Cây cỏ mực - Cây cỏ mực bỏ rễ (5kg) - Rửa sạch, trích nóng với cồn lỗng = phương pháp đun hồn lưu - Cắt loại dung mơi với áp suất giảm Cao tổng Chiết lỏng – lỏng - Dung môi Chloroform - Thu hồi dung môi áp suất thấp - Dung môi ethyl acetate - Dung môi n-butanol - Thu hồi dung môi áp suất thấp - Thu hồi dung môi áp suất thấp Cao CMC (19,2g) Cao CMA (18g) Cao CMC (10g) Cao CMA (18g) Cao CMB (35g) - Sắc ký cột silica gel - Sắc ký cột silica gel - Dung môi giải ly: petroleum ether, chloroform - Dung môi giải ly: ethyl acetate, methanol CMC2 CMC1 CMA3 - CHCl3:CH3OH (8:2) - CHCl3:CH3OH (8:2) - Silicagel Rf = 0,7 - Silicagel Rf = 0,39 - Hiện vết màu nâu dd H2SO4 10% C2H5OH 10% C2H5OH Bột màu trắng Tinh thể vảy trắng - Phổ: -NMR, -NMR DEPT, HSQC, HMBC, COSY Echinocystic acid (C H - Hiện vết dd H2SO4 O ) - Phổ: -NMR, -NMR DEPT, HSQC, HMBC, COSY Eclalbasaponin II (C36H58O9) CMA4