Chương 4 : Kỹ thuật xử lý thực phẩm không sử dụng nhiệt 4.1 Kỹ thuật trường điện từ dạng xung high tensity pulsed electric field PEF 4.1.1 Mở đầu Kỹ thuật trường điện từ dạng xung là p
Trang 1Chương 4 : Kỹ thuật xử lý thực phẩm
không sử dụng nhiệt
4.1 Kỹ thuật trường điện từ dạng xung (high tensity
pulsed electric field (PEF))
4.1.1 Mở đầu
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung là phương pháp
bảo quản thực phẩm không sử dụng nhiệt mà cơ
sở của nó là sử dụng xung điện để loại bỏ các vi
sinh vật gây bệnh và cũng như kiểm soát bào tử
trong thực phẩm
Công nghệ này không sử dụng nhiệt nên giữ được
các tính chất của thực phẩm như giá trị cảm quan,
dinh dưỡng ít biến đổi và nhất là kiểm soát an toàn
thực phẩm.
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
Mở đầu
Dòng điện được sử dụng trong quá trình thanh trùng sữa
vào đầu thế kỷ 19 do công trình của Anderson and
Finkelstein, 1919; Fetterman, 1928; Getchell, 1935 bằng
cách cho dòng điện tách dụng trực tiếp vào dung dịch lỏng
và thấy rằng nó có tác dụng tiêu diệt một vài loại vi khuẩn
bacteria
- 1949, Flaumenbaun đã thông báo về sử dụng trường điện
từ dạng xung trên thực phẩm, nhưng tác giả không nghiên
cứu về bảo quản thực phẩm và vô hoạt vi sinh vật, tác giả
đềcập đến sựtăng tính bán thấm của màng tế bào, tạo
điều kiện dễ dàng cho quá trình ép dịch quả, đây cũng là
một phát hiện lớn cho các ứng dụng của kỹ thuật trường
điện từ dạng xung sau này
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
Mở đầu
- Sales and Hamilton, 1967, 1968 đã công bố nhiều công
trình ứng dụng trường điện từ dạng xung liên quan đến vi
sinh vật, các vi sinh vật bị thủng các lỗ nhỏ trên màng tế
bào, và làm mất tính bán thấm của chúng, các lỗ này không
thể phục hồi lại được và làm chết vi sinh vật Các thông số
ảnh hưởng đến việc đánh thủng lỗ trên màng vi sinh vật là
cường độ dòng điện, điện thế đầu vào, cường độ điện
trường, thời gian tác động, hình dạng và kích thước của vi
sinh vật
- Trên lĩnh vực di truyền học, Zimmermann et al., 1974 đã
phát triển một phương pháp dung hợp tế bào dựa trên kỹ
thuật xung điện Kỹ thuật dùng trường điện từ dạng xung
đánh thủng màng tế bào và gắn kết các lỗ trên màng lại,
làm dung hợp hai tế bào vào nhau
Trang 2high tensity pulsed electric field (PEF)
Mở đầu
- Tháng 7/1995, The Food and Drug
Administration (FDA) không phản đối cho sử
dụng kỹ thuật trường điện từ dạng xung,
được phát triển bới công ty PurePulse, để
tiêu diệt vi sinh vật trong dịch lỏng bơm
kỹ thuật trường điện từ dạng xung ở qui mô
công nghiệp
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.2 Nguyên lý của kỹ thuật trường điện từ
dạng xung (PEF)
- ĐN: Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
dựa trên khả năng trường điện từ dạng xung
có cường độ cao làm biến dạng màng tế
bào, kết quả là vi sinh vật bị chết.
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
- Nguyên lý: thực phẩm được đặt giữa hai điện cực dẫn
điện, hai điện cực này được lắp trên vật liệu không dẫn
điện, do đó không có hiện tượng truyền điện từ điện cực
này sang điện cực kia Cung cấp xung dòng điện có hiệu
điện thế cao sẽ sinh ra trường điện từ dạng xung có
cường độ cao Xung này tác động vào thực phẩm ở giữa
Trang 3Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.3 Cấu trúc của hệ thống trường điện từ
Phòng
xử lý Dòng ra
Dòng vào
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.3 Cấu trúc của hệ thống trường điện từ dạng xung
- Máy phát xung điện : có nhiệm vụ cung cấp xung điện hiệu điện thế
cao, có hình dạng xung, độ dài và biên độ xung khác nhau Bộ phận
thành một chiều, bộ phận tích trữ điện thường là một hoặc nhóm tụ
điện và bộ phận phóng xung Hiệu điện thế trong công nghiệp thường
dùng từ 220 volts đến 440 volts, khi đi qua hệ thống máy phát, dòng
điện được đưa lên khoảng 20 kV đến 60 kV Điện thế được nạp vào
tụ và thực hiện quá trình tạo xung gián đoạn bằng các thiết bị điều
khiển
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.3 Cấu trúc của hệ thống trường điện từ dạng xung
- Phòng xử lý thực phẩm : 2 bản cực được làm từ các
vật liệu có độ bền điện môi cao đặt trên các tấm đỡ
không dẫn điện các điện cực thường là vàng, platinun,
polyacetylen, cách bố trí hai cặp cực có thể song song,
dạng chữ U, dạng xoắn, dạng hội tụ và ống thuỷ tinh
xoắn
Trang 4high tensity pulsed electric field (PEF)
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
Trang 5Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.3 Cấu trúc của hệ thống trường điện từ
dạng xung
- hệ thống bơm dòng lỏng : sử dụng bơm
xử lý
- Hệ thống kiểm soát và hiển thị : hệ thống
máy tính và các thiết bị điều khiển tạo xung
điện,
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.4 Cơ chế vô hoạt vi sinh vật của PEF
- Vi sinh vật có màng tế bào dùng để trao đổi chất có chọn
lọc với môi trường bên ngoài, nhờ vào màng tế bào mà
chúng có thể sống sót ở trạng thái bình thường thì tồn tại
các lớp điện tích trước và sau màng tế bào tạo nên sự
đồng đều về áp suất giữa hai môi trường trong và ngoài tế
bào
Trang 6high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.4 Cơ chế vô hoạt vi sinh vật của PEF
- khi đưa một trường điện từ tích tụ điện tích trong màng tế trong và ngoài màng tế bào, vào lực điện trường do chênh này tác động vào màng tế bào, làm cho màng tế bào biến dạng, tại một số vị trí của màng tế bào mỏng đi và vượt
bị thủng thành các lỗ nhỏ Điện thế đánh thủng màng tế bào cần đạt đến độ chênh lệch khoảng 1V giữa bên trong và bên ngoài màng tế bào
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.4 Cơ chế vô hoạt vi sinh vật của PEF
- phụ thuộc vào hướng tác động của điện trường lên vi
sinh vật mà nó làm biến dạng màng và phá hỏng chúng,
khi tạo thành các lỗ nhỏ không thể khắc phục được thì
chúng không còn chức năng bán thấm nữa và làm mất
cân bằng áp suất thẩm thấu dẫn đến hư hỏng tế bào
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.4 Cơ chế vô hoạt vi sinh vật của PEF
-Theo một số thuyết thì sự thay đổi màng bán thấm dẫn đến sự thay đổi các yếu tố khác như là pha nội tại chứa lipid (Sugar anh chuyển hoá giữa hai lớp phân tử Lipid (Deuticke et al., 1983), làm đến sự chuyển hoá của pore kị nước thành ưu nước và mở ra, biến tính của các kênh prôtêin nhạy cảm (Tsong, 1992)
-Do tác động của các điện tích, nên các kênh mở ra đến mức chúng vượt quá kích thước giới được , chúng sẽ mở ra vĩnh viễn
và tạo thành các lỗ trên thành tế bào
Sơ đồ màng phospholipid kép
Trang 7Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5 Các yếu tố ảnh hưởng đến kỹ thuật điện từ
trường dạng xung
4.1.5.1 yếu tố kỹ thuật : cường độ điện trường và
thời gian xử lí là hai yếu tố ảnh hưởng nhiều nhất
đến quá trình xử lí pef
- cường độ điện trường : cường độ điện trường
tạo ra giữa 2 môi trường : trong và ngoài tế bào
khoảng 1V, sẽ phá hỏng thành tế bào Chỉ có
cường độ của trường điện từ và thời gian xử lí mới
làm hư hỏng màng tế bào, còn các yếu tố khác
như vùng xử lí, hằng số điện môi, cường độ dòng
điện hoặc công suất không đóng vai trò làm hư
hỏng màng tế bào
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5.1 yếu tố kỹ thuật
-thời gian xử lí: kỹ thuật xung điện sử dụng các
dạng xung ngắn để tránh tăng nhiệt và những phản
ứng thuỷ phân không mong muốn thời gian xử lí
được tính bằng chiều rộng xung nhân với số xung
-Thời gian xử lí khoảng từ 1µ giây đến 5µ giấy là
đủ để làm vô hoạt tế bào, vì rằng với quá trình xử lí
10 nsec trong xung điện trường đã thiết lập được
điện thế chênh lệch
-Sau khi các pore tạo thành, thì với sự tác động
của xung trong khoảng 1µ giây đến 5µ giấy làm
cho vi sinh vật không kịp sửa chữa những hư hỏng
trên thành tế bào
yếu tố kỹ thuật :
- hình dạng xung : xung vuông có đường tắt xung dạng đường cong
mũ có tác dụng mạnh hơn đến sự làm thủng lỗ trên thành tế bào.
Xung tắt dần dạng mũ Xung vuông
xung lưỡng cực vuông xung lưỡng cực dạng mũ xung xoay chiều
Trang 8high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5.2 Yếu tố sinh học
-kích thước và hình dạng của tế bào :
Vc = f.Ec.a.cosυ trong đó-Vc là điện thế đánh thủng,
-a : bán kính của tế bào,
-Ec : điện trường tới hạn yêu cầu
-υ : là góc nghiêng của màng tế bào với điện trường
-f là hệ số = 1,5 cho hình cầu và f = l/(l-d/3) trong đól: chiều dài của vi sinh vật
và d: đường kính của vi sinh vật
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5.2 Yếu tố sinh học
- dạng vi sinh vật: hình cầu, ô van, trụ, nấm men nhạy
cảm nhất với xử lí PEF
Dễ bị tiêu diệt nhất
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5.2 Yếu tố sinh học
- các vi khuẩn gram (-) cũng nhạy cảm
hơn các vi khuẩn gram(+)
Thành tế bào vi khuẩn Gram (+) Thành tế bào vi
khuẩn Gram (-)
Lớp peptidoglucan
Trang 9Yếu tố sinh học (tt)-trạng thái sinh lí của vi
sinh vật: pha log
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5.2 Yếu tố thực phẩm
- Thành phần các chất : sự đồng đều về kích thước và
thành phần sẽ ảnh hưởng đến hằng số điện môi của thực
phẩm và ảnh hưởng đến quá trình xử lí pef khá nhiều Sự
có mặt của chất béo, prôtêin cũng khó khăn hơn trong việc
xử lí pef
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.5.2 Yếu tố thực phẩm
-Nhiệt độ : là yếu tố ảnh hưởng đứng sau cường độ điện
trường và thời gian xử lí Khi nhiệt độ của thực phẩm tăng
lên, hiệu quả của quá trình xử lí pef cũng tăng lên Quá trình
sử dụng pef thường được thực hiện ở nhiệt độ dưới 65°C
trong thời gian vài giây
-Sự tăng hiệu quả xử lí pef ở nhiệt độ cao phụ thuộc vào tính
chất lưu biến của màng tế bào dưới tác động của nhiệt độ
Nguyên nhân của màng tế bào bị đánh thủng là do tính chất
co dãn của màng tế bào khi nhiệt độ tăng lên(giống như chất
lỏng) vì thế khi tăng nhiệt độ thì dễ dàng đánh thủng màng tế
bào bằng xung điện
-Một số nghiên cứu cho thấy rằng điện thế đánh thủng màng
tế bào dạng lipid-protein là 2V ở 4°C, 1V ở 20°C và 500 mV ở
30-40°C (Zimmermann, 1986)
Trang 10high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.6 Một số ứng dụng của PEF
-Ứng dụng quá trình tách chiết : PEF có thể làm rách màng
tế bào của vi sinh vật thuận lợi cho việc tách chiết các chất
trong tế bào ra ngoài PEF còn ứng dụng vào việc làm rách
màng bán thấm của tế bào động vật và thực vật, ứng dụng
vào việc ép các chất dinh dưỡng từ trái cây, từ đường
mía,
-Ví dụ quá trình áp dụng pef cho việc tách chiết nước ép táo
có năng suất tăng từ 67% đến 73% so với phương pháp ép
thông thường và sản phẩm trong hơn, với nước ép carrot
tăng từ 51% đến 67% khi sử dụng pef và đạt được hàm
lượng cao β-carotene tốt hơn phương pháp ép cổ truyền
(Knorr et al, 1994)
Kỹ thuật trường điện từ dạng xung
high tensity pulsed electric field (PEF)
4.1.6 Một số ứng dụng của PEF
-Hỗ trợ quá trình sấy : pef làm tăng quá trình truyền
khối và truyền nhiệt của thực vật và động vật nhờ
vào khả năng làm rách màng tế bào
- Vô hoạt enzyme : khi có tác dụng của pef có thể
làm tăng hoạt tính hoặc giảm hoạt tính của
enzyme, vấn đề này còn nhiều báo cáo trái ngược
nhau.
- Bảo quản các chất rắn và bán rắn : làm vô hoạt
enzyme và vi sinh vật.
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
Đổi đơn vị
1 at = 105Pa
hPa = hectopascal where 1 hPa = 100 Pa
kPa = kilopascal where 1 kPa = 1000 Pa
MPa = megapascal where 1MPa = 1000000 Pa = 10 at
Trang 11Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.1 MỞ ĐẦU
Thực phẩm khi bảo quản và chế biến cần giữ được giá trị
dinh dưỡng và giá trị cảm quan trong đó cần đảm bảo an
toàn vi sinh vật, thời gian bảo quản dài hơn, giữ được giá trị
của thực phẩm như lúc còn tươi Phương pháp sử dụng áp
suất cao đã được ứng dụng theo nhiều hình thưc khác
nhau
Khi sử dụng áp suất cao để xử lý thực phẩm, vi sinh vật bị
vô hoạt mà không cần sử dụng nhiệt, khi đó hàm lượng
vitamin, chất màu và màu sắc của thực phẩm không bị tác
động hoặc thay đổi rất ít ứng dụng áp suất cao để xử lý
thực phẩm coi như là một quá trình chế biến lạnh (Crawford
et al, 1996)
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.1 MỞ ĐẦU
Một số loại thực phẩm hiện nay có xử lý áp suất cao xuất
hiện trên thị trường là mứt dẻo, nước sốt, đồ ăn dẻo, sữa
chua, nước ép trái cây, trái cây nhúng đường, thịt bò, các
sản phẩm khác nhau từ thuỷ sản, một vài nước ép trái cây
xử lý với áp suất cao có mùi tốt hơn, giữ được hàm lượng
vitamin cao và thời gian bảo quản dài hơn
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.2 thiết bị và thao tác của quá trình xử lý
áp suất cao -thiết bị : áp suất cao được tạo ra trực tiếp đến 600 Mpa và thường được nén trong nước là chính, thường kết hợp với chất chống ăn mòn Phòng xử lý có thể duy trì áp môi trường nước.
- quá trình xử lý thực phẩm bằng áp suất liên tục ví dụ với các sản phẩm rắn thường như trái cây nghiền, chất lỏng và các loại ứng dụng trong các dây chuyền bán liên tục
quá trình gián đoạn có nhiều điểm lợi vì nó tránh được sự nguy cơ nhiễm tạp từ vật liệu,
từ thiết bị chứa vì khi quá trình xử lý kết thúc, thiết bị chứa không được rửa sạch
Trang 12(high pressure processing)
4.2.3 Biến đổi hoá học và hóa lý
4.2.3.1 Tác động của áp suất cao đến thực phẩm
Nước trong thực phẩm tồn tại dưới dạng dung dịch hoặc phân tán
và dạng huyền phù liên kết với prôtêin, cacbonhydrat, lipid, Vì áp
suất tác động đến tính chất liên kết của nước, sức căng bề mặt,
khối lượng riêng, mômen lưỡng cực, hằng số điện môi và các tính
chất nhiệt Sự thay đổi áp lực nước ảnh hưởng đến vi sinh vật,
enzyme và các phản ứng hoá học trong môi trường lỏng của thực
phẩm
Các chất như lipid, prôtêin, đường, có cấu trúc bậc một (dạng
thẳng) ít chịu ảnh hưởng của áp suất trong khoảng 1000 đến 2000
MPa nhờ vào các liên kết cộng hoá trị
Sự tạo thành các liên kết Hydrogen làm giảm thể tích, và liên kết
này được quan tâm đến nhiều khi sử dụng áp suất cao Áp suất cao
làm biến tính prôtêin, với áp suất < 101MPa, sự biến tính này giảm
khi các liên kết hydrogen có sẵn trong cấu trúc xoắn của các peptid
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.3.1 Tác động của áp suất cao đến thực phẩm (tt)
Các liên kết ưu nước cũng bị ảnh hưởng bởi áp suất, vì với
áp suất nhỏ hơn 1000 atm, các tương tác với nước làm tăng
thể tích còn nếu tăng hơn 1000 atm thì các liên kết này bị
phá vỡ và làm giảm thể tích, hướng tới cấu trúc bền nhất
như vậy, áp suất tác động đến cấu trúc của prôtêin bậc 4,
bậc 3, bậc 2 Nhìn chung, khi tăng áp suất đến khoảng 400
MPa thì bắt đầu biến tính prôtêin
Sự ảnh hưởng của áp suất cao đến các phản ứng của
enzym có thể theo hai hướng : (i) liên kết các cơ chất, tính
đàn hồi của phức enzyme-cơ chất và (ii) quá trình xúc tác
mà hệ enzyme-cơ chất được hoạt hoá
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.3.1 Tác động của áp suất cao đến thực phẩm (tt)
Như vậy, thể tích thay đổi liên quan đến sự tạo thành các
tương tác trong hệ thống sinh học Một vài tương tác quan
trọng trong thực phẩm được giới thiệu sau đây:
- liên kết hydrogen : liên quan đến thu nhỏ thể tích nhỏ nhất
nhờ vào bán kính liên kết nhỏ của nguyên tử H và cũng như
khoảng cách liên kết nhỏ (Tauscher, 1995)
-Tương tác ưa nước: các chất phân cực có xu hướng tập
hợp trong môi trường nước, phân tử nước thường liên kết
với các H-C, các phân tử sinh học khác như prôtêin,
lipid, và các tương tác này tăng lên khi các thành phần tồn
tại dưới dạng ion
-các liên kết cộng hoá trị: khoảng cách liên kết thường rất
ngắn và tạo thành các hợp chất phức tạp;
-biến đổi thể tích của phản ứng hoá học
Trang 13Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.3.2 Thay đổi pha
Áp suất cao làm giảm điểm kết tinh và nóng chảy của
nước, ở 207,5 MPa thì là -22°C, vì áp suất đối ngược với
sự tăng thể tích xảy ra với nước loại I (là loại nước rất tinh
khiết, sử dụng trong các thiết bị phân tích chất lượng cao)
- sự tăng tốc độ làm lạnh khi sử dụng áp suất, làm giảm
nhiệt độ nóng chảy, cho phép tạo thành các điểm quá lạnh
tại -20°C, sự tạo thành nhanh và đồng đều của các mầm
tinh thể
- sự tăng tỷ lệ tan chảy (tan giá)
- bảo quản thực phẩm dạng tan chảy và dưới 0°C
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.4 ứng dụng của áp suất cao
4.2.4.1 Ức chế hoạt động của vi sinh vật
sự áp dụng áp suất tác dụng trên cơ thể sống được gọi là
Áp suất trong khoảng 0,2 đến 2 MPa gọi làhyperbaric Hiệu
ứng của áp suất trên vi sinh vật được xác định bởi tác động
của áp suất đối với nước, nhiệt độ trong quá trình xử lí,
thành phần hoá học và các giai đoạn phát triển của vi sinh
vật, trong đó áp suất và nhiệt độ được dùng nhiều nhất và
nó liên quan đến an toàn thực phẩm
Áp suất tăng lên khoảng 40MPa gọi là barophiles và nằm
trong khoảng 0,1 đến 50 MPa gọi là eurybaric và trong
khoảng 20 đến 202 MPa gọi là baroduric.
Ứ ng dụng của áp suất cao
(high pressure processing)
4.2.4.1 Ức chế hoạt động của vi sinh vật (tt)
Nguyên lí cơ bản : vô hoạt vi sinh vật có thể là nguyên
nhân của một vài yếu tố
Yếu tố thứ nhất làm thay đổi tính bán thấm của màng tế
bào kéo theo sự biến tính của prôtêin, là nguyên nhân của
cắt đứt liên kết và làm vô hoạt các trung tâm của enzym
Áp suất khoảng 101 đến < 303 MPa làm biến tính thuận
nghịch prôtêin và áp suất đạt 303 MPa làm biến tính không
thuận nghịch