11 LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn CẢNH BÁO - Khi loại bỏ dung mơi dịng nitơ (xem 9.5.6), thi không làm bay đến khô mà giữ lại khoảng 50 l dung môi lọ, không PAH bay bị thất thoát 9.4 Tách chiết (chiết dạng lỏng/lỏng) 9.4.1 Sơ đồ quy trình tách chiết nêu Bảng A.1 9.4.2 Cân khoảng 2,5 g mẫu, xác đến mg, cho vào ống ly tâm 100 ml (6.8) Thêm 10 ml hỗn hợp dung môi (5.9) 9.4.3 Lắc ống ly tâm 30 s máy trộn vortex (một nửa tốc độ), sau cho ống ly tâm vào bể siêu âm (6.17) 9.4.4 Ly tâm tốc độ 000 min-1 9.4.5 Cẩn thận lấy lớp dung dịch pipet Pasteur (6.18) chuyển lớp dung dịch vào ống hình nón cân (6.9) 9.4.6 Cho bay dung môi khỏi ống hình nón khoảng từ 30 đến 40 min, dịng khí nitơ (5.18), sử dụng nồi cách thủy nhiệt độ 35 oC (6.6) cô quay tự động (6.5) 9.4.7 Lặp lại việc chiết hai lần, lần 10 ml hỗn hợp dung môi (5.9) Cô đặc dịch chiết ống hình nón dịng khí nitơ (5.18), dùng nồi cách thùy cài đặt nhiệt độ 35 oC (6.6) dùng cô quay tự động (6.5) Chất béo lại phải khoảng từ 200 mg đến 800 mg Nếu khối lượng chất béo lại cao 800 mg, phương pháp chung (Điều 9) khơng thích hợp nên sử dụng phương pháp riêng dầu dừa (Điều 10) 9.5 Tinh cột chiết liên kết C18 (chiết dạng rắn/lỏng) 9.5.1 Ổn định cột: Đặt cột (5.16) giá đỡ (6.19) Tráng cột metanol (5.1) lần lần 12 ml sau tráng axetonitril (5.3) lần lần 12 ml Để dung môi chảy qua cột áp suất khí 9.5.2 Đặt ống hình nón cân (6.9) cột (5.16) 9.5.3 Dùng xyranh (6.12) pipet chia độ (6.13), lấy ml hỗn hợp dung môi (5.9) cho vào ống hình nón có chứa chất béo lại (9.4.6) Lắc ống máy trộn vortex (6.4) 15 s Ly tâm 30 s Chuyển lớp dung dịch vào cột (5.16) pipet Pasteur (6.18) Lặp lại việc chiết hai lần (2 ml hỗn hợp dung môi 1, trộn đều, ly tâm chuyển lên cột) Thu lấy dung môi giải hấp từ cột với dung môi rửa giải 9.5.4 Thêm ml hỗn hợp dung mơi (5.9) vào phía đỉnh cột (5.16) tiếp tục rửa giải áp suất khí 9.5.5 Dùng xyranh (6.14), bơm khơng khí vào cột để rửa giải dung mơi cịn lại tất PAH lưu lại pha 9.5.6 Loại bỏ dung mơi dịng khí nitơ (5.18) nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC (6.6) quay tự động (6.5) Chất béo cịn lại khơng q 50 mg 9.5.7 Pha lỗng phần chất béo lại ml hexan (5.2) đong xyranh (6.12) Đậy chặt ống hình nón bảo quản nhiệt độ - 18 oC tiếp tục sử dụng 9.6 Tinh cột chiết liên kết Florisil (chiết dạng rắn/lỏng) 9.6.1 Để cho dịch chiết (9.5.7) ấm đến nhiệt độ mơi trường h 9.6.2 Ổn định cột: Đặt cột (5.17) giá đỡ (6.19) Tráng cột diclometan (5.5) lần, lần ml, sau tráng hexan (5.2) lần lần ml 9.6.3 Đặt ống hình nón cân (6.9) cột (5.17) 9.6.4 Chuyển dịch chiết (9.5.7) vào cột (5.17) pipet pasteur (6.18) 9.6.5 Dùng xyranh (6.12) pipet chia độ (6.13), lấy ml hỗn hợp dung môi (5.11) cho vào ống hình nón có chứa dịch chiết Lắc ống 15 s máy trộn vortex chuyển hỗn hợp vào cột (5.17) Tráng ống hỗn hợp dung môi (5.11) lần, lần ml chuyển dung môi lên cột Thu lấy dung môi giải hấp từ cột với dung môi rửa giải Cẩn thận tránh tiếp xúc pipet ống hình nón để tránh bị nhiễm bẩn chéo 9.6.6 Rửa giải ml hỗn hợp dung môi (5.11) qua cột (5.17) Dùng xyranh (6.14) bơm khơng khí vào cột để rửa giải dung mơi cịn lại LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn 9.6.7 Cơ đặc dung dịch khí nitơ (5.18) nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC (6.6) cô quay tự động (6.5) đến khoảng ml (cô đặc từ 10 đến 15 min) Thêm khoảng 0,5 ml toluen (5.6) (bảo quản) tiếp tục làm bay lại khoảng 50 l dung môi Không để đung môi bay hồn tồn 9.6.8 Thể tích dịch chiết xác định cách cân ống hình nón tính theo tỷ trọng toluen Bổ sung lượng dung môi cần thiết [MeOH/THF (5.12) axetonitril (5.3)], Vbổsung, đến 250 l Vbổsung = 250 Trong m khối lượng mẫu, tính miligam (mg); d tỷ trọng toluen (0,866 kg/m3) 9.6.9 Chuyển mẫu vào lọ micro (6.16) đặt lọ (6.15) 10 Quy trình xác định PAH từ dầu mỡ: Phương pháp riêng dầu dừa 10.1 Chiết lần thứ (chiết dạng lỏng/lỏng) 10.1.1 Sơ đồ quy trình tách chiết nêu Hình A.2 10.1.2 Cân khoảng g mẫu, xác đến mg, cho vào ống ly tâm 100 ml (6.8) Thêm 10 ml hỗn hợp dung môi (5.9) 10.1.3 Lắc ống ly tâm 30 s máy trộn vortex (một nửa tốc độ), sau đặt ống vào bể siêu âm (6.17) 10.1.4 Ly tâm tốc độ 000 min-1 10.1.5 Cẩn thận lấy lớp dung môi pipet Pasteur (6.18) cho vào ống hình nón (6.9) 10.1.6 Cho bay dung mơi khỏi ống hình nón khoảng từ 30 đến 40 dịng khí nitơ (5.18), sử dụng nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC (6.6) cô quay tự động (6.5) 10.1.7 Lặp lại việc chiết hai lần, lần 10 ml hỗn hợp dung môi (5.9) Cơ đặc dịch chiết ống hình nón dịng khí nitơ (5.18) sử dụng nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC (6.6) cô quay tự động (6.5) 10.2 Chiết lần thứ hai (chiết dạng lỏng/lỏng) 10.2.1 Dùng xyranh (6.12) pipet chia độ (6.13), lấy ml hỗn hợp dung môi (5.9) cho vào ống hình nón có chứa chất béo lại (10.1.7) Lắc mạnh ống máy trộn vortex 15 s Ly tâm 30 s Chia dịch chiết thành hai phần cho vào hai ống hình nón cân (6.9) Cẩn thận trành tiếp xúc pipet ống hình nón để tránh bị nhiễm bẩn chéo 10.2.2 Lặp lại hai lần quy trình quy định 10.2.1, sử dụng ống hình nón 10.2.3 Cơ đặc hai dịch chiết dịng khí nitơ (5.18), sử dụng nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC cô quay tự động (6.5) Lượng chất béo lại dịch chiết nên khoảng 250 mg 10.3 Tinh cột chiết liên kết C18 (chiết dạng rắn/lỏng) 10.3.1 Ổn định cột: Đặt hai cột (5.16) lên giá đỡ (5.19) Tráng cột metanol (5.1) lần lần 12 ml, sau tráng axetonitril (5.3) lần lần 12 ml Để yên dung môi chảy qua cột áp suất khí 10.3.2 Đặt ống hình nón cân (6.9) cột (5.16) 10.3.3 Dùng xyranh (6.12) pipet chia độ (6.13), lấy ml hỗn hợp dung mơi (5.10) cho vào hai ống hình nón có chứa chất béo lại (10.2.3) Lắc ống máy trộn vortex 15 s Chuyển toàn dịch chiết ống vào cột (5.16) pipet Pasteur (6.18) Tráng ống hỗn hợp dung môi (5.10) lần lần ml chuyển hỗn hợp lên cột Thu lấy dung môi giải hấp từ cột với dung môi rửa giải 10.3.4 Rửa giải ml hỗn hợp dung môi (5.10) qua cột (khơng bơm khơng khí lên cột) 10.3.5 Loại bỏ dung mơi dịng khí nitơ (5.18), sử dụng nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC (6.6) cô quay tự động (6.5) Lượng chất béo lại phải từ 50 mg đến 100 mg LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn 10.3.6 Pha loãng lượng chất béo lại ml hexan (5.2), đong xyranh (6.12) Đậy chặt ống hình nón bảo quản nhiệt độ - 18oC đến ngày hôm sau 10.4 Tinh cột chiết liên kết Florisil (chiết dạng rắn/lỏng) 10.4.1 Để cho dịch chiết (10.3.6) ấm đến nhiệt độ mơi trường h 10.4.2 Ổn định cột: Đặt hai cột (5.17) giá đỡ (6.19) Tráng cột diclometan (5.5) lần lần ml, sau tráng hexan (5.2) lần lần ml 10.4.3 Đặt ống hình nón cân (6.9) cột (5.17) 10.4.4 Chuyển dịch chiết (10.3.6) vào cột (5.17) pipet Pasteur (6 18) 10.4.5 Dùng xyranh (6.12) pipet chia độ (6.13), lấy ml hỗn hợp dung môi (5.11) cho vào ống chiết Lắc ống 15 s máy trộn vortex chuyển hỗn hợp vào cột (5.17) Tráng ống dung môi (5.11)2 lần lần ml chuyển dung môi lên cột Thu lấy dung môi giải hấp từ cột với dung môi rửa giải 10.4.6 Rửa giải ml hỗn hợp dung mơi (5.11) qua cột (5.17) (khơng bơm khơng khí vào cột) 10.4.7 Cơ đặc dung dịch dịng khí nitơ (5.18), sử dụng nồi cách thủy cài đặt nhiệt độ 35 oC cô quay tự động (6.5) đến khoảng ml (cô đặc từ 10 đến 15 min) Thu lấy hai dịch chiết vào ống hình nón cách chuyển dịch chiết từ ống hình nón vào ống hình nón Tráng ống hình nón rỗng hexan (5.2) lần lần ml Thêm khoảng 0,5 ml toluen (5.6) (bảo quản) xyranh (6.12) tiếp tục làm bay đến khoảng 50 l Không nên loại bỏ hết dung mơi 10.4.8 Thể tích dịch chiết xác định cách cân ống hình nón tính theo tỷ trọng toluen Bổ sung lượng dung môi cần thiết (MeOH/THF (5.12) axetonitril (5.3)], V bổsung, đến 200 l Vbổsung = 250 Trong m khối lượng mẫu, tính miligam (mg); d tỷ trọng toluen (0,866 kg/m3) 10.4.9 Chuyển mẫu vào lọ micro (6.16) đặt lọ (6.15) 11 Phân tích sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 11.1 Điều kiện vận hành Pha động: Hỗn hợp dung môi A: axetonitril Hỗn hợp dung mơi B: axetonitril/nước (50:50 thể tích) Tốc độ dịng: 1,2ml/min Thể tích bơm: 20 l Nhiệt độ cột: 25 oC Ví dụ chương trình rửa giải dung mơi nêu Bảng Chương trình gradient rửa giải dung môi cần thay đổi theo cột sử dụng Bảng – Chương trình gradient rửa giải cột pha đảo C18 Thời gian Hỗn hợp dung môi A Hỗn hợp dung môi B % % 0 100 100 27 60 40 36 100 41 100 LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Thời gian Hỗn hợp dung môi A Hỗn hợp dung môi B % % 43 100 45 100 11.2 Thơng số phát Phổ kích thích phổ phát xạ thay đổi nhẹ theo thiết bị khác Để xác định bước sóng kích thích bước sóng phát xạ cực đại phổ hợp chất phải thu nhận từ dung dịch chuẩn làm việc 16 PAH (5.15) sau - Trước tiên, xác định bước sóng phát xạ cực đại cách qt bước sóng kích thích tùy chọn khoảng từ 300 nm đến 550 nm (xem Bảng 2); - Sau đó, xác định bước sóng kích thích cực đại cách quét bước sóng phát xạ xác định trước từ 200 nm đến 350 nm Đối với nhóm bảy nhóm hợp chất (xem Bảng 2) có thời gian lưu gần nhau, chọn tập hợp bước sóng kích thích/phát xạ gần với bước sóng cực đại hợp chất tốt Ví dụ, lựa chọn bước sóng thu với máy đo huỳnh quang HP 1100 nêu Bảng Bảng – Chương trình Nhóm Thành phần phát Thời gian Bước sóng kích thích Bước sóng phát xạ nm nm 270 324 12,6 248 375 16,4 280 462 18,05 270 385 28,0 256 446 31,1 292 410 38,0 274 507 Naphatalen Acenaphten floren Phenantren Antraxen Floranten Pyren Benz(a)antraxen Chrysen Benzo(b)floranten Benzo(k)floranten Benzo(a)floranten Dibenz(a,h)antraxen Benzo(g,h,i)pyren lndeno(1,2,3-c,d)pyren Ở điều kiện thu sắc đồ Hình dung dịch chuẩn 16 PAH LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Toluen 11 Benzo(b)floranten Naphtalen 12 Benzo(k)floranten Axenaphten 13 Benzo(a)pyren Floren 14 Dibenz(a,h)antraxen Phenantren 15 Benzo(g,h,i)perylen Antraxen 16 Indeno(1,2,3-c,d)pyren Floranten 17 vị trí bước sóng thay đổi Pyren 18 hỗn hợp dung môi A (axetonitril) Benz(a)antraxen 19 hỗn hợp dung mơi B (axetonitril/nước tỷ lệ 50/50 thể tích) 10 Chrysen Hình - Sắc đồ dung dịch chuẩn làm việc (5.15) 11.3 Phép phân tích mẫu dung dịch chuẩn Mẫu dung dịch chuẩn phải bơm hai lần Độ lệch chuẩn tương đối diện tích hai lần bơm mẫu không vượt % Nếu độ lệch chuẩn vượt q %, cần tối ưu hóa điều kiện HPLC, mẫu dung dịch chuẩn nên bơm vào lần thứ hai Trình tự bơm sau: a) dung dịch chuẩn (5.15); b) dung dịch chuẩn tách chiết (xem 9.3); c) mẫu Ví dụ, chi tiết trình tự bơm nêu Bảng A.2 PAH có mẫu xác định cách so sánh thời gian lưu sắc đồ mẫu với thời gian lưu gần sắc đồ mẫu đối chứng Sắc đồ nêu Hình A.3 thu mẫu dầu oliu nguyên chất 11.4 Phép thử khẳng định có mặt PAH Ngồi ra, bơm mẫu thêm hai lần nữa: lần để ghi lại phổ phát xạ hợp chất lần để ghi lại phổ kích thích Việc ghi lại phổ hợp chất cho phép khẳng định có mặt hợp chất cần phân tích cách so sánh phổ chúng với phổ đối chứng 12 Biểu thị kết Trước tính, kiểm tra điểm sau: - chất lượng mẫu trắng; - độ lệch chuẩn tương đối hai lần bơm mẫu (không vượt %); - phần trăm độ thu hồi PAH (9.3 Bảng A.1) Thực việc tính kết phương pháp chuẩn ngoại Tính hàm lượng ci PAH mẫu, microgam kilogam: LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Cơng ty luật Minh Kh www.luatminhkhue.vn Trong Ai diện tích pic (trung bình hai lần bơm) PAH dung dịch mẫu; Air diện tích pic (trung bình hai lần bơm) PAH dung dịch chuẩn làm việc (5.15); cir nồng độ PAH dung dịch chuẩn làm việc (5.15), tính microgam kilogam (g/kg); V thể tích dịch chiết cuối, tính mililit (ml); m khối lượng mẫu, tính gam (g) Đối với phép phân tích định lượng, mẫu phải chiết hai lần Hàm lượng PAH tính trung bình hai giá trị thu được, biểu thị xác đến 0,1 g/kg 13 Độ chụm 13.1 Phép thử liên phòng thử nghiệm Các kết phép thử liên phòng thử nghiệm độ chụm phương pháp nêu Phụ lục B Giá trị giới hạn lặp lại giá trị giới hạn tái lập tính xác khoảng 95 % khơng áp dụng cho dải nồng độ chất khác với dải nồng độ chất nêu 13.2 Độ lặp lại Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử riêng rẽ độc lập thu sử dụng phương pháp, vật liệu thử giống hệt nhau, phòng thử nghiệm, người thao tác, sử dụng thiết bị, khoảng thời gian ngắn, không % trường hợp lớn giới hạn lặp lại r tính từ bảng sau Nồng độ PAH đơn lẻ, c (g/kg) từ g/kg đến 10 g/kg từ 10 g/kg đến 100 g/kg Giới hạn lặp lại, r (g/kg) 0,37 x c 0,12 x c + 3,7 Trong c trung bình hai kết thử nghiệm, tính microgam kilogam 13.3 Độ tái lập Chênh lệch tuyệt đối hai kết thử riêng rẽ thu sử dụng phương pháp, vật liệu thử giống hệt nhau, phòng thử nghiệm khác nhau, người thao tác khác nhau, sử dụng thiết bị khác nhau, không % trường hợp lớn giới hạn tái lập R tính từ bảng sau Nồng độ PAH đơn lẻ, c (g/kg) từ g/kg đến 10 g/kg từ 10 g/kg đến 40 g/kg từ 10 g/kg đến 100 g/kg Giới hạn tái lập, R (g/kg) 1,1 x c 0,86 x c + 1,5 40 g /kg Trong c trung bình hai kết thử nghiệm, tính microgam kilogam 14 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm phải ghi rõ: a) thông tin cần thiết để nhận biết đầy đủ mẫu thử; b) phương pháp thử sử dụng, viện dẫn tiêu chuẩn này; c) chi tiết thao tác không quy định tiêu chuẩn tùy chọn cố ảnh hưởng đến kết thử nghiệm; d) kết thử nghiệm đơn vị biểu thị; e) giá trị độ thu hồi PAH PHỤ LỤC A LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn (Tham khảo) Các giá trị độ thu hồi, sơ đồ, sắc đồ trình tự bơm Bảng - Giá trị độ thu hồi Hợp chất trung bình hydrocacbon đa vòng dầu Phương pháp chung Phương pháp dầu dừa Phenantren > 70 % > 70 % Antraxen > 70 % > 70 % Floranten > 70 % > 70 % Pyren > 70 % > 70 % Benz(a)antraxen > 70 % > 70 % Chrysen > 70 % > 70 % Benzo(b)floranten > 70 % > 70 % Benzo(k)floranten > 70 % > 70 % Benzo(a)pyren > 70 % > 60 % Dibenzo(a,h)antraxen >70% > 60 % Benzo(g,h,i)perylen > 60 % > 50 % Indeno (1,2,3-c,d)pyren > 70 % > 50 % LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Hình A.1 – Sơ đồ quy trình tách chiết: Phương pháp chung LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Hình A.2 – Sơ đồ quy trình tách chiết: Phương pháp quy định dầu dừa LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn CHÚ DẪN Toluen (dung môi) Benz(a)antraxen nd Naphtalen (10,2 g/kg) 10 Chrysen (1,0 g/kg) Axenaphten nd 11 Benzo(b)floranten (0,4 g/kg) Floren (2,2 g/kg) 12 Benzo(k)floranten (0,2 g/kg) Phenantren (15,2 g/kg) 13 Benzo(a)pyren (0,2 g/kg) Antraxen (1,4 g/kg) 14 Dibenz(a,h)antraxen nd Floranten (4,2 g/kg 15 Benzo(g,h,i)perylen (0,4 g/kg) Pyren (4,3 g/kg 16 lndeno(1,2,3-c,d)pyren nd nd = không phát Hình A.3 - Sắc đồ mẫu dầu oliu nguyên chất Bảng A.2 – Trình tự bơm Số thứ tự Lọ HPLC Số lần bơm Phương pháp thu nhận Phép xác định hàm lượng PAH Tetrahydrofuran/methanol (50:50, thể tích) Bước sóng quy định Mẫu trắng (9.2) Bước sóng quy định Dung dịch chuẩn, 50 ng/ml (5.15) Bước sóng quy định Dung dịch chuẩn chiết (9.3) Bước sóng quy định Mẫu Bước sóng quy định Dung dịch chuẩn, 50 ng/ml (5.15) Bước sóng quy định Mẫu 2 Bước sóng quy định Mẫu Bước sóng quy định Dung dịch chuẩn, 50 ng/ml (5.15) Bước sóng quy định 10 Mẫu Bước sóng quy định 11 Mẫu Bước sóng quy định 12 Dung dịch chuẩn, 50 ng/ml (5.15) Bước sóng quy định 13 Mẫu Bước sóng quy định 14 Mẫu Bước sóng quy định 15 Dung dịch chuẩn, 50 ng/ml (5.15) Bước sóng quy định LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê Số thứ tự www.luatminhkhue.vn Lọ Số lần bơm Phương pháp thu nhận Tổng thời gian phân tích 23 h Phép khẳng định có mặt PAH Mẫu 1 Phát xạ Mẫu Phát xạ Mẫu Phát xạ Mẫu Phát xạ Mẫu Pháỉ xạ Mẫu Phát xạ Mẫu Phát xạ Mẫu 1 Kích thích Mẫu Kích thích 10 Mẫu Kích thích 11 Mẫu Kích thích 12 Mẫu Kích thích 13 Mẫu Kích thích 14 Mẫu Kích thích Phụ lục B (Tham khảo) Các kết phép thử liên phòng thử nghiệm Phép thử liên phòng thử nghiệm cấp quốc tế ITERG (Pháp) tổ chức thực vào năm 2002/2003, có 19 phịng thử nghiệm tham gia, với mẫu phòng thu hai kết thử, cho kết thống kê [được đánh giá phù hợp với TCVN 6910-2 (ISO 5725-2)] nêu Bảng B Bảng B.1 - Các kết phép thử liên phòng thử nghiệm Mã số PAH Số phịng thử nghiệm Trung bình sr RSD(r) r SR RSD(R) R A Phenatren 15 39,95 4,96 12,4 % 13,89 13,27 33,2 % 37,15 A Antraxen 15 31,60 3,47 11,0% 9,71 10,56 33,4 % 29,55 A Floranten 13 49,70 3,57 7,2 % 9,99 13,68 27,5 % 38,31 A Pyren 13 70,36 4,67 6,6% 13,07 23,47 33,4 % 65,71 A Bezo[a]antraxen 15 30,64 2,21 7,2 % 6,20 A Chrysen 15 34,34 2,39 6,9 % 6,68 10,23 29,8 % 28,63 A Benzo[b]floranten 15 26,00 2,25 8,7 % 6,30 8,61 33,1 % 24,11 A Benzo[k]floranten 14 20,23 1,23 6,1 % 3,44 6,76 33,4 % 18,94 A Benzo[a]pyren 12 18,19 1,23 6,8 % 3,44 4,44 24,4 % 12,42 A Dibenzo[a, h]antraxen 15 18,78 2,46 13,1 % 6,88 7,24 38,5 % 20,27 A Benzo[g,h,i]perylen 13 11,63 1,56 13,5% 4,38 4,11 A Indeno[1,2,3-c,d]pyren 14 12,91 2,88 22,3 % 8,06 5,93 45,9 % 16,61 B Phenantren 17 82,57 4,08 4,9 % 11,42 13,94 16,9 % 39,02 LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 9,56 31,2% 26,78 35,3 % 11,51 Công ty luật Minh Khuê Mã số PAH www.luatminhkhue.vn Số phòng thử nghiệm Trung bình sr RSD(r) r SR RSD(R) R B Antraxen 17 74,72 3,93 5,3 % 10,99 14,30 19,1 % 40,05 B Floranten 17 83,18 3,43 4,1 % 9,60 14,23 17,1 % 39,83 B Pyren 17 112,81 8,25 7,3 % 23,09 18,82 16,7 % 52,69 B Benzo[a]antraxen 17 70,47 3,75 5,3 % 10,51 11,62 16,5 % 32,54 B Chrysen 16 80,96 4,77 5,9 % 13,35 13,97 17,3 % 39,11 B Benzo[b]floranten 17 68,95 4,04 5,9 % 11,30 13,32 19,3 % 37,30 B Benzo[k]floranten 17 55,95 2,72 4,9 % 7,62 B Benzo[a]pyren 17 57,78 3,95 6,8 % 11,07 12,61 21,8% 35,30 B Dibenzo[a, h]antraxen 17 48,92 3,46 7,1 % 9,69 14,43 29,5 % 40,40 B Benzo[g,h,i]perylen 17 41,99 3.05 7,3 % 8,53 16,01 38,1 % 44,82 B lndeno[1,2,3-c,d]pyren 15 45,11 5,77 12,8 % 16,15 18,00 39,9 % 50,39 C Phenantren 17 7,67 0,72 9,4 % 2,01 5,35 69,8 % 14,98 C Antraxen 15 3,59 0,58 16,1 % 1,62 0.86 23,9 % 2,40 C Floranten 15 4,52 0,85 18,9% 2,39 0,98 21,6% 2,73 C Pyren 15 6,12 0,80 13,0% 2,23 1,19 19,4% 3,33 C Benzo[a]antraxen 16 3,79 0,53 13,9% 1,47 0,77 20,4 % 2,16 C Chrysen 15 4,28 0,64 15,0% 1,80 0,97 22,6 % 2,71 C Benzo[b]floranten 16 3,58 0,54 15,2 % 1,52 1,00 27,8 % 2,79 C Benzo[k]floranten 14 2,55 0,41 16,2% 1,16 0,46 18,1 % 1,29 C Benzo[a]pyren 17 3,21 0,40 12,3 % 1,11 1,35 42,1 % 3,78 C Dibenzo[a, h]antraxen 16 2,25 0,36 16,0 % 1,01 1,08 48,1 % 3,03 C Benzo[g,h,i]perylen 16 1,86 0,32 17,1 % 0,89 0,86 48,3 % 2,41 C Indeno[1,2,3-c,d]pyren 15 1,98 0,34 17,3 % 0,96 1,01 51,2 % 2,84 D Phenantren 18 5,48 1,77 32,3 % 4,96 5,07 92,5 % 14,20 D Antraxen - - - - - D Floranten 15 0,61 0,18 29,3 % 0,50 0,40 65,6 % 1,12 D Pyren 16 0,88 0,25 28,8 % 0,71 0,61 69,0 % 1,70 D Benzo[a]antraxen - - - - - - - - D Chrysen 13 0,22 0,04 D Benzo[b]floranten - - - - - - - - D Benzo[k]floranten - - - - - - - - D Benzo[a]pyren - - - - - - - - D Dibenzo[a, h]antraxen 13 0,03 0,03 10,7 % 0,09 0,37 123,8 % 1,04 D Benzo[g,h,i]perylen 12 0,10 0,10 35,7 0,27 0,59 216,9 % 1,64 D lndeno[1,2,3-c,d]pyren - - - - - E Phenantren 16 14,55 1,60 11,0% 4,48 6,09 41,8 % 17,04 E Antraxen 15 1,08 0,24 22,2% 0,67 0,43 39,7 % 1,20 LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 9,80 - - 17,5% 27,45 - - - - Công ty luật Minh Khuê Mã số PAH www.luatminhkhue.vn Số phịng thử nghiệm Trung bình sr RSD(r) r SR RSD(R) R E Floranten 15 4,10 0,48 11,6 % 1,33 1,19 28,9 % 3,32 E Pyren 15 3,69 0,51 13,9 % 1,44 1,00 27,1 % 2,80 E Benzo[a]antraxen 15 0,41 0,13 30,5 % 0,35 0,40 97,6 % 1,12 E Chrysen 15 1,17 0,13 11,0 % 0,36 0,43 36,6 % 1,20 E Benzo[b]floranten 16 0,40 0,06 16,1 % 0,18 0,31 77,7 % 0,87 E Benzo[k]floranten - - - - - E Benzo[a]pyren 17 0,32 0,04 11,2 % 0,10 E Dibenzo[a, h]antraxen - - - - - - - - E Benzo[g,h,i]perylen - - - - - - - - E lndeno[1,2,3-c,d]pyren - - - - - - - - F Phenantren 16 5,03 0,76 15,2 % 2,14 5,42 107,7 % 15,17 F Antraxen 13 0,27 0,06 21,2 % 0,16 0,31 116,4 % 0,88 F Floranten 13 1,63 0,36 22,1 % 1,01 0,93 57,0 % 2,60 F Pyren 17 4,52 0,87 19,2 % 2,43 4,32 95,6 % 12,10 F Benzo[a]antraxen 15 2,50 0,32 12,9 % 0,90 2,79 111,6 % 7,81 F Chrysen 14 5,36 0,42 7,9 % 1,18 4,86 90,7 % 13,61 F Benzo[b]floranten 11 0,64 0,13 20,1 % 0,36 0,95 149,0 % 2,67 F Benzo[k]floranten 15 1,07 0,20 19,0 % 0,57 1,15 107,8 % 3,23 F Benzo[a]pyren 12 0,36 0,08 21,8 % 0,22 0,53 145,8 % 1,47 F Dibenzo[a, h]antraxen 16 1,26 0,71 56,7 % 2,00 1,62 128,4 % 4,53 F Benzo[g,h,i]perylen 14 0,78 0,18 22,9 % 0,50 0,97 124,1 % 2,71 F lndeno[1,2,3-c,d]pyren - - - - - - G Phenantren 14 3192 258 8,1 % 721 948 29,7 % 2653 G Antraxen 14 413 58 14,1 % 163 225 54,6 % 631 G Floranten 13 966 101 10,5 % 284 324 33,5 % 906 G Pyren 15 903 86 9,5 % 240 284 31,4 % 794 G Benzo[a]antraxen 14 247 23 9,1 % 63 134 54,2 % 375 G Chrysen 12 441 16 3,7 % 46 160 36,3 % 448 G Benzo[b]floranten 15 136 11 8,1 % 31 43 31,3 % 119 G Benzo[k]floranten 15 42 11,9 % 14 12 28,1 % 33 G Benzo[a]pyren 15 112 13 11,5 % 36 33 29,7 % 93 G Dibenzo[a, h]antraxen 13 15 12,8 % 12 79,9 % 33 G Benzo[g,h,i]perylen 14 68 11 16,3 % 31 31 46,2 % 88 G lndeno[1,2,3-c,d]pyren 13 29 22,2 % 18 31 108,4 % 88 H Phenantren 15 3,54 0,36 10,2 % 1,01 2,70 76,2 % 755 H Antraxen 15 0,87 0,15 16,8 % 0,41 0,25 29,1 % 0,71 H Floranten 13 1,10 0,13 12,0 % 0,37 0,30 27,6 % 0,85 LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 - - - 0,30 94,9 % 0,85 - - Công ty luật Minh Khuê Mã số PAH www.luatminhkhue.vn Số phịng thử nghiệm Trung bình sr RSD(r) r SR RSD(R) R H Pyren 16 1,69 0,29 16,9 % 0,80 0,90 53,3 % 2,52 H Benzo[a]antraxen 16 0,96 0,11 11,5 % 0,31 0,36 37,6 % H Chrysen 13 0,93 0,11 11,5 % 0,30 0,23 24,2 % 0,63 H Benzo[b]floranten 17 0,95 0,13 13,2 % 0,35 0,40 42,5 % 1,13 H Benzo[k]floranten 17 0,76 0,08 10,3 % 0,22 0,38 50,3 % 1,07 H Benzo[a]pyren 15 0,64 0,07 10,6 % 0,19 0,16 25,7 % 0,46 H Dibenzo[a, h]antraxen 17 0,50 0,08 15,7 % 0,22 0,27 53,6 % 0,75 H Benzo[g,h,i]perylen 16 0,53 0,11 21,6 % 0,32 0,38 70,8 % 1,05 H lndeno[1,2,3-c,d]pyren - - - - - - 101 - - MẪU A: dầu dừa tinh luyện thêm chuẩn hỗn hợp PAH nồng độ trung bình (~ 50 (g/kg) MẪU B: dầu oliu nguyên chất thêm chuẩn hỗn hợp PAH nồng độ cao (~100 (g/kg) Mẫu C: dầu hạt hướng dương tinh luyện thêm chuẩn hỗn hợp PAH nồng độ thấp (~ 50 (g/kg) Mẫu D: dầu hạt cải tinh luyện, không thêm chuẩn Mẫu E: dầu oliu nguyên chất, không thêm chuẩn Mẫu F: bã dầu oliu tinh luyện, không thêm chuẩn Mẫu G: bã dầu oliu thô, không thêm chuẩn Mẫu H: dầu hạt hướng dương tinh luyện thêm chuẩn hỗn hợp PAH nồng độ thấp (~ g/kg) Số phòng thử nghiệm: số lượng phòng thử nghiệm giữ lại sau loại trừ ngoại lệ Trung bình: Giá trị trung bình (g/kg mẫu) sr: Độ lệch chuẩn lặp lại (g/kg) sR: Độ lệch chuẩn tái lập (g/kg) RSD(r): Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại (%) RSD(R): Độ lệch chuẩn tương đối tái lập (%) r: Giới hạn lặp lại (2,8 x sr) R: Giới hạn tái lập (2,8 x sR) -: vượt 50 % liệu ban đầu giới hạn định lượng, nên kết không xử lý THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] TCVN 2625:2007 (ISO 5555:2001) Dầu mỡ động vật thực vật - Lấy mẫu [2] TCVN 6910-1:2001 (ISO 5725-1:1994), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo - Phần 1: Định nghĩa nguyên tắc chung [3] TCVN 6910-2:2001 (ISO 5725-2:1994), Độ xác (độ độ chụm) phương pháp đo kết đo – Phần 2: Phương pháp xác định độ lặp lại độ tái lập phương pháp đo tiêu chuẩn [4] TCVN 7150 (ISO 835), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Pipet chia độ [5] TCVN 7153 (ISO 1042), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Bình định mức [6] TCVN 8488 (ISO 4788), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Ống đong chia độ [7] TCVN 7152 (ISO 7712), Dụng cụ thí nghiệm thủy tinh - Pipet Pasteur sử dụng lần LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162