Khảo sát thành phần hóa học và cô lập một số hợp chất có trong cây cỏ mực (eclipta prostrata l )họ cỏ mực (asteraceae)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA SƯ PHẠM GÓP PHẦN KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HỐ HỌC VÀ CƠ LẬP MỘT SỐ CHẤT TRONG CÂY CỎ MỰC (ECLIPTA PROSTRATA L ), HỌ CÚC (ASTERACEAE) Luận văn Tốt nghiệp Ngành: SƯ PHẠM HÓA HỌC GV hướng dẫn: ThS Nguyễn Văn Hùng Sinh viên: Nguyễn Hửu Tài Lớp: Sư phạm Hoá học K35 Mã số SV: 2091999 Cần Thơ,2013 LỜI CẢM ƠN  -Qua tám tháng thực đề tài luận văn tốt nghiệp “Góp phần khảo sát thành phần hố học cô lập số chất cỏ mực (Eclipta prostrate L.), họ cúc (Asteraceae)”, nỗ lực, phấn đấu thân, nhận nhiều giúp đỡ tận tình q thầy bạn bè Vì thế, trang này, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến:  Thầy Nguyễn Văn Hùng theo sát suốt q trình nghiên cứu, học tập, ln đơn đốc, động viên dạy tận tình, truyền đạt cho tơi nhiều kinh nghiệm, kiến thức hữu ích việc nghiên cứu  Thầy Ngô Quốc Luân, cô Lê Thị Lộc, cô Thái Thị Tuyết Nhung thầy cô khác Bộ môn quan tâm, giúp đỡ truyền đạt kiến thức thức quý báu suốt thời gian học tập trường để tơi thực tốt đề tài  Cô Nguyễn Thị Thu Thủy - Trưởng Bộ mơn Hóa Học, Khoa Sư Phạm, Trường Đại học Cần Thơ quan tâm, tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ không riêng cá nhân mà tất bạn sinh viên thực đề tài  Cha mẹ, gia đình ủng hộ, động viên cho tinh thần vật chất giúp tơi hồn thành luận văn tốt nghiệp  Tập thể lớp Sư phạm Hóa học khóa 35 – người bên tôi, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi học tập, nghiên cứu, hoàn thành tốt luận văn Xin chân thành cảm ơn! NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN  - NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN  - MỤC LỤC  -LỜI CẢM ƠN i NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ HƯỚNG DẪN ii NHẬN XÉT CỦA CÁN BỘ PHẢN BIỆN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG, SƠ ĐỒ ix DANH MỤC CÁC HÌNH x TÓM TẮT NỘI DUNG ĐỀ TÀI xi LỜI MỞ ĐẦU xii Phần một: TỔNG QUAN I TỔNG QUAN VỀ CÂY CỎ MỰC I.1 Đặc điểm cỏ mực [ 1, 3, 4, 13, 14, 16] I.2 Phân bố sinh thái [3] I.3 Tác dụng dược lý cỏ mực [3] I.3.1 Y học dân gian I.3.1.1 Y học dân gian Việt Nam I.3.1.2 Y học dân gian giới I.3.1.2 Y học hóa sinh đại II CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CỎ MỰC 10 II.1 Các công trình nghiên cứu Việt Nam 10 II.2 Các cơng trình nghiên cứu tiêu biểu giới 11 II.2.1 Thành phần hóa học cỏ mực [3,18,22,30,31,32] 11 II.2.2 Các hợp chất tiêu biểu cô lập từ cỏ mực 12 Phần hai: THỰC NGHIỆM I DỤNG CỤ - HÓA CHẤT 19 I.1 Dụng cụ 19 I.2 Hóa chất 20 II NGUYÊN LIỆU 20 II.1 Q trình thu hái xử lí ngun liệu 20 II.1.1 Thu hái nguyên liệu 20 II.1.2 Xử lí nguyên liệu 20 II.1.3 Xác định độ ẩm nguyên liệu 20 III QUY TRÌNH THỰC NGHIỆM 22 III.1 Sơ đồ điều chế cao Etyl acetat 22 III.2 Các bước tiến hành 23 IV ĐỊNH TÍNH CÁC NHĨM HỢP CHẤT TRONG CỎ MỰC 23 IV.1 Xác định diện steroid 23 IV.2 Xác định diện flavonoid 24 IV.3 Xác định diện alkaloid 24 IV.4 Xác định diện saponin 25 IV.5 Xác định diện tamin 26 IV.6 Xác định diện glycosyde 26 IV.7 Xác định diện coumarine 27 IV.8 Kết định tính 28 V Q TRÌNH CƠ LẬP VÀ TINH CHẾ HỢP CHẤT TRÊN CAO ETYL ACETAT 29 V.1 Quá trình điều chế cao PE 29 V.2 Quá trình điều chế cao Etyl acetat 29 V.3 Chọn hệ dung mơi cho q trình giải ly cột 29 V.4 Cô lập tinh chế hợp chất từ cao Etyl acetat 30 V.5 Xác định tính chất vật lí, cấu trúc hợp chất nhận danh 32 Phần ba: KẾT LUẬN I KẾT LUẬN 38 II KIẾN NGHỊ 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHỤ LỤC Phụ lục Phổ IR hợp chất EPT01 PL1 Phụ lục 2a Phổ 1H-NMR hợp chất EPT01 .PL2 Phụ lục 2b Phổ 1H-NMR hợp chất EPT01 .PL3 Phụ lục 2c Phổ 1H-NMR hợp chất EPT01 .PL4 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất EPT01 PL5 Phụ lục 3a Phổ 13C- NMR mở rộng hợp chất EPT01 PL6 Phụ lục 3b Phổ 13C- NMR mở rộng hợp chất EPT01 PL7 Phụ lục 4a Phổ DEPT kết hợp phổ 13C- NMR hợp chất EPT01 PL8 Phụ lục 4b Phổ DEPT kết hợp phổ 13C- NMR hợp chất EPT01 .PL9 Phụ lục Một số hình ảnh minh họa thành phần hóa học Cỏ mực PL10 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT  -δ : Chemical shift (Độ dịch chuyển hóa học) ν : Tần số dao động (Số sóng) λmax : Bước sóng hấp thu cực đại µM : micromol/lít : Proton Nuclear Magnetic Resonance (Phổ proton) H-NMR 13 C-NMR : Carbon (13) Nuclear Magnetic Resonance (Phổ 13C) Ace : Acetone CDCl3 : CHCl3 hydro (H) deuteri (D) MeOD : MeOH hydro (H) deuteri (D) CHCl3 : Chloroform d : Doublet DEPT : Distortionless Enhancement by Polarization Transfer EtOAc : Ethyl acetate g : Gam J : Hằng số ghép spin m : Multiplet (Mũi đa) mg : Miligam MeOH : Methanol MHz : Mega Hertz NMR : Nuclear Magnetic Resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) PE : Petroleum Ether (Ether dầu hỏa) ppm : Part per million (Phần tỉ) Rf : Retention factor t : Trilet (Mũi ba) s : Singlet (Mũi đơn) Stt : Số thứ tự TLC : Thin layer chromatography (Sắc ký mỏng) DANH MỤC CÁC BẢNG, SƠ ĐỒ  -Bảng Các dụng cụ sử dụng Bảng Các hóa chất sử dụng Bảng Xác định độ ẩm nguyên liệu Bảng Kết định tính thành phần hóa học Cỏ mực Bảng Kết sắc ký trình sắc ký cột Bảng Kết đo nhiệt độ nóng chảy hợp chất EPT01 Bảng Phổ hồng ngoại hợp chất EPT01 Bảng Phổ 13 C–NMR hợp chất EPT01 Bảng So sánh phổ IR EPT01 với 3-O-  -D-glucosyl-brassicasterol Bảng 10 So sánh số liệu phổ NMR hợp chất EPT01 với3-O-  -D-glucosylbrassicasterol Sở đồ Quy trình thực nghiệm [15] Trần Văn Thạnh (1998), Hóa học hữu cơ, Đại học Bách Khoa Tp.HCM [16] Võ Văn Chi (1999), Từ điển thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, trang 33-34 [17] Trần Vũ Thiên (2008), Góp phần nghiên cứu thành phần hóa hoc cỏ mực (Eclipta prostrata L.), Họ cúc (Asteraceae), Luận văn thạc sĩ, Trung tâm học liệu, Đại hoc Cần Thơ [18] Abdel-Kader MS, Bahler BD, Malone S, Werkhoven MC, van Troon F, David, Wisse JH, Bursuker I, Neddermann KM, Mamber SW, Kingston DG (1998), DNAdamaging steroidal alkaloids from Eclipta alba from the suriname rainforest1, J Nat Prod, 61(10):1202-8 [19] Anuradha S Majumdar, Madhusudan N Saraf, Norma R Andrades and Rahul Y Kamble (2008), Preliminary studies on the antioxidant activity of Tribulus terrestris and Eclipta alba, Pharmacognosy Magazine, ISSN: 0973-1296, 102-107 [20] Bohlmann, F et al., Phytochemistry, 1976, 15, 1309 [21] Curtis, R.F et al., Tetrahedron, 1967, 23, 4419 [22] Han Y, Xia C, Cheng X, Xiang R, Liu H, Yan Q, Xu D (1998), Preliminary studies on chemical constituents and pharmacological action of Eclipta prostrate L., Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 23(11), 680-2, 703 [23] Kagan, J., Prog Chem Org Nat Prod., 1991, 56, 87 [24] Karthikumar, S., Vigneswari, K and Jegatheesan, K.(2007), Screening of antibacterial and antioxidant activities of leaves of Eclipta prostrata (L), Scientific Research and Essay, Vol 2(4), pp 101-104 [25] MacEachern, A et al., Tetrahedron,1988, 44, 2403 [26] Mohammad S Radman, Rasheduzzaman Chowdhury, Chowdhury M Hasan and Mohammad A.Rashid (2005), Oleanane Glycosides from Eclipta prostrata, The Dhaka Universitr Journal of Pharmaceutical Sciences,Vol 4, Number 27] Sarg, T.M et al., Sci Pharm, 1981, 49, 262 [28] Shoji Yahara, Ning Ding, and Toshihiro Nohara (1994), Oleanane Glycosides from Eclipta alba, Chem Pharm Bull 42(6), 1336-1338 [29] Shoji Yahara, Ning Ding, Toshhiro Nohara, Kazuo Masuda and Hiroyuki Ageta (1997), Taraxastane Glycosides from Eclipta alba, Phytochemistry, Vol 44, No 1, pp 131-135 [30] Zhang JS, Guo QM (2001), Studies on the chemical constituents of Eclipta prostrate (L.), Yao Xue Xue Bao, 36(1), 34-7 [31] Zhang M, Chen Y (1996), Chemical constituents of Eclipta alba (L.) Hassk, Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 21(8), 480-1, 510 [32] Zhang M, Chen YY, Di XH, Liu M (1997), Isolation and identification of ecliptasaponin D from Eclipta alba (L.) Hassk, Yao Xue Xue Bao, 32(8), 633-4 [33] Wagner H, Geyer B, Kiso Y, Hikino H, Rao GS (1986), Coumestans as the Main Active Principles of the Liver Drugs Eclipta alba and Wedelia calendulacea, Planta Med., 52(5), 370-4 [34] Chia-Fu Chang, Ling-Yi Yang, Shiao-Wei Chang, Yu-Ting Fang, Yean-Jang Lee (2008), Total synthesis of demethylwedelolactone and wedelolactone by Cumediated/Pd (0)-catalysis and oxidative-cyclization, Tetrahedron 64, 3661-3666 PHỤ LỤC Phụ lục Phổ IR hợp chất EPT01 Phụ lục Phổ 1H- NMR hợp chất EPT01 Phụ lục 2a Phổ 1H- NMR mở rộng hợp chất EPT01 Phụ lục 2b Phổ 1H- NMR mở rộng hợp chất EPT01 Phụ lục Phổ 13C- NMR hợp chất EPT01 Phụ lục 3a Phổ 13C- NMR mở rộng hợp chất EPT01 Phụ lục 3b Phổ 13C- NMR mở rộng hợp chất EPT01 Phụ lục 4a Phổ 13C- NMR kết hợp với phổ DEPT hợp chất EPT01 Phụ lục 4b Phổ 13C- NMR kết hợp với phổ DEPT hợp chất EPT01 Phụ lục Một số hình ảnh minh họa thành phần hóa học Cỏ mực Xác định diện Steroid Mẫu đối chứng Thuốc thử LiebermannBurchard Thuốc thử Salkowski Xác định diện Flavonoid Mẫu đối chứng Thuốc thử Shinoda Thuốc thử FeCl3 1% Xác định diện Akaloid Mẫu đối chứng Với Dragendoff Với Wagner Xác định diện Saponin Dựa vào số bọt Thuốc thử Liebermann- Burchard Xác định diện Tamin Mẫu đối chứng Thuốc thử stiasny Thuốc thử (CH3COO)2Pb Thuốc thử FeCl3 1% Xác định diện Glycosyde Mẫu đối chứng Thuốc thử Fehling Thuốc thử Tollens Xác định diện Coumarine Phản ứng mở vòng lacton Phản ứng diazo .. .L? ??I CẢM ƠN  -Qua tám tháng thực đề tài luận văn tốt nghiệp “Góp phần khảo sát thành phần hố học l? ??p số chất cỏ mực (Eclipta prostrate L. ), họ cúc (Asteraceae)? ??, nỗ l? ??c, phấn... Phổ DEPT kết hợp phổ 13C- NMR hợp chất EPT01 PL8 Phụ l? ??c 4b Phổ DEPT kết hợp phổ 13C- NMR hợp chất EPT01 .PL9 Phụ l? ??c Một số hình ảnh minh họa thành phần hóa học Cỏ mực PL10 DANH MỤC CÁC... hành khảo sát thành phần hóa học, l? ??p nhận danh cấu trúc hợp chất tinh khiết từ Cỏ mực 3-O-  -D-glucosyl-brassicasterol Phần TỔNG QUAN I TỔNG QUAN VỀ CÂY CỎ MỰC I.1 Đặc điểm cỏ mực [ 1, 3, 4, 13,