(LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến tính kháng thuốc của vi khuẩn mycobacterium tuberculosis tại thành phố cần thơ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ HẠNH CHI XÁC ĐỊNH MỘT SỐ YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦA ENTEROTOXIGENIC ESCHERICHIA COLI (ETEC) GÂY TIÊU CHẢY TRÊN HEO CON Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã ngành: 62 42 01 07 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC 2015 download by : skknchat@gmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ HẠNH CHI XÁC ĐỊNH MỘT SỐ YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦA ENTEROTOXIGENIC ESCHERICHIA COLI (ETEC) GÂY TIÊU CHẢY TRÊN HEO CON Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG Chuyên ngành: Vi sinh vật học Mã ngành: 62 42 01 07 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hà Thanh Toàn PGS.TS Lý Thị Liên Khai 2015 download by : skknchat@gmail.com Cơng trình hồn thành tại: Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, trường Đại học Cần Thơ Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hà Thanh Toàn PGS.TS Lý Thị Liên Khai Phản biện 1:…………………………………………………… Phản biện 2:…………………………………………………… Phản biện 3:…………………………………………………… Luận án bảo vệ Hội đồng chấm luận án cấp Trường Họp tại……………………………………………………… Vào……giờ…… , ngày……tháng…… năm……… Có thể tìm luận án tại: Thư viện Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, trường Đại học Cần Thơ Trung tâm học liệu trường Đại học Cần Thơ Thư viện Quốc gia download by : skknchat@gmail.com Chương TỔNG QUAN VỀ LUẬN ÁN 1.1 Giới thiệu Enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) nguyên nhân phổ biến gây bệnh tiêu chảy cho heo theo mẹ sau cai sữa, yếu tố độc lực kháng nguyên bám dính độc tố ruột (Nagy and Fekete, 1999, Gyles and Fairbrother, 2010) Phần lớn nghiên cứu E coli khu vực đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) dừng việc thực phản ứng huyết học để phát kháng nguyên O kháng nguyên F, số loại độc tố Trong nghiên cứu nước thời gian qua cho thấy phân bố đặc điểm E coli gây bệnh nói chung ETEC nói riêng ln thay đổi theo vùng địa lý, thời gian lấy mẫu đàn khác Bên cạnh đó, người chăn ni sử dụng kháng sinh để phòng điều trị bệnh cho vật nuôi tạo nên chủng đa kháng với kháng sinh Những chủng gây ảnh hưởng đến sức khoẻ người tiêu dùng, mà ảnh hưởng đến trình điều trị bệnh sau Vì vậy, nghiên cứu giúp phát chủng ETEC gây bệnh heo con, đề kháng khả mang gene kháng kháng sinh chúng, nhằm bảo vệ vật nuôi, nâng cao suất chất lượng thịt theo yêu cầu ngày cao người tiêu dùng súc sản phẩm thịt sạch, an toàn chất lượng để bảo vệ sức khỏe cho người Xuất phát từ vấn đề trên, nghiên cứu “Xác định số yếu tố độc lực enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC) gây tiêu chảy heo Đồng sông Cửu Long” tiến hành 1.2 Mục tiêu Xác định phân bố yếu tố độc lực, đặc tính kháng kháng sinh chủng ETEC phân lập từ heo số tỉnh/thành thuộc ĐBSCL; phân tích số đặc tính di truyền mức độ phân tử chủng ETEC mang kháng nguyên F4 F18 1.3 Ý nghĩa luận án Luận án cơng trình nghiên cứu cách có hệ thống số gene độc lực chủng ETEC từ heo khỏe, heo tiêu chảy, môi trường chăn nuôi, đánh giá phân bố gene mã hóa độc lực theo địa phương, theo nhóm tuổi heo Kết đề kháng nhạy cảm với kháng sinh chủng ETEC để giúp cán thú y chọn loại kháng sinh điều trị có hiệu lực cao cho địa phương download by : skknchat@gmail.com Kết nghiên cứu sở khoa học cho nghiên cứu biến thể kháng nguyên bám dính F4 F18 để chọn chủng ETEC mang kháng ngun thích hợp cho việc sản xuất vaccine phịng bệnh ETEC gây heo khu vực ĐBSCL, đồng thời có giá trị góp phần bổ sung kiến thức thực tế, tư liệu khoa học dùng cho nghiên cứu giảng dạy môn Vi sinh vật học Thú y, Bệnh truyền nhiễm, Miễn dịch học trường Đại học Nông nghiệp 1.4 Những điểm luận án Luận án cơng trình ứng dụng kỹ thuật PCR để xác định xác diện gene mã hóa kháng nguyên bám dính (F4, F5, F6, F18, Intimin, AIDA-I), độc tố ruột (LT, STa, STb, EAST1) gene mã hóa khả kháng kháng sinh chủng ETEC gây bệnh tiêu chảy heo theo mẹ heo sau cai sữa khu vực ĐBSCL Vì vậy, kết nghiên cứu làm sở để xác định vai trò ETEC gây tiêu chảy heo hiệu phòng chống bệnh khu vực Kết luận án cung cấp thông tin khoa học phân bố gene liên quan đến độc lực đề kháng kháng sinh chủng ETEC phân lập từ trại chăn nuôi heo khu vực ĐBSCL Phân tích mức độ tương đồng gene faeG, fedA quan hệ di truyền chủng ETEC gây bệnh tiêu chảy heo ĐBSCL Bố cục luận án Luận án gồm 147 trang (không kể phần phụ lục), chia thành phần sau: Chương 1: Tổng quan luận án (3 trang); Chương 2: Tổng quan tài liệu (32 trang); Chương 3: Nội dung và phương pháp nghiên cứu (20 trang); Chương 4: Kết thảo luận (76 trang); Chương 5: Kết luận đề xuất (2 trang); Tài liệu tham khảo (14 trang) Luận án có 40 bảng, 45 hình Tổng tài liệu tham khảo 182, gồm 25 tài liệu tiếng Việt, 153 tài liệu tiếng Anh tài liệu tham khảo từ trang Web Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Vi khuẩn Escherichia coli Vi khuẩn E coli Theodore Escherich - người Đức mô tả lần vào năm 1885 sau xem nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy người động vật (Levine, 1987) Đây vi khuẩn thường trú đường tiêu hóa động vật người Vi khuẩn E coli gây bệnh cho gia súc lứa tuổi, đặc biệt gia súc sơ sinh (Hirsh, 2004) 2.1.1 Đặc điểm hình thái download by : skknchat@gmail.com E coli trực khuẩn đường ruột, Gram âm, vi khuẩn hình que nhỏ, kích thước dài ngắn tùy thuộc vào mơi trường ni cấy, đường kính khoảng µm Khơng hình thành bào tử, tạo giáp mơ mỏng, có lơng quanh thể Khuẩn lạc mơi trường đặc phát triển hồn tồn sau ngày ni cấy Khuẩn lạc có nhiều dạng khác từ nhẵn, nhăn nheo có bìa trịn, nhăn nheo nhầy Một vài chủng có khả gây dung huyết (Fairbrother and Gyles, 2006) 2.1.2 Đặc tính ni cấy E coli thuộc loại trực khuẩn hiếu khí yếm khí tùy tiện Nhiệt độ thích hợp cho chúng phát triển 37oC, pH thích hợp 7,2-7,4 Chúng mọc dễ dàng MacConkey (MC), Eosin Methylene Blue (EMB), có khả sản sinh dung huyết α β (Quinn et al., 2004) 2.1.3 Đặc tính sinh hóa Kết kiểm tra Indole Methyl Red (MR) E coli dương tính, Voges Proskauer (VP) Citrate âm tính, hồn ngun nitrate thành nitrite, khơng sử dụng ure Trên môi trường Kligler Iron Agar (KIA): E coli lên men đường glucose lactose, phần thạch nghiêng thạch đứng chuyển sang màu vàng, làm nứt thạch; không sinh H2S, (Quinn et al., 2004) 2.2 Phân loại vi khuẩn E coli gây bệnh Vi khuẩn E coli thuộc Enterobacteriales, họ Enterobacteriaceae, giống Escherichia (Hirsh, 2004) E coli gây bệnh chia hai nhóm: E coli gây bệnh đường ruột E coli gây bệnh đường ruột Trước đây, E coli gây bệnh đường ruột chia thành phân nhóm dựa khả gây bệnh chúng: Enteropathogenic E coli (EPEC), enterohaemorrhagic E coli (EHEC), enteroinvasive E coli (EIEC), enteroaggregative E coli (EAEC), enterotoxigenic E coli (ETEC) diffusely adherent E coli (DAEC) (Kaper et al., 2004) Gần đây, xuất thêm hai phân nhóm mới, adherent invasive E coli (AIEC) cho có liên quan với bệnh Crohn, không gây tiêu chảy shiga toxin (Stx) producing enteroaggregative E coli (STEC) gây ổ dịch E coli Đức vào năm 2011 (Clements et al., 2012) 2.3 Giới thiệu ETEC heo ETEC xâm nhập vào động vật đường tiêu hóa, diện đủ số lượng, bám vào thụ thể biểu mô ruột non lớp biểu mô phủ chất nhầy, sau phát triển nhanh chóng để đạt số lượng lớn khoảng 109 vi khuẩn/ gram đoạn không tràng đến hồi tràng ETEC bám chặt với biểu mơ sản xuất độc tố ruột, kích thích xuất download by : skknchat@gmail.com mức nước chất điện giải vào lòng ruột Kết dẫn đến tiêu chảy chất lỏng dư thừa từ ruột non xuống không hấp thụ lại ruột già ETEC nguyên nhân tiêu chảy nghiêm trọng, dẫn đến nước, mệt mỏi, chuyển hóa nhiễm acid, gây chết (Gyles and Fairbrother, 2010) 2.4 Các yếu tố độc lực ETEC Những nghiên cứu gần cho yếu tố bám dính ETEC sinh heo K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6), F41 F18 Ngoài nhà khoa học phát thêm loại bám dính khác (AIDA-I) chủng ETEC VTEC có mang kháng ngun bám dính F18 (Mainil et al., 2002, Ngeleka et al., 2003) Sau bám vào thụ thể tế bào biểu mô ruột, chủng ETEC sản xuất độc tố đường ruột, độc tố chịu nhiệt (STa, STb EAST1) độc tố chịu nhiệt (LT) (Gyles and Fairbrother, 2010) Những chủng ETEC dương tính với F4 chủng phổ biến heo theo mẹ bị tiêu chảy, chúng sản xuất độc tố ruột LT STb, chủng dương tính với F5, F6 F41 sản xuất chủ yếu STa, vài chủng sản sinh STb, chủng gây bệnh tiêu chảy chủ yếu heo từ - ngày tuổi, heo lớn chiếm tỷ lệ thấp (Fairbrother and Gyles, 2006) Ngoài chủng ETEC phân lập từ heo sơ sinh cai sữa bị tiêu chảy có chứa độc tố STb hay STb: EAST1 dương tính với AIDA-I (Ngeleka et al., 2003) Kháng nguyên bám dính F4 F18 chiếm tỷ lệ cao đóng vai trị quan trọng trình gây bệnh heo (Frydendahl, 2002; Zhang et al., 2007) 2.5 Tính kháng kháng sinh E coli có khả kháng lại nhiều loại kháng sinh, đặc biệt loại kháng sinh sử dụng phổ biến thức ăn chăn nuôi điều trị bệnh gia súc (Ahmed et al., 2009) Gần đây, chủng E coli có tính đa kháng với nhiều loại kháng sinh ngày tăng, đặc biệt với kháng sinh thường sử dụng thuộc họ β-lactam, cephalosporin quinolones hệ (Văn Bích ctv., 2009) Sự kháng thuốc vi khuẩn chủ yếu gene nằm plasmid qui định Nhờ gene kháng thuốc mà vi khuẩn có khả chống lại tác dụng kháng sinh Sự đề kháng bền vững truyền sang hệ sau qua trình di truyền (Kenneth, 2012) 2.6 Tình hình nghiên cứu nước nước ETEC gây bệnh tiêu chảy heo download by : skknchat@gmail.com Các nghiên cứu nước Cù Hữu Phú ctv (2003), Hồ Soái Đinh Thị Bích Lân (2005), Trương Quang (2005), Trịnh Quang Tuyên (2006), Đỗ Ngọc Thúy ctv (2008) Võ Thành Thìn (2012) ngồi nước Frydendahl (2002), Vũ Khắc Hùng Pilipcinec (2003), Wang et al (2006), Zhang et al (2007), Lee et al (2008) Chae et al (2012) thời gian qua cho thấy phân bố đặc điểm E coli gây bệnh đường ruột nói chung ETEC nói riêng ln thay đổi theo thời gian vùng địa lý Sự thay đổi có ảnh hưởng lớn đến hiệu biện pháp phòng chống bệnh cho đàn heo vùng địa lý-kinh tế khác Riêng khu vực ĐBSCL, E coli xác định số nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy thường xảy heo theo mẹ sau cai sữa (Lý Thị Liên Khai, 2001) Chỉ có nghiên cứu chuyên sâu E coli gây bệnh heo ĐBSCL Nguyễn Khả Ngự Lê Văn Tạo (1996); Lý Thị Liên Khai (2001), Bùi Trung Trực ctv (2004) ỏi so với khu vực chăn nuôi heo khác nước Chương NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Nội dung nghiên cứu 3.1.1 Phân lập định danh vi khuẩn E coli từ phân heo khỏe, heo tiêu chảy môi trường Phân lập xác định tỷ lệ nhiễm E coli từ phân heo khỏe, heo tiêu chảy môi trường Định danh chủng ETEC phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính 3.1.2 Xác định yếu tố độc lực ETEC Xác định diện số gene mã hóa kháng ngun bám dính F4, F5, F6, F18, Intimin AIDA-I Xác định diện số gene mã hóa độc tố STa, STb, LT EAST1 Thí nghiệm động vật thí nghiệm chuột heo sau cai sữa 3.1.3 Xác định đặc tính đề kháng kháng sinh ETEC Xác định kháng kháng sinh ETEC Xác định gene kháng kháng sinh 3.1.4 Phân tích đặc tính di truyền mức độ phân tử số chủng ETEC Phân tích trình tự nucleotide gene faeG fedA mã hóa tiểu phân tử FaeG, FedA kháng nguyên bám dính F4 F18 Xác định quan hệ di truyền chủng F4 F18 ETEC download by : skknchat@gmail.com 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu Địa điểm lấy mẫu: nông hộ/ trang trại tỉnh/ thành thuộc ĐBSCL (An Giang, Bến Tre, Đồng Tháp, Sóc Trăng, Vĩnh Long Thành phố Cần Thơ) Phịng thí nghiệm: (1) phịng thí nghiệm Vi khuẩn học, Bộ môn Thú y, Đại học Nông nghiệp Kỹ thuật Tokyo, Nhật Bản; (2) Phịng thí nghiệm Vệ sinh Thực phẩm, Bộ môn Thú Y, khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng, Đại học Cần Thơ; (3) Phịng thí nghiệm Sinh học phân tử, Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, Đại học Cần Thơ; (4) Công ty Macrogen, Hàn Quốc Thời gian nghiên cứu: 12/2011 – 7/2014 3.3 Phương pháp nghiên cứu 3.3.1 Phân lập định danh vi khuẩn E coli từ phân heo khỏe, heo tiêu chảy môi trường 3.3.1.1 Đối tượng nghiên cứu: Từ tháng 11/2011 đến 12/ 2013, mẫu phân thu thập từ heo theo mẹ sau cai sữa mắc bệnh tiêu chảy, mẫu phân heo khỏe mẫu môi trường 3.3.1.2 Phương pháp a) Điều tra trạng ni tình hình bệnh heo Các nội dung cần thu thập điều tra ghi nhận theo phiếu điều tra b) Lấy mẫu Tổng số mẫu phân thu thập 2.011, có 1.272 mẫu từ heo tiêu chảy, 199 mẫu heo khỏe 540 mẫu môi trường Mẫu phân: dùng tăm vô trùng xoay nhẹ hướng biểu mô niêm mạc trực tràng heo bị tiêu chảy nghi E coli, cho tăm bơng có mẫu phân vào lọ vơ trùng có chứa mơi trường vận chuyển cary-blair, bảo quản lạnh vận chuyển phịng thí nghiệm Số mẫu từ phân tiêu chảy tiến hành lấy 2-3 mẫu/ đàn trại lấy 3-5 đàn Riêng mẫu phân heo khỏe lấy mẫu đại diện/ trại Mẫu môi trường Mẫu nước uống: trại/ hộ dân có heo tiêu chảy, rửa núm uống bỏ giọt nước đi, dùng bọc nilon vô trùng lấy 1.000 ml, bảo quản lạnh 4-8oC đem phịng thí nghiệm phân lập ngày Mẫu ổ úm/ sàn chuồng: dùng tăm vô trùng quét nhẹ lên chuồng, chổ khô ráo, khơng dính phân, cho tăm bơng vào mơi trường chun chở, bảo quản lạnh download by : skknchat@gmail.com c) Nuôi cấy, phân lập định danh vi khuẩn E coli Nuôi cấy phân lập E coli dựa theo quy trình Barrow and Feltham (2003) Đặc tính sinh hóa E coli mơi trường KIA xét nghiệm IMViC (Quin et al., 2004; Gyles and Fairbrother, 2010) d) Định danh chủng ETEC phản ứng huyết học Chọn 1.141 chủng phân lập từ 1.141 mẫu phân heo tiêu chảy; 197 chủng từ phân heo khỏe 220 chủng từ môi trường Phản ứng ngưng kết tìm chủng F4 (K88), F5 (K99) F6 (987P) theo Moon et al (1976) Moon et al (1977) 3.3.2 Xác định gene mã hóa yếu tố độc lực ETEC 3.3.2.1 Xác định gene mã hóa số kháng ngun bám dính (F4, F5, F6, F18, Intimin, AIDA-I) độc tố ruột (STa, STb, LT, EAST1) vi khuẩn ETEC 390 chủng ETEC dương tính với phản ứng ngưng kết nhanh phiến kính chọn để tiến hành phản ứng PCR, gồm có 330 chủng từ phân heo tiêu chảy, 14 chủng từ heo khỏe 46 chủng từ môi trường thu thập từ tỉnh/ thành thuộc ĐBSCL Ly trích DNA mẫu phương pháp đun sôi (Costa et al., 2010) Gene mã hóa cho loại kháng ngun bám dính độc tố vi khuẩn ETEC xác định phản ứng PCR PCR phát gene faeG, fanA, fasA, fedA, eaeA, aidA-I mã hóa kháng ngun bám dính F4, F5, F6, F18, Intimin AIDA-I; độc tố LT, STa, STb EAST1 mã hóa gene elt, estA, estB astA Trình tự cặp mồi dùng để xác định yếu tố bám dính độc tố ETEC dựa theo Boerlin et al (2005), Ojeniyi et al (1994), Frank et al (1998); Fagan et al (1999) Vu-Khac et al (2007) Tổng thể tích thành phần phản ứng PCR 25 µl, hóa chất sử dụng công ty Promega (Mỹ) sản xuất 3.3.2.2 Thử nghiệm động vật thí nghiệm a) Kiểm tra độc lực chủng ETEC chuột bạch theo phương pháp Picard et al (1999) b) Kiểm tra độc lực chủng ETEC qua tiêm truyền cho heo Sử dụng chủng F4 F18 gây bệnh chuột để kiểm tra độc lực heo sau cai sữa, heo kiểm tra không mang kháng thể kháng F4 F18 phương pháp ELISA gián Verdonck et al (2002) Tiêm truyền theo dõi heo thí nghiệm thực theo phương pháp Verdonck et al (2002) 3.3.3 Xác định đặc tính kháng kháng sinh chủng ETEC download by : skknchat@gmail.com Bảng 4.3: Phân bố chủng ETEC F4, F5 F6 phân heo môi trường Heo tiêu chảy (n=1.141) SMDT Tỷ lệ (mẫu) (%) F4 (K88) 233 20,42 F5 (K99) 96 8,41 F6 (987P) 66 5,78 p0,05 Môi trường (n=220) SMDT Tỷ lệ (mẫu) (%) 20 9,09 14 6,36 12 5,45 p>0,05 Thống kê p0,05 p>0,05 p>0,05 NL: nước lợ; NN: nước ngọt; SMĐD: Số mẫu định danh SMĐD F4 (K88) 185 44 (23,78) 371 70 (18,87) p>0,05 F5 (K99) (4,32) 33 (8,89) p>0,05 F6 (987P) (2,70) 17 (4,58) p>0,05 4.1.2.4 Phân bố chủng ETEC F4, F5 F6 phân heo tiêu chảy theo quy mô đàn Bảng 4.6: Phân bố chủng ETEC F4, F5 (K99), F6 (K99) heo tiêu chảy theo quy mô đàn Quy mô đàn Nhỏ * Vừa** Lớn*** SMĐD F4 (K88) F5 (K99) F6 (K99) SMDT Tỷ lệ (%) SMDT Tỷ lệ (%) SMDT Tỷ lệ (%) 542 98 18,08 42 7,75 31 5,72 310 71 22,90 29 9,35 23 7,42 289 64 22,15 25 8,65 12 4,15 p>0,05 p>0,05 p>0,05 *: (100 nái), SMĐD: Số mẫu định danh Sự phân bố chủng ETEC mang kháng nguyên F4, F5 F6 heo tiêu chảy nuôi quy mô nhỏ nông hộ quy mô vừa hay quy mô lớn khác khơng có ý nghĩa thống kê Vì phân bố chủng ETEC liên quan tới quy trình chăn ni điều kiện vệ sinh môi trường quy mô chuồng trại 4.2 Xác định gene mã hóa yếu tố độc lực chủng ETEC Bảng 4.7: Phân bố gene mã hóa độc lực chủng ETEC phân heo mơi trường Độc tố Kháng ngun bám dính Gen độc lực mã hóa F4 F5 F6 F18 F41 Intimin AIDA - I STa STb LT EAST1 Heo tiêu chảy (n=330 ) SMDT Tỷ lệ (%) (mẫu) 90 27,27 22 6,67 33 10,00 66 20,00 2,73 23 6,97 12 3,64 p0,05 7,14 21,43 0,00 55,76 p0,05 Môi trường (n=46 ) SMDT Tỷ lệ (%) (mẫu) 11 23,91 4,35 15,22 8,70 4,35 4,35 2,17 p0,05 p>0,05 10 (18,18) p>0,05 (1,82) p>0,05 (3,64) p>0,05 (5,45) p>0,05 Sự phân bố gene mã hóa kháng ngun bám dính chủng ETEC phân lập từ tỉnh/ thành có khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Nhưng gene mã hóa kháng nguyên AIDA-I chiếm tỷ lệ thấp, đặc biệt không tìm thấy tỉnh An Giang Đồng Tháp Các số liệu cho thấy chủng ETEC mang kháng nguyên F4 F18 xuất nhiều phân heo tiêu chảy tỉnh/thành thuộc ĐBSCL Kết giống với kết nghiên cứu Võ Thành Thìn (2012) Nguyen Thi Lan et al (2009), họ cho thấy chủng ETEC mang gene qui định F4 F18 chiếm tỷ lệ cao 4.2.1.2 Phân bố gene mã hóa kháng ngun bám dính chủng ETEC phân heo tiêu chảy theo tuổi Kết cho thấy chủng ETEC phân lập từ heo theo mẹ tiêu chảy mang gene mã hóa F4 tìm thấy với tỷ lệ cao Kết tương tự với báo cáo Lý Thị Liên Khai (2001), Vũ Khắc Hùng ctv 13 download by : skknchat@gmail.com (2005a) Võ Thành Thìn (2012), tác giả cho F4 đóng vai trị gây bệnh quan trọng heo theo mẹ Bảng 4.9: Phân bố gene mã hóa kháng ngun bám dính chủng ETEC phân heo tiêu chảy theo tuổi Các chủng mang gene mã hóa yếu tố bám dính Gene mã hóa KNBD F4 F5 F6 F18 F41 Intimin AIDA-I Ít gene KNBD Heo theo mẹ (n=162) SMDT 56 16 17 20 11 116 Tỷ lệ (%) 34,57a 9,88b 10,49b 12,35b 3,09c 6,79b 1,85c 71,60 Heo sau cai sữa (n=168) SMDT 34 16 46 12 105 Tỷ lệ (%) 20,24a 3,57c 9,52b 27,38a 2,38c 7,14b 5,36b,c 62,50 Thống kê p0,05 p>0,05 KNBD: kháng nguyên bám dính; SMDT: số mẫu dương tính Các giá trị cột với chữ số mũ khác khác có ý nghĩa thống kê (p0,05 EAST1 90 55,56a 94 55,95a p>0,05 Ít gene độc tố 110 67,90 106 63,10 Các giá trị cột với chữ số mũ khác khác có ý nghĩa thống kê (p