Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 6760 : 2000 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT - XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG HEXAN KỸ THUẬT Animal and vegetable fats and oids Determination of residual technical hexane content Lời nói đầu TCVN 6760 : 2000 hồn tồn tương đương với ISO 9832 : 1992 TCVN 6760 : 2000 Ban kỹ thuật tiêu chuẩn TCVN/TC/F2 - Dầu mỡ động vật thực vật biên soạn, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đề nghị, Bộ Khoa học, Công nghệ Môi trường ban hành TCVN 6760 : 2000 DẦU MỠ ĐỘNG VẬT VÀ THỰC VẬT XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG HEXAN KỸ THUẬT Animal and vegetable fats and oids Determination of residual technical hexane content Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn qui định phương pháp xác định dư lượng henxan kỹ thuật dầu mỡ động vật thực vật (gọi chất béo) Phương pháp thích hợp cho việc xác định hàm lượng hexan khoảng từ 10 mg đến 1500 mg kilogam chất béo Phương pháp không áp dụng cho loại dầu cá biển Tiêu chuẩn trích dẫn TCVN 6128 :1996 (ISO 661 : 1989), Dầu mỡ động vật thực vật - Chuẩn bị mẫu thử Định nghĩa Trong tiêu chuẩn áp dụng định nghĩa sau : 3.1 Dư lượng henxan kỹ thuật : hàm lượng hidrocacbon bay bị giữ lại chất béo chế biến có dùng đến dung mơi hidrocacbon, xác định phương pháp qui định tiêu chuẩn Dư lượng hexan kỹ thuật biểu thị miligam henxan kilogam mẫu Nguyên tắc Khử hấp thụ hidrocacbon bay cách đun nóng nhiệt độ 80 0C bình đậy kín sau cho thêm chất chuẩn nội Xác định hàm lượng hidrocacbon bay cụ thể khoảng trống phía sắc ký khí sử dụng cột nhồi cột mao dẫn Thuốc thử Chỉ sử dụng thuốc thử phân tích khơng có qui định khác 5.1 Henxan kỹ thuật, có thành phần giống thành phần henxan sử dụng sản xuất công nghiệp, hoặc, khơng sẵn có sử dụng n-henxan Chú thích - Khuyến cáo nên sử dụng henxan kỹ thuật để hiệu chuẩn Thuốc thử thường có hàm lượng n - hexan 50 % (m/m) chứa phần lớn chất đồng phân C chứa hidrocacbon C5 C7 5.2 Chất nội chuẩn, n-heptan Nếu khơng sẵn có n-heptan sử dụng xyclohexan, với điều kiện dung môi (5.1) sử dụng để triết hiệu chuẩn có hàm lượng không đáng kể xyclohexan / n-heptan thành phần khác có thời gian lưu tương tự 5.3 Khí mang, thí dụ : hidro, nitơ heli khơ kỹ có hàm lượng oxi nhỏ 10 mg/kg LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn 5.4 Khí phụ trợ, hidro (99,9 % tinh khiết, khơng chứa tạp chất hữu cơ) khơng khí ( khơng chứa tạp chất hữu cơ) 5.5 Chất béo để hiệu chuẩn, mỡ thực vật khử mùi tinh chế, chứa lượng hexan kỹ thuật không đáng kể Chú thích - Chất béo để hiệu chuẩn không nên chứa peroxit thành phần khác làm phân huỷ tạo thành chất bay mà gây nhầm lẫn với hidrocacbon trình thử nghiệm Thiết bị, dụng cụ Sử dụng thiết bị dụng cụ phịng thí nghiệm thơng thường đặc biệt sau: 6.1 Các lọ nhỏ với lớp màng ngăn, dung tích 20 ml 6.2 Màng ngăn, trơ với chất béo dung môi, làm vật liệu cao su butyl cao su đỏ không chứa cặn dung mơi hidrocacbon có chất lượng thích hợp để chúng khơng nở sử dung, nắp nhơm thích hợp để dùng với lọ (6.1) kẹp gắp 6.3 Kẹp, thích hợp để giữ lọ nhỏ (6.1) 6.4 Xy lanh, có dung tích 10 μl sử dụng để phân tích dư lương hexan kỹ thuật Không rửa chúng dung môi hidrocacbon 6.5 Xy lanh, dung tích 1μl sử dụng để phân tích dư lượng hexan kỹ thuật Khơng rửa chúng dung mơi hidrocacbon 6.6 Xy lanh khí kín, dung tích 1000 μl sử dụng để phân tích dư lượng hexan kỹ thuật Khơng rửa chúng dung mơi hidrocacbon 6.7 Sắc ký khí, có detector ion hố lửa phân tích / ghi, trang bị với là: a) cột thuỷ tinh nhồi, dài m đến m có đường kính khoảng 3,2 mm, nhồi diatomit rửa axit, có cỡ hạt từ 150μm đến 180μm (Chromosorb P NAW 60-80 mesh thích hợp) 1) , phủ 10% squalance pha khác để tách sắc phổ theo yêu cầu, b) cột mao dẫn thuỷ tinh, dài khoảng 30 m có đường kính khoảng 0,3 mm, phủ màng mỏng metylpolyxyloxan 0,2μm Nhiệt độ tiêm phát phải 1000 C nhiệt độ tủ sấy 500 C Nếu sử dụng cột mao dẫn [xem b)], thiết bị phải có hệ thống tiêm tách 1/100 Chú thích - Để phân tích hàng loạt, sắc ký khí buồng khơng gian với tiêm mẫu từ động thích hợp Trong trường hợp tiêm tay khơng thích hợp 6.8 Nồi đun nóng, trang bị kẹp để giữ lọ, điều chỉnh nhiệt độ 80 C ± 20 C Chú thích - Để thực liên tục, nên dùng glyxerol làm môi trường đun nóng 6.9 Máy lắc Lấy mẫu Điều quan trọng phịng thí nghiệm nhận mẫu đại diện không bị hư hỏng thay đổi suốt trình vận chuyển bảo quản Việc lẫy mẫu không quy định tiêu chuẩn Nên lấy mẫu theo TCVN 2625 : 1999 (ISO 5555) 2) Bảo vệ mẫu tránh hấp thụ thêm thất thoát dung môi Chuẩn bị mẫu thử Chuẩn bị mẫu thử theo TCVN 6128 : 1996 (ISO 661), ý tránh bị hấp thụ thêm thất dung mơi Cách tiến hành 9.1 Hiệu chuẩn 1) Chromosorb P NAW 60 - 80 ví dụ sản phẩm phù hợp, dễ tìm thấy thương mại Thơng tin đưa tiện lợi cho người sử dụng tiêu chuẩn khơng xác nhận sản phẩm ISO 2) ISO 5555 : 1999 - Dầu mỡ động vật thực vật - Lấy mẫu LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn 9.1.1 Cân g chất béo hiệu chuẩn (5.5) xác đến 0,01 g cho vào lọ dãy bảy lọ (6.1) Đậy lọ màng ngăn nắp (6.2) Dùng xy lanh (6.4 6.5) lấy lượng dung môi (5.1) qui định bảng cho vào sáu bảy lọ (6.1) để thu nồng độ qui định Không cho dung môi vào lọ thứ bảy Lắc mạnh sáu lọ thêm dung môi máy lắc (6.9) khoảng h nhiệt độ phòng 9.1.2 Cuối giai đoạn dùng xy lanh (6.4) tiêm μl ± 0,1 μl chất nội chuẩn (5.2) vào tất bảy lọ qua màng ngăn Chú thích - Đối với nồng độ hexan từ 10 mg/kg, thích hợp thêm μl chất chuẩn nội (5.2) Bảng - Hàm lượng hexan mẫu hiệu chuẩn Thể tích dung mơi (5.1) cho thêm μl Hàm lượng hexan (mg/kg) sử dụng hexan kỹ thuật n- hexan 0,5 67 66 134 132 268 264 536 528 938 924 10 1340 1320 Trộn thật mạnh lượng chứa lọ khoảng phút cách dùng tay xoay tròn theo mặt phẳng nằm ngang cho chất béo không chạm đến màng ngăn Nếu chất béo chạm đến màng ngăn huỷ bỏ lọ bắt đầu làm lại với phần chất béo hiệu chuẩn khác Chú thích - Nếu chất béo dính vào màng ngăn nhiễm bẩn kim tiêm lẫy mẫu chất nhiễm bẩn truyền sang cột; điều quan trọng sử dụng cột mao dẫn phải tránh nhiễm bẩn Cứ sau khoảng 15 phút (tức thời gian lưu chất hội chuẩn), đặt lọ ngập đến tận cổ bể đun nóng (6.8) 80o C để chất béo pha khí đạt độ cân 9.1.3 Từ lọ làm nóng bể đun nóng 60 phút ± phút, dùng xi lanh (6.6) làm ấm đến 60oC lấy 1000 μl pha khí (vẫn ngun bể đun nóng) Tiêm pha khí lấy vào sắc ký khí 9.1.4 Từ sắc đồ tương ứng với lọ thứ bảy không cho thêm dung môi, tính hàm lượng hexan Ac, biểu thị phần trăm tổng diện tích pic 9.1.5 Từ sắc đồ tương ứng với lọ cho thêm dung mơi, tính hệ số hiệu chuẩn F theo công thức sau: Trong Ac hàm lượng hexan tính 9.1.4; Ais hàm lượng chất nội chuẩn có chất béo hiệu chuẩn (5.5) thêm dung mơi, tính phần trăm tổng diện tích pic At hàm lượng hidrocacbon tổng số, kể chất nội chuẩn có chất béo hiệu chuẩn (5.5) thêm dung mơi, tính phần trăm tổng diện tích pic Wh hàm lượng dung mơi (5.1) có chất béo hiệu chuẩn (5.5) thêm dung môi, tính miligam kilogam; Wis hàm lượng chất nội chuẩn có chất béo hiệu chuẩn (5.5) thêm dung mơi, tính miligam kilogam, tức 680 n-heptan 780 xyclohexan Chú thích - Nếu cho thêm μl 9.1.2 Wis 272 n-heptan 312 xyclohexan Lấy kết đến chữ số thứ ba sau dấu phẩy LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Các hệ số hiệu chuẩn sáu mẫu hiệu chuẩn phải xấp xỉ Tính giá trị trung bình F, khoảng 0,45 heptan Hệ số F tính sử dụng để xác định hàm lượng hexan mức nhỏ 60 mg/kg Nếu giá trị F tìm lọ chứa 0,5 μl dung môi (5.1) thấp đáng kể so với giá trị trung bình F, sai lệch khó khăn việc lấy xác 0,5 μl loại bỏ phép xác định lặp lại phép xác định Hệ số tiêu chuẩn trung bình xyclohexan thơng thường khoảng 0,5 7và n-heptan khoảng 0,45 9.2 Tiến hành xác định 9.2.1 Cân g phần mẫu thử (điều 8), xác đến 0,01 g cho vào lọ (6.1) nhanh tốt Đậy màng ngăn nắp (6.2) 9.2.2 Dùng xy lanh (6.4) tiêm μl chất chuẩn nội (5.2) qua màng ngăn Trộn thật mạnh lượng chứa lọ khoảng phút cách dùng tay xoay tròn theo mặt phẳng nằm ngang cho chất béo không chạm đến màng ngăn Nếu chất béo chạm đến màng ngăn huỷ bỏ lọ bắt đầu làm lại với phần chất béo hiệu chuẩn khác (Xem thích 9.1.2) Đặt lọ ngập đến cổ nồi đun nóng (6.8) nhiệt độ 80o C 60 phút ± phút 9.2.3 Dùng xy lanh (6.6) làm ấm đến 60oC để lấy 1000 μl pha khí để nguyên lọ bể đun nóng Tiêm pha khí lấy vào sắc ký khí 9.2.4 Xác định hàm lượng dư lượng hexan kỹ thuật mẫu từ sắc đồ (xem thí dụ hình 1), đo pic nhận biết hexan sản phẩm phân huỷ 9.3 Số phép xác định Tiến hành xác định liên tục hai phần mẫu thử mẫu thử 10 Biểu thị kết Hàm lượng hexan kỹ thuật mẫu, w, tính miligam kilogam theo cơng thức: Trong A'is hàm lượng chất nội chuẩn, tính phần trăm tổng diện tích pic; A't hàm lượng hydrocacbon tổng số, kể chất nội chuẩn, mẫu thử, tính phần trăm tổng diện tích pic F hệ số hiệu chuẩn trung bình xác định 9.1.5 W'is hàm lượng chất nội chuẩn có mẫu, tính miligam kilogam, tức 680 nheptan 780 xyclohexan Lấy kết cuối trung bình cộng hai phép xác định (9.3), với điều kiện thoả mãn yêu cầu độ lặp lại (xem 11.2) Nếu không thoả mãn yêu cầu độ lặp lại, huỷ bỏ kết tiến hành hai phép xác định phần mẫu thử lấy từ mẫu thử 11 Độ xác 11.1 Kết thử liên phịng thí nghiệm Một thử nghiệm liên phịng thí nghiệm IUPAC thực năm 1985, phịng thí nghiệm tiến hành phép xác định kép, cho kết thống kê bảng (phù hợp với ISO 5725) 3) 11.2 Độ lặp lại Kết hai lần thử riêng rẽ, độc lập thu sử dụng phương pháp, tiến hành vật liệu phịng thí nghiệm, người phân tích dùng loại dụng cụ, tiến hành khoảng thời gian ngắn, phải nằm phạm vị giá trị trung bình bảng 2, chênh lệch tuyệt đối hai kết thử thu không vượt giới hạn lặp lại qui nội suy tuyến tính từ số liệu bảng 3) ISO 5725 : 1986 - Độ xác phương pháp thử -Xác định độ lặp lại độ tái lập phương pháp thử chuẩn thử nghiệm liên phịng thí nghiệm LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 Công ty luật Minh Khuê www.luatminhkhue.vn Chú thích - Nên ý rằng, giá trị độ tái lập R bảng áp dụng trường hợp đặc biệt, so sánh kết xác định độc lập thu hai phịng thí nghiệm Khi thực phương pháp mơ tả tốt so sánh kết cuối (các kết thu từ phép xác định kép) thu hai phịng thí nghiệm, kết R nên đổi xác suất 95% giá trị tới hạn khác nhau, CrD95 áp dụng cho trung bình lần xác định dùng công thức sau: 12 Báo cáo kết Báo cáo kết phải rõ : - phương pháp lấy mẫu (nếu biết); - phương pháp sử dụng; - kết thử nghiệm thu - kiểm tra độ lặp lại, nêu kết cuối thu được; Báo cáo kết phải đề cập đến tất chi tiết chi tiết thao tác không qui định tiêu chuẩn này, tuỳ ý lựa chọn, với chi tiết bất thường khác ảnh hưởng tới kết Báo cáo kết bao gồm tất thông tin cần thiết việc nhận biết đầy đủ nmẫu thử Bảng - Các kết thống kê thử nghiệm liên phịng thí nghiệm Mẫu 1) Số phịng thí nghiệm 16 16 11 11 Số phịng thí nghiệm cịn lại sau trừ ngoại lệ 16 16 10 Giá trị trung bình dư lượng henxan kỹ (mg/kg) 2,95 13,7 104 1048 Độ lệch chuẩn độ lặp lại, sr (mg/kg 0,65 1,70 7,6 71,5 Hệ số biến thiên độ lặp lại (%) 22,4 12,2 7,3 6,8 Độ lặp lại, r = 2,83 sr (mg/kg) 1,8 4,8 21 202 Độ lệch chuẩn độ tái lập,sR (mg/kg) 2,6 4,1 28,4 293 Hệ số biến thiên độ tái lập (%) 89 30 27 28 Độ tái lập, R=2,83 sR (mg/kg) 7,4 12 80 829 Chú thích - Các số liệu mẫu 1cũng tính đến nằm phạmvi áp dụng tiêu chuẩn 1) Mẫu 1:dầu lạc thực phẩm chế biến + 3,3 ppm hexan kỹ thuật Mẫu : dầu lạc chế biến bảo quản + 13,2 ppm hexan kỹ thuật Mẫu : dầu hạt cải thô (đã ép )+100 ppm hexan kỹ thuật Mẫu : dầu hạt cải thô (đã ép) +1000 ppm hexan kỹ thuật LUẬT SƯ TƯ VẤN PHÁP LUẬT 24/7 GỌI 1900 6162 ... tiêu chuẩn 1) Mẫu 1 :dầu lạc thực phẩm chế biến + 3,3 ppm hexan kỹ thuật Mẫu : dầu lạc chế biến bảo quản + 13,2 ppm hexan kỹ thuật Mẫu : dầu hạt cải thô (đã ép )+100 ppm hexan kỹ thuật Mẫu : dầu. .. khí lấy vào sắc ký khí 9.2.4 Xác định hàm lượng dư lượng hexan kỹ thuật mẫu từ sắc đồ (xem thí dụ hình 1), đo pic nhận biết hexan sản phẩm phân huỷ 9.3 Số phép xác định Tiến hành xác định liên... khó khăn việc lấy xác 0,5 μl loại bỏ phép xác định lặp lại phép xác định Hệ số tiêu chuẩn trung bình xyclohexan thơng thường khoảng 0,5 7và n-heptan khoảng 0,45 9.2 Tiến hành xác định 9.2.1 Cân